巴曲酶对局灶性脑缺血再灌流大鼠成纤维细胞生长因子样免疫反应的影响

以往实验研究曾发现巴曲酶对脑血管病具有良好的神经保护作用。本文研究的目的为：巴曲酶是否还通过影响成纤维细胞生长因子起修复作用。用大鼠中大脑动脉（ＭＣＡ）线栓法脑缺血再灌注模型及免疫组化方法发现在缺血９０ｍｉｎ，再灌流４８ｈ后，缺血侧皮层、尾壳核及海马区ｂＦＧＦ样免疫反应细胞增加及神经细胞变性。在缺血后给予巴曲酶（８ＢＵ／ｋｇ），ｂＦＧＦ样免疫反应加强，并且缺血对侧相应ＭＣＡ供血脑区也可见轻度的ｂＦＧＦ样免疫反应改变，神经细胞变性之程度较轻。提示：巴曲酶对脑缺血再灌注的保护作用可能与它加强ｂＦＧＦ的修复作用有关。     

丹参在缺血再灌注时的神经保护作用──成纤维细胞生长因子上调

丹参作为传统中药治疗缺血性脑血管病具有良好的疗效，本实验研究丹参是否通过影响成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）起修复作用。用大鼠线栓法缺血再灌注模型及免疫组化方法，发现大鼠缺血９０ｍｉｎ、再灌流４８ｈ后，缺血侧皮层、尾壳核及海马区ｂＦＧＦ样免疫反应增加及神经细胞变性；缺血后给予丹参（１５ｇ／　ｋｇ）大鼠，ｂＦＧＦ样免疫反应加强，并且缺血对应侧脑区也可见轻度的ｂＦＧＦ样免疫反应改变，且神经细胞变性程度较轻。提示丹参对脑缺血再灌流的保护作用可能与它加强ｂＦＧＦ的修复作用有关。     

丹参在缺血再灌注时的神经保护作用——成纤维细…

丹参作为传统中药治疗缺血性脑血管病具有良好的疗效，本实验研究丹参是否通过影响成纤维细胞生长因子起修复作用，用大鼠线栓法缺血再灌注模型及免疫组化方法，发现大鼠缺血９０ｍｉｎ，再灌流４８ｈ后，缺血侧皮层，尾壳核及海马区ｂＦＧＦ样免疫反应增加及神经细胞变性；缺血后给予丹参大鼠，ｂＦＧＦ样免疫反应加强，并且缺血对应侧脑区也可见轻度的ｂＦＧＦ样免疫反应改变，且神经细胞变性程度较轻，提示丹参对脑缺血再灌流的保     

脑缺血再灌流后bFGF基因的表达及MK-801的影响

目的 研究脑缺血再灌流后ｂＦＧＦ基因表达的意义及其机制。方法 采用原位杂交和１免疫组化的方法,观察大鼠脑缺血再灌流后ｂＦＧＦ基因的表达及ＭＫ－８０１对它们的影响。结果 缺血２ｈ再灌流１ｈ可见ｂＦＧＦ表达增高（Ｐ〈０．０５）,ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ表达于１２ｈ达高峰,ｂＦＧＦ蛋白于２４ｈ,达高峰;ＭＫ－８０１组与缺血组相比,于再灌流６ｈ～４８ｈ ｂＧＦＧ表达减弱（Ｐ〈０．０５）。结论 局灶性脑缺血再灌流     

巴曲酶对大鼠大脑缺血及缺血再灌注ET1基因表达的影响

本实验采用大鼠急性脑缺血及缺血再灌注模型，研究巴曲酶对脑缺血及脑缺血再灌注时内皮素（ET1）基因表达的影响。用中大脑动脉（MCA）线检法大鼠模型，共12只，分为缺血组及缺血再灌注组（每组各6只），每组又分为巴曲酶组及盐水组（对照组）。缺血组在缺血后24h，再灌注组则在缺血1．5h及再灌注24h后用原位杂交，并采用IBHS图像分析系统研究ET1基因表达。发现巴曲酶组或对照组手术侧大脑皮质及尾壳核ET1mRNA表达均显著高于对侧（非手术侧）。但是巴曲酶组手术侧的ET1mRNA表达显著低于对照组。结果提示，巴曲酸可使缺血及缺血再灌注ET1基因表达下调。这可能是巴曲酶对缺血再灌注的脑保护作用机理之一。     

碱性成纤维细胞生长因子对脑缺血后神经元特异性烯醇化酶的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对局灶脑缺血的作用。方法采用线栓法制备右侧大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血模型。术后即刻分别腹腔注射ｂＦＧＦ和生理盐水。测定缺血前后血压、心率，缺血前、缺血后３０分钟～２４小时的局部脑血流量（ｒＣＢＦ），缺血２４小时血清神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ），观察缺血２４小时病理学改变和行神经功能评分。结果发现ｂＦＧＦ可降低血清ＮＳＥ，改善组织病理和ｒＣＢＦ，促进神经功能恢复，但不影响血压、心率。结论ｂＦＧＦ能减轻缺血性脑损害，保护脑组织。     

实验性犬SAH后CVS血浆、CSF中ET、CGRP含量动态变化及巴曲酶的保护作用研究

采用放免法动态观察了２５只实验性犬ＳＡＨ后ＣＶＳ动物模型的血浆、ＣＳＦ中ＥＴ及ＣＧＲＰ含量变化及巴曲酶的保护作用。结果：单纯注血组及巴曲酶治疗组的血浆、ＣＳＦ中ＥＴ含量较对照组明显增高（Ｐ＜０．０１），ＣＧＲＰ含量明显降低（Ｐ＜０．０１）。单纯注血组在注血后３０ｍｉｎ血浆、ＣＳＦ中ＥＴ含量开始升高，ＣＧＲＰ含量开始下降，至第７ｄＥＴ达最高值，ＣＧＲＰ达最低值。经蛛网膜下腔及静脉注入巴曲酶０．４ＢＵ／ｋｇ／ｄ组，血浆及ＣＳＦ中ＥＴ含量均较同期单纯注血组明显降低（Ｐ＜０．０１），而ＣＧＲＰ则明显升高（Ｐ＜０．０１）。提示血浆、ＣＳＦ中ＥＴ、ＣＧＲＰ失衡是ＳＡＨ后ＣＶＳ的原因之一。巴曲酶可防止ＥＴ升高和ＣＧＲＰ降低。     

巴曲酶对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用机理的研究

用Ｓｍｉｔｈ等的方法制备大鼠前脑短暂缺血再灌注模型，在缺血１０分钟后，再灌注６小时缺血前脑ＯＨ、ＧＳＳＧ及ＧＳＳＧ／总ＧＳＨ比值明显增高；海马区组织病理学检查显示神经元有不同程度的变性及轻度坏死；海马ＣＡ１区细胞计数显示存活细胞明显减少。巴曲酶（１．６ＢＵ／ｋｇ）可明显地逆转上述氧应激状态，海马ＣＡ１区存活细胞比缺血组明显增多。巴曲酶对缺血神经元的保护作用可能是缓解氧自由基损伤的结果，似乎不是诱导热休克蛋白７０基因表达的结果。     

巴曲酶对大鼠颞叶梗死后空间认知障碍的改善和PDGF表达的影响

目的：探讨巴曲酶对单侧颞叶缺血性损害大鼠空间认知加工能力的改善作用及与ＰＤＧＦ表达的关系。方法：用Ｍｏｒｒｉｓ迷宫监测大鼠空间认知能力，行为。实验结束后取脑进行梗死体积测定及ＰＤＧＦ免疫组化分析。结果：（１）巴曲酶可以显著地缩短梗死大鼠在Ｍｏｒｒｉｓ迷宫中搜索目标的平均反应时和行程；（２）、巴曲酶组大鼠较多，较早地使用了正常的认知策略。巴曲酶治疗组颞叶梗死体积较单纯梗死组显著缩小，ＰＤＧＦ－Ａ表达     

实验性犬SAH后CVS血浆,CSF中ET,CGRP含量动态变化及巴曲…

采用放免法动态观察了２５只实验性犬ＳＡＨ后ＣＶＳ动物模型的血浆，ＣＳＦ有ＥＴ及ＣＧＲＰ含量变化及巴曲酶的保护作用，结果；单纯性血组及巴曲酶治疗组的血浆，ＣＳＦ中ＥＴ含量较对照组明显增高（Ｐ〈０．０１），ＣＧＲＰ含量明显降低（Ｐ〈０．０１）。单纯注血组在注血后３０ｍｉｎ血浆，ＣＳＦ中ＥＴ含量开始升高，ＣＧＲＰ含量开始下降，至第７ｄＥＴ达最高值，ＣＧＲＰ达最代值。经蛛网膜下腔及静脉注入巴曲酶０．４ＢＵ     

巴曲酶对脑缺血再灌注细胞外液单胺类及其代谢产物的影响——微透析研究

目的巴曲酶对脑缺血再灌流损伤的保护机理。方法采用脑内微透析技术结合高灵敏度的高压液相色谱－电化学检测手段（ＨＰＬＣ－ＥＤ），测定前脑缺血３０ｍｉｎ再灌注１２０ｍｉｎ时的纹状体细胞外液（ＥＣＦ）的ＤＡ、５－ＨＴ和ＮＥ及其代谢产物（５－ＨＩＡＡ）和ＨＶＡ的变化和巴曲酶的影响。结果显示脑缺血时，ＥＣＦＤＡ、ＮＥ及５－ＨＴ明显升高，巴曲酶能显著地降低脑缺血时ＥＣＦＤＡ及再灌注时ＥＣＦＨＶＡ和５－ＨＩＡＡ的水平。结论巴曲酶影响单胺神经递质是对脑缺血再灌注损伤起保护作用的机理之一     

NOS抑制剂对缺血再灌注脑组织rCBF及白细胞浸润的 …

目的 应用非选择性ＮＯＳ抑制剂Ｌ－ＮＡＭＥ和选择性ｉＮＯＳ抑制剂ＡＧ治疗鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤，通过对脑梗死体积，ｒＣＢＦ和白细胞浸润程度的观察，研究探讨不同类型ＮＯＳ抑制剂治疗脑梗死的机制。方法 采用线栓法制作鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，不同缺血及再灌注时间测定脑梗死体积，ｒＣＢＦ，缺血脑组织ＭＰＯ酶活性，结果 应用Ｌ－ＮＡＭＥ（１５ｍｇ／ｋｇ，ｉｐ）不但障碍再灌注后ｒＣＢＦ的恢复，也增加缺     

重症肌无力患者血清TNF水平变化及其与AChRab产生的相关性研究

为了探讨肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）在重症肌无力（ＭＧ）发病机理中的作用及其临床意义以及受糖皮质激素（ＧＣ）治疗的影响，应用ＭＴＴ法检测了４２例ＭＧ患者血清ＴＮＦ水平，同时检测了其中３６例ＭＧ患者血清乙酰胆碱受体抗体（ＡＣｈＲａｂ），并观察了２０例ＭＧ患者ＧＣ治疗前后ＴＮＦ水平及ＡＣｈＲａｂ的变化。结果显示：眼肌型、全身型ＭＧ患者血清ＴＮＦ水平皆明显高于正常对照组，ＴＮＦ水平变化与ＡＣｈＲａｂ产生以及与ＭＧ临床类型、病情密切相关，ＧＣ治疗后血清ＴＮＦ水平及ＡＣｈＲａｂ阳性率明显降低。我们认为ＴＮＦ在ＭＧ发病机理上发挥了重要作用，检测血清ＴＮＦ水平对指导ＭＧ临床有重要价值，ＧＣ可抑制ＴＮＦ合成及ＡＣｈＲａｂ产生     

巴曲酶对脑缺血再灌注细胞外液单胺类及其代谢产物的影响 …

目的 巴曲酶对脑缺血再灌流损伤的保护机理。方法 采用脑内微透析技术结合高灵敏度的高压液相色谱－电化学检测手段（ＨＰＬＣ－ＥＤ），测定前脑缺血３０ｍｉｎ再灌注１２０ｍｉｎ时的纹状体细胞外液（ＥＣＦ）的ＤＡ、５－ＨＴ和ＮＥ及其代谢产物（５－ＨＩＡＡ）和ＨＶＡ的变化和巴曲酶的影响。结果 显示脑缺血时，ＥＣＦ ＤＡ、ＮＥ及５－ＨＴ明显升高，巴曲酶能显著地降低脑缺血时ＥＣＦ ＤＡ及再灌注时ＥＣＦ ＨＶＡ和５     

脑缺血再灌流大鼠脑胶质源性神经营养因子基因表达的变化

探讨脑缺血再灌流不同时程及不同程度缺血对海马及皮层胶质源性神经营养因子（ｇｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ, ＧＤＮＦ）基因表达的影响,以及Ｎ甲基Ｄ天冬氨酸（Ｎｍ ｅｔｈｙｌＤｓａｐａｒｔａｔｅ, ＮＭＤＡ）受体拮抗剂,钙离子通道阻断剂是否能调节缺血病态下ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ的表达。参照Ｓｍ ｉｔｈ 等方法建立大鼠前脑缺血再灌流动物模型。用ＤＩＧＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ３′ｅｎｄ ｌａｂｅｌｉｎｇ Ｋｉｔ,标记５１ ｍ ｅｒ的ＧＤＮＦ寡核苷酸探针在含有海马结构的冰冻组织切片上进行原位杂交检测ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ的表达。１０ ｍ ｉｎ 缺血再灌流２ ｈ,齿状回ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ表达上调。再灌流６ ｈ,ＣＡ１,ＣＡ３ 和皮层ＰＡＲ区ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ表达亦见增多,２４ ｈ 达高峰。Ｋｅｔａｍ ｉｎｅ 可使ＧＤＮＦ的基因表达在海马结构及皮层ＰＡＲ区明显低于相应的缺血再灌流组,统计学差异显著（Ｐ＜ ００５）。脑缺血再灌流时ＧＤＮＦ基因表达增加,对缺血神经元可能起保护作用。Ｋｅｔａｍ ｉｎｅ可阻断缺血后ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ 的表达增加,提示ＮＭＤＡ谷氨酸受体很可能参与介导了缺     

实验性犬SAH后CVS血浆、CSF中NPY、ANP含量动态变化及巴曲酶的保护作用研究

目的探讨蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）后脑血管痉挛（ＣＶＳ）的发病机理和防治方法。方法采用放免法动态观察了犬ＳＡＨ后血浆、ＣＳＦ中神经肽Ｙ（ＮＰＹ）、心钠素（ＡＮＰ）含量动态变化及巴曲酶的保护作用。结果单纯注血组及巴曲酶治疗组血浆、ＣＳＦ中ＮＰＹ、ＡＮＰ含量较注血前及同期正常对照组明显增高（Ｐ＜０．０１）；单纯注血组在注血后３０ｍｉｎ血浆、ＣＳＦ中ＮＰＹ含量开始升高，ＣＳＦ中ＡＮＰ含量亦在注血后３０ｍｉｎ升高，血浆ＡＮＰ含量则在第２ｄ开始升高，至第７ｄ最高。蛛网膜下腔给药组和静脉注入巴曲酶０．４ＢＵｋｇ－１ｄ－１组血浆、ＣＳＦ中ＮＰＹ、ＡＮＰ含量均明显低于同期单纯注血组（Ｐ＜０．０１）。结论血浆、ＣＳＦ中ＮＰＹ、ＡＮＰ的异常增高是ＳＡＨ后ＣＶＳ的原因之一，巴曲酶可以防止ＮＰＹ和ＡＮＰ的异常增高。     

局灶性脑缺血后脑内髓过氧化物酶活性观察

目的　探讨局灶性脑缺血后脑组织髓过氧化物酶（ＭＰＯ） 活性的测定方法,以及与缺血性损害的关系。方法　采用新型小鼠大脑中动脉线栓模型,检测不同缺血时间组梗塞体积及ＭＰＯ活性。结果　缺血１ ｈ 后再灌注２３ ｈ 组（ｔＭＣＡＯ）缺血灶体积明显小于缺血２４ ｈ 组（ｐＭＣＡＯ）;ＭＰＯ活性在各缺血组缺血侧明显高于对照侧和对照组（ Ｐ＜ ０－０５）,ｐＭＣＡＯ 组缺血侧基底节区ＭＰＯ 活性显著高于ｔＭＣＡＯ 组（ Ｐ＜ ０－０５） ,而两组缺血皮质区ＭＰＯ 活性则无显著差异。结论　本研究建立了局灶性脑缺血的ＭＰＯ活性测定方法,证明ＭＰＯ活性与缺血损伤间具有一定关系。     

THE T CELL REPERTOIRE TO ACETYLCHOLINE RECEPTOR SUBUNITS IN MYASTHENIA GRAVIS AND CONTROLS

（１）目的：多数重症肌无力（ＭＧ）患者可见作为烟碱样乙酰胆碱受体（ｎＡＣｈＲ）抗体（Ａｂ）升高基础的抗原特异性辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ）增多，本研究目的在于探讨此类细胞的可能作用。（２）方法：设重症肌无力、其它神经科患者和正常对照三组。用体外测试的免疫酶点法，即以电鳗的ＡＣｈＲα－，β－，γ－，和δ－亚单位作为特异性抗原以及ＰＰＤ和与多发性硬化相关的髓鞘碱性蛋白作为非特异性抗原，于抗原刺激后计数分泌γ干扰素（ＩＦＮ－γ）的Ｔｈ１细胞数。测定周围血中针对这些抗原的Ｔ细胞亚群计数。（３）结果：ＭＧ患者识别ＡＣｈＲ四种亚单位的Ｔ细胞数均增高，依次为：１／２５０００，１／５９０００，１／８３０００和１／２５０００个细胞。６５％ＭＧ患者的Ｔ细胞主要识别α－亚单位，有些则主要识别γ－和δ－亚单位。少数ＭＧ患者测不到对任何亚单位起反应的Ｔ细胞。（４）结论：ＭＧ患者中，ＡＣｈＲ的四种亚单位均为通过分泌ＩＦＮγ的Ｔｈ１样细胞自身免疫攻击的靶。     

丹参对大鼠脑缺血再灌注损伤保护机制的实验研究

目的进一步了解丹参的神经保护作用是否与它能抑制白细胞的粘附有关。方法ＳＤ大鼠大脑中动脉（ＭＣＡ）栓塞２ｈ再灌注１ｈ后，给予丹参（１５ｇ／ｋｇ，ｉｐ）或同等容量的生理盐水（ＮＳ），用激光多谱勒血流仪及流式细胞仪分别测量给药或ＮＳ后１ｈ、６ｈ、１２ｈ脑缺血区的血流量及１２ｈ外周血中白细胞表面ＣＤ１８、ＣＤ１１ｂ免疫阳性细胞数，在再灌注２４ｈ后行脑组织ＨＥ染色。结果丹参明显增加缺血侧ＭＣＡ分布区血流量，降低外周血中白细胞ＣＤ１８及ＣＤ１１ｂ免疫阳性细胞数，抑制ＭＣＡ缺血区白细胞浸润及神经元的坏死。结论丹参的神经保护作用机制可能与封闭外周血中白细胞粘附分子结合位点，抑制白细胞与血管内皮细胞的粘附有关。     

急性脑血管病并／不并多器官功能衰竭患者下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴功能研究

应用放射免疫分析法对１６７例急性脑血管病（ＡＣＶＤ）患者血清泌乳素（ＰＲＬ）、生长激素（ＧＨ）、皮质醇（Ｆ）及血浆促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）水平变化进行了观察。结果发现：ＡＣＶＤ患者ＰＲＬ、ＧＨ、ＡＣＴＨ与Ｆ水平均显著高于对照组，ＡＣＶＤ并多器官功能衰竭（ＭＤＦ）患者４种激素水平显著高于ＡＣＶＤ各疾病组，随ＡＣＶＤ病程不同，４种激素水平也相应改变，１周时水平最高，２周后逐渐恢复、ＡＣＶＤ并ＭＤＦ重型患者（ＭＤＦ积分＞４分）ＰＲＬ、ＧＨ与Ｆ水平显著高于轻型患者（ＭＤＦ积分≤４分）。结果提示ＰＲＬ、ＧＨ和Ｆ可能参与了ＡＣＶＤ并ＭＤＦ的病理生理过程。