再生障碍性贫血患儿HLA-DRBl＊15表达及其与免疫抑制治疗疗效的关系

本研究探讨再生障碍性贫血（AA）患儿HLA—DR基因表达情况及其与免疫抑制治疗疗效的关系，评价HLA—DRB1＊15基因型检测的临床意义。采用SSP—PCR方法对40例（特发性33例，继发性7例）获得性AA儿童和107名正常对照人群进行HLA—DR位点基因检测，其中32例AA患儿接受了免疫抑制治疗（其中强化免疫抑制治疗24例，单纯CsA治疗8例），比较AA患儿和健康人群HLA—DR基因表达差异，观察AA儿童HLA—DRBl＊15表达与免疫抑制治疗疗效、疾病复发的关系。结果显示，特发性AA患儿HLA—DRBl＊15（＋）率为5l、5％（17／33），较正常对照人群（20．6％）显著增高（P〈0．01），7例继发性AA患儿均为}玎LA—DRBl＊15（-）。HLA—DRBl＊15（＋）组AA患儿经免疫抑制治疗后6个月有效率和完全缓解（CR）率分别为93．8％、87、5％，而在HLA—DRBl＊15（-）组分别为56．3％和31．3％，两组比较差异均具有极显著意义（P〈0．01）。5例复发患儿均为HLA—DRBl＊15（＋）。结论：AA患儿HLA—DRBl＊15基因表达频率较正常人群显著增高，HLA—DRBl＊15（＋）AA患儿对免疫抑制治疗反应好，疾病完全缓解率高。     

广东地区CML患者中HLA-A,B,DRB1的表达与分析

为了调查慢性髓系白血病（CML）患者中HLA—A、B、DRB1基因多态性的表达，探讨HLA与CML之间的可能关联，采用DNA扩增基础上的反向序列特异性寡核苷酸杂交（PCR—RSSO）技术，对广东地区293例CML患者和随机同期采集的406名汉族健康献血者的HLA—A、B、DRB1位点进行基因多态性分型，并对2组间基因频率进行了比对分析。结果显示：CML组HLA—A＊24基因频率为15．53％，显著低于对照组22.09％（RR=0．63，P=0．005），HLA—B＊13基因频率为10．41％，与对照组6．74％相比则显著增高（RR=1.68，P=0.016），HLA—DRB1＊14基因频率为7．51％，与对照组11．89％相比显著降低（RR=0．58，P=0．008）。结论：HLA—A＊24、HLA—DRB1＊14在广东地区CML患者中表达较正常人明显减低，HLA—B＊13在广东地区CML患者中表达较正常人明显升高。HLA—A＊24、HLA—DRB1＊14是否为广东地区CML患者的保护性基因标记及HLA—B＊13是否为其易感性基因标记尚需进一步研究明确．     

人类白细胞抗原基因与重症血液病的相关性

目的研究HLA-A、B、DRB1基因与5种常见重症血液病的相关性。方法采用序列特异性引物PCR（polymerase chain reaction with sequence-specific primers，PCR-SSP）技术，对368例血液病患者进行HLA分型，其中急性淋巴细胞白血病（ALL）53例、急性髓细胞白血病（AML）105例、慢性髓细胞白血病（CML）109例、骨髓增生异常综合征（MDS）42例、再生障碍性贫血（AA）59例，并与1000份健康新生儿脐带血进行比较，并计算相对危险度。结果在ALL患者中DRB1＊14的等位基因频率为10．38％，高于对照组的4．70％，差异有统计学意义[r=6．849，P=0．009，相对危险度（RR）=2．348]；而B＊46和DRB1＊09的等位基因频率分别为1．89％和6．60％，显著低于对照组的6．75％和13．15％，差异有统计学意义（B＊46的r=3．914、P=0．048、RR=0．266，DRB1＊09的Х^2=3．86、P=0．049、RR=0．467）。在AML患者中B＊51的等位基因频率为10．48％，高于对照组的6．80％，差异有统计学意义（Х^2=3．869，P=0．049，RR=1．604）；在CML患者中A＊29和DRB1^＊14的等位基因频率分别为2．75％和8．72％，高于对照组的0．95％和4．70％，差异有统计学意义（A＊29的，Х^2=4．226、P=0．040、RR=2．951，DRB1＊14的，Х^2=6．556、P=0．010、RR=1．936）。在MDS患者中A＊01、B＊54和B＊57的等位基因频率分别为12．07％、12．07％和6．90％，高于对照组的4．10％、2．80％和1．20％，差异有统计学意义（A＊01的Х^2=6．832、P=0．009、RR=3．21，B＊54的Х^2=13．345、P=0．000、RR=4．765，B＊57的P=0．007、RR=6．099）。在AA患者中B＊13、B＊54和DRB1＊09的等位基因频率分别为17．86％、8．04％和20．34％，高于对照组的11．50％、2．80％和13．15％，差异有统计学意义（B＊13的，Х^2=4．107、P=0．043、RR=1．673，B＊54的Х^2=8．071、P=0．004、RR=3．033，DRB1＊09的Х^2=4．916、P=0．027、RR=1．686）；而DRB1＊03的等位基因频率为0．85％，低于对照组的5．10％，差异有统计学意义（Х^2=4．355，P=0．037，RR=0．159）。结论不同血液病分别与不同HLA基因有显著的相关性，这对血液病的病因研究有重要意义。     

中医瘀血体质与HLA—Ⅱ类基因相关性研究

目的：研究中医瘀血体质与HLA—Ⅱ类基因（DPB1、DRB1、DQB1）多态性的关系。方法：采用PCR—SBT（sequence—basedtyping）分型方法对正常体质、瘀血体质人群样本进行DPB1、DRB1、DQB1基因分型。比较组间各等位基因表型频率（PD并计算相对危险度（RR）。结果：与正常质组比较，瘀血质组DRB1＊15011、DRB1＊04051、DQB1＊05021表型频率显著降低（P=0．04、0．01、0．05）；DRB1＊1405、DRB1＊14071、DQB1＊03032、表型频率显著升高（P=0．04、0．02、0．02）。结论：HLA基因与中医体质类型有一定关联，为中医体质的免疫遗传学研究提供依据。     

糖尿病视网膜病变与HLA—A、B和DRB1基因相关性的研究

目的研究HLA—A、B和DRB1基因与糖尿病视网膜病变的相关性。方法收集48名临床诊断为糖尿病视网膜病变（DR）患者的血样，采用rSSO HLA流式磁珠分型方法进行HLA—A、B和DRB1基因定型．统计DR患者HLA—A、B和DRB1三个基因座的基因频率；并引用以往本实验室调查的汉族健康对照人群的HLA基因频率数据，采用Woolf法计算相对危险度值。结果48例DR患者中。HLA—A、B基因频率的分布与正常对照组无显著差异．而DR患者HLA-Ⅱ类DRB1基因．DRB1＊01基因频率显著高于正常对照组．而DRBI＊12基因频率显著低于正常对照人群，计算RR值分别为5．32和0．34。结论DR患者HLA—A、B基因频率分布与正常对照人群无显著差异，但HLA—DRB1基因与DR具有相关性。     

慢性乙型肝炎患者HLA—A、DRBl基因多态性检测意义

[目的]了解与乙型肝炎慢性化有关的HLA—A、DRBl等位基因多态性。[方法]用基因芯片分型方法分析比较56例慢性乙型肝炎患者与146例正常人HLA—A、DRBl等位基因的多态性。[结果]HLA—A位点中的HLA—A*02、11、24与HLA—DRBl位点中的HLA—DRBl*12、09、04为正常人群常见等位基因。慢性乙型肝炎患者组HLA—A*02(43．8％ vs 29．1，OR：1．89，P=0．005，95％CI：1．21—2．95)与HLA—DRBl*07(10．7％ vs 5．1％，OR：2．21，P=0．04，95％CI：1．02—4．79)、43．8％ vs 29．1％，HLA—DRBl*08(16．1％vs6．8％，OR：2．60，P=0．004，95％CI：1．35—5．02)、HLA—DRBl*11(15．2％vs5．8％，OR：2．89，P=0．002，95％Cl：1．46—5．74)的出现频率较正常对照组明显升高。慢性乙型肝炎患者组HLA—DRBl*13出现频率呈下降趋势，无统计学意义。[结论]HLA—A*02与HLA—DRBI*07、08、11可能是慢性乙型肝炎的易感基因，可以作为慢乙肝预后转归的参考指标。     

HLA-I类基因与白血病相关性研究

本研究目的是从常见类型白血病群体的HLA多态性分布特征探讨白血病与HLA-Ⅰ类基因的相关性。采用序列特异性引物扩增方法（SSP—PCR）检测了605例白血病患者（ALL189例、AML184例、CML232例）的HLA-A、B、C基因特异性，以900份脐血库资料作为正常群体对照。结果发现，在急性淋巴细胞性白血病（LL）患者中HLA—A＊26、A＊68、B＊56的基因频率分别为4．46％、2．65％和1．17％，明显高于对照组（2.31％、0．95％和0．22％）；Cw＊06基因频率（3．64％）明显低于对照组（11．65％）。在急性髓性白血病（AML）患者中HLA—A＊01、B＊37基因频率（9．41％、3．60％）明显高于正常对照（3．57％、1．75％），A＊33、B＊51基因频率（3．60％、4．73％）明显降低（对照：7．64％、7．93％）；在慢性髓性白血病（CML）患者中HLA-A＊32、B＊27、B＊44、B＊54、B＊55基因频率分别为2．18％、3．96％、5．06％、4．63％和2．84％，明显高于正常对照（0．84％、2．04％、3．07％、2．44％和1．29％）。结论：各类白血病分别与不同的HLA基因有明显的相关性，这对白血病发病机制的研究有重要意义。     

慢性粒细胞性白血病与HLA等位基因多态性的相关性

目的探讨慢性粒细胞性白血病（CML）的易感性与HLA等位基因多态性的相关性。方法采用聚合酶链反应序列特异性引物（PCR—SSP）分型技术对46例CML患者进行HLA—A、B、DRB1基因分型，并与7418例健康对照的分型结果进行对比。结果CML患者HLA—A^＊30、B^＊45、B^＊81、DRB1^＊09基因频率较对照组升高（P〈0．05），HLA—A^＊03、DRB1^＊12、DRB1^＊13基因频率降低（P〈0．05），差异有显著性。结论HLA—A^＊30、B^＊45、B^＊81、DRB1^＊09等位基因与CML相关，HLA—A^＊03、DRB1^＊12、DRB1^＊13可能具有保护作用。     

糖尿病视网膜病变与HLA-A、B和DRB1基因相关性的研究

目的研究HLA—A、B和DRB1基因与糖尿病视网膜病变的相关性。方法收集48名临床诊断为糖尿病视网膜病变（DR）患者的血样，采用rSSO HLA流式磁珠分型方法进行HLA—A、B和DRB1基因定型．统计DR患者HLA—A、B和DRB1三个基因座的基因频率；并引用以往本实验室调查的汉族健康对照人群的HLA基因频率数据，采用Woolf法计算相对危险度值。结果48例DR患者中。HLA—A、B基因频率的分布与正常对照组无显著差异．而DR患者HLA-Ⅱ类DRB1基因．DRB1＊01基因频率显著高于正常对照组．而DRBI＊12基因频率显著低于正常对照人群，计算RR值分别为5．32和0．34。结论DR患者HLA—A、B基因频率分布与正常对照人群无显著差异，但HLA—DRB1基因与DR具有相关性。     

安徽合肥地区汉族群体HLA基因频率分布

目的分析安徽合肥地区汉族造血干细胞捐献者人类白细胞抗原HLA—A,B,DRB1基因频率的分布特征。方法应用PCR—SSOP和PCR—SSP基因分型技术,对合肥地区1174名造血干细胞捐献者血样进行HLA—A,B,DRB1基因分型,并用统计学方法对基因型频率进行Hardy—Weinberg平衡检验。结果共检出61个基因,合肥地区HLA—A,B,DRB1位点基因频率最高的分别为A＊02（37．3％）,A＊11（20．8％）,A＊24（17．8％）;B＊15（13．8%）,B＊40（17．6％）,B＊13（11．3％）;DRB1＊15（16％）,DRB1＊09（15％）,DRB1＊04（14％）。发现了A＊34和B＊15中的B＊95等在中国人群中比较罕见的基因。结论合肥地区汉族造血干细胞捐献者HLA部分位点的基因频率呈现出地区差异。     

Immunogenetic markers in hemoblastosis

AIM: To establish for hemoblastoses general and individual associations between HLA genes and predisposition or resistance to malignant transformation of hemopoiesis. MATERIAL AND METHODS: Antigens of class I and class II genes were determined by microlymphocytotoxic test and DNA typing (PCR-SSP) in 30 patients with acute myeloblastic leukemia (AML), 47 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL), 52 patients with chronic myeloblastic leukemia (CML), 58 patients with lymphogranulomatosis (LGM) and 224 donors. RESULTS: HLA specificities were elucidated frequency of which was high in all the above nosological entities: Cw7 (RR 2.5 to 5.22), DRB1*11 (RR 2.3 to 4.88). Frequency of antigen B5 was high in three diseases (RR 2.14-2.6). A number of specificities have distribution deviations typical for only one or two diseases (A19--AML and CML, B27--ALL, DRB1*08--AML). The HLA-gene was detected the frequency of which was low in three diseases--DRB1*07 (RR 0.39 to 0.11). Individual preventive HLA genes for AML, ALL, LGM were A2, B8; A1, B8, B40; DRB1*01, respectively. CONCLUSION: Cw7, DRB1*11, B5 are HLA-specificities marking hemopoiesis predisposition to malignant transformation in general. Development into a certain nosological entity depends on combination of general HLA-genes with markers of individual hemoblastosis. DRB1*07 is a general preventive gene. Preventive HLA genes can be also individual for the above hematological diseases.     

散发性阿尔茨海默病易患性与人类白细胞抗原基因频率的相关性

目的探讨人类白细胞抗原HLA-DR2,DRB1*04,DRB1*09基因频率与散发性阿尔茨海默病(SAD)的关系,试图从分子免疫遗传学角度揭示SAD的发病机制。方法SAD组44例(广州市精神病院中筛选),男11例,女33例,年龄59～91岁。正常对照组45例(中山大学附属第二医院保健科体检的自愿健康老年人),男14例,女31例,年龄61～88岁。采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术分别测定44例SAD患者(SAD组)和45例正常老年人(对照组)的HLA-DR2,DRB1*04,DRB1*09基因频率。结果SAD患者中3种基因频数分别为25,5,16;频率分别为28.41%,5.68%,18.18%。而正常老年人中的相应基因频数分别为16,13,19;频率分别为17.78%,14.44%,21.11%。其中HLA-DR2,DRB1*04较对照组差异有显著性意义(χ2=4.002,4.187,P<0.05),DRB1*09差异无显著性意义(χ2=0.050,P>0.05)。结论HLA-DR2可能是SAD的易感基因,而HLA-DRB1*04可能对SAD的发病起到保护作用。HLA-DRB1*09与SAD发病无关联。     

中国北方汉族造血干细胞捐献者人类白细胞抗原-A、B、DRB1基因和单倍型高分辨水平的多态性研究

目的 从高分辨率水平研究中国北方汉族人群人类白细胞抗原(Human Leukocyte Antigens,HLA)-A、B、DRB1基因和单倍型的多态性.方法 采用聚合酶链反应-测序分型方法(Polymerase Chain Reaction-Sequence Based Typing,PCR-SBT)对631名随机北方汉族个体的HLA-A、B、DRB1基冈进行序列分析,进而采用最大似然性方法计算等位基因和单倍型的分布频率.结果 30个HLA-A等位基因中,频率高于0.05的5种常见等位基因A*1101、A*2402、A*0207、A*0201和A*3303的频率总和为69.26%;64个HLA-B等位基因中,频率高于0.05的4种常见等位基因B*4001、B*4601、B*5801和B*1502的频率总和为38.11%,41个DRB1等位基因中,频率高于0.05的7种常见等位基因DRB1*0901、DRB1*1501、DRB1*1202、DRB1*0701、DRB1*0803、DRB1*1101和DRB1*0405的频率总和为59.98%.499条A-B、659条BDRB1和2 426条A-B-DRB1单倍型中,分别有38、39和31条单倍型频率高于0.005,其频率总和分别为59.82%、53.69%和32.38%,A*0207-B*4601、B*4601-DRB1*0901和A*0207-B*4601-DRB1*0901分别为其最主要单倍型.结论 中国北方汉族人群高分辨水平的HLA-A、B、DRB1等位基因和单倍型的多态性数据可作为人类学、法医学、移植配型和疾病相关性研究和应用的参考数据.     

HLA-DRB1基因与湘西土家、汉族人群不明原因反复流产的相关性研究

目的 探讨HLA-DRB1基因多态性与湘西土家族、汉族人群不明原因反复流产(URSA)的遗传关联性.方法 采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,对76例湘西土家族、68例汉族人群URSA患者和82例湘西土家族、75例汉族人群健康对照者的HLA-DRB1等位基因进行分析.结果 ①土家族、汉族URSA组的DRB1*04基因频率显著高于土家族及汉族对照组(RR>1,PC<0.01);DRB1*12的基因频率显著低于对照组(RR<1,PC<0.01).②土家族URSA组的DRB1*07基因频率明显高于汉族URSA组(18.08%比5.28%,PC<0.01).结论 HLA-DRB1*04可能是湘西土家族、汉族人群不明原因反复流产的易感基因,HLA-DRB1*12可能为保护基因.     

斑秃患者HLA-A、B、DRB1基因多态性调查分析

目的 调查河南汉族斑秃患者HLA-A、B、DRB1中低分辨多态性分布,探讨该病与HLA的关联性.方法 收集2007年10月至2008年2月被河南省某医院皮肤科诊断为斑秃的121例河南籍汉族无血缘关系者血液标本,提取基冈组DNA,采用PCR-SSO流式荧光微珠法进行HLA-A、B、DRB1中低分辨检测,统计分析A、B、DRB1等位基因频率,并与本地区24 930份造血干细胞捐献者(对照组)进行对比,u检验分析两组样本间率的差异的显著性.结果 共检测斑秃患者血样121例,其中A位点等位基因频率较高的有A*02(0.2603)、A*11(0.1653)、A*24(0.1240),B位点等位基因频率较高的有B*15(0.2107)、B*13(0.1198)、B*40(0.1074),DRB1位点等位基因频率较高的有DRB1*15(0.2273)、DRB1*07(0.1364)、DRB1*09(0.1198)、DRB1*04(0.1074);在对照组中A位点等位基因频率较高的有A*02(0.2909)、A*11(0.1666)、A*24(0.1570),B位点基因频率较高的有B*15(0.1370)、B*13(0.1316)、B*40(0.1315)、B*51(0.0765),DRB1位点基因频率较高的有DRB1*15(0.1786)、DRB1*07(0.1322)、DRB1*09(0.1302)、DRB1*04(0.1082),两组样本A位点等位基因分布差异无统计学意义;斑秃患者DRB1*12频率低于正常对照组(P<0.05),B*15(62)和DRB1*15基因频率显著高于正常对照组(P<0.05).结论 斑秃患者与正常人群中HLA-A位点等位基因分布差异无统计学意义.DRB1*12可能对于斑秃的发病有抵御作用,B*15(62)和DRB1*15可能为斑秃的易感基因.     

Age-dependent HLA genetic heterogeneity of type 1 insulin-dependent diabetes mellitus.

The association of insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM) with certain HLA alleles is well documented in pediatric patients. Whether a similar association is found in adult-on-set IDDM is not clear, although the disease occurs after the age of 20 in 50% of cases. HLA class II DRB1, DQA1, and DQB1 alleles were studied in 402 type I diabetics and 405 healthy controls (all Caucasian) using oligonucleotide typing after gene amplification. Alleles DRB1*03, DRB1*04, DQB1*0201, DQB1*0302, DQA1*0301, and DQA1*0501 were indeed enriched in diabetics and the highest relative risk was observed in patients carrying both the DRB1*03-DQB1*0201 and the DRB1*0402 or DRB1*0405-DQB1*0302 haplotypes. However none of these alleles, or specific residues, could alone account for the susceptibility to IDDM. Furthermore, there were major differences in HLA class II gene profiles according to the age of onset. Patients with onset after 15 yr (n = 290) showed a significantly higher percentage of non-DR3/non-DR4 genotypes than those with childhood onset (n = 112) and a lower percentage of DR3/4 genotypes. These non-DR3/non-DR4 patients, although presenting clinically as IDDM type 1 patients, showed a lower frequency of islet cell antibodies at diagnosis and a significantly milder initial insulin deficiency. These subjects probably represent a particular subset of IDDM patients in whom frequency increases with age. The data confirm the genetic heterogeneity of IDDM and call for caution in extrapolating to adult patients the genetic concepts derived from childhood IDDM.     

肾综合征出血热与人类白细胞抗原的关联分析

目的探讨人类白细胞(HLA)Ⅰ、Ⅱ抗原与肾综合征出血热易感相关性.方法应用免疫学清学方法检测59例肾综合征出血热患者和60名正常对照者的HLA-Ⅰ类抗原型;以序列特异性引物PCR扩增(PCR/SSP)技术鉴定HLA-DRB1,B3,B4和B5基因型及等位基因频率.结果肾综合征出血热患者组HLA-Ⅰ类A1抗原频率明显高于对照组,两组间频率分别为22%和8%[χ2=4.35P=0.03相对危险(RR)=3.11];患者组DRB1*15和DRB1*16等位基因(即DR2血清型)频率明显高于对照组,37.3%和19.8%,P<0.01;两组间DR51(B5)频率差异更明显,为56%和19%P=0.02.结论上述结果表明HLA-Ⅰ、Ⅱ类抗原型与肾综合征出血热相关,而HLA-DRB1*(15,16)-DRB5单倍型是个体肾综合征出血热(HFRS)易感性的重要遗传标志.