重视HBsAg和HBsAb同时阳性标本的复查分析工作

HBsAg常作为HBV感染的首要指标,而HBsAb常被视为机体对HBV感染具有保护力的指标,HBV血清学模式包括7种常见模式,16种少见模式,9种罕见模式,在少见模式中HBsAg和HBsAb同时阳性又是比较多见的,而且这样的结果使医生对HBV血清学标志物临床报告的分析和解释越来越难,可能导致诊断、治疗的错误,甚至会产生医疗纠纷。为此,我们收集HBsAg和HBsAb同时阳性的标本45例,重新复查检测,并作HBVDNA定量检测,进行分析报告如下:1材料和方法1.1标本来源收集本院门诊和住院患者病人标本2005年5月~2006年8月检测2839例标本中HBsAg和HBsAb同时阳性的标本45例,分离血清-20℃冻存。1.2试剂1.2.1酶联免疫试剂:乙肝五项酶联免疫检测试剂盒采用厦门英科新创科技有限公司生产的,HBsAg和HBsAb酶联免疫检测试剂盒复检采用潍坊三维生物工程集团有限公司和上海实业科华生物技术有限公司的试剂进行复检。1.2.2电化学发光免疫试剂:瑞士罗氏公司的2010电化学发光免疫分析仪和配套的HBsAg和HBsAb定量试剂盒。1.2.3 HBVDNA荧光定量试剂:采用深圳匹基生物技术有限公司生产的H...     

国产化学发光免疫试剂检测血清HBsAg的应用评价

目的考核国产化学发光免疫分析试剂检测血清HBsAg的效果,探讨其在血液筛查和临床检测应用中的可行性。方法采用国产化学发光免疫分析试剂筛查345份HBsAg确认阳性的血清标本,比较其与常用的进口和国产酶联免疫检测试剂盒的漏检率;并采用不同浓度的标准HBsAg血清对国产化学发光免疫分析试剂进行线性分析和精密性试验。结果国产化学发光免疫分析检测试剂的漏检率高于Murex和Organon酶联免疫试剂盒,差异有统计学意义（P〈0．01）,而与国产英科新创（厦门）科技公司和上海科华生物技术有限公司的HBsAg酶联免疫诊断试剂盒的差异无统计学意义;采用标准血清进行线性分析,标本浓度在（0．5～150）ng／ml范围时与化学发光单位量（RLUs）呈良好的线性正相关;分别对低、中、高浓度标准血清进行板内和板间的重复检测,其反应具有良好的重复稳定性。结论化学发光免疫分析法检测血清HBsAg具有快速、可定量、反应稳定的特点,可用于血液筛查和临床标本的检测。     

免疫筛查阴性献血者血样病毒核酸检测的研究

目的了解二次酶联免疫筛查献血者血样漏检的原因。方法将二次酶联免疫筛查阴性的献血者血样在加样仪上实现血液样本汇集,用全自动核酸提取仪提取样本核酸,以核酸扩增检测仪做HBV、HCV和HIV自动扩增检测。对HBsAg阴性、HBVDNA阳性献血者用核酸筛查试剂定量检测HBV,并每隔2周对其跟踪采血,做HBV两对半免疫检测和HBsAgV3的确认试验。结果16320份二次酶联免疫筛查阴性的合格献血者血样中,8份HBVDNA阳性(漏检率0.49‰),未发现HCV和HIV1RNA阳性。8份HBVDNA阳性献血者乙肝两对半免疫检测HBsAg、HBsAb和HBeAg均为阴性,HBcAb均为阳性,3份HBeAb为阳性。6例HBsAg阴性HBVDNA阳性献血者血样的病毒滴度在(76～1490)copies/ml,2例病毒滴度过低,未定量检测到病毒。跟踪6名HBVDNA阳性献血者,1例18周时HBsAg确认试验阳性,其余5例仍为阴性。结论现行的二次酶联免疫技术的血液筛查存在HBV漏检,原因可能是隐匿性乙型肝炎病毒感染。应重视血液筛查工作中HBV的漏检及输血传播,并在现有的血液筛查模式中或增加HBcAb检测,或增加病毒核酸筛查。     

乙型肝炎病毒表面抗原与表面抗体同时阳性的血清学模式初步研究

目的分析乙型肝炎病毒感染者乙型肝炎表面抗原与乙型肝炎表面抗体同时阳性的血清学模式与HBVDNA的关系,并探究其原因及临床意义。方法用酶联免疫分析法筛选出HBsAg和抗-HBs同时阳性的标本,用化学发光微粒子免疫分析法确认,用实时荧光定量聚合酶链反应检测其HBV DNA含量。结果在选取的HBsAg和抗-HBs双阳性的56人中,共出现4种HBV血清学模式:(1)HBsAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性模式占42.8%,HBV DNA阳性率41.6%;(2)HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc阳性模式占30.4%,HBV DNA阳性率70.5%;(3)HBsAg、抗-HBs、HBcAb阳性模式占25%,HBV DNA阳性率21.4%。(4)HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc阳性模式占1.8%,HBV DNA阳性率100%。56例样本中,有27例血清HBV DNA检测阳性,阳性率为48.2%。结论 HBsAg和抗-HBs双阳性伴HBeAg阳性者,血清中有较高水平的HBV DNA。HBsAg和抗-HBs双阳性并不代表疾病好转。     

HBsAg常规检测阴性结果分析

目的 了解日常工作中HBsAg漏检情况,为提高临床检验质量提供参考.方法 在日常工作中从临床检测备份管随机收集400份经国产A品牌全套试剂ELISA检测乙型肝炎病毒血清学指标(HBVM),其中HBsAg呈阴性结果的血清标本,按HBsAb检测结果分成HBsAb阴性和阳性两类各200例,双份分装-20℃冻存;增加B,C另外两种国产ELISA HBsAg试剂及美国超敏MONOLISA HBsAg ULTRA试剂,共四种试剂同时复检HBsAg,阳性标本行双份HBV DNA定量分析、结果取均值.结果 A,B,C三种国产试剂复检HBsAg结果一致阴性,美国超敏MONOLISA HBsAg ULTRA试剂从HBsAb阴性标本中检出5例HBsAg阳性,从HBsAb阳性标本中未检出HBsAg阳性结果.HBV DNA定量分析结果显示均小于500 copies/ml,其中400～500 copies/ml 1例, 100～200 copies/ml 2例,10～100 copies/ml 2例,未发现低于检测下限结果.结论 国产常规ELISA HBsAg试剂灵敏度普遍偏低、容易漏检;漏检标本多来自HBsAb阴性个体;漏检个体可能和隐匿性HBV感染相关,临床应重视长时间HBsAb阴性个体的HBVM定期复查工作.     

乙型肝炎病毒血清学标志物特殊模式样本HBV DNA定量分析

目的了解乙型肝炎病毒(HBV)感染的特殊血清学模式的传染性。方法日常用甲试剂检测获得HBV标志物特殊结果样本,经倍比稀释法或二步法确认HBV表面抗原(HBsAg)结果,用乙试剂与丙试剂重检,剔除试剂因素造成的假性结果样本;以荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测HBVDNA。结果70例3种试剂HBV标志物检测结果一致样本的特殊血清学模式分2类5种:A类结果为HBsAg与HBV表面抗体(HBsAb)双阳性,其HBVDNA的阳性率(>5×102拷贝/ml)为84.4%、载量为5.66±1.62;B类结果为HBsAg阴性而HBVe抗原(HBeAg)阳性,其HBVDNA的阳性率为72.0%、载量为4.41±1.12;50例HBsAg、HBeAg、HBV核心抗体(HBcAb)阳性样本HBVDNA的阳性率为100.0%、载量为7.21±0.43。结论临床工作中出现特殊HBV标志物结果,应考虑用其他试剂或二步法确认,同时建议医生追加HBVDNA检测,根据HBVDNA结果作出临床解释。     

核酸检测后血液检测模式的探讨

目的对采供血机构开展核酸检测后的血液检测模式的探讨。方法应用全自动核酸检测系统针对HIV、HCV和HBV的检测,ULTRIO反应性的标本再进行拆分鉴别试验。所有的标本同时应用2种酶联免疫试剂(进口与国产)进行针对3种病毒的检测,其中每个单位约检测10 000人份,所有酶联免疫与NAT结果不符的标本进行血清学的确证试验。结果 30 050份有效标本的检测中共有251份酶联免疫阳性,29 799份阴性,而酶联免疫阴性标本中共有21份NAT阳性,是为酶联免疫漏检(漏检率0.07%,1/1 428);酶联免疫阳性中共有46份经补充血清学试验确认为血清学真阳性(全部为HBV),且NAT无反应性,是为NAT漏检(漏检率0.15%,1/663)。在抗-HIV和抗-HCV的检测上,进口与国产试剂对真阳性标本的检测能力无明显区别。而在HBsAg的检测上,进口试剂明显优于国产试剂。结论单独应用NAT或酶联免疫进行血液筛检,都会造成阳性血的漏检,如果只选一种酶联免疫试剂检测的话,抗-HIV和抗-HCV的检测可选择国产试剂,而HBsAg的检测上则以进口试剂为佳.     

155例乙型肝炎血清学标志物少见模式的分析

目的对155例乙型肝炎血清学标志物(HBV-M)少见模式进行分析,探究可能原因。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者HBV-M,同时参考聚合酶链反应(PCR)HBV DNA检测的结果进行综合分析。结果发现155例少见HBV-M结果模式,主要表现为三组:HBsAg与抗-HBs同时阳性的HBV感染;抗-HBc阴性的HBV感染;HBsAg阴性的HBV感染。结论机体免疫反应的不同、ELISA检测方法本身的局限性、病毒变异都可能导致HBV-M检测结果出现少见模式,建议使用更为灵敏的化学发光法定量检测。     

HBsAg阴性献血者隐匿性HBV感染的血清学特征及其与病毒载量的关系

目的了解苏州地区HBsAg阴性合格献血者隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)感染的血清学标志物的状况及其与病毒载量水平的相关性,为采供血机构制定血液安全保障措施提供参考依据。方法使用两种ELISA试剂对献血者血液进行HBsAg筛查,阴性标本应用核酸检测技术进行HBV DNA检测,收集HBsAg阴性HBV DNA阳性献血者标本进行乙肝血清标志物检测及HBV DNA实时荧光PCR定量分析。结果两种ELISA检测均为HBsAg阴性的标本有29 890份,其中31份为HBV DNA阳性。31份HBsAg阴性的HBV DNA阳性标本经化学发光检测,发现其中3份为HBsAg假阴性标本,另28份为HBsAg阴性HBV DNA阳性。28份标本中有2份(7.1%)为疑似"窗口期"感染,26份(92.9%)为疑似"隐匿性"感染,经核酸检测后HBV残余风险可降低9.37/万。26份隐匿性感染标本中乙肝血清学以HBsAb、HBcAb共阳性及单独HBcAb阳性两种模式为主;HBsAb阴性组的HBV DNA载量水平显著高于HBsAb阳性组(P0.05)。结论 ELISA法检测HBsAg阴性的献血者经输血传播HBV的残余风险依然存在,感染状况多以隐匿性感染为主。核酸检测的应用能提高血液的安全性。HBsAg阴性合格献血者隐匿性HBV感染呈现特定的血清学模式,其中HBsAb阴性人群可能存在较高的输血传播HBV的风险。     

981例乙型肝炎表面抗原及表面抗体同时阳性的实验分析

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)感染后血清标志物检测中血清HBV表面抗原(HBsAg)与HBV表面抗体(HBsAb)同时阳性的特殊模式。方法采用微粒子酶免疫分析(MEIA)对标本中的HBV血清标志物进行检测,从中选取HBsAg与HBsAb同时阳性的标本,并分析其不同阳性模式及不同定量模式。结果 24 737例HBsAg阳性者共检出HBsAg和HBsAb同时阳性981例性,占HBsAg阳性总人数的3.97%,以"12345"和"1245"阳性模式为主,分别占44.65%和40.57%。HBsAg和HBsAb同时阳性以低浓度HBsAb 10.00~100.00mIU/mL为主,占,79.92%。结论引起HBsAg和HBsAb同时阳性的原因有多种,模式多样,但以"12345"和"1245"阳性模式为主,且HBsAg和HBsAb同时阳性以HBsAb低浓度为主,不具有保护肝细胞免受HBV颗粒侵入的作用。     

乙肝患者血清标志物不常见模式与前S1抗原、HBV-DNA的对比分析

乙型肝炎病毒（HBV）目前最常用检测方法是用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者乙肝血清标志物（HBV-M）,在实际检测中常遇到一些不常见的模式,如：HBsAg阳性,HBsAg与HBeAg阳性,HBsAg、HBsAb、HBeAb和HBcAb阳性等。研究表明HBV感染是存在许多少见的特殊的血清学模式［1］。本文通过对110例少见的特殊的血清学模式患者样本进行前S1抗原（Pre-S1）和乙型肝炎DNA病毒（HBV-DNA）测定,旨在探讨HBV-M标志物的不常见模式。     

低水平HBsAg血清学模式及其临床价值

目的 探讨低水平乙型肝炎表面抗原(HBsAg)血清学模式及其临床价值.方法 收集HBsAg≥0.05 IU/mL的阳性标本9972例,采用化学发光法定量检测乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物.以HBsAg<100.00 IU/mL判定为低水平.初检HBsAg<0.50 IU/mL时,对标本进行高速离心后复检,以复检结果为...     

HBcAb单项或HBcAb与HBeAb二项阳性时HBsAg定量检测分析

目的用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒(HBV)标志物,若乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)单项或HBcAb与乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)二项阳性,再进行乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)定量和HBV载量测定,了解HBV携带及病毒复制情况。方法 ELISA检测HBV标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,选取1 098例HBcAb阳性、966例HBeAb和HBcAb二项阳性样本及832例HBV标志物全阴性标本为对照,用化学发光法定量复检HBsAg,并用PCR的方法检测HBV载量。结果 1 098例HBcAb单项阳性检测出HBsAg定量436例(39.7%)、PCR-DNA230例(20.9%);966例HBeAb、HBcAb二项阳性的标本分别定量检测出HBsAg定量387例(40.1%)、PCR-DNA 212例(21.9%),HBV标志物全阴性的HBsAg定量和PCR-DNA比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ELISA法检测HBV标志物时,若只HBcAb阳性或HBcAb与HBeAb二项阳性,仍可检出表面抗原和病毒的复制,需做进一步的检测,以免漏检,造成医疗风险。     

乙型肝炎血清标志物HBsAg和HBsAb同时阳性模式的相关研究

目的分析乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎表面抗体（HBsAb）同时阳性患者的病毒复制、肝功能状况及临床特点,探讨此类模式的产生原因及其临床意义。方法应用微粒子酶免疫荧光分析法检测标本的HBV血清标志物,从中筛选出HBsAg和HBsAb同时阳性的标本,检测此类标本HBVDNA定量值和肝功能结果,并结合患者的临床特征进行综合分析。结果检测17759例患者的HBV血清标志物,HBsAg阳性2060例,阳性率为11．6％;HBsAg和HBsAb同时阳性者占4．08％（84／2060）。将84例HBsAg和HBsAb同时阳性的患者根据其HBV血清指标的组合模式不同分成6种类型,以HBsAg、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、乙型肝炎核心抗体（HBcAb）阳性模式和HBsAg、乙型肝炎e抗体（HBeAb）、HBcAb阳性模式最多见;84例HBsAg和HBsAb同时阳性的患者中,HBVDNA〉l×10^3 IU／mL者占85．7％;肝功能指标的异常率为68．4％;临床分类：慢性乙型肝炎占53％,肝硬化占20％,肝癌占13％。结论乙型肝炎患者出现HBsAg和HBsAb同时阳性并不代表乙型肝炎恢复,相反此类患者往往持续存在HBV的复制和突变,更容易造成肝功能的慢性损伤,预后较差,应当引起实验室和临床的高度重视。     

杭州地区体检人群乙型肝炎病毒标志物阴性结果分析

目的分析2014年杭州地区体检人群乙型肝炎病毒血清学五项标志物(HBV-M)全阴模式的分布特征,为预防和控制HBV-M阴性人群感染乙型肝炎病毒(HBV)提供对策。方法采用ELISA对体检人群的血液标本进行HBV-M(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb)检测。对保存的300例HBV-M阴性标本,分别使用化学发光免疫分析法检测HBsAg、HBsAb和PROCLEIX ULTRIOAssay检测HBV-DNA,对HBV-DNA反应性标本进行病毒载量测定。结果在检测的9 143例体检者的标本中,2 213例标本为HBV-M阴性,阴性率为24.20%;男女HBV-M阴性率比值为1∶1.21。使用化学发光免疫分析法和PROCLEIX ULTRIOAssay分别检测出1例低浓度的HBsAg标本(HBsAb及HBV DNA均无反应性),4例低浓度的HBsAb标本(HBsAg及HBV DNA均无反应性),2例HBV-DNA反应性标本(HBV-M阴性)。其中1例HBV-DNA反应性标本定量检测为560IU/mL。结论杭州地区ELISA HBV-M阴性的体检人群中,少数人可检出低浓度的HBsAg或HBsAb或HBV DNA。针对ELISA HBV-M阴性人群,建议接种乙肝疫苗前进行HBV-M和HBV-DNA定量检测,以确定是否需要接种乙肝疫苗及接种乙肝疫苗的方案。     

时间分辨荧光免疫法与ELISA法检测HBV标志物的比较分析

[目的]对时间分辨荧光免疫法与ELISA法检测HBV标志物进行分析比较。[方法]ELISA法检测HBsAg阳性的血清标本336例，同时用时间分辩荧光免疫分析法进行检测。[结果]336例标本用ELISA法检出的45例大三阳及256例小三阳两种常见模式与TRF法定量检测结果相一致。16例HBsAg、HBcAb阳性的标本TRF检测只有5例与ELISA法相符，其余3例成为小三阳，8例成为大三阳；8例HBsAg、HBeAg阳性的标本TRF法全部为大三阳；5例HBsAg单项阳性的标本用TRF法仅1例仍为单项阳性，其余全为阴性；6例HBsAg、HBsAb阳性的标本用TRF法测定除1例相同外，都变为单项HBsAb阳性。[结论]TRF法是一种灵敏度高，特异性强的定量免疫测定方法。ELISA法检测结果为少见模式时，可用TRF法进行复检，以进一步提高检验结果的准确性。     

乙型肝炎表面抗原/抗体同时存在的血清学模式与病毒血症的关系

目的分析乙型肝炎病毒（HBV）感染者乙肝表面抗原（HBsAg）与乙肝表面抗体（HBsAb）同时阳性的模式,与HBV DNA的关系,以及其产生的原因及临床意义。方法采用化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）检测样本的HBV血清标志物,从中选出HBsAg和HBsAb同时阳性的样本,采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测其HBV DNA定量值。结果在选取的HBsAg和HBsAb同时阳性的37例样本中,出现3种HBV模式：（1）HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性,阳性率46%,HBV DNA阳性率22%;（2）HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性,阳性率30%,HBV DNA阳性率30%;（3）HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性,阳性率24%,HBV DNA阳性率5%。37例样本中,有21例血清HBV DNA检测阳性,阳性率为57%。结论 HBsAg和HBsAb同时阳性并不代表疾病真正好转,部分感染者仍存在病毒血症,应当引起重视。     

金标法检测HBsAg漏检原因分析

HBsAg漏检原因较多,现将金标法检测HBsAg漏检原因分析如下。1临床资料对象2009年1～12月本院门诊患者及健康体检人员。采用艾康生物技术(杭州)有限公司的HbsAg金标试纸,其灵敏度为1ng/mL,上海荣盛生物技术有限公司的HBsAg酶联免疫试剂盒。将金标法初筛为阴性的标本离心血清采用酶联免疫吸附测定(ELISA)进行初、复检。当两次测定的S/CO≥1     

349例乙型肝炎病毒血清标志物复检结果分析

目的 总结、分析应用全自动酶免疫分析系统检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBV M)时出现需复检结果的常见原因和找出相应的处理及预防对策.方法 收集349份需复检的临床标本.将初检HBsAg吸光度值/临界值(S/CO)0.8～1.2的"灰区"结果和S/CO 1.2～2.0的弱反应性结果统一定义为"可疑"(以"±"表示),S/CO>2.0者直接判断为有反应性,即阳性:(1)对于HBsAg"可疑"标本用ELISA法对HBV M进行复检,同时用电化学发光免疫分析(ECLIA)法对HBsAg进行定量复检;(2)对于初检HBV M模式为少见模式者仅用ELISA法对HBV M进行复检.所有标本复检前均对其中有、无红细胞或纤维蛋白进行检查并重新3 500 r/min(离心半径13.5 cm)离心5 min,同时对该份标本所对应的前一份标本的性状及其结果进行分析,以明确是否有携带污染的可能.结果 HBsAg"可疑"标本ECLIA法复检阳性率(56.6%)显著高于ELISA法复检阳性率(40.3%),少见模式标本ELISA法复检与初检结果符合率为38.4%,由于初检时标本的前处理不合格直接引起的复检与初检结果不符者占所有不符标本的53.0%.结论 对于ELISA法测定的HBsAg"可疑"结果,ECLIA法不失为一种方便、准确的复检方法.对于使用全自动酶免疫分析系统检测HBV M的实验室,标本的前处理是影响结果准确性的关键因素,应建立规范的标本前处理程序.     

江苏地区献血者隐匿性HBV感染情况调查

目的调查无偿献血人群中隐匿性乙型肝炎病毒的携带率,病毒载量与血清学标志物检出的关系。方法对无偿献血者血液进行ELISA检测后,再行HBV、HCV、HIV核酸检测(NAT)。ELISA阴性、NAT阳性样品再进行HBVDNA、HCV RNA、HIV RNA定量检测及HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb化学发光法检测。结果共检测51 248份献血者血液样品,检出41例隐匿性HBV感染者,其携带率为0.80‰;血浆HBV病毒载量均小于66IU/ml;HBcAb阳性者23例,占56.1%;HBcAb伴HBsAb阳性者14例,占34.1%;HBsAb阳性4例,占9.7%。HBsAb或伴HBcAb阳性组与单一HBcAb阳性组相比,HBV DNA含量的差异无统计学意义(P<0.05)。结论江苏地区无偿献血者中隐匿性HBV感染率约为0.80‰;其HBV病毒载量均较低,且血清学标志物的检出模式与病毒载量无相关性。