微量乙酰靛酚比色法测量胆碱酯酶活性

微量乙酰靛酚比色法是采用脂溶性底物乙酰靛酚测量胆碱酯酶活性的方法,适用于膜结合胆碱酶、抗原抗体复合物中的胆碱酯酶等必需用脂溶性底物测定胆碱酯酶活性的实验.     

以氯化丁酰胆碱为底物测定假性胆碱酯酶活性的微量羟胺比色法

目的：建立适用测定假性胆碱酯酶（ＢＣｈＥ）活性的微量羟胺法。方法：酶促反应用人血清ＢＣｈＥ,选择优化以氯化丁酰胆碱为底物测定ＢＣｈＥ活性微量羟胺法的条件并进行了方法学评价。结果及结论：本法底物丁酰胆碱最适浓度为９ｍｍｏｌＬ－１,最佳反应时间为３０ｍｉｎ,最适比色波长为４９２ｎｍ,灵敏度是以乙酰胆碱做底物的微量羟胺法的２倍,呈色物质比５,５－二硫基双－２－硝基苯甲酸（ＤＴＮＢ）法中的稳定,重复性好,操作简单,试剂及酶用量少,适用于临床检验及实验研究中ＢＣｈＥ活性测定     

人参皂甙对培养脑神经细胞胆碱酯酶活性的促进作用

神经细胞培养的第3天或第5天给人参皂甙(87μg/ml)可使培养第10天的神经细胞的胆碱酯酶活性显著增强和高峰提前;但培养到第14天时,培养第3天给人参皂甙比培养第5天给人参皂甙的神经细胞胆碱酯酶活性强约2.5倍.培养第3天给人参皂甙比培养第5天给人参皂甙对神经细胞胆碱酯酶活性的增强作用更好.细胞分裂抑制剂氨甲基喋呤能显著地减弱培养神经细胞胆碱酯酶活性,而人参皂甙能减轻氨甲基喋呤对培养神经细胞胆碱酯酶活性的减弱.初步认为,人参皂甙促进培养神经细胞胆碱酯酶活性的增强是因为它促进了神经细胞的分化成熟、分裂增殖和存活.     

紫外线照射自血回输疗法对梭曼染毒家兔全血胆碱酯酶活性的影响

目的 :探讨紫外线照射自血回输疗法 (AUVIB)对梭曼染毒家兔全血胆碱酯酶 (ChE)活性的影响。方法 :健康家兔 2 4只 ,随机分为 4组 :阴性对照组 ,中毒组 ,常规治疗组及AUVIB治疗组 ,观察染毒家兔血常规及胆碱酯酶活性变化。结果 :AUVIB治疗组ChE活性明显高于中毒组及常规治疗组 (P <0 .0 5 )。结论 :AUVIB疗法显著提高全血ChE活性 ,可应用于梭曼急性中毒的治疗。     

严重多发伤患者早期血清胆碱酯酶活性检测的意义

血清胆碱酯酶（ChE）活性主要用于有机磷中毒和慢性肝病的评价，但尚未见在严重创伤中变化的报道。笔者检测了45例严重多发伤患者伤后24h内血清ChE的活性，探讨其与病情严重度及预后的关系。     

γ线照后大鼠胃组织乙酰胆碱含量胆碱酯酶活性及平滑肌对乙酰胆碱反应性的变化

本文以大鼠为实验对象,观察了γ线8Gy照后胃组织内乙酰胆碱含量、胆碱酯酶活性及平滑肌对乙酰胆碱反应性的变化。结果表明,照后1/24～l天胃组织内乙酰胆碱含量明显下降,3天趋向正常,5天基本恢复至照前水平。胃组织的胆碱酯酶活性在照后l/24～5天基本无改变。在同一剂量照后1h,胃窦平滑肌对乙酰胆碱的反应与照前近似,l天后开始减弱,3天后明显下降,与正常相比有非常显著差异。     

胆碱酯酶活性自动电位滴定测量法

自动电位滴定法已用于胆碱酯酶活性的测量。国产ZD-2型自动电位滴定计用于胆碱酯酶活性测定性能良好。此法非常适用于酶的动力学实验,精确度高,复演性好。缺点是样品需逐个地进行测量,不适于样品数多的实验。样品数多时可采用常量或微量羟胺比色法。乙酰胆碱在胆碱酯酶的催化下水解成胆碱和乙酸。标准氢氧化钠溶液在自动电磁阀的控制下,自动滴入反应液,中和生成的乙酸,使反应系统维持在给定的pH值。酶活性     

人脑乙酰胆碱酯酶活性微量测定法

乙酰胆碱酯酶(AChE)是神经系统的重要水解酶,对维护神经系统的正常功能具有重要的生理意义。已发现在某些疾病状况下脑组织中AChE活性发生变化。因此测定AChE活性可作为某些疾病的辅助诊断。     

去甲肾上腺素对神经细胞胆碱酯酶活性的促进作用

鸡胚脑神经细胞培养的第5天给去甲肾上腺素(NE)2μg/ml,培养第10天的神经细胞胆碱酯酶活性为对照的2.3倍,且较对照提前3天达到高峰。在神经细胞培养的第5天同时给 NE2μg/ml 和人参皂甙87μg/ml 时,第7天的胆碱酯酶活性为单给 NE的190.7%。氨甲基喋呤能明显降低神经细胞的胆碱酯酶活性,NE 能减轻氨甲基喋呤对神经细胞胆碱酯酶活性的降低。初步认为 NE 促进培养神经细胞胆碱酯酶活性的增强是因为它促进了神经细胞的成熟和胆碱酯酶的合成。     

前庭刺激对红细胞和脑乙醚胆硷酯酶活性的影响

观察了２１名海员在海上航行平稳和颠簸明显时期红细胞乙酰胆硷酯酶活性的变化。结果表明颠簸所造成的前庭刺激可引起该酶活性降低（Ｐ＜０．０５）。动物实验发现，大鼠接受正负交变加速度旋转刺激后，红细胞和丘脑、延脑内乙酰胆硷酯酶活性均明显降低（Ｐ＜０．０１）。结果表明，人和动物机体受到异常前庭刺激时红细胞与中枢某些部位的乙酰胆硷酯酶活性发生的变化类似。     

亲和层析法纯化蚯蚓胆碱酯酶

将Sepharose 4B经溴化氰活化接上己二胺,再与乙酰胆碱酯酶的可逆性抑制剂(间-羧苯二甲基碘乙基季胺盐)偶联,作为亲和层析凝胶。蚯蚓(Eiseaia foetida)从养殖场买回后,用水冲净,室温饥饿2～4天。用5%硫酸铵在4℃制成匀浆,13,000g离心。上清液用36%硫酸铵沉淀及Sephadex G-200柱处理后,通过亲和层析柱纯化,胆碱酯酶活性提高了1,084倍。     

沙林对猴全血乙酰胆碱酯酶抑制的老化及重活化

目的研究沙林对猴全血乙酰胆碱酯酶（AChE）的抑制,磷酰化酶的老化速率及肟类药物的重活化作用。方法 5,5-连硫代-双-2-硝基苯甲酸（DTNB）法测定AChE活性。结果沙林抑制猴全血AChE的IC50值为6.3×10-8mol/L,IC90值为1.5×10-7mol/L。在0.1、0.33和1 mmol/L的浓度下,氯解磷定对沙林抑制猴全血AChE的重化活率分别为16%、45%和83%;双复磷对沙林抑制猴全血AChE的重化活率分别为18%、39%和70%;碘解磷定对沙林抑制猴全血AChE的重化活率分别为14%、41%和72%。采用1 mmol/L的氯解磷定为重活化剂时,沙林抑制猴全血AChE磷酰化酶的半老化时间约为12 h。结论沙林中毒后应尽早使用氯解磷定等肟类重活化剂。在低浓度0.1 mmol/L时,双复磷重活化效果最好;随着不同重活化剂浓度的增加,氯解磷定显示出较好的重活化效果。氯解磷定为重活化剂时,急性中毒症状控制后,建议应在12 h内重复使用。     

一个新的可逆性胆硷酯酶抑制剂——二甲氨基甲酸-3-叔丁基-4-〔2-(1-哌啶基)乙氧基〕苯酯

本文报告了我所自己合成的可逆性胆硷酯酶抑制剂——二甲氨基甲酸-3-叔丁基-4-〔2-(1-哌啶基)乙氧基〕苯酯(代号"8294")与生理对抗剂或胆硷酯酶重活化剂伍用,对不同神经性毒剂中毒的预防效价、安全系数、有效时间以及与催醒宁("705")比较等所进行的观察.结果显示,"8294"比"705"的毒性小,安全系数大,效价高,有效时间长.     

试管内肿瘤细胞集落形成法的建立及其用于药物抗肿瘤活性研究

本文建立了试管内软琼脂小鼠L_(1210)、P_(388)细胞集落形成法,并与平皿和24孔板软琼脂集落形成法进行了比较,肯定了试管法具有用肉眼计集落数、简便、快速、经济、污染率低,用药量少等优点.本法的集落形成率(PE)平均为0.67±0.17.用本法评价了阿霉素等5种临床抗癌药对抗L_(1210)、P_(388)细胞的作用,其剂量-反应曲线呈指数性直线.用IC_(50)(μg/ml)表示抗肿瘤效应,以阿霉素和氮芥作用最强,其次顺铂、卡氮芥和三尖杉酯碱作用最弱.试管法与平皿法的结果一致.     

胆碱酯酶重活化剂PAM类构型、构象问题

本文参考X-衍射数据,采用MNDO程序计算了不同构型、构象PAM类的生成热,结合核磁共振数据讨论了PAM类构象等问题.结果表明,PAM类在水溶液中:顺式体肟基可以自由旋转,任何一种构象都可能成为药效构象;反式体肟基本不可能存在稳定的平面构象,其药效构象只能是优势构象.用MNDO程序中反应途径的计算法,还计算了顺、反式肟基构型相互转变的势垒,为探讨PAM类重活化机理提供了一定的参考.     

固相放射免疫沉淀-聚乙二醇分析法检测乙型肝炎表面抗体的实验研究及其应用

为提高固相放射免疫法(SPRIA)检测抗-HBs的敏感性和特异性,我们应用固相放射免疫沉淀-聚乙二醇分析法(SPRIPEGA)进行检测抗-HBs的实验研究,并对新生儿接种乙肝疫苗后的抗-HBs应答进行了检查分析.(1)由SPRIA的两步法简化为一步法;(2)以10%以上的胎牛血清封闭可明显降低非特异反应;(3)~(125)I-HBsAg稀释液中含有4%PEG可明显提高方法的敏感性,完全可与Abbott药盒媲美;(4)必要时,可在1h得出结果;(5)用SPRIPEGA检查了161例新生儿接种乙肝疫苗一年内的抗-HBs应答变化,三剂疫苗后20μg和10μg组的抗-HBs应答率分别为100.0%(理论值95.0～100.0%)和97.3±1.9%,GMT分别为1∶448.9±5.9和1∶217.8±8.2.