人牙齿切片器官培养模型的建立

目的建立人牙齿切片体外器官培养模型。方法收集年轻人健康前磨牙或第三磨牙,用慢速切锯制备2mm厚的牙齿横切片,将切片用含1%琼脂糖的半固体培养基包被后采用Trowel器官培养方法在体外培养2～14天,对培养切片的细胞及组织形态进行组织学观察。结果实验成功的将牙齿切片在体外培养了两周,成牙本质细胞在培养一周之内能够很好的维持原来的形态。一周之后成牙本质细胞逐渐萎缩,细胞密度减小。结论实验成功的建立了人牙齿切片体外器官培养的模型,为后期进行组织损伤和修复、第三期牙本质的形成等方面的研究奠定了基础。     

改良支撑材料小鼠颅颌面器官体外培养系统的建立

目的探讨改良支撑材料小鼠颅颌面器官体外培养的可行性及适宜条件。方法分离出生后0．5：天（PN0．5）的C57BL小鼠颅颌面部分器官（下颌磨牙、下颌下腺、舌）,在由有机树脂片作为支撑物的6孔板中体外培养3天,组织学切片HE染色,观察所培养器官的生长发育情况和形态学变化,并且与PN0．5和PN3．5小鼠的相应器官进行组织学比较。结果相对于：PN0．5的颅颌面器官结构,器官培养3天后下颌磨牙、下颌下腺和舌等器官体积增大,并有不同程度的发育,细胞有不同程度的增殖和分化。体外3天培养器官的发育要落后于PN3．5的实际生长。结论本研究初步探索并建立了小鼠颅颌面器官树脂支撑物体外培养系统。     

牙切片器官培养模型的建立与应用

牙切片器官培养模式是一种有效的在体外保持了牙本质牙髓复合体生物学特性的实验方法,可用于进行各种生物性,物理性,化学性组织损伤和修复的研究。本文就牙切片器官培养模型的建立方法和实验应用进展作一综述。     

新生大鼠颅骨缝体外牵张模型的建立

目的探讨建立新生SD大鼠颅骨器官培养模型的方法。方法取1周龄SD大鼠颅顶骨正中矢状缝组织块,大小为8mm×10mm,进行器官培养,对照组和实验组均安装螺旋弹簧,实验组施加0.2g(0.00196N)张力,对照组不施力,两组分别于0、1、6、24、48h收获标本。对实验组和对照组标本进行苏木精-伊红染色,作组织形态学的观察。结果实验组较对照组有明显的成骨细胞活动及毛细血管增生,显示牵张模型的骨缝组织呈活跃增生,分化相、成骨区明显,未见组织坏死及细菌感染。结论外源性张力有扩宽骨缝的作用,骨缝器官可在体外培养中成功存活并继续生长、发育。     

金属栅栏式腭器官培养模型的建立

目的建立金属栅栏式小鼠腭器官培养模型。方法选取妊娠14 d的孕鼠20只,采用金属栅栏静式培养法,将腭器官分别培养24和48 h,肉眼以及苏木精-伊红染色观察腭器官在体外的发育过程。结果腭器官发育良好,细胞形态正常。腭器官培养24 h后可见到中脊上皮;培养48 h后可见中脊上皮消失,腭突融合。结论本方法为研究腭裂发病机制提供了一个良好的体外模型。     

金属栅栏式腭器官培养模型的建立

选取妊娠14d的孕鼠20只,采用金属栅栏静式培养法,将腭器官分别培养24和48h,肉眼以及苏木精-伊红染色观察腭器官在体外的发育过程。结果:腭器官发育良好,细胞形态正常。腭器官培养24h后可见到中脊上皮;培养48h后可见中脊上皮消失,腭突融合。结论:本方法为研究腭裂发病机制提供了一个良好的体外模型。     

改良小鼠胚胎下颌下腺的获取及其体外器官培养模型的建立

分支形态的形成对于保证器官可以在有限的体积内获得最有效的功能形态具有重要意义。下颌下腺是研究器官分支形态发生过程的重要模型,在小鼠胚胎中获取下颌下腺组织进行体外器官培养是一种重要的研究方法。本文介绍了一种改良的小鼠胚胎下颌下腺获取方法,并将整个获取及建立体外器官培养流程作以简介,以对其在体内发育过程中的分支形态发生过程进行更好体外的模拟,从而能够更好地开展相关研究。     

人牙胚体外16 d培养模型的建立

目的建立人牙胚体外较长时间（16 d）的培养模型。方法将处于分泌前期人牙胚采用Trowell型支架培养法,应用BGJb培养基（含L-抗坏血酸200 mg/L,维甲酸1×10^-7mol/L）,37℃,5%CO2＋95%空气条件下进行培养。体外培养4、8、12、16 d后随机抽取牙胚进行常规包埋、切片染色,组织学观察。结果在培养过程中牙胚发育良好,形成明显的牙尖形态,造釉器分化为4层,在培养第16天牙尖部内釉上皮细胞出现核碎裂,牙乳头细胞之间出现裂隙。结论应用此方法能够将处于分泌前期的人牙胚在体外培养16 d。     

体外髁突软骨培养方法的建立

目的:建立体外髁突器官培养系统,明确体外培养髁突软骨的生物学特性,为髁突软骨体外实验提供基础。方法:选用新生SD大鼠的髁突软骨作为器官培养材料,采用格栅式器官培养法,建立体外髁突软骨器官培养模型。分别在取材培养后1~6 d收集样本,制备组织切片并观察。结果:培养早期(4 d以内),髁突软骨层次分明,细胞结构完整,形态良好。培养时间延长至5 d,软骨表层局部出现空腔。结论:体外器官培养的髁突软骨在4d内能维持良好的形态和生长状态,具有生物活性,可以应用于髁突软骨的相关体外实验研究。     

小鼠牙胚发育无血清体外培养模型的建立

目的：建立小鼠牙胚发育无血清体外培养模型。方法：胎龄17d的Balb/c胎鼠上颌第一磨牙牙胚，BGJb无血清半固态培养基中恒温培养4、6、8－16d。终止培养后常规制备石蜡切片，HE及von Kossa染色。结果：初始培养时牙胚处于帽状晚期，成翻器分为三层，紧邻基底膜的牙乳头细胞列不规则，核多为圆形。体外培养4－6d后，牙胚在体外进一步生长。培养6d后，牙尖处成牙本质细胞分化为高柱状，并在局部分泌基质。体外培养8d，牙胚进入钟状晚期，有基质带形成。培养16d后，牙冠已基本形成，根方出现上皮隔。von Kossa染色结果显示：培养10d后，牙胚基质带出现阳性着色。结论：建立了小鼠磨牙发育无血清体外培养模型，该 模型在体外真实地再现了成牙本质细胞、成釉细胞的分化和基质分泌、矿化等生理过程，是一种良好的生物模型。     

Uptake of cadmiuin in developing rat teeth in organ culture

Abstract – Molar teeth from 9-day-old rats were cultured for 7 days in medium supplemented with 1 or 10 ppm Cd for 1 or 3 h or 7 days. After culture the Cd concentrations were measured separately from the mineralizing parts and the cell-containing tissues. The accumulation of Cd increased with the duration of treatment and the concentration used, being more intensive in the hard parts than the soft tissues of the teeth.     

应用牙器官培养模型评价粘结剂的生物相容性

目的:应用大鼠全牙器官培养模型对两种牙科粘结剂进行生物相容性评价。方法:在新鲜拔除的4周龄SD大鼠切牙唇面制洞,随机分成3组:对照组(不涂粘结剂);AP组(涂Adper Prompt粘结剂)和PB组(涂Prime&Bond NT粘结剂),3组洞壁做相应处理后光照10 s后填入树脂,分别于术后即刻和体外全牙培养1周两个时间点,40 g/L多聚甲醛(PBS)固定,100 g/L甲酸脱矿,常规切片,HE染色进行组织学观察,并采集图像进行细胞计数及统计学分析。结果:术后即刻与对照组相比,PB组制洞部位下方的牙髓细胞发生聚集,AP组则表现为成牙本质细胞的细胞数减少,两种细胞均发生形态改变。术后培养1周时与对照组相比,AP组制洞部位下方的牙髓内牙髓细胞坏死,而PB组则表现为成牙本质细胞的细胞数目减少,两种细胞均发生形态改变。结论:两种牙科粘结剂均对牙髓组织有毒性作用,早期AP的毒性大于PB。     

Differentiation of odontogenic tissues in organ culture

abstract – Molar tooth germs from 17-d-old mouse embryos were cultivated in a Trowelltype culture, and different culture media were tested for their ability to support enamel formation. The medium which allowed secretion of considerable amounts of enamel matrix by ameloblasts consisted of BGJb medium supplemented with 20 % horse serum, 10 % chick embryo extract and 0.9 mM ascorbic acid. At the onset of culture the teeth were in the early bell stage. After 2 weeks of cultivation both odontoblasts and ameloblasts had differentiated, and considerable amounts of predentin and enamel matrix had been secreted. Similar development was also seen in teeth which had been enzymatically separated into the mesenchymal dental papilla and epithelial enamel organ and subsequently recombined in vitro . This method allows good differentiation of odontogenic tissues, and is considered suitable for further studies of tissue interactions in the tooth rudiment.     

Experimental odontogenic cysts induced by in vitro 4-nitroquinoline 1-oxide (4NQO) treatment of F344 rat incisor tooth germs

Miura Y, Ozaki HS, Li T-J, Uemura M, Kitano M: Experimental odontogenic cysts induced by in vitro 4-nitroquinoline 1-oxide (4NQO) treatment of F344 rat incisor tooth germs. J Oral Pathol Med 1998; 27: 53–8. © Munksgaard, 1998.
This study was designed to establish an experimental animal model for elucidating the early stages of odontogenic cysts and tumors. It involves the in vitro treatment of tooth germs with 4-nitroquinoline 1-oxide (4NQO) at the early bell stage and their subsequent transplantation into the kidney subcapsular space. While all tooth germ transplants of the control group not exposed to the carcinogen showed continued tooth development with no pathological lesions, 21 of 23 4NQO-treated tooth germs developed into similar appearing keratinized cysts with or without associated tooth structures. The remaining two transplants failed to develop cysts and formed only a tooth. The present experimental procedure was effective in inducing keratinized cystic lesions that exhibit some similarities to human odontogenic keratocysts or primordial cysts.