黄芪多糖对大鼠慢性阻塞性肺疾病羟脯氨酸和基质金属蛋白酶-9的影响

目的 观察黄芪多糖对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中羟脯氨酸和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响.方法 采用香烟熏吸加气管内注入脂多糖(LPS)法建立大鼠COPD模型.黄芪多糖高、中、低3个浓度及强的松灌胃干预30 d.生化法检测肺组织中羟脯氨酸含量,RT-PCR法检测MMP-9基因表达水平,免疫组化法半定量检测MMP-9蛋白含量.结果 模型组大鼠肺组织羟脯氨酸含量和MMP-9表达水平较正常对照组明显增加(P＜0.01);黄芪多糖干预后,羟脯氨酸呈剂量依赖性明显减少(P＜0.05,P＜0.01),MMP-9基因及蛋白表达水平亦明显降低,以中剂量效果最明显.结论 黄芪多糖可减少COPD大鼠肺组织羟脯氨酸的含量和MMP-9的表达,这种作用与改善COPD的肺损伤程度有一定关系.     

不同海拔COPD患者血清基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1的表达

目的通过ELISA法研究COPD患者血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）在不同海拔中的表达。方法选取西宁COPD患者31例作为中度海拔组,同期玉树COPD患者24例作为高海拔组。各组均空腹采静脉血标本3mL静置1h后常温下离心（3000G）10min取血清。用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）测定MMP-9、TIMP—1。比较不同海拔地区COPD患者血清MMP-9、TIMP-1的差异。结果高海拔地区COPD组血清MMP-9、TIMP-1水平为64．198±8．800、10．715±0．630pg／mL;中度海拔地区COPD组血清MMP-9、TIMP-1水平为50．241±5．552、12．025±0．452pg／mL。不同海拔COPD患者血清MMP-9值相比存在显著性差异（P〈0．05）。不同海拔地区COPD患者血清TIMP-1值相比存在显著性差异（P〈0．05）。结论不同海拔COPD患者血清MMP-9、TIMP-1值存在差异。     

清肺化痰通络方对肺纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨清肺化痰通络方对博莱霉素A5（BLMA5）所致肺纤维化大鼠的干预作用及可能机制。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、干预组。模型组和干预组通过气管插管灌注BLMA5复制大鼠肺纤维化模型,对照组给予等量生理盐水气管灌注;对照组和模型组给予生理盐水灌胃,干预组给予清肺化痰通络方药物灌胃。灌胃后3、7、14、28d分别处死大鼠,采用HE和Masson染色观察肺组织病理变化,免疫组化染色检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9在肺组织的表达水平。结果清肺化痰通络方能显著改善大鼠的一般身体状况．减轻肺泡炎及肺纤维化的程度。干预组和模型组肺内MMP-2表达在第14天达到高峰,MMP-9的表达在第7天达到高峰,且两组同时期MMP-2、MMP-9的表达均高于对照组（P〈0．05）;干预组MMP-2、MMP-9表达低于同时期模型组（P〈0．01）。结论清肺化痰通络方可能通过抑制MMP-2、MMP-9在肺内的表达,对BLMA5致肺组织纤维化起到一定的防治作用。     

基质金属蛋白酶9及其组织抑制剂1与慢性阻塞性肺疾病的研究进展

基质金属蛋白酶9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物1(TIMP-1)是调节细胞外基质降解合成的主要酶类,共同作用于呼吸道的细胞外基质和基底膜。目前认为,MMP-9/TIMP-1比值失衡与慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发生、发展关系密切。抑制MMP-9的过度表达、调节MMP-9/TIMP-1平衡可以为COPD的发病机制和治疗提供新思路。同时,对高危人群进行COPD的易感基因检测,可能是未来预防治疗COPD的方向。现就近年来MMP-9/TIMP-1比值失衡与COPD关系的研究进展进行综述。     

基质金属蛋白酶-2、-9及其组织抑制剂-1在大鼠肺组织中的增龄变化

目的研究基质金属蛋白酶(MMPs)-2、-9及组织型基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)-1在大鼠肺组织中的增龄性变化规律。方法不同月龄(1月龄、3月龄、12月龄、18月龄、24月龄)雄性清洁级(SD)大鼠47只分为5组,按月龄取实验大鼠的右下叶肺组织,用流式细胞术检测MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达水平,进行定量分析。结果 MMP-2、MMP-9和TIMP-1均随着月龄的增长呈先降后升波谷型曲线变化;3月龄、12月龄和18月龄MMP-2、MMP-9和TIMP-1均较1月龄明显下降,且以12月龄为最低值;24月龄MMP-2、MMP-9和TIMP-1均较1月龄上升。MMP-2/TIMP-1比值和MMP-9/TIMP-1比值均随着月龄的增长呈先升后降波峰型曲线变化;12月龄和18月龄均较1月龄明显升高,且以18月龄为最高点;3月龄的MMP-2/TIMP-1较1月龄有所上升,3月龄的MMP-9/TIMP-1与1月龄持平;24月龄的MMP-2/TIMP-1和MMP-9/TIMP-1较1月龄也有不同程度上升。结论大鼠肺组织中MMPs及其抑制剂TIMPs随月龄的增长,呈特征性变化规律。     

MMP-9、TIMP-1在COPD大鼠肺组织中的表达及虎杖的干预影响

摘要：目的：探讨虎杖对慢阻肺大鼠模型肺组织内基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法：选用熏烟和气管内注入脂多糖（LPS）的造模方法建立大鼠慢性阻塞性肺病(COPD)模型。40只雄性SD大鼠被随机分成4组,每组10只：正常对照组、COPD模型组、强的松组、虎杖干预组。在每次熏烟前0.5h给药,熏烟的第29天采用虎杖煎剂、强的松进行相关干预,给药28天。在给药第28天,处死大鼠。Real-Time PCR方法检测肺组织匀浆标本MMP-9和TIMP-1表达。结果：与对照组相比,其他3组大鼠MMP-9和TIMP-1表达水平均明显升高（P<0.05）;与COPD模型组相比,强的松组、虎杖组表达水平均显著降低（P<0.05）。结论：虎杖可降低MMP-9和TIMP-1表达,对COPD大鼠肺组织有一定保护作用,这也可能是其控制气道炎症及抑制重塑的作用有关。     

参七虫草胶囊对肺纤维化大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9及基质金属蛋白酶抑制剂-1表达的影响

目的探究参七虫草胶囊治疗肺纤维化的机制。方法将80只雄性SD大鼠随机分成空白组、模型组、泼尼松组、参七虫草胶囊组,每组20只。采用博莱霉素气管内滴注法复制肺纤维化模型。给药后15、30d,分别观察各组大鼠肺组织病理变化,并采用免疫组织化学方法检测肺组织中基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(issue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的表达水平。结果与模型组比较,参七虫草胶囊组、泼尼松组大鼠各时点肺泡炎性反应和肺纤维化程度明显减轻,各时点泼尼松组、参七虫草胶囊组肺组织MMP-9、TIMP-1表达水平显著降低(P0.05,或P0.01)。结论参七虫草胶囊抑制肺纤维化早期肺泡的炎性反应与其降低肺组织MMP-9、TIMP-1表达水平有关。     

动脉粥样硬化患者血液中基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1的基因表达

目的通过检测动脉粥样硬化（AS）患者血液中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与基质金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）的基因表达水平,探讨AS发生的分子机制及预测因子。方法 AS患者120例为动脉硬化组,72例正常体检者为对照组。用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测其血液中MMP-9和TIMP-1 mRNA表达水平。结果 MMP-9和TIMP-1的RT-PCR产物序列与GenBank上人MMP-9 mRNA和TIMP-1基因片段完全一致。动脉硬化组的MMP-9基因表达水平高于对照组MMP-9基因表达水平,但差异无统计学意义（P〉0.05）。动脉硬化组的TIMP-1基因表达水平低于对照组TIMP-1基因表达水平,差异有统计学意义（P〈0.05）。MMP-9/TIMP-1基因表达定量比值,动脉硬化组高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 AS患者TIMP-1基因表达水平的降低与MMP-9/TIMP-1基因表达定量比值升高可能是AS发生的分子机制之一,二者一起可以作为AS发生的预测因子。     

参龙煎剂对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织基质金属蛋白酶2与金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响

目的：观察博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织中基质金属蛋白酶2（matrixmetalloproteinase-2,MMP-2）和金属蛋白酶组织抑制剂1（tissue inhibitor of metallo proteinase-1,TIMP-1）mRNA的表达,探讨中药复方参龙煎剂防治大鼠肺纤维化的作用机制。方法：230只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、泼尼松组和参龙煎剂低、中、高剂量组,采用气管内注入博来霉素的方法建立Wistar大鼠肺纤维化模型。正常对照组和模型组大鼠第2日起每日予生理盐水灌胃,其余各组大鼠按配好的参龙煎剂以等容药品灌胃。苏木素-伊红染色和Masson染色观察不同时间点大鼠肺组织病理变化,以评价模型是否成功。逆转录聚合酶链反应检测大鼠肺组织MMP-2和TIMP-1mRNA的表达水平。结果：各组大鼠肺组织在各个时间点均有MMP-2和TIMP-1mRNA表达。与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠在第7天时MMP-2和TIMP-1mRNA基因转录水平均显著增高,尤以MMP-2mRNA增加明显,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;在第14天时,MMP-2和TIMP-1mRNA的基因转录表达继续增高,但TIMP-1mRNA增加更显著,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;第28天时,MMP-2已有所下降,但TIMP-1mRNA表达仍持续性增高,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。与模型组大鼠比较,治疗组大鼠第7天MMP-2和TIMP-1mRNA基因转录水平降低,尤其是MMP-2的表达降低更明显,第28天时这种降低作用仍持续存在,以参龙煎剂中剂量组大鼠表现最明显,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论：参龙煎剂可能是通过上调TIMP-1mRNA的表达来抑制MMP-2mRNA表达水平,从而起到延缓肺纤维化的作用。     

MMP-9和TIMP-1在实验性肺气肿大鼠肺组织中的表达及其意义

目的研究基质金属蛋白酶(MMP-9)及其组织抑制因子(TIMP-1)在弹性蛋白酶所致肺气肿大鼠肺组织中的表达.方法雄性Wistar大鼠20只,随机分为两组:正常对照组和肺气肿模型组,每组10只.模型组大鼠气管内滴入弹性蛋白酶复制肺气肿模型.25d后,观察各组大鼠肺组织的病理改变,免疫组化方法观察肺组织MMP-9和TIMP-1中的蛋白表达情况.结果肺气肿模型组MMP-9和TIMP-1的表达与正常对照组相比明显增强(P＜0.01),且MMP-9/TIMP-1比值失衡.结论MMP-9/TIMP-1失衡在肺气肿形成中起重要作用.     

慢支咳喘宁对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的 观察慢支咳喘宁胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,以探讨慢支咳喘宁胶囊在改善COPD气道重塑中的作用及其机制.方法 将72只SPF级Wistar大鼠随机分为6组,即空白对照组,模型对照组,慢支咳喘宁低、中、高剂...     

多西环素对大鼠体外循环后肺内MMP-9和TIMP活性和基因表达的影响

目的:探讨多西环素对大鼠体外循环后肺内基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)活性和基因表达的影响?方法:健康雄性SD大鼠36只随机分为对照组?体外循环组(CPB组)和治疗组,分别于手术结束时(T1)和手术结束后6 h(T2)收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本?Western blot法测定BALF中MMP-9和TIMP-1的蛋白活性,RT-PCR法测定肺组织MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达?结果:治疗组大鼠肺组织水肿减轻,BALF的中性粒细胞减少;CPB组BALF中MMP-9活性明显升高,CPB后6 h表达最强,治疗组MMP-9活性较CPB组有明显下降,TIMP-1的活性在CPB组和治疗组于CPB结束后呈较弱的增强趋势,两组间相同时间点的表达差异不明显;CPB组和治疗组MMP-9mRNA表达增强,但治疗组MMP-9 mRNA的表达在相应时间点较治疗组下降;TIMP-1 mRNA在治疗组表达增强,且T2时间点显著增强;MMP-9/TIMP-1 mRNA在CPB组和治疗组均有显著增大,但治疗组中T2时间点MMP-9/TIMP-1 mRNA比值较CPB组明显下降?结论:CPB可以引起大鼠术后肺内MMP-9的活性和基因表达增强,导致术后早期肺内MMP-9/TIMP-1 mRNA表达失衡,多西环素可以抑制CPB后大鼠肺组织内MMP-9蛋白水平和mRNA的表达,还可能上调TIMP-1的表达而间接抑制MMP-9 mRNA表达,改善MMP-9/TIMP-1的比例失衡?     

丰白散对COPD模型大鼠肺组织中MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的观察丰白散对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)基因表达的影响,探讨其治疗COPD的作用机制。方法取10只大鼠为正常组,不予任何处理,另取大鼠36只采用烟熏加气管内滴加脂多糖(LPS)方法复制COPD模型,取造模成功的30只大鼠随机分为模型组、沐舒坦组和丰白散组各10只,予相应干预28天后,用苏木素—伊红(HE)染色评估各组大鼠肺组织病理改变,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测MMP-9、TIMP-1 mRNA表达水平。结果正常组肺泡结构完整,肺泡间隔无缺损;模型组肺泡结构破坏、融合、弹力纤维网破坏;沐舒坦组、丰白散组病理改变程度明显减轻。模型组大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1 mRNA表达水平明显高于正常组(P<0.05);沐舒坦组、丰白散组大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1 mRNA表达水平较模型组下降(P<0.05),2组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MMP-9、TIMP-1过度表达,MMP-9/TIMP-1失衡在COPD气道重构中发挥重要作用;丰白散能下调MMP-9、TIMP-1 mRNA表达,调节MMP-9/TIMP-1失衡,干预气道重构。     

基质金属蛋白酶9及其抑制剂在慢性阻塞性肺疾病发病中的作用

目的　探讨基质金属蛋白酶 9(MMP 9)及其基质金属蛋白酶组织抑制剂 1(TIMP 1)在慢性阻塞性肺疾病 (COPD)发病机制中的作用。方法　选择COPD稳定期组 12例、COPD急性加重期组 12例、COPD急性加重期 +糖皮质激素治疗组 12例和正常对照组 12例患者 ,采用逆转录 聚合酶链的方法测定各组患者外周血单个核细胞中MMP 9和TIMP 1mRNA的表达 ,同时用明胶图谱法测定血浆中MMP 2 ,9的蛋白质水平 ,并分析其与肺功能的关系。结果　 (1)COPD各组MMP 9mRNA表达水平和MMP 9/TIMP 1的比值增加 ,与正常组相比 ,差异具有显著性 (P <0 0 5 ) ,而COPD各组间表达差异无显著性 (P >0 0 5 )。 (2 )COPD各组血浆中MMP 9蛋白水平增加 ,高于正常组 (P <0 0 5 ) ,而COPD各组间蛋白质水平差异无显著性 (P >0 0 5 )。 (3)COPD组中MMP 9mRNA的表达、MMP 9/TIMP 1比值及血浆中MMP 9蛋白质水平与FEV 1 0%占正常预计值呈负相关 (r =- 0 789,P <0 0 5 ;r =- 0 5 3,P <0 0 5 ;r =- 0 6 5 2 ,P <0 0 5 ) ,与RV/TLC %呈正相关 (r =0 375 ,P <0 0 5 ;r =0 4 4 ,P <0 0 5 ;r =0 5 2 9,P <0 0 5 )。结论　MMP 9和MMP 9/TIMP 1比例失衡在COPD的发病机制中起到了一定的作用 ,并与FEV1 0 %占正常预计值、RV/TLC %呈相关性。     

Clinical study of inflammatory factors in sputum induced early after lung volume reduction surgery

Background The aim of this study was to prospectively study the changes in neutrophil elastase （NE）, fibroblast growth factor 9 （Fgf9）, matrix metalloproteinase-9 （MMP-9）, tissue inhibitor of metalloproteinase 1 （TIMP-1） in sputum induced during the early period after lung volume reduction surgery （LVRS）. Methods From April to October 2005, ten consecutive patients with chronic obstructive pulmonary disease （COPD） underwent LVRS. Ten non-small cell lung cancer patients （stage II-Illa） received Iobectomy as a control group. The induced sputum was collected from both groups at six different times （two weeks before operation and postoperatively at 1, 2, 4, 6 and 10 days）. The level of NE, Fgf9, MMP-9 and TIMP-1 were measured using enzyme-linked immunosorbent assay. Results The pulmonary function （FEV~%） and arterial blood gases （PaO2 and PaCO2） were significantly different belween the groups. There were no significant differences in age, ejection fraction （EF）, and operation duration, but hemoglobin in the LVRS group was statistically higher than in the controls. At certain times, there were significant differences in NE, MMP-9, TIMP-1 and MMP-9/TIMP-1 （P 〈0.05） but not in Fgf9 between the two groups. The levels of NE and TIMP-1 were maximal at 2 days postoperatively and that of MMP-9 and MMP-9/TIMP-1 at 4 days postoperatively in the LVRS group. In the control group, maximal levels of NE and TIMP-1 occurred at 2 days postoperatively and that of MMP-9 and MMP-9/TIMP-1 at 1 day postoperatively. Ten days after surgery, all values of the control group were not significantly different from the baseline. In the LVRS group, the levels were significantly different from the pre-operative values （P 〈0.05） apart from TIMP-1. Conclusion The levels of NE, MMP-9, TIMP-1 and MMP-9/TIMP-1 of the LVRS group were different from those of the control group. The time course of these chanties may be related to LVRS and the underlying process of COPD.     

MMP-9／TIMP-1与COPD肺气肿关系研究进展

慢性阻塞性肺疾病（chronicobstructivepulmonarydisease,COPD）是一种以进行性气流阻塞为特征的慢性呼吸道炎症性疾病,目前发病机制尚未明确。多数研究表明蛋白酶／抗蛋白酶机制是COPD的主要发病机制之一。其中基质金属蛋白酶9（MMP-9）／基质金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP-1）失衡对其发病尤为重要,且两者均参与肺气肿的形成。该文就近年MMP-9／TIMP-1与COPD肺气肿相关性的研究进展作一综述。