无细胞异种真皮基质动物移植实验和临床应用观察

目的为降低异种(猪)真皮组织的抗原性,探讨其临床复合移植的可行性。方法健康小猪中厚皮,半数经戊二醛交联,采用胰蛋白酶和TritonX-100等处理,分别制成未交联(sADM0)和交联型(sADM1)网状脱细胞真皮基质,通过动物实验和临床应用,观察二种sADM移植效果和组织学变化情况。结果(1)兔皮下埋植sADM0早期自体组织细胞侵入迅速,炎症反应重,皮片降解和收缩明显,8周后外观和组织学均难辨别,而sADM1早期组织相容性较差,炎性反应轻,皮片降解和收缩均不明显,至30周时,其外观和组织学结构仍较完整。(2)10例烧伤患者Ⅲ度创面和1例胸部瘢痕切除后,以自体薄中厚皮(TTS)和自体刃厚皮或超薄皮(OTS)为对照,进行sADM+OTS复合移植,19块复合皮平均成活率为78.9%,与TTS组无显著差异。其中sADM0+OTS组早期炎症反应和创面收缩明显,外观效果与OTS组相当;在sADM1+OTS组,早期炎症反应和创面收缩较轻,外观平整,触软,与TTS组相当,但其中有3例患者的6块创面在术后13～20周时,复合皮出现破溃、sADM1外露及组织学异物巨噬细胞等排异反应。结论临床用交联型sADM作复合皮的真皮替代物,...     

异种(猪)脱细胞真皮基质移植后炎症免疫反应的实验研究

目的：研究异种（猪）脱细腻真皮基质与薄自体皮复合移植后炎症反应的变化规律及对Th1/Th2细胞因子的影响。方法：将异种（猪）脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植于大鼠，分别于移植后1，2，3，4，8，12，16周取标本，采用组织学观察及RT-PCR技术动态检测异种（猪）脱细胞真皮基质复合移植后炎症反应及Th1/Th2细胞因子的变化，同时以单纯薄自体皮移植作对照。结果：异种（猪）脱细胞真皮与薄自体皮复合移植后早期存在炎症反应，并随着创面愈合的进行而逐渐消失，Th2细胞因子的表达明显高于对照组。结论：异种（猪）脱细胞真皮基质仍具有一定的免疫原性，Th2细胞因子的高表达说明机体对异种（猪）脱细胞真皮基质的免疫反应主要以体液免疫为主，也可能是异种（猪）脱细胞真皮基质移植后未被排斥的原因之一。     

不同种属脱细胞真皮与自体皮复合移植的比较性研究

目的　观察不同种属脱细胞真皮基质 (acellulardermalmatrix,ADM)与自体皮复合移植的效果 ,为异种ADM的临床应用提供理论依据。　方法　本地产白色小猪 6头 ,分为异种 (人 )ADM +自体刃厚皮组 (A组 )、同种异体 (猪 )ADM +自体刃厚皮组 (B组 )、单纯自体刃厚皮组 (C组 )及单纯自体中厚皮组 (D组 )。观察术后 2、4、8、12、2 4周内移植物存活率 ,以及移植皮片收缩程度、移植区组织学变化等情况。　结果　A、B组移植后皮片外观光滑、有弹性 ;两组均获得了满意的皮片成活率 ,并可迅速诱导成纤维细胞、血管内皮细胞等宿主修复细胞的长入 ;两组移植皮片收缩面积有大于C、D组的趋势 (P <0.0 5);术后 2 4周移植区组织与单纯中厚皮移植组织结构一致。　结论　在观察期内(复合移植后 2 4周 ) ,与自体皮复合移植时 ,同、异种ADM具有相近的生物学作用 ,异种来源的ADM可能具有更广阔的应用前景     

自体网状皮片与异种(猪)脱细胞真皮基质复合移植的临床应用

目的：探讨1：3自体网状皮片与异种（猪）脱细胞真皮基质复合移植的可行性。方法：选择9例烧伤及瘢痕患者，在Ⅲ度烧伤创面行切痂术或瘢痕切除术后的创面上移植异种（猪）脱细胞真皮基质，摊平固定后，在支架上再植1：3网状自体刃厚皮片，表面再覆盖辐照猪皮。结果：9例复合移植皮肤全部成活，临床效果满意。结论：1：3自体网状刃厚片可以与异种（猪）脱细胞真皮基质复合移植，同时将自体皮扩增3倍，成活后的复合网状皮片有相当于中厚皮片或者全厚皮片移植的效果。     

不同种属脱细胞真皮基质与自体刃厚皮复合移植近期效果的对比研究

目的　对比研究异体和异种脱细胞真皮基质 (acellular dermal matrix,ADM)与自体刃厚皮复合移植 ,应用在烧伤创面的近期效果 ,为全层皮肤缺损的无瘢痕修复寻求理想的皮肤替代物。　方法　 2 0 0 1年 9月～ 2 0 0 3年 6月 ,以两种 ADM分别与自体刃厚皮复合移植于 18例 度烧伤患者的切痂创面 ,以单纯自体中厚皮移植作对照 ,通过术后 2周自体皮成活率、术后 8周自体皮收缩率和温哥华瘢痕评分比较移植效果。　结果　三种移植方式术后 2周皮片成活率组间比较无差异 (P>0 .0 5 ) ;其中 14例患者术后第 8周随访 ,未见明显排斥反应 ,三种移植方式术后 8周皮片收缩率和瘢痕评分组间比较无差异 (P>0 .0 5 )。　结论　异体和异种 ADM在临床上具有相近的效果 ,均能用于受皮者的皮肤重建。     

异种或同种异体脱细胞真皮基质移植后免疫细胞分型的研究

目的　比较异种脱细胞真皮基质 (Xeno ADM)与同种异体脱细胞真皮基质 (Allo ADM)移植物免疫学反应的差异。　方法　选用健康小猪和健康自愿者的中厚皮 ,分别制成Xeno ADM和Aoll ADM后 ,与深度烧伤患者的断层超薄自体皮 (UTS)重叠 ,即时覆盖其切痂创面 ,相应设为Xeno组(2 6例 )和Aoll组 (10例 )。于另 8例深度烧伤患者切痂创面上移植单纯断层自体中厚皮 (TTS) ,设为对照组。采用免疫组化方法 ,于移植术后进行组织学观察 ,并检测外周血和移植物内免疫细胞分型情况。　结果　与对照组比较 :(1)移植术后 ,Xeno组和Allo组外周血免疫细胞分型情况无明显改变(P >0 .0 5 )。 (2 )Xeno组移植物局部长期存在炎症 免疫反应 ,其中 80 %以上为CD3+ CD4 + 和CD4 5RO+ 细胞 ,CD8+ 细胞、Vs8C+ 浆细胞、CD5 7+ 的自然杀伤细胞 (NK)相对较少 ;另可见嗜酸性粒细胞和CD6 8+ CD4 + 异物巨细胞反应 ,在发生排异反应前的Xeno ADM中尤为明显 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。Allo组仅在移植早期 (术后 8周以内 )有中度炎症 免疫反应。　结论　人体对脱细胞真皮基质的特异性免疫反应 ,可能是在单核 巨噬细胞参与下、以CD4 + T淋巴细胞介导的细胞免疫为主要表现 ;辅助性T细胞和巨噬细胞构成的异物巨细胞可能在其中起重要作用     

异种脱细胞真皮基质与自体皮复合移植后基底膜重塑的实验观察

目的　观察异种 (猪 )脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植模型中基底膜重塑的变化规律。　方法　将异种 (猪 )脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植于大鼠创面 ,分别于移植后 1、2、3、4、8、12、16周留取标本 ,采用免疫组化、透射电镜等方法 ,观察基底膜中层粘连蛋白的变化规律及 12周时基底膜的超微结构 ,同时以单纯薄自体皮移植进行对照。　结果　异种脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后 ,层粘连蛋白的表达高于单纯薄自体皮移植。 12周时复合移植组基底膜清晰连续 ,半桥粒较多且分布均匀 ;薄自体皮组基底膜致密板模糊、不连续 ,半桥粒减少且分布不均。　结论　异种脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后 ,基底膜中层粘连蛋白表达增高 ,可能有利于复合皮移植后基底膜的重塑 ,增强表皮和真皮之间的连接 ,进而改善创面愈合质量     

体外构建复合皮移植后对大鼠创面愈合的影响

目的：观察角质形成细胞和成纤维细胞与无细胞异种真皮基质构成的复合皮移植于全层皮肤缺损创面后的效果,寻找一种新的创面覆盖物。方法：54只SD大鼠作背部全层皮肤缺损创面后分为A、B、C三组,分别以A型复合皮（角质形成细胞＋成纤维细胞＋无细胞异种真皮基质）、B型复合皮（角质形成细胞＋无细胞异种真皮基质）和普通敷料进行移植,术后定期观察创面愈合情况并进行创面收缩率的计算,同时切取创面组织进行组织学检测。结果：三组中,A组的创面愈合及外观情况最好;A组创面收缩率明显低于B、C两组（P（0．05）;组织学检测提示A组复合皮上皮分化充分,胶原增生有序,表皮一真皮连接结构重建明显,未见明显的急性期免疫排斥反应。结论：角质形成细胞和成纤维细胞与无细胞异种真皮基质构成的复合皮移植后能改善创面愈合质量,是一种较理想的、可探索的皮肤替代物。     

人表皮细胞与无细胞异种真皮复合移植的实验研究

目的 观察人表皮细胞与无细胞异种真皮复合移植全层皮肤缺损创面后的效果,寻找一种新的创面覆盖物。方法 42只裸鼠作背部全层皮肤缺损创面,分别进行复合皮移植（复合皮组）和单纯表皮细胞膜片移植（对照组）,术后定期观察创面愈合情况并进行创面愈合率及创面收缩率的计算,同时留取创面组织进行组织学检查。结果 与对照组相比较,复合皮组的创面愈合及外观情况良好,两组创面愈合率及收缩率的差异有显性意义（P＜0．05）;组织学检测提示复合皮上皮分化充分,胶原增生有序,表皮－真皮连接结构重建明显,未见明显的急性期免疫排斥反应。结论 人表皮细胞与无细胞异种真皮复合移植能改善创面愈合质量,可作为一种新的皮肤代用品。     

自体微粒皮与异体真皮基质复合移植的实验研究

目的　观察自体微粒皮与异体真皮基质复合移植后创面的修复情况。　方法　于 6只小白猪背部制作 4 6个皮肤全层缺损创面 ,同时制作网状脱细胞异体真皮基质和自体微粒皮。创面分为实验组和对照组 ,每组 2 3个 ,分别进行自体微粒皮 异体真皮基质 (两者比例为 1∶4 ) 异体断层猪皮、自体刃厚皮 异体真皮基质的移植。　结果　实验组和对照组的移植成活率及创面收缩率差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。两组移植术后组织学观察无明显差别 ,术后 8～ 2 0周胶原纤维结构完整、清晰、排列规则、粗细均匀 ,可见正常的血管组织 ,炎症反应逐渐减轻 ,表 真皮间结合良好 ,钉突横跨基底膜并完好地固定于异体真皮上。移植术后 5个月皮肤均较平滑、有弹性、功能好。　结论　自体微粒皮与脱细胞异体真皮基质复合移植后皮片成活率较高 ,为大面积深度烧伤创面修复中较理想的覆盖材料。     

异体脱细胞真皮基质与自体皮片复合移植的临床应用

目的:探讨异体脱细胞真皮基质与自体皮片复合移植修复大面积深度烧伤及瘢痕切除后皮肤缺损创面及其愈合后皮肤的外形和功能。方法:应用异体脱细胞真皮基质与自体刃厚皮片组成复合皮移植,以自体刃厚皮片移植作为对照,采用一步移植法治疗切痂后大面积深度烧伤创面及瘢痕切除后皮肤缺损共56例患者60处创面,观察术后皮片的成活情况、外形及功能恢复情况并随访。结果:60处创面全部愈合,移植皮片生长良好,瘢痕增生不明显,未见明显挛缩,皮肤弹性较好。在6～12个月的观察期内,自体刃厚皮片与异体脱细胞真皮基质复合移植后,功能和形态优于单纯自体刃厚皮片移植;随访2年复合移植未发现明显的排异反应。结论:异体脱细胞真皮基质与自体皮片复合移植修复大面积深度烧伤及瘢痕切除后皮肤缺损创面愈合良好,无瘢痕增生,皮肤外观功能满意,无排异反应。     

复合皮混合移植治疗深Ⅱ度烧伤患者创面疗效观察

目的观察深Ⅱ度烧伤患者创面削痂术后应用复合皮混合移植治疗的效果。方法对23例烧伤患者的30个深Ⅱ度烧伤肢体在伤后3d内分次行削痂术,削至浅筋膜后移植大张异体脱细胞真皮基质,然后切取大张自体刃厚皮(0.10～0.25mm)覆盖于其上。术后10—12d计算移植皮片的存活率,记录创面愈合时间。观察随访3—6个月时患者的肢体外观及功能恢复情况。取1例患者随访3个月时的愈合创面皮肤标本,行病理学观察。结果本组患者复合皮片成活率为93%,7%的皮片因术中固定较差,移植后自体刃厚皮与异体脱细胞真皮基质分离致皮片坏死,或因感染致皮片溶解。随访3—6个月,移植部位皮肤外观、弹性及功能恢复良好。病理学观察显示,成活皮片表皮、真皮结构正常。结论烧伤后早期削痂立即移植复合皮是治疗深Ⅱ度创面的有效方法。     

Preparation of laser micropore porcine acellular dermal matrix for skin graft: an experimental study

In our previous study, we used composite grafts consisting of meshed porcine acellular dermal matrix (PADM) and thin split-thickness autologous epidermis to cover full thickness burn wounds in clinical practice. However, a certain degree of contraction might occur because the distribution of dermal matrix was not uniform in burn wound. In this study, we prepare a composite skin graft consisting of PADM with the aid of laser to improve the quality of healing of burn wound. METHODS: PADM was prepared by the trypsin/Triton X-100 method. Micropores were produced on the PADM with a laser punch. The distance between micropores varied from 0.8, 1.0, 1.2 to 1.5mm. Full thickness defect wounds were created on the back of 144 SD rats. The rats were randomly divided into six groups: micropore groups I-IV in which the wound were grafted with PADM with micropores, in four different distances, respectively and split-thickness autograft; mesh group rats received meshed PADM graft and split-thickness autograft; control group received simple split-thickness autografting. The status of wound healing was histologically observed at regular time points after surgery. The wound healing rate and contraction rate were calculated. RESULTS: The wound healing rate in micropore groups I and II was not statistically different from that in control group, but was significantly higher than that in mesh group 6 weeks after grafting. The wound healing rate in micropore groups III and IV was lower than that in mesh and control groups 4 and 6 weeks after grafting. The wound contraction rate in micropore groups I and II was remarkably lower than that in control group 4 and 6 weeks after surgery and it was significantly much lower than that in mesh group 6 weeks after surgery. Histological examination revealed good epithelization, regularly arranged collagenous fibers and integral structure of basement membrane. CONCLUSION: Laser micropore PADM (0.8 or 1.0mm in distance) grafting in combination with split-thickness autografting can improve wound healing. The PADM with laser micropores in 1.0mm distance is the better choice.     

血小板源性生长因子基因修饰的人工复合皮移植大鼠创面效果观察

目的观察血小板源性生长因子B(PDGFB)基因修饰的人工复合皮移植大鼠创面后的效果。方法构建PDGFB真核表达质粒,在脂质体介导下转染大鼠成纤维细胞。分别构建复合皮1(角质形成细胞 猪脱细胞真皮基质 PDGFB基因转染的成纤维细胞)和复合皮2(角质形成细胞 猪脱细胞真皮基质 未转染的成纤维细胞),移植于大鼠背部全层皮肤缺损创面,相应设为转染组、未转染组(各18只)。以不作皮肤移植的8只大鼠全层皮肤缺损创面为对照组。术后2周观察大鼠创面移植皮片存活情况。术后2、4、6周观察大鼠创面大体情况,计算创面收缩率,并取创面组织标本进行组织学观察。结果(1)术后2周,转染组大鼠中皮片完全存活者14只、部分存活者3只、未存活者1只;未转染组大鼠中皮片完全存活者10只、部分存活者4只、未存活者4只。(2)术后2周,对照组创面结痂。术后6周转染组移植皮片表面光滑,有弹性,抗磨擦性强,愈合效果优于其他两组。(3)术后2、4、6周,对照组大鼠创面收缩率均高于其他两组,转染组创面收缩率低于未转染组(P<0.05)。(4)术后2周转染组移植皮片内可见较多毛细血管分布;6周时表皮细胞分化达7～10层,纤维排列致密整齐,毛细血管分布均匀。结论用含PDGFB基因的人工复合皮移植修复创面,可明显提高创面愈合质量。     

无细胞真皮基质与自体皮片复合移植的临床应用

目的：改善烧伤创面移植皮片愈合后皮肤的外形和功能,并减轻供皮区瘢痕增生。方法：应用自制的无细胞真皮基质与自体刃厚皮片复合移植于4例切（或削）痂后的烧伤创面。结果：未发现对复合移植皮片的排异反应。创面愈合后,大体观察发现移植自体网状皮片及自体小皮片的轮廓界面变得不明显或基本消失,自体大张皮片与真皮基质复合移植区出现较厚而特殊的脱屑,均反映了愈合过程的特殊性。光镜和电镜观察发现复合皮片移植区棘细胞间桥粒清晰,基底膜连续而完整等。与对照部位相比,复合皮片移植区瘢痕增生减轻,未见明显挛缩,皮肤弹性较好。结论：在3－4个月的观察期内,自体刃厚皮片与无细胞真皮基质复合移植后,功能和形态等同或优于单纯自体刃厚皮片移植。     

无细胞真皮基质与自体皮复合移植愈合过程的观察

目的 :为改善植皮区外观和功能 ,并同时减轻供皮区瘢痕增生。方法 :应用自制的无细胞真皮基质与薄的刃厚自体皮复合移植应用于 2例切削痂后的烧伤创面。结果 :未发现对复合移植物的排异反应。创面愈合后 ,大体观察发现移植网状自体皮的网状形式已变得不明显 ,自体小皮片的轮廓基本消失 ,均反应了愈合过程的特殊性。光镜和电镜观察发现复合移植区基底膜清晰、连续且完整等。与对照部位相比 ,复合移植区瘢痕增生减轻 ,未见明显挛缩 ,皮肤弹性较好。结论 :至少到目前为止的观察期 (3～ 4个月 )内 ,较薄的刃厚自体皮与无细胞真皮基质复合移植后外观和功能等同或优于单纯刃厚自体皮移植     

烧伤早期切痂脱细胞异体真皮基质与自体皮浆复合移植的临床应用

目的探讨脱细胞异体真皮基质与自体皮浆复合移植的可行性。方法在8例患者Ⅲ。烧伤创面早期切痂,13个部位采用18块脱细胞真皮基质移植固定,在异体皮的真皮面上均匀涂布备好的皮浆,覆盖于脱细胞真皮基质上,缝合包扎固定。同一肢体其余创面常规用自体皮浆加异体皮移植做对照观察,皮浆与创面比例为1：5～1：8。结果18块脱细胞异体真皮基质复合移植皮肤成活率94％,随访3～13个月皮肤弹性及色泽好、瘢痕轻、耐磨,愈合质量优于对照部位创面。术后3个月组织切片表皮真皮连接紧密,可见钉突样结构,胶原纤维排列较规整;单纯皮浆移植皮肤为瘢痕皮肤结构。结论应用脱细胞真皮基质与自体皮浆复合移植,明显优于单纯的皮浆移植,具有较好的临床应用前景。     

复合皮移植修复烧伤功能部位创面疗效评价

目的探讨脱细胞同种异体真皮与自体刃厚皮复合移植修复深度烧伤功能部位创面的疗效。方法 2002年6月-2008年12月,收治30例烧伤及瘢痕整形患者共42个创面。男25例,女5例;年龄3～52岁,中位年龄31岁。烧伤24例35个创面,其中深Ⅱ度23个创面,Ⅲ度12个创面;病程3～45 d,平均24 d。瘢痕整形6例7个创面;病程9～21 d,平均16 d。42个创面分别位于颈部2个,手部4个,前臂及肘部8个,肩部3个,腘窝6个,膝部4个,小腿及足踝部15个。彻底清创、削痂及切除瘢痕后,创面范围为10 cm×10 cm～30 cm×20 cm。采用一步法将脱细胞同种异体真皮与自体刃厚皮复合移植修复创面。结果术后27例39个(92.9%)创面复合皮移植完全成活;3例3个(7.1%)创面复合皮部分坏死,分别经换药和自体皮片移植术后愈合。患者均获随访,随访时间30～34个月,平均32个月。复合皮有轻度色素沉着,外观平整,质地柔软,弹性好,皮肤耐磨;复合皮无挛缩及瘢痕增生,功能部位活动正常。刃厚皮供皮区未见瘢痕增生。结论脱细胞同种异体真皮与自体刃厚皮复合移植修复功能部位深度烧伤及瘢痕整形创面,可获得良好外形及功能。