维生素D受体与肿瘤生长调节

维生素D受体(VDR)是维生素D作用于细胞的关键调节因子。研究表明VDR或者其天然配基1,25-(OH)2D3可以调节肿瘤的生长。本文着重关注VDR在肺癌、结肠癌、食道癌、前列腺癌、胰腺癌等肿瘤生长过程中调节控制的差异,评价其选择性预防和治疗的前景。     

1,25-二羟维生素D3的免疫调节机理及其应用进展

1,25-二羟维生素D3[1,25（OH）2D3]不仅具有调节钙磷代谢的作用,还可影响多种细胞的生长和分化,具有调节免疫系统的作用.该文综述1,25（OH）2D3的免疫调节机制,为进一步开发更安全有效的类似物,并作为新兴的免疫调节剂应用于临床提供理论依据.     

维生素D与免疫功能的研究

维生素D是维持人体生命所必需的营养素,体内的维生素D有内源性和外源性两种,最终被转化为有较强生物活性的1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3],经血液循环运送到各个靶器官发挥作用。最近研究表明,维生素D是一种新的神经内分泌-免疫调节激素,对细胞免疫具有重要的调节作用,包括维生素D受体(VDR)在免疫相关细胞内的表达,1,25-(OH)2D3对细胞因子生成的调控,VDR和各羟化酶缺损的转基因动物研究等。因此,除了对血钙、血磷代谢的调节预防和治疗佝偻病外,维生素D在免疫功能的调节方面也越来越受关注。     

维生素D受体基因多态性与自身免疫疾病相关性的研究进展

<正>维生素D受体(Vitamin D Recepter,VDR)是一种属于配体依赖的类固醇激素超家族的受体,维生素D的代谢产物维生素D3(Vitamin D3)即1,25(OH)2D3,就是与VDR结合并发挥生物学活性的配体。自从发现1,25(OH)2D3抑制IL-2、IFN-C、GM-CSF和IL-12的转录以及上调细胞因子IL-4以来,VDR在免疫调节     

1,25-二羟维生素D3及其类似物对免疫系统的调节作用

1,25-二羟维生素D3是维生素D的活性形式,是一种第二类固醇类激素,和维生素D受体（VDR）结合发挥作用。VDR是核受体超家族中的一员,这一核受体超家族还包括类固醇激素受体,甲状腺激素受体和维甲酸受体。1,25-二羟维生素D3调节钙磷代谢,控制细胞的增殖和分化,产生免疫调节作用。对1,25-二羟维生素D3及其类似物功能研究的进展和免疫调节机制的新认识,提示它们在治疗自身免疫性疾病和诱导同种异体移植耐受上可有广泛的应用。1,25-二羟维生素D3及其类似物除了直接作用于T细胞外,还通过各种机制调节抗原呈递细胞的表型和功能,尤其是树突细胞。体内和体外实验都已证明1,25-二羟维生素D3及其类似物诱导树突细胞获得致耐受性,这一特性可被用于人类自身免疫性疾病及同种异体移植排斥的治疗。作者就1,25-二羟维生素D3及其类似物功能研究的新进展和免疫调节机制的新认识作一综述。     

利用载体介导的RNA干扰技术抑制人骨肉瘤细胞HOS-8603内维生素D3受体的表达及功能

目的:构建由载体介导的抑制人维生素D3受体(VDR)表达的RNA干扰载体,并在人骨肉瘤细胞中初步研究其对VDR表达及功能的影响.方法:通过在线筛选设计了两段针对人VDR的RNAi序列,并与载体pSilencer-2.1-U6连接,获得了表达载体pSilencer-2.1-U6-VDR1与pSilencer-2.1-U6-VDR2.利用脂质体转染法分别转入人骨肉瘤细胞系HOS-8603细胞中,通过Western 印迹法检测其对内源性VDR蛋白表达、对1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]激活PKC作用的影响,利用细胞计数和MTT的方法检测其对1,25(OH)2D3抑制HOS-8603细胞增殖作用的影响.结果:在分别转染pSilencer-2.1-U6-VDR1/2的HOS-8603细胞中,与对照细胞比较,内源性VDR蛋白的表达、1,25(OH)2D3对细胞的增殖抑制作用以及1,25(OH)2D3快速诱导PKC磷酸化的作用均有显著降低.结论:构建的表达载体pSilencer 2.1-U6-VDR1与pSilencer 2.1-U6-VDR2均能在细胞水平显著抑制内源性VDR基因的表达,并能有效阻断一些由VDR介导的1,25(OH)2D3生物学作用,为进一步研究VDR与维生素D3的功能提供了一个有用工具.     

1，25-二羟维生素 D3对白血病6T-CEM细胞株作用的体外研究

目的研究1,25-二羟维生素D3[1,25（OH）2 D3]对人白血病6T-CEM细胞株凋亡及维生素D受体（VDR）蛋白表达的影响。方法在体外用不同浓度的1,25（OH）2 D3作用于6T-CEM。末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记染色法（TUNEL）检测细胞晚期凋亡的变化,免疫细胞化学法检测VDR蛋白表达。结果不同浓度的1,25（OH）2 D3作用后可促进6T-CEM 细胞的凋亡,呈剂量和时间依赖性（P ＜0．05）。1,25（OH）2 D3作用前后6T-CEM细胞均表达VDR蛋白,药物作用后VDR蛋白表达上调。结论1,25（OH）2 D3在一定浓度范围内可诱导6T-CEM细胞凋亡,使VDR蛋白表达上调。     

1,25-(OH)D3及其类似物对人骨肉瘤细胞增殖分化的影响及对VDR mRNA表达的调节

目的:研究1,25-(OH)2D3及其类似物MC1288对人骨肉瘤细胞系(HOS-8603)增殖及分化的影响,并探讨二者对HOS-8603细胞维生素D3受体(VDR)mRNA表达的调节作用.方法:用细胞计数及碱性磷酸酶(ALP)测定法观察1,25-(OH)2D3及MC1288对HOS-8603细胞系细胞的增殖抑制及诱导分化的作用;用半定量RT-PCR法研究1,25-(OH)2D3及类似物对VDR mRNA表达的调节作用.结果:MC1288和1,25-(OH)2D3与HOS-8603细胞孵育后,其增殖分化均明显减弱,以MC1288作用更强,但二者对HOS-8603细胞VDR mRNA表达均无影响.结论:MC1288的选择性活性并非由于转录调节而引起;MC1288的选择性活性对临床治疗肿瘤和其他疾病有较大价值.     

1,25(OH)2D3对骨代谢的影响

维生素D代谢物1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]是体内生物活性最强的维生素D活性形式,通过对成骨细胞和破骨细胞的作用,参与骨形成和骨吸收的代谢调节.维生素D受体(VDR)是一种核受体超家族的成员,其主要介导维生素D对靶细胞的生物效用.VDR不仅分布于与骨、钙代谢有关的小肠、肾和骨等组织,还存在于脑、肝、皮肤、牙齿等器官;同时促进其对钙、磷的吸收.1,25(OH)2D3与受体结合激活基因组时先由维生素D结合蛋白(DBP)将其转运到各靶器官组织,与靶器官及组织中的VDR结合,再与视黄醛X受体(RXR)形成杂二聚体,后与维生素D反应元件(VDRE)结合,对靶基因的转录和翻译进行调控,且只调节含有VDRE的基因,进而实现其生物学功能.1,25(OH)2D3亦介导快速反应,其反应时间仅几秒钟.如肠细胞、破骨细胞、甲状旁腺组织及胰岛β细胞均有这种快速反应.它通过与膜表面受体相互作用,刺激蛋白激酶C,进而使细胞内钙浓度升高,然后刺激丝裂原活化的蛋白激酶(MAP)引起基因效应.VDR功能本质上反映了1,25(OH)2D3的功能,其不仅存在于成骨细胞,而且也存在于破骨细胞[1].位于骨组织上的VDR作用是双向的,成骨细胞上的VDR可调节而位于破骨细胞上的VDR,可抑制其增殖亦可促进其分化.从而对骨的合成和分解代谢起着双向调节作用,而该双向作用的取向则取决于维生素D的含量.正常的骨再建过程依赖于骨吸收和骨形成过程的动态平衡,而这一过程又分别与破骨细胞和成骨细胞的功能密切相关.     

维生素D受体与肿瘤生长调节

维生素D受体（VDR）是维生素D作用于细胞的关键调节因子。研究表明VDR或者其天然配基1,25-（OH）2D3可以调节肿瘤的生长。本文着重关注VDR在肺癌、结肠癌、食道癌、前列腺癌、胰腺癌等肿瘤生长过程中调节控制的差异,评价其选择性预防和治疗的前景。     

维生素D及其受体在妇科肿瘤中的研究进展

维生素D受体(VDR)是介导1,25二羟维生素D3发挥生物效应的核内生物大分子,为类固醇激素/甲状腺受体超家族成员。1,25二羟维生素D3是维生素D的活性形式,它除了具有钙、磷代谢调节作用外,还能调节正常组织和肿瘤细胞的生长和分化。VDR基因上存在多个多态性位点,与部分肿瘤的发生发展密切相关。本文主要综述VDR的结构及其功能、基因多态性,维生素D的细胞作用机制及与妇科肿瘤的相关性研究。     

维生素D与胎儿生长受限关联的研究进展

胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)是常见的妊娠并发症,与围产儿死亡率高和青少年健康成长问题及成年后心血管及代谢性疾病密切相关。尽管FGR的发病率高达5%~10%,但目前仍没有很好的预防和治疗方法。维生素D是人体必需的一种脂溶性激素,在人体中有多种存在形式,1,25(OH)₂D为其活性形式,能与维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)结合并发挥广泛的生物学功能,对正常妊娠的维持以及胎儿的生长发育具有重要作用。VDR属核受体超家族成员,是维生素D代谢途径中的一个重要组成部分,参与激活调节和启动众多涉及到细胞增殖和分化的基因的表达与调控。VDR基因存在多态性并影响VDR的转录活性,改变VDR蛋白功能,并直接或间接地影响维生素D的功能,与多种疾病的遗传易感性相关。人体和动物实验研究表明:子宫内膜基质以及妊娠早期蜕膜组织细胞中均有VDR表达,VDR蛋白参与早期胚胎植入过程的免疫调节,FGR患者胎盘VDR表达下降。因此,孕期维生素D状态以及VDR基因多态性可能与胎儿生长发育迟缓以及新生儿低出生体重有关。本文就维生素D、维生素D受体基因多态性与FGR的关系作一综述。      

1,25（OH）2D3抑制高糖致大鼠肾脏系膜细胞肥大的机制研究

目的 观察1,25（OH）2D3能否抑制高糖导致的大鼠肾小球系膜细胞（RMC）肥大,并探讨其可能的作用机制.方法 将体外培养的RMC分为正常对照组、等渗对照组、高糖组、单纯1,25（OH）2D3组、等渗＋1,25（OH）2D3组及高糖＋1,25 （OH）2D3组.1,25（OH）2D3浓度为10-2mol/L,培养48 h,检测各组细胞总蛋白/细胞数比值,流式细胞仪检测各组前向角光强度（FSC）,并采用Western blot检测各组维生素D受体（VDR）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、核蛋白S6激酶（p70S6K）、延长因子4E结合蛋白（4EBP1）的表达情况.结果 高糖＋1,25（OH）2D3组与高糖组比较,FSC降低（530.7±15.6 vs.509.0±35.0,P＜ 0.05）、总蛋白/细胞数比值降低（41.5±1.7 vs.49.9±1.1,P＜0.05）;Western blot半定量灰度分析显示,高糖组较正常对照组VDR下调,mTOR及p70S6K的蛋白水平上调（P＜0.05）;高糖＋1,25（OH）2D3组较高糖组mTOR及p70S6K的蛋白水平均下调（P＜0.05）.结论 1,25（OH）2D3可逆转高糖导致的RMC肥大,其机制可能是通过抑制mTOR及其下游信号通路,减少了蛋白质的合成.     

1,25-二羟维生素D3处理树突状细胞在过敏性气道炎症中的作用

目的 研究1,25-二羟维生素D3对树突状细胞(dendritic cells,DC)表型和功能的影响及其处理后DC在过敏性气道炎症中的作用.方法 体外扩增小鼠骨髓来源的树突状细胞,采用流式细胞术和ELISA检测1,25-二羟维生素D3对DC表型和分泌细胞因子IL-10和IL-12的影响;观察1,25-二羟维生素D3处理DC过继卵蛋白致敏小鼠肺组织病理特点和支气管肺泡灌洗液细胞类型.结果 经1,25-二羟维生素D3处理后,DC表达CD80和MHC Ⅱ均明显降低,而CD11c变化不明显;分泌IL-10显著增加,而分泌IL-12显著降低.过继小鼠肺组织未见典型的哮喘样病理改变,支气管肺泡灌洗液细胞类型与空白对照组无显著差异.结论 1,25-二羟维生素D3可抑制DC成熟,经其处理后DC过继致敏小鼠可诱导对抗原的免疫耐受,避免过敏性气道炎症的发生.     

维生素D的免疫功能及在自身免疫性疾病中的应用前景

对维生素D的免疫功能及在自身免疫性疾病中的应用前景作一综述．     

稳定转染维生素D受体反义cDNA的人骨肉瘤细胞系的建立

目的：建立稳定转染维生素D受体（VDR）反义cDNA的人骨肉瘤细胞系,方法：构建VDR反义cDNA的真核表达载体,用Lipofectamine法转染人骨肉瘤细胞系HOS－8603,经G418筛选后获得稳定转染细胞株,并用免疫组化技术检测内源性VDR蛋白折表达情况,采用瞬时转染报告基因技术从靶基因水平检测VDRas3细胞内VDR的转录激活功能,结果“筛选出6株抗G418细胞克隆（VDRas1-6),其中VDRas3细胞内源性VDR蛋白的表达量低于对照细胞,激素作用72h后,对照组细胞的报告基因氯霉素乙酰转移酶（CAT）转录活性增加约3．5倍,而VDRas3细胞CAT的转录基本不受激素诱导。结论：获得了稳定转染VDR反义cDNA的细胞系,为今后进一步研究1,25（OH）2D3及其类似物调节细胞增殖分化的分子机制提供了一个良的细胞模型。     

维生素D/维生素D受体、自噬与炎症相关疾病

维生素D及维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)介导的生物效应参与调节体内多个病理生理过程,包 括钙磷代谢、免疫调控、抗炎、抗感染、肿瘤预防等。自噬是真核细胞溶酶体介导的一种分解代谢途径,分为巨自 噬、微自噬及分子伴侣介导的自噬3种类型。自噬有助于维持细胞能量及新陈代谢,炎症、感染、肿瘤等多种病理过 程均与自噬功能障碍密切相关。维生素D/VDR通过调节炎症因子影响自噬,调节自噬的不同阶段,在自身免疫性疾 病、糖尿病、心血管疾病、肿瘤等炎症相关疾病中发挥重要作用。     

Forskolin对1，25－二羟维生素D_3受体mRNA表达的调节及其生物学意义

目的：研究腺苷酸环化酶激活剂ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（Ｆ）对１，２５－二羟维生素Ｄ３［１，２５（ＯＨ）２Ｄ３］受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ表达的调节作用及其可能的生物学意义。方法：以人原始巨核白血病细胞系（ＨＩＭｅｇ）为模型，ＶＤＲｍＲＮＡ的检测采用定量逆转录－聚合酶链反应；细胞增殖实验采用悬浮培养系统及甲基纤维素培养系统。结果：Ｆ对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ的表达具有向上调节作用，且有明显的时间依赖性特点；Ｆ本身虽然对ＨＩＭｅｇ细胞的增殖及分化过程无明显影响，但却可以显著地加强１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对该细胞系的作用，具体表现在：当Ｆ同时存在时，１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对ＨＩＭｅｇ细胞的增殖过程和克隆形成率的抑制作用更为明显，对ＨＩＭｅｇ细胞分化过程的诱导作用亦更为显著；同时，１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对ＨＩＭｅｇ细胞周期分布的影响也更加突出。结论：Ｆ对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ具有向上调节作用，并伴有１，２５（ＯＨ）２Ｄ３生物学效应的提高，说明下对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ的向上调节作用具有生物学意义。