用多聚酶链反应探讨宫颈人乳头瘤病毒感染

目的了解温州地区ＨＰＶ感染与宫颈炎的关系，为防治该病提供依据。方法用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测１２８例慢性宫颈炎及４８例正常宫颈标本组织中的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ，并对ＨＰＶ进行１６、１８型别分析。结果慢性宫颈炎组ＨＰＶ检出率为３２．９％（４２／１２８），ＨＰＶ１６、１８及双重感染（１６＋１８）各占其中的５４％（２３／４８）、１１．９％（５／２４）、１１．９％（５／２４），对照组．ＨＰＶ的检出率为６．３％（３／４８）。两组ＨＰＶ阳性检出率有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论ＨＰＶ感染，尤其ＨＰＶＩ６感染与慢性宫颈炎相关，但与年龄大小无关。     

用PCR检测消化道巨细胞病毒感染

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测５１例消化道疾病患者活检或手术标本的人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）－ＤＮＡ，阳性率９．８０％；采用间接免疫荧光法随机检测其中４１例患者血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ。结果显示：消化道组织巨细胞病毒感染数低于血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性数（Ｐ＜０．０１）；血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ检测中，恶性肿瘤和结肠炎患者ＨＣＭＶ感染均较对照组为高（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）。提示ＰＣＲ是消化道巨细胞病毒感染的特异而敏感的早期诊断方法     

子宫颈组织中人乳头状瘤病毒的PCR检测

①目的探讨人乳头状瘤病毒１６，１８型（ＨＰＶ－１６，ＨＰＶ－１８）感染与慢性宫颈炎、宫颈癌的关系。②方法聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测２２例正常宫颈、５５例慢性宫颈炎、３０例宫颈癌的子宫颈组织。③结果正常宫颈组织中ＨＰＶ－１６，１８的检出率均为０．００％，慢性宫颈炎分别为１８．１８％和７．２７％，宫颈癌分别为５６．６７％和３．３３％．统计学处理表明，宫颈癌组织中ＨＰＶ－１６的检出率明显高于宫颈炎组织（χ２＝１３．６２４，Ｐ＜０．０１），而且Ⅲ度宫颈糜烂组织中ＨＰＶ－１６的检出率也较Ⅰ，Ⅱ度的检出率高，两者比较差异有显著意义（χ２＝１０．５５０，Ｐ＜０．０１），但不同宫颈疾患组织中ＨＰＶ－１８的检出率无统计学意义。④结论子宫颈癌的发生与ＨＰＶ感染密切相关，以ＨＰＶ－１６尤为明显，ＰＣＲ技术是检测组织中ＨＰＶ－ＤＮＡ的敏感、特异的方法     

宫颈癌癌前病变及宫颈癌与HPV感染的关系

目的： 评价宫颈癌前病变及宫颈癌与宫颈人乳头状瘤病毒 （ Ｈ Ｐ Ｖ） 感染的关系。方法： 对１５８ 例宫颈涂片异常患者进行阴道镜下宫颈多点活检同时行宫颈 Ｐ Ｃ Ｒ Ｈ Ｐ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 检测。结果： 慢性宫颈炎、低度鳞状上皮内病变 （ Ｌ Ｓ Ｉ Ｌ） 、高度鳞状上皮内病变 （ Ｈ Ｓ Ｉ Ｌ） 和宫颈癌的 Ｈ Ｐ Ｖ １６／１８ 感染率分别为８６６ ％ 、３４６９ ％ 、６８８９ ％ 和８３３３ ％ , Ｈ Ｓ Ｉ Ｌ 的 Ｈ Ｐ Ｖ １６／１８ 感染率明显高于 Ｌ Ｓ Ｉ Ｌ （ Ｐ＜ ００１） 。 Ｈ Ｐ Ｖ １６／１８ （ ＋ ） 的 Ａ Ｓ Ｃ Ｕ Ｓ 中 Ｈ Ｓ Ｉ Ｌ 检出率明显高于 Ｈ Ｐ Ｖ １６／１８ （ － ） , Ｈ Ｐ Ｖ １６／１８ （ ＋ ） 的 Ｌ Ｓ Ｉ Ｌ 中 Ｈ Ｓ Ｉ Ｌ 检出率明显高于 Ｈ Ｐ Ｖ １６／１８ （ － ） 。结论： 宫颈癌前病变、宫颈癌与 Ｈ Ｐ Ｖ １６／１８ 感染密切相关, 随着病变程度的加重, Ｈ Ｐ Ｖ １６／１８检出率升高, 提示 Ｈ Ｐ Ｖ １６／１８ 为宫颈癌的高危因素。宫颈 Ｐ Ｃ Ｒ Ｈ Ｐ Ｖ １６／１８ Ｄ Ｎ Ａ 的检测可用于 Ａ Ｓ Ｃ Ｕ Ｓ、 Ｌ Ｓ Ｉ Ｌ 患者活检前的筛查。     

乙型肝炎病毒基因多重PCR的临床观测

为探讨多重多聚酶链反应（ＰＣＲ）在慢性乙型肝炎检测中的应用价值，选用ＨＢＶＤＮＡ的Ｓ区、Ｃ区及Ｘ区的３对引物Ｓ１／Ｓ２，Ｃ１／Ｃ２和Ｘ１／Ｘ２，同时扩增ＤＮＡ。结果发现，３个基因区的表达情况不同。７７例慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者ＨＢＶＤＮＡ的检出率分别是Ｓ区６１０％，Ｃ区４５５％，Ｘ区３９０％；且三区联合检出率为７５３％，与单独Ｃ区检出有明显差异（Ｐ＜００５）。提示多重ＰＣＲ能对ＨＢＶＤＮＡ同一模板的各基因区同时扩增，从而可以得到Ｃ区以外的其它保守基因区特异性的扩增片段，提高了对乙型肝炎病毒患者ＨＢＶＤＮＡ的检出率。     

双温聚合酶链反应检测喉乳头瘤中HPV－DNA

应用双温聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测喉乳头瘤石蜡包埋组织中的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ。结果与常规ＰＣＲ（三温循环）相同：３０例喉乳头瘤中ＨＰＶ总检出率为４６．７％（１４／３０），ＨＰＶ－６／１１／１６的检出率分别为４０％（１２／３０）、１６．７％（５／３０）和６．７％（２／３０），ＨＰＶ－６的检出率极显著高于ＨＰＶ－１１／６（ｘ２＝１０．６，Ｐ＜０．０１）。初步结果表明，本地区喉乳头瘤主要与ＨＰＶ－６的感染密切相关。该法具有缩短检测时间、节省一个恒温水浴箱等优点。     

用PCR的RELP法检测宫颈癌组织中HPV16型的研究

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）和限制性片段长度多态性（ＲＥＬＰ）方法，直接对石蜡包埋的宫颈癌组织切片进行人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６型的检测。结果表明ＨＰＶ１６型的阳性检出率为６６．７％。该方法简便快速，特异性较强，为ＨＰＶ１６型的检测提供一种较敏感而快速的诊断手段。     

用PCR检测消化道巨细胞病毒感染

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测５１例消化道疾病患者活检或手术标本的人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）－ＤＮＡ，阳性率９．８０％；采用间接免疫荧光法随机检测其中４１例患者血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ。结果显示：消化道组织巨细胞病毒感染数低于血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性数（Ｐ〈０．０１）；血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ检测中，恶性肿瘤和结肠炎患者ＨＣＭＶ感染均较对照组为高（Ｐ〈０．０１和Ｐ〈０．０５）。提示ＰＣＲ是消化道巨细胞病毒     

多聚酶链反应检测结核杆菌复合群方法的建立及临床应用

采用多聚酶链反应 （ＰＣＲ） 对结核杆菌复合群基因组进行扩增, 得到一２８５ ｂｐ ＤＮＡ条带。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 印迹证实为特异性扩增。用ＰＣＲ方法对临床４０ 份待测标本进行检测,并与结核杆菌常规培养以及高渗培养等方法进行比较, 其阳性率分别为６０．０％ 、７．５％ 和０％ , 差异均有显著性意义 （均为Ｐ＜ ０．０１）。     

妊娠期单纯疱疹病毒感染及母婴传播的研究

应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和多聚酶链反应（ＰＣＲ）研究３８０例孕妇单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）感染及母婴传播。结果表明：孕妇ＨＳＶ感染相当普遍,ＨＳＶ１和ＨＳＶ２感染率分别为８１．８５％、４８．０６％,其中ＨＳＶ２感染有异常孕产史者关系更加密切。孕妇宫颈分泌物中ＨＳＶ２ ＤＮＡ检出率为２．４１％,ＨＳＶ２宫内感染率为４．１７％,孕早期绒毛组织中ＨＳＶ２垂直传播率为１０％,１例无脑儿的胎脑,胎肺及     

PCR和原位杂交技术检测新疆哈萨克族食管癌中HPV感染情况

目的:检测人乳头状瘤病毒(HPV)在新疆哈萨克族食管癌及癌旁组织中的感染情况.方法:分别采用PCR法和原位杂交法检测60例食管鳞癌组织及相应癌旁正常鳞状上皮组织中HPV感染情况.结果:PCR和原位杂交检测食管癌组织中的HPV阳性率为51.7%和45% ;正常食管癌癌旁组织中 HPV阳性率为25%和15%.统计学结果显示食管癌组与癌旁正常鳞状上皮组中HPV感染,差异有统计学意义P<0.05.结论:新疆哈萨克族食管癌组织中存在HPV感染,HPV感染可能是其发病的危险因素之一.     

肺鳞癌中人乳头瘤病毒的原位杂交检测和病理组织学研究

对经多重多聚酶链反应（多重PCR）检测的在49例肺鳞癌中发现的7例人乳头瘤病毒（HPV）DNA阳性肿瘤组织又进行了生物素标记HPVDNA探针的原位杂交检测。结果5例呈杂交阳性，其中HPV11型阳性3例，HPV16型阳性1例，1例为HPV11和16型混合阳性。原位杂交显示HPVDNA大多位于凹空样肿瘤细胞的核内。分子生物学和肿瘤组织学研究表明HPV感染可能与部分肺鳞癌有较密切的关系。     

第二代杂交捕获法和聚合酶链反应检测人乳头瘤病毒的比较

目的:比较两种常用的人乳头瘤病毒(HPV)的检测方法。方法:第二代杂交捕获法(HCⅡ)和聚合酶链反应(PCR)检测妇女宫颈分泌物中的高危型HPV。结果:103例宫颈病变患者中,PCR和HCⅡ检测HPV的阳性率分别为41.7％和39.9％。两种检验方法具有相关性(P<0.05)。结论:PCR和HCⅡ具有较好的一致性。     

鼻咽癌组织中人乳头瘤状病毒DNA的研究

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）及４型人乳头瘤状病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ探针杂交技术，检测福建５８例鼻咽癌活检的石蜡包埋组织中人乳头瘤状病毒ＤＮＡ的存在及其类型。结果发现ＨＰＶＤＮＡ阳性者１４例（２４％），其中１６型５例（３５．７％），６型４例（２８．６％），１６型和６型同时阳性者４例（２８．６％），未知类型者１例（７％）。未发现１８型和１１型病例。５例慢性鼻咽炎粘膜中未检出ＨＰＶＤＮＡ。４２例癌旁粘膜被覆的鳞状上皮中见有挖空细胞、角化过度和疣状增生等ＨＰＶ感染效应。结果表明在鼻咽癌高发区ＨＰＶＤＮＡ有较高检出率，它与鼻咽癌的发生有一定关系。     

人乳头瘤病毒感染与膀胱肿瘤关系的探讨

本研究旨在探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染与膀胱肿瘤发生发展之间的关系。用体外基因扩增技术，即聚合酶链反应，使用人乳头瘤病毒１６和１８型引物序列，对３４例膀胱癌新鲜手术切除标本、３０例正常膀胱粘膜作对照，进行人乳头瘤病毒基因检测，肿瘤标本ＨＰＶＤＮＡ总阳性率为４１．１８％；其中ＨＰＶ１６型阳性率为２０．６０％，ＨＰＶ１８型阳性率为２６．４７％，合并感染阳性率为５．８８％。３０例正常对照标本未检出ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８型ＤＮＡ序列。研究初步表明，高危类ＨＰＶ１６型、ＨＰＶ１８型在膀胱癌的病因中有一定的影响     

多重多聚酶链反应和原位杂交检测成人咽喉病变中人乳头瘤病毒感染

用多重我聚酶链反应（ＰＣＲ）和生物素标记探针的原位杂交方法对３６例石蜡包埋的成人咽、喉部乳头状瘤、上皮不典型增生和鳞状细胞癌的组织标本进行了检测。结果共检出６例ＨＰＶＤＮＡ阳性病例，全部为ＨＰＶ６／１１，其中仅１例伴ＨＰＶ１６型感染。６例阳性病例包括喉乳头状瘤３例，咽乳头状瘤、喉粘膜上皮高度不典型增生及喉鳞癌各１例。原位杂交显了ＨＰＶＤＮＡ在肿瘤组织、组织中的分布。     

鼻内翻性乳头状瘤与人乳头瘤病毒感染的相关性研究

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)感染与鼻内翻性乳头状瘤(NIP)发病及复发的相关性.方法 应用聚合酶链反应(PCR)和PCR产物斑点杂交技术,检测33例患者42份NIP石蜡和新鲜标本,以及20份正常鼻黏膜组织HPV6、11、16、18、33五个型别的HPV-DNA.结果 NIP组织HPV总阳性率为54 7%(23/42),其中HPV6为19.0%(8/42),HPV11为21.4%(9/42);HPV16为7.1%(3/42);HPV11 16为7.1%(3/42);HPV18 33均为阴性.对照组各型检测结果均为阴性.两组比较差别具有非常显著性意义(P＜0.001).结论 HPV感染在NIP的发病和复发过程中起一定的作用.良性NIP发病与HPV6、11型感染有关.     

PCR-RFLP法检测外生殖器表皮原位癌组织HPV DNA

目的 通过对外生殖器部位表皮原位癌标本进行人乳头瘤病毒(HPV)检测和分型,探讨HPV在外生殖器表皮原位癌发病中的作用。方法 采用通用型引物PCR检测标本中HPVDNA,并用限制性片段长度多态性(RFLP)方法进行分型。结果 51例外生殖器原位鳞癌中29例(56．9％)HPV DNA阳性,其中26例(89．7％)为HPVl6。40例鲍温样丘疹病中22例(55％)HPV DNA阳性,其中20例为HPVl6,1例为HPV31,1例为HPV6 16;5例鲍温病HPVDNA全部阳性(100％),其中4例为HPVl6,1例为HPV6 16;6例Queyrat增殖性红斑中2例(33．3％)HPVDNA阳性,均为HPVl6。结论外生殖器病理上有表皮原位癌改变的鲍温样丘疹病、鲍温病、Queyrat增殖性红斑的发生与HPVl6感染密切相关。     

复发尖锐湿疣中人乳头瘤病毒相关序列的检测

用聚合酶链反应及其产物斑点杂交技术，对２９例复发尖锐湿疣中人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）相关序列进行检测和分型，结果显示复发尖锐湿疣中：ＨＰＶ６：６５．５％，ＨＰＶ１１：２４．１％，ＨＰＶ１６：３１．０％，ＨＰＶ６／１１：１３．８％，ＨＰＶ６／１６：１０．４％，ＨＰＶ１８未检测出来，所用探针以外的型别：３．４％。     

聚合酶链反应和原位杂交检测成人肾炎肾组织HBV DNA

目的 探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染与成人肾小球肾炎（肾炎）之间的联系,及研究ＨＢＶ对肾脏的致病作用。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和原位杂交（ＩＳＨ）技术检测３９例血清ＨＢＶ标志物阳性的成人肾有活检组织ＨＢＶ ＤＮＡ的存在状态。结果 用ＰＣＲ法测定肾活检组织抽提物ＨＢＶ ＤＮＡ１７／３９例阳性（４３．６％）,其中５例ＰＣＲ阳性者再且地高辛素标记的ＨＢＶ ＤＮＡ探针原位杂交,测定肾活检石腊包埋切