肾透明细胞癌组织中泛素连接酶Pirh2蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨肾透明细胞癌组织中泛素连接酶Pirh2蛋白(p53-induced RING-H2 protein,Pirh2)的表达及与临床病理特征和预后的关系. 方法 肾透明细胞癌标本92例,G1 29例、G2 36例、G3 24例、G4 3例,T1 55例、T2 16例、T3 20例、T4 1例;正常肾组织标本20例作为对照组.采用免疫组织化学方法检测两组标本组织中Pirh2蛋白的表达,并结合临床资料进行分析. 结果 正常肾组织中Pirh2蛋白表达率为20.0％ (4/20),肿瘤组织为52.2％(48/92),且随组织病理分级和分期增加,Pirh2蛋白表达量逐渐增高.Pirh2蛋白在G1、G2、G3、G4组织中的高表达阳性率分别为24.1％、30.6％、75.0％和66.7％,T1、T2、T3、T4期肿瘤组织中高表达阳性率分别为25.5％、50.0％、75.0％和100.0％,分级间分期间差异有统计学意义(P=0.001).随访7～70个月,平均42个月,复发10例,复发组与未复发组中 Pirh2蛋白高表达阳性率分别为80.0％和36.6％,差异有统计学意义(P=0.022).Kaplan-Meier曲线显示,Pirh2蛋白高表达组与低表达组患者术后总生存率(71.1％与94.4％)和无复发生存率(78.9％与96.3％)比较,差异均有统计学意义(P＜0.01). 结论 Pirh2蛋白高表达与肾透明细胞癌的恶性程度及预后相关,Pirh2与肾透明细胞癌的发生和发展存在相关性.     

癌性恶病质

恶病质“ｃａｃｈｅｘｉａ”一词源于希腊语“ｋａｋｏｓ”和“ｈｅｘｉｓ” ,意思是“坏的”“状况” ,是以骨骼肌和脂肪丢失为特征的综合征 ,伴有呼吸肌功能的潜在损害。约半数癌症患者有癌性恶病质 (ｏｎｃｏｌｏｇｉｃａｌｃａｃｈｅｘｉａ ,简为ＯＣ) ,是癌症患者死亡的重要原因 ,约占 10 %～ 2 2 %。治疗ＯＣ可提高生活质量 ,延长生存时间 ,对仅靠机体分解代谢维持生长的癌症 ,也是一种抗癌治疗。近年对ＯＣ机理的认识已有重大进展 ,并由此派生出许多治疗方法。综述如下。一、ＯＣ、单纯饥饿与厌食癌症 ,ＡＩＤＳ ,手术 ,严重创伤、营…     

NEDD4泛素连接酶家族在骨质疏松症中的研究

骨质疏松症的重要发病原因是骨重塑过程的紊乱,而介导泛素化的NEDD4泛素连接酶家族在这一过程中扮演着关键的角色。其中泛素连接酶Smurf1、Wwp1能够抑制成骨细胞分化,Smurf2则能够抑制促破骨细胞分化因子RANKL的分泌,而Wwp2却是一种成骨的正向促进因子。近年来,有关NEDD4泛素连接酶家族的研究为骨质疏松症的发病机制和治疗提供了许多新的方向。本篇综述总结了NEDD4泛素连接酶家族在骨重塑过程中的调控作用。     

风湿性心脏病合并心源性恶液质病人的围术期处理

我们于１９９２．３～１９９４．４手术治疗风心病合并心源性恶液质病人３４例。早期死亡率为８．８％。３１例存活出院者的心脏功能及全身情况均有显著改善，肝、肾功能已恢复正常，术后早期效果良好。但围术期并发肾、肝、肺等脏器功能不全的发生率高。我们认为，良好的手术效果取决于术前充分准备；术中加强心肌保护和体外循环管理，彻底纠正三尖瓣反流和积极整形缩小巨大心房；术后加强心肺功能支持，及早处理肾功能不全，充分重视围术期的营养支持。     

脓毒症对大鼠骨骼肌组织泛素及泛素化蛋白表达的影响

目的 研究脓毒症大鼠骨骼肌组织泛素化蛋白表达的变化规律,探讨导致骨骼肌蛋白降解增强的机理。方法 大鼠腹腔注射内毒素复制脓毒症模型,将其随机分成内毒素攻击后2、6、12和24h组,每组（16只）各设正常对照。骨骼肌充分氧供离体孵育后,氨基酸自动分析仪测定脓毒下大鼠伸趾长肌总蛋白降解率和肌纤维蛋白降解率,利用蛋白免疫印记（western blot)方法测定大鼠不同时相点伸趾长肌泛素及泛素化蛋白的表达变化。结果 脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白降解率在内毒素攻击后2h和6h轻度增加,12h和24h增加不明显,而肌纤维蛋白降解率则在2h和6h分别增加155%和222%,12h增加40%,24h变化不明显;伸趾长肌泛素及泛素及泛素化蛋白的表达在内毒素攻击后2h和6h表达较正常对照组明显增加,其中游离泛素蛋白增加46%,泛素化蛋白增加2.4倍,但12h和24h无明显变化,增加的泛素化蛋白主要为高分子量蛋白。结论 脓毒症大鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体途径被激活,泛素及泛素化蛋白高水平表达表明进入泛素-蛋白酶体途径底物显著增多,进而导致骨骼肌蛋白大量消耗。     

2023年“第七届癌性恶病质协会学术年会”热点内容介绍

2023年“第七届癌性恶病质协会学术年会”对恶病质临床诊断分级进行更新,并探讨寻找更多的临床评估指标。此外,大会重点关注癌性恶病质基础研究领域,内容包括多器官影响机制、骨骼肌纤维化与萎缩、脂肪组织溶解及营养素代谢等机制研究。     

核因子-κB在癌性恶病质形成中的作用

目的研究核因子(NF)-κB和促炎细胞因子在癌性恶病质形成中的作用以及吲哚美辛(IND)对其调控作用.方法 30只雄性BALB/c小鼠随机分为5组A组为对照组,B组为荷瘤加生理盐水组,C组为荷瘤加IND(0.25 mg/kg)组,D组为荷瘤加IND (0.5 mg/kg)组;E组为荷瘤加 IND (2.0 mg/kg)组.利用鼠结肠腺癌26细胞株皮下接种诱导癌性恶病质.恶病质出现后,皮下分别给予生理盐水以及不同剂量IND.1周后检测动物血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-6)浓度和脾脏中NF-κB活性.整个实验过程中跟踪监测动物体重以及腓肠肌重量改变.结果所有接种动物均出现恶病质,食物摄入量组间无明显差异.第16天B组体重为A组的82.0% (P<0.01),腓肠肌重量下降了28.7% (P<0.01),血清TNF-α和IL-6浓度显著升高(P<0.01).0.5 mg/kg的IND腓肠肌重量显著增加(P<0.01),血清TNF-α(P<0.05)和IL-6水平降低(P<0.01).凝胶电泳迁移率分析显示B组小鼠脾脏NF-κB活性较A组显著增加(P<0.01), IND降低NF-κB活性,在0.5 mg/kg剂量组最为显著(P<0.01).且脾脏NF-κB活性与细胞因子浓度呈正线性相关(rTNF-α=0.918, PTNF-α=0.028;rIL-6=0.884, PIL-6=0.046).结论癌性恶病质的产生与受NF-κB调控的细胞因子TNF-α和IL-6水平相关.IND可以降低NF-κB活性和细胞因子水平,缓解恶病质症状.     

肿瘤性恶液质的治疗对策

肿瘤性恶液质是恶性肿瘤晚期患者极度消瘦衰竭的一种临床表现,临床上近80％晚期肿瘤患者会出现恶液质,近20％肿瘤患者直接死于恶液质。肿瘤性恶液质表现为厌食、体重减轻、脂解作用增强、骨骼肌分解代谢增加而蛋白合成代谢减少。其最佳治疗是治愈原发肿瘤疾病从而可以彻底缓解代谢失调,不幸的是很多进展期及晚期肿瘤患者并不能完全治愈,而且,肿瘤性恶液质的治疗往往在化疗后状态下实施,既顾虑到瘤体的生长,又要涉及机体高分解代谢的改善。因此,单纯的营养治疗并非能够凑效。现结合文献就有关恶液质治疗加以探讨。     

肌肉游离移植后肌肉萎缩盒F基因和肌肉环状指基因1 mRNA的表达

目的 检测肌肉移植后肌肉萎缩盒F基因(muscle atrophy F-box,MAFbx)和肌肉环状指基因1(mLIsele ring finger 1,MuRFI)mRNA表达的变化,并探讨其与肌肉萎缩和肌肉功能的关系.方法 建立大鼠股薄肌原位游离移植的模型,以自身为对照,应用real-time PCR、电生理等方法,观察MAFbx和MuRFI mRNA表达、肌肉萎缩与肌肉功能的演变,统计学分析三者之间的相关性. 结果肌肉移植术后,肌纤维横截面积、肌肉湿重维持率、肌肉最大单收缩力和肌肉强直收缩力维持率均先降低后增加,术后晚期时仍低于对照侧水平(P<0.05)6肌肉移植后MAFbx和MuRFI mRNA在术后3～4周时达到最高然后逐渐降低,最高达对照侧的7.1倍和4.1倍,术后晚期时仍持续低水平高表达,与对照侧比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 肌肉移植后MAFbx和MuRFI mRNA的持续高表达,是肌肉萎缩引起肌肉功能降低的重要联系点.二者可以作为骨骼肌萎缩早期的标记物,也可以作为药物干预的潜在靶点用于治疗肌肉萎缩.     

高糖对大鼠肾系膜细胞泛素及泛素化蛋白表达的影响

目的 探讨高糖对大鼠肾系膜细胞泛素及泛素化蛋白表达的影响。 方法 将大鼠HBZY-1肾系膜细胞进行体外培养,高糖作为刺激因子,分别设正常对照组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖组（10、20、30 mmol/L葡萄糖）、甘露醇组。刺激12、24、48 h后,分别用实时定量PCR法和Western印迹法检测各组系膜细胞泛素mRNA和泛素化蛋白的表达。 结果 泛素化蛋白多以大分子蛋白为主。与正常对照组比较,30 mmol/L葡萄糖刺激24 h和48 h后泛素化蛋白的表达分别增加36％和52％（均P ＜ 0.01）;20 mmol/L和30 mmol/L葡萄糖作用48 h泛素化蛋白的表达分别增加31％和52％（均P ＜ 0.01）;高糖作用24、48 h,泛素mRNA的表达显著增加（均P ＜ 0.05）。 结论 高糖呈时间浓度依赖性地促进大鼠肾系膜细胞泛素mRNA及泛素化蛋白的表达,增加泛素蛋白酶体途径活性。     

人参总皂苷对体外培养肌管形态及Atrogin-1表达的影响

目的：慢性肾衰竭（CKD）尤其进入终末期透析的患者常并发以骨骼肌蛋白质-能量消耗为特征的营养不良,研究表明Atrogin-1激活是肌肉蛋白分解的关键步骤。本实验通过培养肌细胞,观察人参总皂苷的干预下,对糖皮质激素作用下肌细胞形态改变及Atrogin-1的表达的影响。方法：培养小鼠肌原细胞C2C12并使之融合成肌管,以不同浓度的地塞米松（0～10μm）和人参总皂苷（100μmol/L）刺激肌管后,镜下观察肌管形态改变,Westernblot检测Atrogin-1蛋白表达水平。结果：糖皮质激素地塞米松作用下,可剂量依赖性地使肌管变细,肌管Atrogin-1蛋白表达水平显著增高;在人参总皂苷干预后,肌管形态较地塞米松组增粗,同时肌管Atrogin-1蛋白降低（P〈0.05）。结论：人参总皂苷能够改善地塞米松作用下肌肉消耗,并下调肌管Atrogin-1蛋白表达水平。     

泛素蛋白连接酶E3A在乳腺癌细胞中作用的蛋白质组学与生物信息学分析

目的:通过蛋白质组学与生物信息学方法探讨泛素蛋白连接酶E3A(UBE3A)在乳腺癌细胞中的生物学功能。方法:将三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231分别转染shRNA-UBE3A片段(UBE3A敲低组)与阴性对照shRNA片段(对照组)后,采用双向电泳(2-DE)法及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF-MS/MS)对两组细胞的差异蛋白质分离和鉴定;采用DAVID Functional Annotation及String在线工具对差异表达蛋白质进行生物信息学分析。结果:2-DE及MALDI-TOF-TOF-MS/MS分离和鉴定出28个差异蛋白,其中UBE3A敲低组相对于对照组有4个表达上调,24个表达下调。与DAVID数据库有23个相匹配,其中能够进行生物学途径、细胞成分、分子功能注释分类的蛋白质分别为23个(100%)、20个(87.7%)和23个(100%),而在泛素-蛋白酶体系统及糖代谢方面分类比较明确;String分析显示这些差异蛋白中有23个存在直接或间接的联系。结论:UBE3A可能通过泛素-蛋白酶体系统功能与糖代谢途径参与乳腺癌细胞生物学行为的调控。     

下调泛素蛋白连接酶E3A表达对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨降低泛素蛋白连接酶E3A(UBE3A)的表达对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:采用慢病毒载体分别将构建的3条UBE3A shRNA序列转染人三阴性乳腺癌细胞株MDAMB-231,检测干扰效率后,筛选出干扰效率最高的序列用于实验。分别采用CCK8法、Transwell小室实验、流式细胞术观察MDA-MB-231细胞经所选用的UBE3A shRNA序列转染后侵袭能力、增殖能力与细胞周期的变化,以转染阴性对照组序列和无处理的MDA-MB-231细胞作为阴性对照及空白对照。结果:成功构建UBE3A shRNA慢病毒表达载体并筛选出干扰率最高的UBE3A shRNA序列(UBE3A基因和蛋白表达抑制率分别为89.5%、45.3%)。与空白对照组细胞比较,下调UBE3A的MDAMB-231细胞的增殖、侵袭能力均明显降低,且细胞周期出现明显的S期阻滞(均P0.05);阴性对照组细胞各项观察指标无统计学差异(均P0.05)。结论:下调UBE3A表达能诱导三阴性乳腺癌细胞的细胞周期阻滞,从而抑制其增殖与侵袭能力,提示UBE3A在三阴性乳腺癌细胞的恶性生物学行为中发挥了重要作用。     

Are cytokines possible mediators of cancer cachexia?

The possible role of cytokines in the development of cancer cachexia was reviewed from the literature. Tumor necrosis factor (TNF)-alpha, interleukin (IL)-1, IL-6, interferon (IFN)-gamma and leukemia inhibitory factor (LIF) can elicit many but not all host changes seen in cancer cachexia, including loss of appetite, loss of body weight, and the induction of acute-phase protein synthesis. However, these cytokines are not always demonstrated in the circulation of the cancer patients. The inability to detect circulating cytokines may be due to their low rate of production, their short half-life and rapid clearance from plasma, or their mode of action (autocrine or paracrine). Different cytokines are induced to stimulate the same response. This is very different from hormonal regulation, where a hormone acts on a cell directly through a specific receptor without depending on other mediators. Specific antibodies including anti-IFN-gamma, anti-TNF and anti-IL-6 antibodies, as well as the cyclooxygenase inhibitor indomethacin, have been used to reverse cancer cachexia. Overlapping physiologic activities make it unlikely that a single substance is the sole cause of cancer cachexia. It is hoped that further investigation on other cytokines and their possible relationships with hormones will help to clarify the mechanisms of cancer cachexia in the near future.This work was supported by a grant from the Japan-Sweden Foundation in 1991.     

程序性死亡配体1在肝癌小鼠的表达及鳖甲煎丸的抑制作用

目的:研究程序性死亡配体1(PD-L1)在肝癌小鼠的表达,探讨鳖甲煎丸抑制肝癌发生的作用机制。方法:健康雄性SPF级C57BL/6小鼠24只,随机分为对照组、模型组和鳖甲煎丸组,每组8只。采用高脂高糖饮食联合腹腔注射四氯化碳(CCl4)制备小鼠肝癌模型;自第6周开始,鳖甲煎丸组给予鳖甲煎丸(1.365 g/kg)灌胃,1次/d;至第24周处死小鼠,计算各组小鼠肝脏的相对质量,记录肝脏表面结节数,测定最大结节直径,取肝组织行HE染色,并分别用荧光定量PCR和Western blot检测PD-L1 mRNA和蛋白表达。结果:模型组小鼠肝脏的相对质量、表面结节数量和结节最大直径,较对照组比较均增加(P＜0.05);与模型组比较,鳖甲煎丸组小鼠肝脏的相对质量、表面结节数量和结节最大直径均减少(P＜0.05);模型组小鼠肝组织镜下可见肝小叶结构紊乱,有增生性结节及癌结节,肝细胞脂肪变性明显,可见核深染、核分裂,伴炎症细胞浸润及点、片状坏死灶,鳖甲煎丸组的组织病理学改变,较模型组减轻;模型组小鼠肝组织PD-L1 mRNA和蛋白表达,较对照组升高(P＜0.05),与模型组比较,鳖甲煎丸组PD-L1 mRNA和蛋白表达均降低(P＜0.05)。结论:PD-L1在肝癌小鼠高表达,鳖甲煎丸抑制肝癌发生的作用机制包括抑制PD-L1表达、降低肝癌细胞免疫逃逸,并改善肿瘤免疫微环境。     

癌症患者恶病质脂肪酸代谢研究进展

癌症预计成为人类健康的头号杀手。近年来关于癌症营养代谢的研究迅速增多,包括葡萄糖、氨基酸和脂肪酸等营养物质对肿瘤细胞增殖和扩散的影响。恶病质是影响癌症患者预后的关键因素,约80%的癌症患者罹患恶病质导致癌症治疗失败。针对恶病质的药物治疗和饮食治疗目前还缺乏临床研究。本综述主要通过脂肪酸对肿瘤细胞增殖和转移的影响以及恶病质脂肪酸相关药物及饮食治疗对胃癌恶病质脂肪酸代谢研究进展进行综述。     

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目的：前瞻性地研究癌性恶液病人的机体组成成分变化。方法：将54例恶性肿瘤病人依体重指数（BMI）分为两组：BMI≤18为A组，BMI＞18为B组，利用机体组成分析仪（InBody 3.0,Biospace Co.)对两种病人进行测定，并以节段多频生物电阻抗法自动分析受检者的各项机体组成成分。结果：A组肿瘤病人各项机体组成成分与理想体重的比值皆明显低于B组，两组间的差异有极显著意义（P＜0．01）。结论：癌性恶液质病人的机体组成变化不但有显著的脂肪群丢失，还有大量瘦肉群与体细胞群的丢失。癌性恶液质病瘦肉群的丢失，可能会导致病人生活质量下降、机体功能障碍及生存时间缩短。因此，尽早地监测肿瘤病人营养状况变化、及时予以营养支持干预，都将有效地将改善肿瘤病人的预后。     

川芎嗪对失神经骨骼肌萎缩大鼠FoXO3a、MAFbx以及MuRF1表达的影响

目的研究川芎嗪对失神经骨骼肌萎缩中FoXO3a、MAFbx及MuRF1表达的影响。方法 8周龄雌性SD大鼠54只,体重(200±10)g。随机分为3组,即正常对照组(A组,n=6)、失神经对照组(B组,n=24)、干预组(C组,n=24)。B、C组实验动物制备右下肢失神经腓肠肌动物模型,C组于模型制备后每日腹腔注射川芎嗪注射液80 mg/(kg.d),B组每日腹腔注射等剂量生理盐水;A组实验动物不作任何处理。取A组实验动物以及造模后2、7、14、28 d B、C组实验动物各6只,处死取其双侧腓肠肌称湿重,计算腓肠肌肌湿重比;另取右侧肌组织采用RT-PCR及Western blot检测各时间点FoXO3a、MAFbx、MuRF1 mRNA和蛋白表达水平。结果与A组比较,随着大鼠失神经时间延长,B、C组腓肠肌肌湿重比逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.05);造模后7、14、28 d,C组腓肠肌肌湿重比高于B组,且差异有统计学意义(P<0.05)。B、C组造模后7、14、28 d,FoXO3a、MAFbx、MuRF1 mRNA和蛋白表达水平均较A组高,C组各时间点均较B组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论川芎嗪可能通过降低FoXO3a、MAFbx以及MuRF1 mRNA和蛋白表达水平进而延缓失神经骨骼肌萎缩。