人突变apoE高脂血症转基因近交系小鼠Tg(0,apoE7,human)1模型的建立

用C57BL/6杂交1代鼠(种鼠与供卵鼠相同),经显微注射法,成功地制备了人apoE7转基因高脂血症模型小鼠。人突变apoE7基因为apoE3型在第244,245位突变(Lys取代Glu)所致。所构建的基因组DNA真核细胞表达片段,由小鼠MT-1启动子调控。联合应用PCR法、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平测定,鉴定首建鼠与鼠系。100余只出生的仔鼠中,有3只PCR阳性鼠。其中1只鼠TC为3.68mmol/L,TG为1.10mmol/L,10只对照鼠TC为(2.24±0.29)mmol/L,TG为(0.48±0.10)mmol/L仔鼠TC、TG与对照鼠的差值均超过对照鼠标准差5倍以上,确证其为整合与表达人突变…     

载脂蛋白E基因多态性与2型糖尿病患者血脂的关系

目的 研究中国北方汉族群体载脂蛋白E（ApoE）基因多态性与2型糖尿病患者血脂水平的关联.方法 选择2型糖尿病患者200例作为病例组,健康个体210例作为对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测ApoE基因型,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平.结果 病例组ε3/4基因型分布频率显著高于对照组（36.50％比22.38％,x2=9.864,P＜0.05）;病例组携带ε3/4基因型的患者血清TC、TG和LDL-C水平高于对照组携带ε3/4基因型者[TC：（6.02±0.98） mmol/L比（4.87±0.97） mmol/L,t=6.301,P＜0.05;TG：（2.04±0.42） mmol/L比（1.55 ±0.54） mmol/L,t=5.568,P＜0.05;LDL-C：（2.81±0.53）mmol/L比（2.36±0.58） mmol/L,t =4.500,P＜0.05）,HDL-C水平低于对照组[（1.16±0.47） mmol/L比（1.69±0.56）,t=5.579,P＜0.05];病例组中携带ε3/4基因型患者脂代谢异常程度高于其他基因型,差异均具有统计学意义（P＜0.05）.结论 ApoEε3/4基因型与2型糖尿病血脂水平升高及发病有关.     

老年性痴呆患者血清脂质、脂蛋白、载脂蛋白水平变化的研究

目的 探讨脂代谢异常在老年性痴呆病因中的作用.方法 选取46例老年性痴呆患者及50例正常对照者,抽取其静脉空腹血,运用单克隆抗体一免疫酶联吸附法(McAb-ELISA)测定其血清载脂蛋白E(ApoE)含量,同时测定血清中总胆同醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、极低密度脂蛋白(VLDL-C)、载脂蛋白B(ApoB)和载脂蛋白A(ApoA)含量,并对结果进行比较.结果 ①老年性痴呆组ApoB[(1.72±0.65)mg/L]的水平较对照组[(1.21±0.54)mg/L]明显升高,组间比较差异有显著性(P<0.05);②与对照组[TC、TG、LDL-C、ApoA、ApoE分别为(5.64±2.14)mmol/L、(1.51±1.23)mmol/L、(4.08±0.74)mmol/L、(1.76±0.55mg/L)、(5.21±1.32)mg/L]比较,老年性痴呆组TC[(5.86±2.31)mmol/L]、TG[(1.65±1.21)mmol/L]、LDL-C[(4.10±0.65)mmol/L]、ApoA[(1.85±0.65)mg/L]、ApoE[(5.32±1.45)mg/L]水平较高,但2组间比较差异无显著性(P>0.05);③与对照组比较,老年性痴呆组HDL-C、VLDL-C水平则较低,但2组间比较差异无显著性(P>0.05).结论 脂代谢紊乱在老年性痴呆病因中可能发挥重要作用.     

高血脂对小鼠Foxp3基因表达的影响

目的 研究高血脂对小鼠Foxp3基因表达的影响,并观察ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化中Foxp3的表达及鉴定其功能.方法 选取8周龄雄性C57BL/6J ApoE-/-及其同系野生型小鼠16只,分为对照组和高脂饮食组(n=8),构建小鼠动脉粥样硬化模型,比较不同组小鼠血脂水平、斑块面积和不同器官组织中Foxp3+CD4+CD25+Tregs细胞的数目;利用RT-PCR和Western blot分析组织中Foxp3基因转录水平和Foxp3蛋白表达水平.结果 与对照组[TG(2.0±0.1)mmol/L、TC(20.6±0.1) mmol/L]比较,高脂饮食组小鼠血脂水平[TG(2.8±0.2)mmol/L、TC(28.2±1.2) mmol/L]明显升高(P<0.01),斑块面积(25 044.32±4 920.42)μm2显著增加(P<0.01),而不同器官组织中Foxp3+CD4+CD25+Tregs细胞的数目显著减少(P<0.05),Foxp3基因转录水平(P<0.01)和Foxp3蛋白表达(P<0.05)降低.结论 高脂能抑制不同免疫器官Foxp3基因的表达和功能,可能是高脂致动脉粥样硬化的机制之一.     

基于CRISPR/Cas9技术PCSK9基因敲除小鼠模型的构建及表型验证

目的 基于CRISPR/Cas9技术构建前枯草杆菌蛋白原转换酶9(Preprotein convertase subtilisin/kexin type9,PCSK9)基因敲除小鼠模型并对其表型进行初步验证。方法 利用非同源末端连接(NHEJ)修复引入突变的方式,针对PCSK9基因靶序列设计单链向导RNA(sgRNA),将sgRNA和Cas9 mRNA显微注射到C57BL/6J小鼠受精卵,获得F0代敲除小鼠,通过繁育及基因型鉴定获得PCSK9基因敲除(PCSK9 KO)纯合子小鼠。采用PCR方法对PCSK9 KO小鼠进行基因鉴定,Western Blot检测肝组织PCSK9及低密度脂蛋白受体(LDL-R)蛋白的表达,同时检测心、脑、肾、脂肪组织中的PCSK9蛋白表达水平,q-PCR检测PCSK9的mRNA表达水平。采用酶法检测血清中总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)水平。结果 PCR产物凝胶电泳以及PCSK9蛋白及mRNA表达结果表明成功获得全身性PCSK9基因敲除小鼠,肝组织LDL-R(3.42±0.56)蛋白表达显著增高。与WT组相比,PCSK9小鼠血清TC(90.75±17.81...     

河南省商丘市健康成人血脂四项正常参考值的测定与建立

目的:检测了解并建立河南省商丘市健康成人血脂四项,即TC(血清总胆固醇)、TG(血清甘油三酯)、HDL-C(血清高密度脂蛋白)、LDL-C(血清低密度脂蛋白)的正常参考值.方法:酶法-终点法.采用雅培Aerosetx全自动生化分析仪.结果:TC为5.47±0.64mmol/L;TG为1.93±0.71mmol/L;HDL-C为1.37±0.4mmol/L;LDL-C为3.08±0.54mmol/L.     

结直肠腺瘤患者血脂水平测定及其临床意义

目的 研究结直肠腺瘤患者的血脂水平及其临床意义.方法 采用酶法、化学修饰酶法分别测定79例结直肠腺瘤患者及68例对照组的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)及低密度脂蛋白(LDL-C),并进行统计学比较分析.结果 结直肠腺瘤组、远侧结肠腺瘤组的血清TG水平分别为(1.70±1.08)mmol/L、(1.91±1.20)mmol/L,均高于对照组及近侧结肠腺瘤组,差异有统计学意义(P＜0.05);而远侧结肠腺瘤组的血清HDL-C水平为(1.16±0.27)mmol/L,低于近侧结直肠组,差异有统计学意义(P＜0.05);男性结直肠腺瘤组的血清TG水平为(1.84±1.17)mmol/L明显高于女性患者的(1.41±0.83)mmol/L,差异有统计学意义(P＜0.05);各组间血清TC、LDL-C水平差异则均无统计学意义(P0.05).结论 结直肠腺瘤患者TG水平较高,尤其是远侧结肠及男性患者;HDL-C水平较高者结肠腺瘤的发病率较低.     

糖尿病小鼠肝脏脂肪酸合成酶的动态表达

目的观察1型、2型糖尿病小鼠肝脏脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)表达的改变,探讨其在糖尿病肝脏脂质代谢紊乱中的意义。方法 1型糖尿病小鼠模型以链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导,对照组小鼠应用等量生理盐水。2型糖尿病小鼠模型选取C57BL/6基因背景下瘦素受体基因缺陷小鼠,纯合子db/db小鼠入选实验组;杂合子db/m小鼠入选对照组。应用免疫组化法检测FAS在肝脏定位;应用Real-time PCR技术、Western印迹方法,分别从mRNA水平、蛋白水平检测FAS在1型、2型糖尿病小鼠肝脏表达的变化。结果 FAS蛋白在肝脏广泛表达,主要位于肝细胞的胞浆内。1型糖尿病小鼠HbA1c水平(5.45±0.56)%明显高于对照组(2.93±0.08)%(P<0.05),血甘油三酯(triglyceride,TG)水平(2.25±0.66)mmol/L高于对照组(0.99±0.46)mmol/L(P<0.05),血胆固醇(cholesterin,CHO)水平(1.90±0.12)mmol/L高于对照组(1.62±0.10)mmol/L(P<0.05);FAS的mRNA水平约为对照组的1.4倍,FAS在蛋白水平也明显高于对照组。2型糖尿病小鼠HbA1c水平(5.73±0.33)%明显高于对照组(3.90±0.07)%(P<0.05),db/db鼠也存在明显高脂血症,血TG水平(2.85±0.24)mmol/L高于对照组(0.87±0.40)mmol/L(P<0.05),血CHO水平(3.60±0.98)mmol/L高于对照组(1.73±0.50)mmol/L(P<0.05);FAS mRNA水平约为对照组的2.7倍,蛋白印迹显示db/db鼠肝脏FAS也明显高于db/m鼠。结论 1型、2型糖尿病小鼠均存在不同程度的脂质代谢紊乱,其肝脏FAS的含量,无论从mRNA水平还是蛋白水平均较正常小鼠明显增高。     

hApoE7转基因小鼠纯合子的培育和鉴定

目的：载脂蛋白E(apoE)是血浆中参与脂质代谢的重要蛋白质，并且与迟发型早老性痴呆(AD)相关。为从整体水平研究人突变ApoE基因剂量与效应的关系，我们拟培育C57BL/6-hApoE7纯合子转基因小鼠。方法：将经Southern杂交鉴定为阳性的F1代小鼠进行互配，仔代经PCR初筛，再行Southern杂交鉴定，杂交结果经扫描定量分析以确定hApoE7基因整合的拷贝数，纯合子小鼠的拷贝数为杂合子的两倍。经此法鉴定的纯合子小鼠与正常C57 BL/6小鼠进行侧交以进行进一步的鉴定。结果：Southern杂交鉴定出F1代转基因小鼠6只，F2代转基因小鼠7只，其中纯合子3只。将所得到的纯合子小鼠与正常的C57 BL/6小鼠交配，仔代鼠经PCR鉴定结果全部为阳性。结论：通过培育C57 BL/6-hApoE7纯合子转基因小鼠，发现人ApoE7基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传，转基因的遗传特征符合常染色体单位点整合。     

ApoE基因多态性及血脂水平与动脉瘤性蛛网膜下腔出血的相关性

目的 探讨ApoE基因多态性及血脂水平与动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)的关系.方法 对2018年5月至2020年4月该院诊治的85例aSAH患者(病例组)和86例非aSAH患者(对照组)进行病例对照分析,采用PCR荧光探针法测定载脂蛋白E(ApoE)基因型,采用比色法和免疫比浊法测定血脂水平,使用GraphPad Prism 7统计分析ApoE基因多态性及血脂水平与aSAH的关系.结果 ApoE基因型和等位基因频率在两组中差异均无统计学意义(P>0.05);病例组血清三酰甘油水平低于对照组[(1.246±0.070)mmol/L vs.(1.849±0.131)mmol/L,P<0.05];病例组中ε2/ε3型患者血清低密度脂蛋白胆固醇水平高于对照组中ε2/ε3型患者[(2.851±0.212)mmol/L vs.(2.145±0.242)mmol/L,P<0.05];病例组中ε3/ε3型患者血清三酰甘油水平低于对照组中ε3/ε3型患者[(1.216±0.080)mmol/L vs.(1.689±0.138)mmol/L,P<0.05].结论 ApoE基因多态性可能与aSAH存在关联,ApoE基因多态性可能通过血脂水平影响aSAH.     

国人小肠长度的测量

本文报道和分析测量了139具尸体的小肠长度。成年男性54例,均长414.30±9.60厘米;成年女性47例,均长345.87±8.19厘米;男女两性小肠均长382.48±6.40厘米,且两性小肠长度存在非常显著性差异。男性胎儿13例,均长218.46±8.76厘米;女性胎儿25例,均长211.60±7.31厘米;胎儿两性小肠均长213.95±5.68厘米,两性间无差异。求相关系数表明,r=0.039,小肠长度与身高完全无关。     

国人下颌孔的定位研究

用200例(男124、女76)长春市郊出土的干燥成人下颌骨进行了下颌孔定位的研究。所测得的数据,均通过统计学处理。结果发现下颌孔的位置是变化的,但下颌孔主要位于冠突最高点与下颌角连线的上五分之三与下五分之二交界处。同时进行了男、女性别之间及同一性别两侧之间的对比研究。从研究结果看,除下颌孔至下颌角的距离在男、女性别之间存在着明显性别差异以外,其余各项未看出明显性别差异。     

国人腹主动脉不成对脏支起点高度的观察

在162例成年尸体上观察的结果如下:腹腔动脉起点的高度,以平L_1上1/3者最多,平Th_(12)下1/3者次之,平均在L_1上1/3上部。肠系膜上动脉起点的高度,以平L_1上1/3者最多,平L_1下1/3者次之,平均在L_1中1/3下部。肠系膜下动脉起点的高度,以平L_3下1/3者最多,平L_3中1/3者次之,平均在L_3下1/3上部。腹腔动脉起始部下缘与肠系膜上动脉起始部上缘间的距离,以在0.1～0.5厘米之间者最多,平均距离为0.41厘米。肠系膜上动脉起始部下缘与肠系膜下动脉起始部上缘间的距离,以在5.0～7.0厘米之间者最多,平均距离为6.36厘米。腹腔动脉、肠系膜上动脉和肠系膜下动脉起始部下缘与腹主动脉分叉角顶之间的距离,分别以在12.0～14.0厘米、10.0～13.0厘米和3.0～5.0厘米之间者最多,它们的平均距离分别为13.03厘米、11.28厘米和4.21厘米。     

兔胰腺器官内淋巴管

本文对家兔胰腺器官内的淋巴管进行了光镜和电镜观察。胰腺毛细淋巴管和淋巴管存在小叶间和被膜下。毛细淋巴管的超微结构与其他器官所见相同。     

猫直肠的初级传入和传出神经元节段性分布(HRP法研究)

本文用成年猫8只,向直肠壁浆膜下层和肌层内多点注入10％HRP溶液200微升,研究结果证明①猫直肠初级传入神经来自双侧(?)_1至腰_5和骶_1至尾_1的脊神经节,其高峰节段是腰_2和骶_2节段。②脊神经节内直肠的初级传入神经元胞体多为圆形和椭圆形,少数是梭形和不规则形。③直肠初级传入神经元的中枢突经李氏束深面进入骶髓_(13)节段,围绕后角形成较大的外侧束和较小的内侧束。两束沿后角外侧阳内侧缘行向腹侧,其终末均终止于灰质Ⅱ,Ⅲ层和Ⅴ、Ⅶ层.④直肠副交感节前神经元位于双侧骶_1至尾_1节段的中间带外侧核,并在网状核、侧素、后外侧核、中界核和前角后外侧核也见到标记细胞。     

弱视治疗中的有关因素分析

本文报导了83例119眼弱视治疗及随访情况,其中经随访一个月以上的93眼中,56眼(60%)视力恢复三排以上或达1.0以上。 视力恢复与开始治疗的年龄有明显的关系,5岁以前开始治疗者疗效较5岁以后开始治疗者显然好得多。非中心凹注视者疗效不一定比中心凹注视者差,而大多数非中心凹注视眼视力提高者转变为中心凹注视。定期随访,严格认真地遮盖健眼,及强迫多使用弱视眼是治疗弱视的重要原则。     

头孢吡肟中间体合成条件考察

目的：在现有的实验室务件下以7-ACA为原料合成头孢吡肟中间体，并在一定程度上提高收率。方法：与国外文献报道的相关方法具有一致性，同时，采用正交实验设计方法考察了一些关键步骤(时间、温度、剂量)对中间体收率的影响。结果：中间体收率为32．7％。结论：该方法使中间体的合成更易于控制，避免了一些繁杂的操作，并降低了实验成本。