白花蛇舌草多糖提取的工艺优化及抗氧化活性研究

目的:优选白花蛇舌草的水提醇沉多糖提取工艺条件。方法:以白花蛇舌草多糖含量为指标,蒽酮比色法测定指标成分含量,在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验考察料液比、超声提取时间、重复提取次数和乙醇浓度对白花蛇舌草多糖含量的影响,优化其提取工艺。并用DPPH自由基清除率法对其抗氧化活性进行测定。结果:白花蛇舌草多糖最佳提取的工艺条件为料液比1:14,提取时间30~40 min,重复提取次数3次,提取乙醇浓度60%。自由基清除实验显示,白花蛇舌草多糖具有浓度相关的自由基清除能力和抗氧化能力。结论:优选的水提醇沉提取工艺稳定可行,所提取白花蛇舌草多糖具有较强的自由基清除效果,是一种极具开发潜力的优良天然抗氧化剂。     

白花蛇舌草多糖的抗氧化活性研究

目的:评价白花蛇舌草多糖的体外抗氧化能力。方法:以热水回流提取法(料水比1∶31.26,84.71℃下提取2.07h,提取2次)从白花蛇舌草(HDW)提取的多糖为材料,通过1,1-二苯基-2苦肼基自由基(DPPH)清除率、总的抗氧化活性和还原能力测定等体外抗氧化试验来评价白花蛇舌草多糖的体外抗氧化能力。结果:白花蛇舌草多糖清除DPPH自由基、总的抗氧化活性和还原能力均随多糖浓度的增加而上升;1mg/mL的多糖对DPPH自由基的清除率高达82.66%;1mg/mL多糖的总的抗氧化活性在695nm下吸光值为1.641;1mg/mL多糖的还原能力在700nm下吸光值为0.773。结论:白花蛇舌草多糖有较强的抗氧化能力,对体外自由基有较好的清除作用。     

肾康胶囊的质量控制研究及工艺优化

目的:建立肾康胶囊的质量控制方法和确定最佳提取工艺。方法:根据处方组成,采用薄层色谱法对白花蛇舌草、穿山龙、半枝莲、青风藤、莪术、龙葵进行定性鉴别,HPLC法对君药白花蛇舌草中齐墩果酸、穿山龙中薯蓣皂苷元,臣药丹参中丹参酮Ⅱ_A的含量测定。结果:白花蛇舌草、穿山龙、半枝莲、青风藤、莪术、龙葵定性鉴别分离度好,专属性强。丹参酮Ⅱ_A平均加样回收率为93.2%,RSD为2.718%,齐墩果酸平均加样回收率为99.8%,RSD为1.882%,薯蓣皂苷元平均加样回收率为101.9%,RSD为1.98%。最佳提取工艺为提取时间3 h,液料比10,提取次数2。结论:该方法简便,可靠,准确,可用于肾康胶囊的质量控制。     

白花蛇舌草、半枝莲及其药对配伍对人胰腺癌Panc28细胞及人肝癌Bel7402细胞葡萄糖摄取能力及乳酸水平的影响

目的探讨白花蛇舌草、半枝莲及其药对组合抗肿瘤作用及可能机制。方法将人胰腺癌Panc28细胞接种于BALB/c雌性小鼠腋部皮下,当皮下移植瘤长到约100mm~3后开始给药,以注射用环磷酰胺(50mg/kg)为阳性对照,白花蛇舌草、半枝莲、白花蛇舌草-半枝莲药对浓缩液各200mg/kg腹腔注射,隔日1次,共8次,隔日测量小鼠肿瘤体积及体重。取对数生长期的Panc28和人肝癌Bel7402细胞培养,分为对照组、白花蛇舌草组、半枝莲组、药对组,除对照组外,其余各组分别加入不同浓度(400、200、 100、50、25μg/ml)的白花蛇舌草单煎浓缩液、半枝莲单煎浓缩液、白花蛇舌草-半枝莲混煎浓缩液作用48h,检测不同浓度干预下细胞抑制率并计算半数抑制浓度(IC_(50))。观察终浓度为50μg/ml白花蛇舌草单煎浓缩液、半枝莲单煎浓缩液、白花蛇舌草-半枝莲混煎浓缩液处理24h后上清液中相对葡萄糖含量和乳酸含量;培养48h后丙酮酸激酶1(PKM1)、丙酮酸激酶2(PKM2)蛋白表达。结果药对组和阳性对照组小鼠移植瘤体积均小于白花蛇舌草、半枝莲组(P0.05);各药物对小鼠体重无影响(P0.05)。与白花蛇舌草组和半枝莲组比较,药对组Panc28细胞及Bel7402细胞的IC_(50)降低,相对葡萄糖摄取量和乳酸水平明显降低(P0.05),药对组Panc28细胞及Bel7402细胞中PKM1蛋白表达升高,PKM2蛋白表达降低(P0. 05)。结论白花蛇舌草-半枝莲药对可抑制肿瘤生长,其机制可能与抑制肿瘤细胞糖酵解有关。     

基于网络药理学和分子对接研究白花蛇舌草和半枝莲药对治疗宫颈癌的作用机制

目的通过网络药理学与分子对接方法探究白花蛇舌草Hedyotis diffusa和半枝莲Scutellaria barbata药对治疗宫颈癌的潜在活性成分及作用机制。方法通过中药系统药理学数据库分析平台(TCMSP)和STITCH数据库搜集白花蛇舌草和半枝莲药对的活性成分和靶点,在DisGeNET网站下载宫颈癌疾病靶点;以String平台数据为基础,利用Cytoscape软件构建白花蛇舌草和半枝莲药对与宫颈癌共同靶点的蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction network,PPI)网络;利用CytoHubba筛选信号通路关键基因(hub基因),构建靶点的拓扑网络图;绘制"活性成分-靶点-通路"网络图;采用Schrodinger软件对活性成分与靶点进行分子对接。结果 "活性成分-靶点-通路"网络显示,白花蛇舌草和半枝莲药对有25个主要活性成分,38个主要靶点,与18个信号通路有关。分子对接结果显示,白花蛇舌草和半枝莲药对25个活性成分与38个靶点部分或全部对接成功。结论白花蛇舌草和半枝莲药对通过多成分、多靶点、多通路参与宫颈癌细胞凋亡。     

半枝莲与白花蛇舌草及其药对石油醚部位成分分析及其抗子宫内膜癌细胞活性研究

目的:对半枝莲、白花蛇舌草及其药对石油醚部位成分进行分析,并研究体外抗子宫内膜癌细胞活性。方法:采用GC-MS结合保留指数(Kovats retention index,KI)对主要成分进行分析和鉴定;甲基偶氮唑盐类(MTT)法研究三者的抗子宫内膜癌细胞活性。结果:通过GC-MS分析鉴定出半枝莲、白花蛇舌草及药对石油醚部位中同时含有不饱和脂肪酸、酯类、甾醇类等成分,白花蛇舌草和药对相区别于半枝莲的石油醚部位又含有较多蒽醌类化合物。半枝莲、白花蛇舌草及其药对石油醚部位抗子宫内膜癌细胞HEC-1A的IC50值分别为275.204μg/m L,105.826μg/m L,148.645μg/m L,抗子宫内膜癌细胞Ishikawa的IC50值分别为189.114μg/m L,77.974μg/m L,137.999μg/m L。结论:半枝莲与白花蛇舌草及其药对石油醚部位对子宫内膜癌细胞HEC-1A和Ishikawa均有抑制作用,其中白花蛇舌草的抗子宫内膜癌细胞活性最强,推测可能与含量较高的蒽醌类化合物有关。     

“半枝莲-白花蛇舌草”药对治疗胃癌的网络药理学作用机制分析

目的基于网络药理学,探讨"半枝莲-白花蛇舌草"药对治疗胃癌(GC)的有效活性成分及作用机制。方法通过TCMSP数据库选取"半枝莲-白花蛇舌草"药对中含有的131个化合物,筛选其活性成分及潜在靶点;通过人类孟德尔遗传数据库、GeneCards数据库挖掘GC疾病靶点;结合化合物及疾病靶点,构建化合物-靶点网络图,并进行GO功能富集及KEGG通路富集分析。结果 "半枝莲-白花蛇舌草"药对中含有34个活性成分,对应GC161个靶点;主要通过调控RNA聚合酶II启动子、胞质、胞外间隙、血管生成、细胞凋亡信号通路等治疗胃癌,主要涉及肿瘤信号通路、蛋白聚糖信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、p53信号通路等。结论 "半枝莲-白花蛇舌草"药对治疗胃癌的作用机制确切,这为临床中医治疗胃癌提供了客观依据,亦可指导"半枝莲-白花蛇舌草"药对治疗胃癌作用机制的实验研究。     

白花蛇舌草-半枝莲药对提取物抗氧化及清除自由基活性研究

目的 研究白花蛇舌草-半枝莲3种常见配比(2∶1、1∶1、1∶2)药对提取物抗氧化及清除自由基活性.方法 采用紫外分光光度法测定提取物总黄酮的量,HPLC法分析提取物组成;采用还原能力、螯合能力、清除DPPH、·OH自由基能力及保护DNA免受·OH损伤能力等5种化学及生物学模型,研究并比较药对3种配比提取物抗氧化及清除自由基活性的差异.结果 不同配比组方对药对提取浸膏总黄酮的量、组成、清除DPPH能力、清除·OH能力及螯合Fe~(2+)离子能力均有较大影响.而还原能力及保护DNA免受·OH损失作用与药对中各单药材所占比重相关性不大.结论 药对提取浸膏提取率、总黄酮的量、组成及抗氧化活性均受配比的影响,其中1∶2配比药对的活性较强.     

白花蛇舌草总多糖的分离纯化、结构鉴定及初步免疫活性分析

目的:分离纯化白花蛇舌草总多糖,研究其对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫增强活性。方法:采用超滤技术分离纯化白花蛇舌草总多糖,高效凝胶渗透色谱-示差检测器方法测定相对分子质量,柱前衍生化HPLC分析其单糖组成;采用环磷酰胺致免疫低下小鼠碳粒廓清试验研究其免疫活性。结果:从白花蛇舌草中分离得到1个单一多糖组分ODP-1,其相对分子质量20.88 k Da,单糖组成为甘露糖-鼠李糖-半乳糖醛酸-葡萄糖-半乳糖-阿拉伯糖,摩尔比0.005∶0.033∶0.575∶1.000∶0.144∶0.143;免疫活性试验结果表明,ODP-1可升高环磷酰胺致免疫低下小鼠廓清指数、吞噬指数、胸腺指数和脾指数。结论:白花蛇舌草多糖ODP-1为均一多糖,具有免疫增强活性。     

白花蛇舌草和半枝莲配伍微粉对移植性小鼠肝癌肿瘤组织Bcl-2,Bax表达的影响

目的:观察白花蛇舌草和半枝莲微粉对移植性小鼠肝癌H22生长抑制作用及其对肿瘤组织中Bcl-2和Bax表达的影响。方法:建立移植性H22动物模型,并将模型动物随机分为模型对照、软坚口服液7.8 mL.kg-1、白花蛇舌草和半枝莲普通粉15.6 g.kg-1、白花蛇舌草和半枝莲微粉高、中、低剂量(15.6,11.7,7.8 g.kg-1)6组,给药10 d后处死模型小鼠分离肿瘤,检测肿瘤大小、称质量,计算肿瘤抑制率,并将肿瘤组织切片,免疫组化法检测Bcl-2和Bax基因。结果:白花蛇舌草和半枝莲微粉高剂量组肿瘤抑瘤率达47.55%,与软坚口服液结果相近;白花蛇舌草和半枝莲微粉高、中、低剂量可降低肿瘤组织中Bcl-2蛋白基因表达,高、中剂量可升高Bax蛋白基因表达;与白花蛇舌草和半枝莲普通粉组相比,白花蛇舌草和半枝莲微粉高剂量组Bcl-2蛋白基因表达明显降低,Bax蛋白基因表达明显升高。结论:白花蛇舌草和半枝莲微粉可抑制H22瘤体生长,且下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达。     

白花蛇舌草预防肺癌物质基础研究

文章对近年来有关白花蛇舌草的化学成分及预防肿瘤活性研究文献进行系统综述,总结已得成果,找出存在问题,以组分结构理论为指导,提出进行肺癌预防研究的思路和方法。目前,肿瘤的化学预防成为药物研发的新方向,现有的研究已经明确了白花蛇舌草一些具有预防肺癌作用的化学成分及可能机制,但还不能阐明白花蛇舌草预防肺癌作用的物质基础,应尽快进行白花蛇舌草预防肺癌物质基础研究,以便生产出现代化的白花蛇舌草肺癌预防剂。     

19味中药对淋球菌流行株的敏感性研究

目的：探讨l9味中药对淋球菌的抑制作用。方法：采用琼脂稀释法测定l9味中药对淋球菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果：19味中药中，对淋球菌作用最强的是黄连（Coptis chinensis Franch)；其次为黄柏(Phellodendron chinense Schneid)、黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)、大黄(Rhenm palmatum L．)、丁香(Engenia caryophyllata Thund)、地榆(Sanguisorba 0fficinalis L．)、半枝莲(Scutellaria barbata D．Don)；而夏枯草(Prunella vulgaris L．)、蛇床子(Cnidium monnieri(L．)cuss)、紫花地丁(Viola yedoensis)、蚤体(Paris polyphylla Smith)、白鲜皮(Dictamnus dasycarpus Turcz)仅有轻微的抗淋球菌作用。白花蛇舌草(0ldenlandia diffusa (Willd) Roxb)、花椒(Zanthoxylum bungeanum Maxim)、苦参(Sophora flavescens Ait)、挂金灯(Physalis alkekengi L．Var．francheeii (Mast．)Mak．)、萆薢(Dioscorea hypoglauca palib)、车前子(Semen plantaginis)则无抑菌作用。结论：黄连对淋球菌的抑制作用最强。     

白花蛇舌草注射液抗肿瘤和免疫调节作用实验研究

目的研究白花蛇舌草注射液抗肿瘤及对荷瘤小鼠的免疫调节作用。方法采用MTT比色法,检测白花蛇舌草注射液对肿瘤细胞株增殖的抑制作用,计算抑制率。测定荷瘤小鼠脾脏NK细胞活性、腹腔巨噬细胞吞噬功能、脾细胞增殖的影响、血清凝集素活性和脾脏IL-2活性5项指标。结果白花蛇舌草注射液对A549、SGC-7901、HEP-G2、Hela的增殖,剂量在100～20μg/mL范围时,均有不同程度的抑制作用。白花蛇舌草注射液能明显增强荷瘤小鼠脾NK细胞杀伤活性,增强处于IL-2活性严重低下状态下荷瘤小鼠的IL-2活性,增强荷瘤小鼠脾细胞增殖,增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,提高荷瘤小鼠体液免疫血清中抗羊红细胞凝集素值。结论白花蛇舌草注射液具有体外抗肿瘤及提高荷瘤小鼠免疫功能的作用。     

吸波面积法对组分中药白花蛇舌草肠溶胶囊中多成分体外释放度的研究

目的：通过吸波面积法对组分中药白花蛇舌草肠溶胶囊中多成分体外释放度进行测定,探讨中药复杂体系多成分体外释放度测定的可行性。方法：配制槲皮素、齐墩果酸、豆甾醇混合对照品溶液,经紫外-可见分光光度法在200-600nm下进行全波长扫描,通过Origin软件拟合并计算吸光度-波长曲线下面积（简称吸波面积,Area under the Absorbance-wavelength Curve, AUAWC）,采用吸波面积法对组分中药白花蛇舌草肠溶胶囊中混合总药物的释放量进行测定。同时,采用高效液相色谱法分别测定槲皮素、齐墩果酸、豆甾醇各单一成分的体外释放特性,并对两种方法的结果进行比较和分析。结果：吸波面积法和高效液相色谱法测得组分中药白花蛇舌草肠溶胶囊中混合总药物、槲皮素、齐墩果酸、豆甾醇在酸性介质0.1mol?L^-1盐酸中2h胶囊壳无破损,稳定性良好,不释放;在0.2mol?L^-1磷酸盐缓冲液（pH6.8）中120min释药完全,累积释放百分率分别为99.47％、90.87%、95.65%、98.49%,混合总药物不同时间的累积释放量与槲皮素、齐墩果酸、豆甾醇三者药物累积释放量之和接近。结论：吸波面积法用于组分中药白花蛇舌草肠溶的体外释放度方法科学、可行、方便,可用于中药复杂体系多成分体外释放度的测试,其与高效液相色谱法的联合使用为西药复方、组分中药以及复杂体系的中药复方制剂的体内外相关性研究提供了科学思路和可行途径。     

半枝莲醇提物抗肿瘤活性的研究

目的　研究中药半枝莲醇提物的抗肿瘤活性。方法　采用小鼠腋下接种肿瘤细胞法测定了半枝莲醇提物的抗肿瘤活性 ;采用MTT法测定了半枝莲醇提物对小鼠脾细胞的增殖活性。结果　半枝莲醇提物对移植性肿瘤 (肉瘤S180 和肝癌H2 2 )具有显著的抑制作用 ,而对小鼠脾细胞的增殖具有促进作用 ,并有较好的剂量依赖关系。结论　中药半枝莲有可能通过增强机体的免疫力来实现其抗肿瘤活性     

白花蛇舌草水提物抗白血病CEM细胞的增殖作用及机制

目的 观察白花蛇舌草水提物对CEM细胞增殖影响及其机制.方法 对CEM细胞进行细胞培养.采用台盼蓝拒染法,镜下计数活细胞数,绘制生长曲线,检测白花蛇舌草水提物对CEM细胞的生长抑制作用;琼脂糖凝胶电泳法检测白花蛇舌草水提物对CEM细胞的诱导凋亡作用.结果 白花蛇舌草水提物终浓度0.64,3.2,16μg/ml均显著抑制CEM细胞的生长,且呈剂量和时间依赖性.琼脂糖凝胶电泳结果显示实验组出现明显的DNA梯形凋亡条带,而空白对照组没有出现梯形条带.结论 白花蛇舌草水提物对CEM细胞生长具有显著抑制作用,诱导肿瘤细胞凋亡可能是其主要机制之一.     

白花蛇舌草抑制肝癌H22小鼠淋巴管转移的实验研究

目的:观察白花蛇舌草对小鼠肝癌淋巴管转移的影响。方法:在小鼠右下肢爪垫内侧皮下注射接种腹水型肝癌H22瘤株,复制淋巴管转移模型。将模型小鼠随机分为5组,空白组每天灌生理盐水,大、中、小剂量组每天灌白花蛇舌草水煎液,对照组给予环磷酰胺腹腔注射。观察小鼠体质量、免疫器官、肺部转移率、爪垫移植瘤、淋巴结转移瘤等指标变化。结果:白花蛇舌草作用组的小鼠,体质量和免疫器官胸腺质量明显增长,肺部瘤结节数和肺部转移瘤生长指数均下降,且淋巴结转移数明显减少。结论:白花蛇舌草对H22肝癌淋巴管转移有一定抑制作用。     

白花蛇舌草的生育规律研究

目的根据白花蛇舌草各器官和生长中心的变化特点,研究白花蛇舌草的生育特性,为其规范化栽培的合理促控提供依据。方法在大田栽培条件下观测调查。结果白花蛇舌草生育期为145~155 d,可将其个体发育过程划分播种出苗期、幼苗期、始花期、盛花期、成熟期。结论根据其干物质积累特点成熟期为最佳收获期。     

比色法测定白花蛇舌草中总黄酮含量的研究

目的:选择一种比色法作为白花蛇舌草总黄酮的最优测定方法。方法:以芦丁为标准品,通过直接测定法、硝酸铝法、氯化铝法3种检测方法的比较,确定一种检测方法作为白花蛇舌草总黄酮的测定最优方法。结果:经过比较,选择氯化铝法作为测定白花蛇舌草总黄酮含量更好,在410nm波长下测定,样品在0.05mg~0.3mg范围内,其浓度与吸光度呈良好的线性关系,相关系数R=0.9997,平均加样回收率为99.84%,RSD=1.31%(n=5),稳定性、精密度和重现性均理想。结论:氯化铝显色法的大部分指标都好于其他两种比色法,且分析时间较短,准确度高,因此三氯化铝比色法更适合白花蛇舌草总黄酮含量的测定。