树突状细胞的诱导分化研究进展

树突状细胞(dendritic cells,DC)是骨髓来源的非淋巴样单核细胞中为数很少的一个细胞群体,是目前所知的功能最强的、唯一能激活初始性T(Naive T cell)细胞的专职抗原呈递细胞(antigen presenting cell,APC),在抗原的加工提呈、抗原识别及T细胞的激活中发挥着重要的作用,因而在肿瘤免疫治疗中处于极重要地位。     

淋巴细胞的膜结构、亚群及其功能

<正> 淋巴细胞是参与免疫反应的主要细胞,除T细胞、B细胞外,近年来又报道了另外两群即K细胞(Killer cell)与D细胞(Double cell)。淋巴细胞是一个很复杂的不均一群体,用一般形态学方法不易将它们区别开来。目前根据淋巴细胞膜的表面标志、发育阶段中的分化抗原、免疫功能等特征面区分为许多亚群。     

spA对小鼠外周血辅助性T淋巴细胞和抑制性T淋巴细胞的影响

很多体外试验结果证明,可溶性葡萄球菌A蛋白(SpA)是人和动物T淋巴细胞和B淋巴细胞的促有丝分裂原和多克隆激活物。T细胞的两个亚群——辅助性T细胞(helper T cell,Th)和抑制性T细胞(Supperssor T coil,Ts)是免疫调节的中心。SpA对活体的T淋巴细胞及其亚群的影响的研究具有重要的理论和临床意义。现将我们观察的结果报告如下。     

TCRβ链CDR3谱系与病毒感染相关研究进展

T细胞受体（T cell receptor,TCR）是T淋巴细胞特异性识别抗原的受体,也是所有T细胞的特征性表面标志。T细胞应答是通过TCR互补决定区（Complementary determining region,CDR）与各种特异的抗原结合,从而产生各种克隆T细胞,不同克隆T细胞具有不同长度或序列的TCRCDR3区,     

Treg细胞亚型在首诊癌症患者外周血中的表达及意义

目的 探讨癌症患者外周血中调节性T细胞(regulatory T cells, Tregs)亚型即1型辅助性T细胞(type 1 helper T cell, Th1)样Treg细胞(T-bet⁺Treg)、Th2样Treg细胞(GATA3⁺Treg)、Th9样Treg细胞(Pu-1⁺Treg)、Th17样Treg细胞(RORγ⁺Treg)及滤泡型辅助性T细胞(follicular helper T cell, Tfh)样Treg细胞(CXCR5⁺Treg)的表达情况及其对应的CD4⁺T细胞子集：Th1、2型辅助性T细胞(type 2 helper T cell, Th2)、9型辅助性T细胞(type 9 helper T cell, Th9)、17型辅助性T细胞(type 17 helper T cell, Th17)、Tfh的表达。方法 将23例癌症患者设为研究组，23例门诊健康体检者设为正常对照组，采用流式细胞术检测患者外周血中T-bet^+...     

CML患者外周血TCR Vδ亚家族T细胞的谱系变化研究

目的 了解慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者慢性期(chronic phase,CP)和缓解期(complete remission,CR)外周血T细胞受体(T cell receptor,TCR)Vδ亚家族T细胞的分布和克隆性情况.方法 利用RT-PCR扩增8例CML-CP和8例CML-CR患者外周血T细胞中8个Vδ亚家族基因的互补决定区(CDR3),了解TCR Vδ亚家族T细胞的分布和利用情况;阳性产物进一步经基因扫描分析CDR3长度,从而了解其克隆性.10例健康人外周血作为对照.结果 8例CML-CP患者外周血T细胞平均表达(3.25±0.89)个Vδ亚家族,主要以Vδ1、Vδ2和Vδ3的表达为主,而8例CR期患者则平均表达(3.50±0.76)个Vδ亚家族,主要集中在Vδ1、Vδ2、Vδ3和Vδ8中表达;两组与健康对照组(3.50±0.52)比较无统计学意义.此外,Vδ8表达频率在CML-CR患者(5/8)中略高于健康人(3/10)和CML-CP患者(2/8).基因扫描绝大多数患者和健康人外周血TCR Vδ亚家族T细胞均存在克隆性增殖现象,主要以Vδ1-Vδ3为主,但在CML-CR患者中,表达V87亚家族的两例样本均呈克隆性增殖,这在10例健康人中均未检测到.结论 3组样本的外周血T细胞中TCR Vδ谱系和克隆性增殖类似,提示CML患者T细胞免疫抑制可能并不主要累及TCR Vδ谱系变化,并在CML-CR期所出现了一些不同的Vδ表达和克隆模式.     

呼伦贝尔盟少数民族成人T细胞白血病抗体调查

成人T细胞白血病(adult T cell leukema;ATL)是由人类T细胞白血病Ⅰ型病毒(human T cell lymphotropiec Virus type Ⅰ;HTLV—Ⅰ)引起的一种特殊类型的白血病。近年来在我国也发现了小的流行区。为了了解ATL在内蒙古呼伦贝尔盟少数民族中的抗体携带和感染     

卵巢癌细胞生长环境中CD4+Treg细胞和CD4+Teff细胞的糖代谢特征初探

目的:探究 CD4+CD25+CD127low调节性T 细胞(regulatory T cell,Treg)和 CD4+CD25-CD127+效应性T细胞(effector T cell,Teff)在卵巢癌细胞生长环境中的糖代谢特征.方法:流式细胞术(fluorescence-activated cell sortin...     

Th17细胞分化可塑性的研究进展

在机体的适应性免疫应答中,CD4+ 辅助性T 细胞(CD4+ T helper cells,Th细胞)发挥了关键作用,而Th细胞又可分为Th1细胞、Th2细胞、调节性T细胞(T regular cell,Treg)和辅助性T细胞17型(T helper cell 17,Th17)4个主要类型[1].由初始CD4+ T细胞分化为各种不同类型的效应细胞的过程,在过去被认为是不可逆的.     

靶向Trop-2 CAR-T细胞的制备及其体外对卵巢癌细胞杀伤作用的研究

目的：制备靶向人滋养层细胞表面抗原2（human trophoblast cell surface antigen 2 , Trop-2)的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell , CAR-T）,观察Trop-2 CAR-T细胞在体外对卵巢癌细胞增殖的影响。方法：运用分子克隆及基因重组技术构建Trop-2 CAR;采用Western blot检测Trop-2 CAR在293T细胞中的表达;CCK-8法检测Trop-2 CAR-T细胞对卵巢癌细胞增殖的影响;ELISA检测细胞因子分泌的变化。结果：酶切鉴定及测序分析结果表明,Trop-2 CAR各基因片段连接正确;Western blot检测结果显示,该质粒能够在293T细胞中有效表达;CCK-8结果显示,制备的Trop-2 CAR-T细胞在体外能明显抑制表达Trop-2的卵巢癌细胞的增殖（P＜0.05）;ELISA检测结果表明Trop-2 CAR-T细胞与表达Trop-2的卵巢癌细胞共培养后,干扰素（interferon-γ,IFN-γ)、白介素（interleukin-2,IL-2)细胞因子分泌增加（P＜0.01）。结论：该研究成功制备了Trop-2 CAR-T细胞,可有效抑制Trop-2表达阳性的卵巢癌细胞的增殖。     

免疫检查点抑制剂相关性肝损伤的研究进展

<正>免疫检查点抑制剂(Immune checkpoint inhibitors,ICI)是一种新型的抗肿瘤免疫治疗药物,它以程序性细胞死亡蛋白-1(Programmed cell death protein-1,PD-1)及其配体-1(Programmed cell death-1ligand 1,PD-L1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(Cytotoxic T lymphocyte antigen-4,CTLA-4)等作为作用靶点,阻止T细胞表面受体与其配体相结合,     

细胞因子诱导的杀伤细胞与树突细胞联合治疗晚期实体肿瘤40例临床分析

细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)是以CD3 CD56 、CD3 CD8 T细胞为主要效应细胞的异质细胞群,具有增殖快、杀瘤活性高、杀瘤谱广等优点[1～3]。树突状细胞(dendritic cell,DC)是体内功能最强大的专职抗原递呈细胞,是惟一能激活幼稚T细胞(naive T cell)的抗     

T细胞亚群研究进展

T细胞是一个不均一的细胞群体,分类方法有多种。按细胞表面分化抗原(CD)的不同。可分为CD4^ 和CD8^ 两大亚群;按T细胞表面受体(TCR)的不同,可分为αβT细胞γδT细胞;按功能可分为辅助性T细胞(Th细胞)、抑制性T细胞(Ts细胞)、     

系统性红斑狼疮自体外周血干细胞移植T细胞克隆基因谱型变化

目的 通过系统性红斑狼疮(SLE)自体外周血干细胞移植(APBSCT)前后T细胞受体B(TCRβ)CDR3基因表达谱型的变化,探讨SLE发病机理以及患者干细胞移植后T淋巴细胞克隆的免疫重建特征。方法 应用RT-PCR扩增APBSCT的SLE患者外周血的TCRβ可变区(V)25个家族的基因序列,在长泳道测序胶上电泳,形成TCRβCDR3基因表达谱型图。通过谱型图上电泳条带分析SLE移植前T细胞克隆增生的特征以及移植后T细胞克隆群的变化,做增生T细胞克隆的TCRβ基因序列分析,了解TCRβ基因与自身免疫病的相关性。结果 正常HCRβV25个家族的基因序列电泳后分别出现呈高斯分布的10余条电泳条带,组成CDR3基因表达谱型图。8例SLE患者谱型图均出现异常,4例TCRβ在β3V13．1基因家族T细胞出现寡克隆增生,3例在βV8,βV9,βVl5家族中出现寡克隆性增生。APBSCT后T细胞克隆分布趋于正常,CDR3恢复多态性,部分恢复到正常TCRβ基因分布。测序结果显示谱型图上单一条带过度浓集往往是单克隆或者寡克隆T细胞增殖;发现SLE一个异常T细胞克隆的TCRβV8 CDR3氨基酸序列与已报道强直性脊椎炎疾病相关克隆完全一致。结论 SLE患者出现T细胞寡克隆增生,增生的T细胞克隆可能与自身免疫病发病有关。APBSCT后免疫重建,抑制了致病的T细胞寡克隆,可能是移植后SLE治疗缓解的主要因素。     

D细胞临床观察

已知人淋巴细胞中不仅有T及B淋巴细胞,而且还有N细胞(Null cell)及D细胞(Double cell)。对D细胞之分布、特性以及检测方法,已有不少作者作了报道。目前大多认为D细胞可能属于未分化的兼有T与B细胞特性的淋巴细胞,     

骨髓移植前后免疫系统功能评估

目的 :研究重度联合免疫缺陷综合征(SCID)患儿在接受同种异体骨髓移植前后T细胞受体(TCR)的分布情况。方法 :利用Immunoscope方法对15例接受同种异体骨髓移植的SCID患者的Vβ链的T细胞受体分布进行分析。结果 :在骨髓移植前和骨髓移植后100天之内 ,患者外周血单核细胞表现出T细胞发育的寡克隆性(oligoclonal)或者多克隆不均衡性(polyclonalskewed) ,CD45RO T细胞占优势 ;相反 ,在骨髓重建后的(>100天)SCID患者的外周血中CD45RA 细胞占优势 ,Vβ链上TCR呈多克隆正态分布(polyclonalGaussian)。结论 :利用Immunoscope技术可以了解骨髓移植前后T细胞受体的分布情况。在接受骨髓移植后的1年内 ,正常的T细胞在SCID患者体内发展成熟 ,TCR的分布具有多样性。     

CCR8在卵巢癌浸润性Treg上的表达与意义

目的：分析趋化因子受体8(C-C motif chemokine receptor 8,CCR8)在卵巢癌肿瘤浸润性调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）中的表达,探讨CCR8对Treg分化的作用。方法：构建C57BL/6小鼠卵巢癌细胞ID8荷瘤模型;流式细胞术检测小鼠肿瘤组织、脾脏和外周血中Treg上CCR8的表达比例,CCR8+Treg上免疫检查点相关蛋白程序性细胞死亡蛋白1(programmed cell death protein 1,PD-1)、细胞素性T淋巴细胞抗原4(cytotoxic T-lymphocyte antigen 4,CTLA-4)、可诱导的T细胞共刺激分子（inducible T cell costimulators,ICOS）、淋巴细胞激活基因3(lymphocyte activation gene 3,LAG-3)的表达;流式细胞术检测CCR8变构抑制剂AZ084加入前后对C57BL/6小鼠脾脏中初始CD4+T细胞向Treg分化的影响。结果：卵巢癌荷瘤小鼠肿瘤中Treg上的CCR8表达相比脾脏、外周血的Treg显著增高;相比CCR...     

乳腺癌转移淋巴结T细胞克隆性分析

目的分析乳腺癌患者转移淋巴结中TCR BV亚家族T细胞的克隆性分布特点。方法选取2例反应性增生淋巴结及10例乳腺癌转移淋巴结标本,应用RT-PCR方法扩增T细胞24个TCRβ链可变区(BV)亚家族的互补决定区3(CDR3)基因,经基因扫描确定T细胞克隆性。结果乳腺癌转移淋巴结中T细胞存在克隆性增生,增生形式包括单、寡克隆及多克隆。不同患者增生T细胞克隆中均存在TCR谱型偏移,仅表达2~5个BV亚家族。结论乳腺癌转移淋巴结内克隆性T细胞TCR BV亚家族存在选择性取用特点,可能与机体对乳腺癌相关抗原的特异性免疫反应有关。     

神经生长因子受体阳性的人食管鳞癌细胞的分选及其干细胞特性

 目的 应用免疫磁珠分选(magnetic activated cell sorting,MACS)人食管鳞癌细胞(esophageal squamous carcinoma cell,ESCC)中的神经生长因子受体(nerve growth factor receptor,NGFR)阳性细胞,并对其肿瘤干细胞样特征进行研究。方法 采用免疫磁珠分选技术分选人食管鳞癌细胞系中的NGFR阳性细胞,然后通过流式细胞仪法测定分选细胞的纯度及细胞周期分布,并计算细胞回收率;MTT法测定细胞数,绘制生长曲线并计算细胞群体倍增时间;平板克隆实验测定平板克隆形成率;裸鼠接种成瘤实验测定体内致瘤性,从而鉴定NGFR阳性ESCC的干细胞特性。结果 NGFR阳性细胞约占肿瘤细胞的1.89%,经过磁珠分选后,其纯度显著提高,达89.94%,细胞回收率为19.83%。与未分选细胞相比,NGFR阳性细胞的增殖速度明显提高,生长曲线左移,细胞倍增时间缩短［(25.22±8.15)h vs. (47.41±12.69)h,P<0.05］,平板克隆形成率显著增加(16.27%±8.31% vs. 1.22%±0.35%,P<0.05),处于活跃增殖期S、G2、M期的细胞显著增加(72.7% vs. 18.8%,P=?);裸鼠皮下接种的转移瘤形成率增加(8/10 vs. 1/10,P=?),转移瘤重量显著增加［0.72±0.53)g vs. (0.16±0.26)g,P<0.05］。结论 应用免疫磁珠分选技术能有效分选出人食管鳞癌细胞中的NGFR阳性细胞,NGFR阳性细胞具有肿瘤干细胞特性。     

突变型PSMB5通过下调非小细胞肺癌抗原加工呈递功能介导抗PD-1免疫治疗耐药

目的 探讨突变型编码蛋白酶体B5亚基的基因（proteasome subunit beta 5,PSMB5）介导非小细胞肺癌抗程序性死亡受体1(programmed death 1,PD-1)免疫治疗继发耐药的作用及机制。方法 对6例接受免疫治疗的继发PSMB5 p.A79T或p.M104I突变的非小细胞肺癌患者治疗前及耐药后肿瘤组织进行RNA测序,对比基因表达差异。利用I-Mutant 2.0评估PSMB5突变对蛋白稳定性的影响。对抗PD-1免疫治疗前后的肿瘤组织通过免疫组化检测CD8表达水平。流式分选患者免疫治疗期间的PD-1+CD8+T细胞,并进行T细胞受体（T cell receptor,TCR）测序,结合外周血游离细胞DNA(cell free DNA,cfDNA)测序结果进行克隆进化分析。利用肿瘤细胞与T细胞共培养体系,明确突变型PSMB5对T细胞应答的影响。结果 PSMB5 p.A79T或p.M104I突变可导致蛋白稳定性降低,基因信号通路富集分析（gene set enrichment analysis,GSEA）提示突变型PSMB5相比免疫治疗前野生型PSMB5抗原呈...