白细胞介素18上调大肠癌细胞Fas配体表达

我们曾用 Western印迹法检测发现 TNF- α和 IFN- γ可上调人大肠癌细胞株 Fas配体 (Fas L)的表达 [1 ]。为探讨新型细胞因子 IL- 18对大肠癌细胞 Fas L 表达水平的调控作用 ,本研究用 Western印迹法测定 IL - 18处理后大肠癌细胞的Fas L表达水平。1　材料和方法1.1　细胞和试剂　人大肠癌细胞株 RPMI 4 788、HCT- 116、DL D- 1、L o Vo、Wi Dr和 SW6 2 0均为日本冈山大学田中教授惠赠 ,人外周血单核细胞 (PBMC)以 Ficoll液分离。乙酸肉豆蔻佛波醇 (PMA)和离子霉素 (ionomycin)购自 Sigma公司。IL- 18为日本林原生化研究…     

脂多糖对人肺微血管内皮细胞骨架及TNF-α和IFN-γ表达的影响

目的 探讨脂多糖 (LPS) 直接诱导人肺微血管内皮细胞 (HPMVEC)后细胞骨架的改变,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)mRNA的表达及细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平的改变.方法 HPMVEC生长至80 %以上融合时,加入LPS 以 500 ng/mL浓度刺激细胞分别至 0、4、6、8 h,经鬼笔环肽染色后采用激光共聚焦显微镜观察HPMVEC细胞骨架的变化.至预定时相点离心收集培养液上清液,利用实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γ mRNA的表达,采用 ELISA方法测定细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平,并进行统计学分析.结果 LPS 刺激培养后,8 h组细胞开始出现细胞骨架改变;4 h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达与0 h组差异无统计学意义(P>0.05),6 h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达高于0 h组(P<0.05),8 h组TNF-α、IFN-γ表达高于0 h组(P<0.05);4 h 组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平与0 h组比较差异无统计学意义(P>0.05),6 h 组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05),8 h组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05).结论 细菌致病因子LPS能直接刺激HPMVEC使细胞结构发生改变,同时影响细胞因子的分泌,使促炎因子TNF-α和IFN-γ分泌升高,参与肺损伤.这可能是LPS发挥其毒性作用诱发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的一个重要途径.     

细胞因子对K562细胞HSP gp96基因及蛋白表达的影响

目的研究细胞因子与K562细胞共孵育时不同浓度与不同时间条件对gp96基因及蛋白的影响。方法分别将浓度为0kU/L、200kU/L、400kU/L、600kU/L、800kU/L、1000kU/L的IFN-α及0μg/L、2μg/L、4μg/L、6μg/L、8μg/L、10μg/L的IFN-γ与K562细胞共孵育12h,用Western blot及RT-PCR法分析其中的gp96 mRNA和蛋白。分别将浓度为600kU/L的IFN-α和6μg/L的IFN-γ与K562细胞共孵育0、3、6、9、12、18、24、36h检测gp96 mRNA含量。结果1)不同浓度IFN-α和IFN-γ分别与K562细胞共孵育12h后,hsp gp96基因及其蛋白的表达出现相似的改变,即随着浓度的增加表达量逐步增加,当浓度达IFN-α600kU/L、IFN-γ6μg/L后,表达量逐步下降。2)IFN-α 600k U/L、IFN-γ6μg/L分别与K562细胞共孵育,细胞中hsp gp96 mRNA表达量均先增加后逐步下降,在9h达高峰。结论IFN-α、IFN-γ与K562细胞共同孵育,能通过上调细胞中hsp gp96 mRNA增加HSP GP96蛋白。     

脂多糖对人肺微血管内皮细胞细胞骨架及TNF-α, IFN-γ表达的影响

摘 要 目地 探讨脂多糖 (lipopolysaccharide LPS) 直接诱导人肺微血管内皮细胞 (HPMVEC)后,细胞骨架的改变,肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）mRN的表达及细胞培养上清中TNF-α、IFN-γ的表达水平的改变。方法 HPMVEC生长至80 %以上融合时,加入LPS 以 500 ng/ml浓度刺激细胞分别至 0、4、6、8 h,经鬼笔环肽染色后采用激光共聚焦观察HPMVEC细胞骨架的变化。至预定时相点离心收集培养液上清,利用实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γ mRNA的表达,采用 ELISA方法测定细胞培养上清中TNF-α、IFN-γ的表达水平,并进行统计学分析。结果 发现LPS 刺激培养后,8h组细胞开始出现细胞骨架改变;4h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达与0h组无差异（P>0.05）,6h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达则高于0h组（P<0.05）,8h组TNF-α、IFN-γ表达高于0h组（P<0.05）;4h 组细胞培养上清TNF-α、IFN-γ的表达水平与0h组比较无差异（P>0.05）,6h 组细胞培养上清TNF-α、IFN-γ的表达水平与0h组比较升高（P<0.05）,8h组细胞培养上清TNF-α、IFN-γ的表达水平与0h组比较升高（P<0.05）。结论 表明细菌致病因子LPS能直接刺激HPMVEC使细胞结构发生改变,同时影响细胞因子( cytokine, CK)的分泌,使促炎因子TNF-α、IFN-γ分泌升高,参与肺损伤。这可能是LPS发挥其毒性作用诱发ALI/ARDS的一个重要途径。     

维生素E琥珀酸酯对人大肠癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用

目的:检测维生素E琥珀酸酯(VES)对人大肠癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用并分析此种作用的可能机制.方法:VES分别以5、10和20 mg/L浓度作用于人大肠癌细胞株LS174T,12、24以及48 h后应用MTT法检测VES对大肠癌细胞的生长抑制作用.应用流式细胞仪分析不同浓度VES处理48 h后大肠癌细胞的细胞周期并计算凋亡率;以Western蛋白印迹法和流式细胞术检测VES处理后肿瘤细胞Fas蛋白水平和细胞表面Fas表达的变化.结果:VES能够显著抑制人大肠癌细胞的增殖并表现为剂量和时间依赖关系.以5、10和20 mg/L VES作用48 h后,肿瘤细胞的凋亡率由0.9%分别升高至15.9%、46.7%和64.5%.Fas中和性抗体能够明显阻断VES介导的凋亡.VES处理后,细胞Fas蛋白水平升高.流式细胞仪检测细胞表面Fas平均荧光强度由5.43升高至9.88、13.21和18.0.结论:VES能够诱导人大肠癌细胞的生长抑制和凋亡.调控凋亡诱导分子Fas的表达是主要机制之一.其作用主要与肿瘤细胞表面Fas分子表达的上调有关.     

CD_3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用机制的研究

目的 :探讨 CD3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用的机制。方法 :将卵巢癌细胞株 (A2 780 )分成两组 ,实验组采用 CD3AK+ A2 780 ,对照组采用 L AK+ A2 780 ,分别共育 2 4h并于作用前和作用后每 4h收集一次上清液以检测 TNF- α和 IFN- γ分泌水平。结果 :实验组和对照组共育前、后上清液中均有 TNF- α和 IFN- γ分泌 ,但共育后 TNF- α和 IFN- γ分泌水平显著高于共育前 (P <0 .0 1) ,且同一效靶比的实验组 TNF- α和 IFN- γ分泌水平明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :CD3AK细胞可通过分泌细胞因子 TNF- α和 IFN- γ杀伤肿瘤细胞。     

PHA与PMA对外周血单个核细胞产生IL-4、IFN——γ水平的研究

目的 :比较 PHA(植物血凝素 )与 PMA(佛波醇乙酯 )对 PBMCs(外周血单个核细胞 )的刺激效果。方法 :选择健康人群 ,取外周静脉血 ,分离得到 PBMCs,分别加入 PHA+ ionomycin(离子霉素 )及 PMA+ ionomycin进行刺激并孵育 2 h、4h、6h、12 h、2 4h、48h,采用双抗体夹心 ABC-ELISA法 ,分别测定不同时相培养上清中 IL -4和 IFN-γ水平。结果 :刺激 2 h后 ,PHA组与 PMA组 IFN-γ和 IL -4水平无差别 ;刺激 4h后 ,PMA组 IFN-γ和 IL-4水平均高于 PHA组 (P<0 .0 1) ;刺激 6h后 ,PHA组 IFN-γ水平低于 PMA组 (P<0 .0 5 ) ,IL -4水平高于 PMA组 (P<0 .0 5 ) ;刺激 12 h后 ,PHA组 IFN-γ与 PMA组接近 ,两组 IL -4水平亦无差别 ;刺激 2 4h和 48h后 ,PHA组 IFN-γ和 IL-4水平均高于 PMA组 (P<0 .0 5 )。结论 :PHA和 PMA对 PBMCs不同时间的刺激效果不同。     

小檗碱减轻炎症反应时肠上皮屏障功能损害的实验研究

目的 研究小檗碱(berberine,BBR)在炎症反应时对肠上皮屏障功能的保护作用.方法 建立人肠上皮细胞株Caco-2单层培养模型,将单层细胞分为对照组、BBR组、TNF-α+ IFN-γ组、TNF-α+ IFN-γ+ BBR组.用电阻仪测定跨单层肠上皮细胞电阻(TER),测定时相点为处理后0、6、12、24、36 h和48 h;免疫荧光法和蛋白质印迹法检测紧密连接蛋白Occludin的分布及表达变化;蛋白质印迹法检测肌球蛋白轻链(MLC)和磷酸化肌球蛋白轻链(pMLC)的蛋白表达.结果 对照组与BBR组TER均无明显变化;TNF-α+ IFN-γ组TER逐渐下降,并于12、24、36 h及48 h显著低于0 h(P＜0.05);TNF-α+ IFN-γ+ BBR组也呈逐渐下降趋势,但降幅小于TNF-α+ IFN-γ组,并于12、24、36h及48h显著高于TNF-α+IFN-γ组(P＜0.05).各组紧密连接蛋白Occludin表达无明显变化(P＞0.05);但TNF-α+ IFN-γ组Occludin形态有明显变化,并发生重分布,而TNF-α+ IFN-γ+ BBR组Occludin形态变化则较TNF-α+ IFN-γ组明显减轻.TNF-α+ IFN-γ组pMLC表达显著高于对照组或BBR组(P＜0.05),而TNF-α+IFN-γ+ BBR组pMLC表达则明显低于TNF-α+ IFN-γ组(P＜0.05).结论 小檗碱通过降低MLC磷酸化水平,改善紧密连接蛋白定位分布变化,从而减轻炎症反应时肠上皮屏障功能损害.     

氯胺酮对离体人辅助T细胞分化的影响

目的:探讨氯胺酮对离体人辅助性T(Th)细胞分化和细胞内转录因子T-bet及GATA3活性的影响?方法:10例男性健康志愿者(20~45岁,BMI 15~25 kg/m2),分别采集空腹时外周静脉血20 ml,分离外周血单核细胞(PBMCs)?每份血样的PBMCs均随机加入佛波醇-十四酸酯-乙酸酯(PMA)25 ng/ml和离子霉素1 ?滋g/ml以及各种浓度(0?50?100?200 ?滋mol/L)的氯胺酮孵育4 h?然后测量Th细胞亚群百分数?上清液中的干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)的水平以及细胞内转录因子T-bet和GATA3的DNA结合活性?结果:在PMA和离子霉素刺激下Th1和Th2细胞计数?IFN-γ和IL-4水平均显著增加;在PMA和离子霉素刺激下,氯胺酮剂量依赖性降低Th1和Th2细胞计数?IFN-γ和IL-4水平,而增加Th1?Th2细胞计数的比值(Th1/Th2)和IFN-γ?IL-4的比值(IFN-γ/IL-4);同样经刺激后,细胞内T-bet和GATA3的活性显著增加;氯胺酮剂量依赖性降低T-bet和GATA3的活性,而增加T-bet与GATA3活性的比值(T-bet/GATA3)?结论:在PMA和离子霉素的刺激下,氯胺酮能够抑制Th细胞的分化,从而抑制各细胞因子的分泌,但Th1/Th2增加;氯胺酮增加Th1/Th2可能与调节增加T-bet/GATA3有关?     

MML-1细胞G《,1》期阻断对Fas诱导细胞凋亡的抑制作用

目的 分析Fas诱导的B淋巴瘤细胞株MML-1凋亡过程中,PMA阻断MML-1进入细胞周期后细胞凋亡敏感性降低的原因.方法 采用10 nmol/L PMA预处理MML-1细胞24 h,用流式细胞仪检测PMA阻断细胞周期前后50 ng/mL抗Fas抗体诱导的MML-1细胞凋亡率的变化.采用PI-Triton X和active caspase-3/8双染色、Western blotting技术分析PMA处理前后,经抗Fas抗体诱导的MML-1细胞内活化caspase-3/8的表达.通过Western blotting技术检测G1期细胞的凋亡相关蛋白caspase-3/8、Bcl-2、FLIP和Akt的表达.结果 PMA预处理MML-1细胞24 h后,G1期细胞比例显著升高,达93.77%.PMA预处理前,抗Fas抗体诱导6 h后的MML-1细胞凋亡率为56%;经PMA预处理,抗Fas抗体诱导6 h后的MML-1细胞凋亡率为14%.流式细胞术和Western blotting检测发现经PMA预处理,抗Fas抗体诱导后活化caspase-3和caspase-8蛋白的表达受到显著抑制.Westernblotting检测显示G1期细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达上调.结论 将MML-1细胞阻断在G1期能够抑制Fas诱导的细胞凋亡,可能与凋亡抑制分子Bcl-2在G1期的表达上调有关.     

中晚期肺癌患者外周血CD4+细胞因子水平的观察

目的 观察中晚期肺癌患者CD4^＋细胞Th1、Th2因子的表达，探讨其在肺癌发病及分型中的意义。方法采取肺癌患者和健康体检者静脉血标本，用Th1、Th2细胞因子标记流式细胞技术检测IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10，比较肺癌患者相对于健康体检者外周血CD4^＋细胞分泌细胞因子水平的变化。结果 中晚期肺癌患者外周血CD4^＋细胞表达IFN-γ、TNF-α、IL-2水平均低于正常人（P〈0．01）；IL-4、IL-6、IL-10水平均高于正常人（P〈0．01）；中晚期小细胞癌、鳞癌、腺癌患者外周血CD4^＋细胞表达IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10各组间无差异（P〉0．05）；中晚期肺癌患者外周血Th1／Th2（yγ／4）低于正常人（P〈0．01）。结论 肺癌患者体内以Th2型细胞占优势状态，不同病理类型的肺癌Th1、Th2细胞因子间无显著性差异，血清与Th1细胞表达的TNF-α的比值可能对判断预后有一定意义。     

妊娠合并肺结核患者Th细胞因子mRNA表达分析

目的:观察妊娠合并肺结核妇女Th细胞因子mRNA的表达状况。方法:选取收治的25例正常妊娠妇女和25例妊娠合并肺结核患者作为研究对象,分别将两组研究对象设为对照组和研究组,检测两组研究对象妊娠中期IFN-γ、IL-4、IL-2、TNF-α、IL-10等细胞因子mRNA表达水平以及研究组中合并轻度、中度肺结核患者的IFN-γ、IL-4、IL-2、TNF-α、IL-10等细胞因子mRNA表达水平。结果:研究组妊娠中期IFN-γ、IL-4、IL-2、TNF-α、IL-10等细胞因子mRNA高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。研究组中合并中度肺结核患者的IFN-γ、IL-4、IL-2、TNF-α、IL-10等细胞因子mRNA表达水平均高于合并轻度肺结核患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:妊娠合并肺结核妇女Th细胞因子mRNA的表达可见明显异常,尤其是Th2型细胞因子mRNA,提示临床可根据该指标检测结果对妊娠合并肺结核妇女的妊娠结局进行评估。     

葡萄糖、促炎症因子和生长因子影响胰岛自身抗原的表达

目的:探讨葡萄糖、细胞因子TNF-α,IFN-γ和生长因子IGF-1,EGF,FGF对胰岛细胞自身抗原IA-2表达水平及胰岛功能的影响。方法:以不同浓度的葡萄糖(3,7,11和30mmol/L)、IFN-γ(10ng/ml)、TNF-α(100ng/ml)及IGF-1,EFG,FGF-10(10ng/ml),分别刺激胰岛细胞系RIN5F24h和48h,用RT-PCR方法检测各组RIN5F细胞中IA-2的mRNA表达水平,用放射免疫法检测上清中胰岛素的浓度,3-(4,5-二甲基)-5-(3-羧甲基苯环)-2-(4-硫基苯)-2H-四唑盐复合物(MTS)法检测细胞生长速率。结果:RT-PCR结果显示以不同浓度葡萄糖(3,7,11和30mmol/L)分别刺激RIN5F细胞系后,IA-2mRNA水平呈浓度依赖性和时间依赖性增加;TNF-α、IFN-γ可抑制IA-2mRNA的水平(P<0.05),IGF-1、FGF使IA2的表达增加(P<0.05)。TNF-α或IFN-γ刺激RIN5F细胞系后,上清中胰岛素水平均较基础值降低,并且作用48h后差异有显著性(P<0.05)。IGF-1,bFGF作用于RIN5F细胞系48h,上清中胰岛素较基础值显著增加(P<0.05)。MTS结果显示IGF-1使胰岛细胞增殖速率显著增加(P<0.01)。结论:葡萄糖、TNF-α、IFN-γ和一些生长因子可改变胰岛自身抗原的表达,参与1型糖尿病的发病。     

干扰素-α在肝癌细胞对5'-脱氧-5-氟尿苷敏感性及其胸苷磷酸化酶表达的作用

目的探讨肝癌细胞SMMC-7721在干扰素-α（IFN-α）的作用下,对氟尿嘧啶类化疗药物敏感性的变化,及其与胸苷磷酸化酶（TP）表达水平的关系。方法：利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测SMMC-7721细胞TPmRNA表达水平,利用MTF法检测肝癌细胞对氟尿嘧啶类化疗药物的敏感性。结果：IFN-α上调TP mRNA表达具有时间一剂量依赖性。10000U／ml的IFN-α处理SMMC-7721细胞8h后TP mRNA表达水平开始升高,至12h达到峰值,此后维持较高水平至72h。5000U／ml与10000U／ml IFN-α处理肝癌细胞24h,TP mRNA表达水平显著升高,与未用IFN-α处理组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。IFN-α能明显提高SMMC-7721细胞对5′-脱氧-5-氟尿苷（5＇-dFUrd）的敏感性,在10000U／ml IFN-α作用下,5’-dFUrd的IX50由（102．1±18．4）μmol／L降低至（34．2±4．1）μmol／L（P〈0．05）。而IFN-α对5-氟尿嘧啶（5-FU）的敏感性影响不大,IC50与对照组（6．3±1．4）μmol／L相比,10000U／ml IFN-α作用时为（5．8±2．0）μmol／L。细胞对5′-dFurd敏感性的增加与IFN-α上调TPmRNA正相关,相关系数为0．6（Pearson检验P=0．008）。结论：IFN-α显著增强肝癌细胞SMMC-7721对5一Fu前体药物5′-dFUrd的敏感性,与其上调肝癌细胞TP mRNA表达水平正相关;IFN-α上调SMMC-7721细胞TP mRNA表达水平具有时间,剂量依赖性。     

旋毛虫重组抗原P53对小鼠骨髓源树突状细胞表达吲哚胺2,3-双加氧酶的影响

目的 研究旋毛虫重组抗原P53对小鼠骨髓来源的树突状细胞（DC2.4）吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）的表达及炎性因子分泌情况的影响。方法 设立实验组（旋毛虫重组抗原P53,终浓度为20μg/mL）、阳性对照组（IFN-γ,来源于提高树突状细胞IDO表达的小鼠,浓度为1 000 U/mL）和阴性对照组（PBS）,分别刺激细胞0、3、6、12、24 h后收集样品,利用qPCR技术对细胞内IDO、IL-10、IL-6、TNF-α的mRNA的转录水平进行检测;利用Western-blot方法检测各组IDO蛋白表达水平。进一步利用间接免疫荧光技术对细胞内的IDO进行检测。结果 qPCR结果表明,旋毛虫P53蛋白能引起胞内IDO、IL-10、IL-6及TNF-α的mRNA的转录水平增加,且呈现出时间依赖性。在24 h时,相比于阴性对照组,P53蛋白刺激组IDO及IL-6转录水平上调了5倍左右,抑炎因子IL-10 mRNA转录水平更是上调了9倍左右,TNF-α mRNA转录水平上调了7倍左右;Western-blot结果显示,旋毛虫P53蛋白刺激组和IFN-γ阳性对照组的细胞内IDO的蛋白表达水平...     

大肠癌细胞表达的Fas配体具有功能性

目的：探讨大肠癌细胞Fas配体（FasL）mRNA和蛋白的表达及其功能。方法：分别采用RT-PCR和Western印迹法以及氚释放细胞活性测定技术检测大肠癌细胞株中FasL mRNA和蛋白的表达及其功能。结果：所检测的6株大肠癌细胞（RPMI4788、HCT-116、DLD-1、LoVo、WiDr和COLO 320DM）全部表达FasL mRNA和蛋白;DLD-1,LoVo和WiDr等部分大肠癌细胞具有Fas依赖的细胞毒活性。其中DLD-1细胞活性具有量效关系,并且乙酸肉豆蔻佛波醇（PMA）和离子霉素（ionomycine）刺激能显增强DLD-1的细胞活性。结论：DLD-1、LoVo和WiDr等3株大肠癌细胞表达功能性Fas配体,并可能以此反击机体免疫系统,逃避免疫监督。     

灵芝多糖拮抗前列腺素E2对小鼠脾细胞IFN-γ和TNF-αmRNA表达的抑制作用

目的 观察灵芝多糖拮抗前列腺索E2（PGE2）对小鼠睥细胞干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）mRNA表达的抑制作用。方法 混合淋巴细胞培养反应作为实验模型,半定量RT-PCR方法检测IFN-γ和TNF-α mRNA的表达水平。结果 PGE2连续作用4h后,脾细胞IFN-γ mRNA的表达与对照组比较受到不同程度的抑制,当PGE2浓度在10μmol／L以上时具有统计学意义（P〈0．01）。固定PGE2浓度为20μmol／L,合用不同浓度的灵芝多糖,当灵芝多糖为100mg／L以上时可部分对抗PGE2的抑制作用。培养8h后,PGE2明显抑制TNF-α mRNA的表达,灵芝多糖为100mg／L以上时可部分对抗。结论 灵芝多糖可部分拮抗PGE2对小鼠脾细胞IFN-γ和TNF-α mRNA表达的抑制作用。     

炎症细胞因子诱导Tca8113细胞表达PD-L1的作用研究

目的 通过研究炎症细胞因子对人舌鳞状细胞癌细胞Tca8113中程序性死亡因子配体-1(programmed death 1 ligand-1,PD-L1)的表达的影响,探讨肿瘤炎性微环境在肿瘤细胞免疫逃逸中的作用和机制。 方法 用流式细胞分析术(FCM)检测Tca8113在各种炎症细胞因子[白介素(IL)-1β、IL-2、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)以及其他诱导条件[牙龈卟啉单胞菌代谢产物(Pg-sup)及活化外周血单个核细胞的代谢产物(PHA-sup)]处理下PD-L1的表达变化。 结果 PHA-sup、Pg-sup液,IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ等炎症相关细胞因子均能诱导Tca8113中PD-L1的表达,与未做处理的Tca8113(对照组)比较差异有统计学意义(P<0.05), 但IL-2诱导后PD-L1的表达与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。与单个炎症细胞因子诱导比较,炎症细胞因子组合诱导的PD-L1表达均有增高(P<0.05),炎症细胞因子在诱导PD-L1表达中相互之间存在协同效应,其中,IL-1β+IFN-γ、TNF-α+IFN-γ以及L-1β+IL-6+IFN-γ+TNF-α这3组的表达量高于其他各组(P<0.05)。 结论 肿瘤微环境炎症细胞因子促进肿瘤细胞表达PD-L1,在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。     

IFN-γ上调桥本甲状腺炎Fas表达介导甲状腺破坏

目的 探讨干扰素-γ(IFN-γ)对桥本甲状腺炎(HT)Fas表达的影响及可能致病因素.方法 ① 采用免疫组织化学方法检测HT和正常甲状腺组织中IFN-γ及Fas的表达和分布;② 不同浓度、不同时间IFN-γ刺激大鼠甲状腺细胞系(FRTL-5细胞),采用实时荧光定量PCR、流式细胞术方法分别检测FRTL-5细胞Fas mRNA和蛋白的表达.结果 ① HT组织中甲状腺滤泡细胞Fas蛋白、淋巴细胞IFN-γ蛋白的表达显著高于正常甲状腺组织,且Fas阳性甲状腺滤泡细胞常见于淋巴细胞浸润区;② IFN-γ与FRTL-5细胞Fas mRNA表达水平存在时间-剂量依赖关系,差异有统计学意义(P<0.05);③ 流式细胞术测定经IFN-γ作用的FRTL-5细胞表面Fas表达水平显著高于未经IFN-γ刺激的FRTL-5细胞.结论 IFN-γ通过上调Fas的表达介导甲状腺滤泡细胞凋亡.     

TLR7刺激对系统性红斑狼疮易感型小鼠树突状细胞免疫功能的影响

目的 研究TLR7通路对于系统性红斑狼疮易感Fas - -M RLIpr/Ipr小鼠树突状细胞免疫功能的影响.方法 从5周龄MRLIpr/Ipr小鼠骨髓提取DC体外培养,以TLR7激活剂咪喹莫特处理48h,流式细胞仪检测细胞表面分子CD80、MHCⅡ表达.ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-10.结果 咪喹莫特处理后,树突状细胞表面抗原提呈相关分子MHCⅡ和CD80分子均降低,分泌的IFN-γ、TNF-α和IL-10均明显增加.结论TLR7通路调节系统性红斑狼疮易感小鼠MRLIpr/Ipr小鼠DC抗原呈递能力,具有影响免疫应答作用.