小剂量阿糖胞苷诱导HL-60细胞分化的作用

目的观察小剂量阿糖胞苷对HL 6 0细胞生长与分化的影响及其可能的作用机制。方法阿糖胞苷 (10 8M)作用HL 6 0细胞 2 6天 ,观察细胞生长 ,用流式细胞仪分析细胞周期 ,用免疫组化法检测P5 3、P2 1蛋白表达的变化 ,原位杂交法检测P5 3mRNA表达水平的改变。结果小剂量阿糖胞苷可诱导HL 6 0细胞向单核 /巨噬细胞分化 ,抑制HL 6 0细胞的增殖 ,使细胞停滞于G1期 ,P5 3,P2 1蛋白和P5 3mRNA表达明显增强。结论小剂量阿糖胞苷对HL 6 0细胞具增殖抑制和诱导分化作用 ,该作用与G1期阻滞及P5 3,P2 1表达增高有关。     

氟伐他汀对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞的诱导分化作用

目的:探讨氟伐他汀对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞的分化诱导作用,为人类早幼粒细胞白血病的治疗提供理论依据。方法：体外培养HL-60细胞用20 μmol·L^-1氟伐他汀处理,观察细胞分化的形态学改变。20 μmol·L^-1氟伐他汀处理HL-60细胞72 h后测定硝基四氮唑蓝（NBT）还原能力,5 d后进行非特异性酯酶染色,计算分化细胞百分率。结果:经氟伐他汀处理的HL-60细胞,胞体较小,核/质比例降低,核呈扭曲折叠状或分叶状,细胞质内出现特异性颗粒及空泡样改变,部分细胞已分化为较成熟的细胞。用氟伐他汀处理的HL-60细胞NBT还原能力(A值)较对照组显著升高（P<0.01）,与阳性对照组全反式维甲酸（ATRA,10 μmol·L^-1）的作用大致相当。经20 μmol·L^-1氟伐他汀处理5 d的HL-60细胞,非特异性酯酶染色阳性细胞的百分比明显多于对照组(P<0.01),在作用液中加入氟化钠未能抑制该种阳性反应。结论:氟伐他汀可使HL-60细胞分化为较成熟的细胞,提示氟伐他汀可能成为治疗急性早幼粒细胞白血病的药物。     

鼠尾草酸对HL-60细胞生长及分化作用的研究

鼠尾草酸（CA）是一种从植物提取的多酚类双萜化合物，具有很强的抗氧化活性．研究发现其在几种细胞和动物模型中呈抗癌活性。本实验研究不同浓度的CA对人急性早幼粒白血病细胞系HL-60细胞的生长及分化作用。[第一段]     

中药抗癌制剂对HL-60细胞的分化诱导研究

以人早幼粒白血病细胞株 (HL - 60 )为靶细胞 ,运用中药抗癌制剂对其进行体外培养和诱导分化 ,发现剂量在 2 0ul/ml时 ,可显著地抑制HL - 60细胞增殖 ,使原始细胞分化为中幼以下的成熟细胞 ,分化后的细胞具有NBT还原能力和吞噬功能。其形态的改变和吞噬能力与对照组维甲酸和中药苦参相似 (P >0 0 5 ) ;其NBT还原能力与苦参相当 (P >0 0 5 ) ,但稍低于维甲酸 (P <0 0 5 )。上述结果表明该制剂对HL - 60细胞具有较好的分化作用。     

全反式维甲酸诱导分化的HL-60细胞表面凝集素受体的变化

目的：了解人类早幼粒细胞性白血病细胞株（HL-60）细胞经全反式维甲酸诱导分化后各时相细胞表面5种凝集素受体的变化.方法：以刀豆凝集素（ConA）、麦胚凝集素（WGA）、花生凝集素（PNA）、蓖麻凝集素（RCA）、荆豆凝集素（UEA-1）共5种Na^125I-凝集素,标记经全反式维甲酸诱导分化的HL-60细胞,检测各时相细胞表面凝集素受体的变化.结果：HL-60细胞从幼稚分化发育至成熟各阶段中,细胞表面与UEA-1、WGA、ConA结合的凝集素受体有增多的趋势,诱导分化前后各凝集素放射活性比较有显著性差异（P＜0.05）,其中WGA放射活性在分化前后明显增加,而与PNA结合的凝集素受体在HL-60细胞分化过程中呈减少的趋势,在诱导分化后期减少最为明显,诱导分化前后放射活性比较有显著性差异（P＜0.05）.结论：D-半乳糖-N-乙酰氨基半乳糖结构主要表达于HL-60细胞早幼粒阶段,随着细胞的分化成熟而显著减少,其可能是肿瘤特异性抗原.HL-60细胞在经全反式维甲酸诱导分化过程中,细胞膜上含L-岩藻糖糖链结构增多,N-乙酰氨基葡萄糖结构增多和/或唾液酸化作用增强,并出现D-葡萄糖和/或D-甘露糖糖链结构.     

HL-60细胞在诱导分化中的超微结构及细胞化学研究

用电镜及超微结构细胞化学方法,观察并比较了RA及DMSO诱导HL-60细胞分化的演变过程,两种诱导剂均可使HL-60细胞分化为有吞噬功能的粒细胞,但DMSO处理组尚出现少量分化为单核细胞。超微结构和细胞化学的结果说明RA诱导HL-60细胞分化有一个清晰的成熟演变过程。在诱导剂处理四天中,从最初表现为核变形至分裂、胞浆A颗粒由疏松变为致密以及S颗粒和吞噬活动出现;MPO反应从开始时出现于内质网、核膜腔、A颗粒,演变为最终只存在于A颗粒。DMSO处理细胞在第二、三天间有一个诱导分化的转折点。对上述结果进行了初步讨论、     

维生素K2对HL-60细胞生长及凋亡、分化的诱导作用

目的：观察维生素K2(VK2)对HL-60细胞生长及凋亡、分化的诱导作用。方法：通过四氮唑蓝比色,细胞形态,流式细胞仪测定细胞周期、凋亡率及CD14的表达,观察VK2对HL-60细胞的影响。结果：HL-60细胞经10／μmol/L以上浓度的VK2作用后增殖受到抑制,10μmol/L、20μmol/L VK2作用72h后,细胞形态呈现凋亡细胞的特征。5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L VK2作用于HL-60细胞72h凋亡率分别为7．16％、11．31％、20．36％,与对照组相比差异显著。G0/G1期细胞阻滞,CD14的表达与对照组相比无差异性。结论：VK2对HL-60细胞有生长抑制作用,能诱导HL-60细胞发生凋亡,具有一定的量效和时效关系,单独使用VK2的分化作用不显著。     

全反式维甲酸诱导HL-60细胞粒系分化中miRNA-26的表达变化

目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)对HL-60细胞诱导分化的miRNA-26表达变化.方法 采用全反式维甲酸(1μM)影响下不同时间的HL-60细胞为检测对象,显微镜下观察细胞形态学改变;流式细胞仪检测细胞表面分化标志CD15;Real-time PCR检测不同时段miRNA的表达变化.结果 ①随着药物诱导时间的延长,被诱导的HL-60细胞向粒系分化,并出现细胞核型的改变;②与对照组相比,ATRA作用3、4、5和6 d后,流式细胞仪检测HL-60细胞的分化率分别为(52.39±3.56)%,(77.65±0.24)%,(83.90±1.30)%及(68.13±1.67)%,(P＜0.001);③Real-time PCR检测miR-26A、miR-26B的表达水平显示,5 d时miRNA表达水平显著上升,miR-26A、miR-26B的表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-26A、miR-26B在ATRA诱导HL-60细胞粒系分化中表达显著升高,提示miR-26可能参与急性髓系白血病粒系分化调控的过程.     

土贝母提取物——结晶E对HL-60细胞的诱导分化作用

作者以短期液体培养方法,通过细胞活力测定、形态分类、酵母多糖吞噬试验、NBT还原试验及非特异性酯酶染色等指标,观察了土贝母提取物——结晶E(ST-E)对人早幼粒白血病细胞(HL-60)的诱导分化作用.结果发现ST-E能诱导HL-60细胞向类似成熟中性粒细胞方向分化,细胞形态变化显著,核浆比例变小,核呈肾形或杆状,核染色质浓缩增粗,核仁消失,胞浆嗜天青颗粒消失,还原NBT和吞噬酵母多糖能力显著增强,非特异性酯酶染色阴性,提示ST-E可能是一种新的抗白血病有效药物.     

三七皂甙R_1对HL-60细胞系体外诱导分化作用的初步研究

光镜及电镜观察发现,经三七皂甙R_180μg/ml处理 5日,可诱导68%的HL-60细胞分化,其中晚幼粒32％,杆状30％,分叶6％。证实了三七皂甙R_2是HL-60细胞系的强诱导剂,可诱导HL-60细胞向中性粒细胞分化。~3H-TdR掺入实验结果表明,三七皂甙R_1在诱导HL-60细胞分化的同时,对细胞DNA和RNA的合成均有影响。与对照相比,48小时掺入抑制率~3H-TdR为26.32％,~3H-UR为18.57％(P<0.05);72小时掺入抑制率分别为17.46％和21.76%(P<0.05)。     

DMSO诱导下蛋白激酶C与HL—60细胞分化的关系

HL-60细胞在DMSO诱导下沿粒细胞方向分化,120h NBT~ 细胞达84％。细胞经诱导24h蛋白激酶C活性增加,72h为未诱导细胞的2.7倍。酶活性的增加,主要是由于细胞浆部分而不是细胞膜部分可溶性酶活性改变的结果。分化诱导剂DMSO本身不能直接激活蛋白激酶C,提示DMSO对酶活性的影响是间接的。     

新维甲类化合物—R—81001对HL—60细胞的分化诱导作用

应用软琼脂集落形成法选出单克隆HL-60细胞系,系统地研究新维甲类化合物R81001的分化诱导作用。证明该药可使人早幼粒白血病细胞的NBT还原能力明显增强,呈浓度依赖性。形态学观察表明,在药物作用下细胞的核浆比例降低,核仁减少或消失.胞浆中嗜天青颗粒减少,出现特异性颗粒。多数细胞处于中或晚幼粒细胞阶段。非特异酯酶染色试验证明,R81001诱导HL-60细胞沿粒系统定向分化。     

六亚甲基二乙酰胺体外诱导HL-60 细胞分化的机制

目的探讨六亚甲基二乙酰胺(HMBA)体外诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60细胞分化的分子机制。方法HL-60细胞与HMBA体外培养3d；运用流式细胞仪测定细胞分化抗原CD11b、CD14及细胞内Cyclin D、Cyclin E、p27抗原；半定量PT-PCR分析c-myc、Rb基因 mRNA的表达。结果HL-60细胞经HMBA处理后显示CD11b表达显著增高；胞内抗原Cyclin E表达显著下降，Cyclin D、p27表达显著增高，并呈剂量依赖关系；RT-PCR反应显示c-myc mRNA表达显著下调，Rb mRNA表达显著增高。结论HMBA能体外诱导HL-60细胞分化，其机制可能是通过下调Cyclin E、上调p27；同时使得增殖分化相关基因c-myc mRNA表达下调、Rb mRNA表达上调而使细胞阻滞于G1期，抑制细胞增殖，诱导细胞分化。     

抗8-AG和HGPRT缺失的人早幼粒白血病细胞突变株(HL-60-AR)的体外诱导分化潜能

具有抗8-AG和HGPRT~-遗传标记的HL-60-AR细胞与维生素A酸或二甲基亚砜一起保温后,细胞对NBT还原反应能力增强;细胞膜表面出现C_2补体受体;细胞形态按粒系白细胞途径向较成熟的方向发育。同时,细胞并合~3H-TdR的速率降低;细胞几乎全部丧失在软琼脂中形成集落的能力。HL-60-AR细胞对次黄嘌呤的诱导分化反应不敏感。     

天花粉蛋白体外诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的:本研究探讨天花蛋白(Trichosanthin,TCS)对HL-60细胞凋亡的影响。方法:采用MTT比色法测定细胞的增殖抑制率;光学显微镜、DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:TCS抑制HL-60细胞的增殖,促进其凋亡,随作用时间的延长、TCS浓度的增加,增殖抑制及促凋亡作用更加明显。结论:TCS对HL-60细胞有时间和剂量依赖性的细胞凋亡诱导效应。     

小檗碱对HL-60细胞的诱导分化及增殖抑制作用

目的 研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖与分化的影响。方法 应用锥虫蓝排染法、生长曲线测定法、克隆形成实验检测药物对HL-60细胞生长的影响；细胞分化根据细胞形态、硝基四氮唑蓝(NBT)还原能力、细胞表面标记的改变来判断；细胞周期变化用流式细胞仪测定。结果 HL-60细胞经小檗碱处理后生长明显受抑，IC50为5．29(24h)，2．65(48h)，0．74(72h)mg／L。选择1，2，4，8mg／L小檗碱作用于HL-60细胞，动态观察发现HL-60细胞向成熟细胞分化：细胞核变小，核浆比减少；NBT还原能力显著增强；CD11b表达升高，4mg／L组CD11b阳性率高达85．1％。细胞周期分析发现，小檗碱处理后细胞阻滞于G0／G1期，S期细胞明显减少。结论 盐酸小檗碱可抑制HL-60细胞的增殖，并诱导HL-60细胞向成熟细胞分化。     

榄香烯体外诱导急性白血病细胞凋亡的研究

目的 探讨榄香烯诱导白血病细胞凋亡的作用及其机制。方法 采用MTT法、荧光显微镜、透射电镜、流式细胞术（FCM）、DNA电泳方法观察榄香烯对HL．60白血病细胞株的促凋亡作用，并进行细胞周期分析和采用RT-PCR、FCM检测bcl-2基因表达的变化。结果 榄香烯在体外诱导HL-60细胞凋亡，呈细胞凋亡典型的形态和生化特征，可见凋亡小体和梯形条带，并具有时间剂量依赖性，凋亡率最高达51．8％，在凋亡过程中细胞阻滞于S期，并检测到bcl-2基因表达下调。结论 榄香烯具有诱导细胞凋亡的作用，其机制可能与bcl-2基因表达下调有关。     

咖啡因对X射线诱导的HL-60细胞凋亡的影响

目的 探讨细胞周期检测点对不同放射剂量射线的耐受性及咖啡因对细胞周期检测点的影响。方法 对数生长期的急性早幼粒白血病细胞株(HL-60)细胞经不同剂量的X射线照射，并加入终浓度为5mmol／L的咖啡因培养4h后．用亚G1峰法检测细胞凋亡，用DNA链缺口标记法(TdT)分析凋亡细胞的细胞周期特异性。结果 不同剂量X射线照射均可诱导HL-60细胞凋亡，2Gy X射线的照射主要诱导G1期细胞凋亡，20Gy X射线照射诱导的细胞凋亡由G1期发展至以S期和G2期为主。加入咖啡因能使射线诱导的细胞凋亡减少，其中2Gy X射线照射的细胞表现为G1期细胞凋亡减少，而20Gy X射线照射的细胞主要表现为以S期和G2期为主的细胞凋亡的减少。结论 细胞对放射剂量的反应性与细胞周期检测点之间存在一定的关系，咖啡因对射线诱导的细胞凋亡及检测点的影响与射线的剂量有关。