人脑胶质瘤组织中同源盒HOXA1-A4基因mRNA表达

同源盒基因是生物发育分化的主控基因,对DNA合成的转录过程起调控作用.目前,关于同源盒基因在胶质瘤组织中表达的报道尚少~([1]).本研究旨在观察人脑胶质瘤肿瘤组织中同源盒基因HOXA1、HOXA2、HOXA3和HOXA4基因mRNA表达. 一、材料与方法1.一般资料:2007年3至2008年8月收集吉林大学中日联谊医院神经外科28例胶质瘤标本,按2000年WHO神经系统肿瘤分类标准进行分级,其中WHOⅠ～Ⅱ级12例,为低恶组,WHOⅢ～Ⅳ16例,为高恶组.此外,9例取自外伤或癫痫脑叶切除患者的脑组织作为正常对照.     

染色体22q上与胶质瘤RNA编辑相关基因的研究进展

RNA编辑与胶质瘤的发生、发展相关.胶质瘤的肿瘤抑制基因位点涉及染色体22q.新近研究结果显示,1637种基因中存在大量、新的RNA编辑位点[1],其中,位于染色体22q上的基因有29种.本文整理了这些基因与脑部疾病、肿瘤、胶质瘤及细胞中DNA复制或RNA合成相关的文献.     

位于8q24的NOV和WISP-1基因在前列腺癌的表达

目的 探讨定位于8q24的CCN家族成员NOV基因和WISP-1基因在前列腺癌的表达.方法 采用半定量的RT-PCR方法和免疫组化法分析37例前列腺癌组织和10例正常前列腺组织中NOV和WISP-1的mRNA和蛋白的表达.结果 37例前列腺癌组织和10例正常前列腺组织中均检测到NOV mRNA表达,前列腺癌的表达水平显著高于正常前列腺组织(P<0.05),而且T3,T4期前列腺癌的表达水平显著高于T1,T2期前列腺癌(P<0.05).在37例前列腺癌中有24例(64.7%)检测到WISP-1的mRNA表达,而正常前列腺组织中均为阴性,差异具统计学意义(P<0.05).免疫组化研究显示前列腺癌组织的NOV蛋白染色强度明显高于正常前列腺组织(P<0.05).正常前列腺组织和前列腺癌组织均未检测到WISP-1蛋白.结论 NOV基因在前列腺癌的发生发展过程中起着重要作用.     

人脑胶质瘤中全长新基因PPIL3的获得及染色体定位和表达谱分析

目的运用基因芯片技术获取正常成人脑组织与人脑胶质瘤中差异表达的基因，并对其中一条基因进行研究。方法抽提正常成人脑组织与人脑胶质瘤组织中的mRNA来制备探针，经杂交、洗涤后，通过计算机观察两者表达谱的差异情况，对6811705克隆子进行Northern blot，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR），染色体定位和生物信息学分析。结果通过4次基因芯片筛选，获得15条与胶质瘤相关的新基因，经Northern blot证实6811705基因在人正常脑组织中低表达，而在人脑胶质瘤中高表达。PPIL3基因位于染色体2q33区段的STS marker stSG2762和SHGC-3074之间。BLASTn和BLASTx分析显示，它们编码蛋白与线虫Cyp-10蛋白同源性分别为52％和72％。cDNA序列分析发现这两上克隆是同一个基因[命名为eyelophilin-like gene（PPIL3）]的两个不同的剪切体（PPIL3a和PPIL3b）。结论基因芯片筛选正常脑组织与人脑胶质瘤差异表达的基因具有样品用量少，高质量，高速度，高敏感等特性。6811705基因可能是与人脑胶质瘤形成有关的一条全长新基因。     

Nestin及Musashi-1蛋白在人脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义

目的 观察Nestin、Musashi-1蛋白在脑胶质瘤组织中的表达,探讨其与人脑胶质瘤发生及进展的关系.方法 50例人脑胶质瘤标本,应用免疫组织化学染色法检测Nestin、Musashi-1蛋白的表达.结果 50例胶质瘤标本中Nestin、Musashi-1蛋白的表达率分别为76%和68%,Nestin和Musashi-1蛋白在脑胶质瘤组织中的表达呈正相关.Nestin、Musashi-1蛋白在低恶性组和高恶性组脑胶质瘤阳性表达率分别为60.9%(14/23)、88.9%(24/27);52.2%(12/23)、81.5%(22/27),以上两组间阳性率差异均有统计学意义(P<0.05).结论 Nestin、Musashi-1蛋白的表达增高可能与脑胶质瘤的发生、发展有关,其表达还可能与脑胶质瘤的预后有关.

Abstract：

Objective To investigate the expression of Nestin and Musashi-1 in human glioma tissues and its clinicopathogical significance.Methods The expression of Nestin and Musashi-1 was examined in 50 human glioma samples by using immunohistochemistry staining.Results The expression rate of Nestin and Musashi-1 in glioma tissues was 76% and 68% respectively. There was a positive correlation between the expression of Nestin and Musashi-1 in glioma tissues. Immunohistochemical results showed that the positive rate of Nestin and Musashi-1 in low and high grade malignant gliomas was 60.9% (14/23), 88.9% (24/27); 52.2% (12/23), 81.5% (22/27) respectively (P<0.05).Conclusion The expression of Nestin and Musashi-1 may play a pivotal role in the initiation and development of glioma and may be correlated with cthe prognosis of glioma.     

STAT3和Cyclin D1在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的 探讨信号转导及转录激活因子3(STAT3)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达与脑胶质瘤生物学行为的关系及意义.方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测并比较68例不同级别胶质瘤和10例正常脑组织中STAT3和Cyclin D1的表达,并对两者表达做相关分析.结果 RT-PCR检测胶质瘤组织STAT3、Cyclin D1的mRNA表达量(2.23±0.32、2.18±0.26)均明显高于正常脑组织(0.53±0.14、0.48±0.11),Western blot检测胶质瘤组织STAT3、Cyclin D1的蛋白表达量(42.3±2.6)%、(45.4±1.8)%均明显高于正常脑组织(9.8±1.1)%、(10.4±0.9)%,其差异均有统计学意义(P＜0.05),STAT3和Cyclin D1的表达与胶质瘤级别呈正相关.结论 STAT3可能通过激活其下游靶基因Cyclin D1,引起胶质瘤细胞异常增殖和分化失控.     

水通道蛋白8在人脑胶质瘤组织的表达及临床意义

目的探讨水通道蛋白8(AQP8)在人脑胶质瘤中的表达及其与预后的关系。方法选取河南省人民医院2017年7月至2019年7月35例人脑胶质瘤组织,通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测AQP8的表达,再通过短发卡RNA(shRNA)技术下调AQP8基因,通过细胞增殖测定和Transwell侵袭/转移实验研究其对人脑胶质瘤U373和T98G细胞增殖和侵袭/迁移的影响。采用t检验或方差分析进行组间差异比较。结果AQP8的表达水平在胶质瘤中高于正常脑组织(1.52±0.36,t=7.969,P<0.01),差异有统计学意义;下调AQP8后,在U373和T98G细胞的72 h相对增殖率显著低于对照组(0.68±0.27,0.64±0.30,t=11.043、1.110,P<0.01),差异有统计学意义,同时在这两种细胞中细胞周期蛋白CCNB1(0.88±0.17,0.64±0.15,t=6.263,P<0.01),CCNB2(0.18±0.05,0.11±0.06,t=5.302,P<0.01),CDK1(0.68±0.14,0.41±0.12,t=8.663,P<0.01),KIF4A(0.47±0.19,0.19±0.06,t=8.314,P<0.01)和FEN1(0.31±0.06,0.26±0.05,t=3.787,P<0.01)的表达也明显降低,差异有统计学意义。此外,干预组U373和T98G细胞的侵袭/迁移能力显著下降。结论下调AQP8可抑制胶质瘤细胞的增殖并降低其侵袭和迁移能力。     

脑胶质瘤相关基因1在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨脑胶质瘤相关基因1（GLi-1）在结肠癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学方法（SP法）检测96例结肠癌组织中GLi-1的表达,并分析其与临床病理因素及术后肝转移的关系。结果：结肠癌组织中GLi-1阳性表达率显著高于正常结肠组织（79.2%vs30.8%,P〈0.05）,有淋巴结转移组、Dukes分期C＋D期组阳性表达显著高于无淋巴结转移及Dukes分期A＋B期组（P〈0.05）;GLi-1阳性表达在年龄、肿瘤大小、性别、分化程度等组间差异无统计学意义（P〉0.05）。GLi-1阳性表达组结肠癌术后肝转移时间显著短于阴性表达组（20.46±6.32月vs 48.22±10.03月,P〈0.01）。结论：结肠癌组织中GLi-1异常表达参与了结肠癌的发生、发展,对结肠癌术后肝转移有一定的促进作用。     

全长新基因PPIL3的获得及在人脑胶质瘤中的表达

目的 运用基因芯片技术获取正常成人脑组织与人脑胶质瘤中差异表达的基因,并对其中1条基因进行初步研究.方法 抽提正常成人脑组织与人脑胶质瘤组织中的mRNA来制备探针,经杂交、洗涤后,通过计算机观察两者表达谱的差异情况,对681F05克隆子进行Northern blot,原位杂交和生物信息学分析.结果 通过4次基因芯片筛选,获得15条与胶质瘤相关的新基因,经northern blot证实681F05基因在人正常脑组织中低表达,而在人脑胶质瘤中高表达.原位杂交得到相同的结果.BLASTn和BLASTx分析显示,它们编码蛋白与线虫Cyp-10蛋白同源性分别为52%和72%.cDNA序列分析发现这两上克隆是同一个基因(命名为cyclophilin-like gene (PPll3))的两个不同的剪切体(PPIL3a和PPll3b).结论 基因芯片筛选正常脑组织与人脑胶质瘤差异表达的基因具有样品用量少,高质量,高速度,高敏感等特性.681F05基因可能是与人脑胶质瘤形成有关的一条全长新基因.     

乳腺良、恶性病变组织中Kal-1 mRNA|Kiss-1 mRNA和MTA1的表达及其意义

目的 探讨乳腺癌和乳腺良性病变组织中KAI-1 mRNA,Kiss-1 mRNA和MTA1的表达水平及其临床病理意义.方法 检测60例乳腺癌和30例乳腺良性组织标本KAI-1 mRNA和Kiss-1 mRNA的表达情况.结果 乳腺癌KAI-1 mRNA和Kiss-1 mRNA表达阳性率及其评分明显低于乳腺良性病变(P＜0.05或P＜0.01);乳腺癌MTA1表达阳性率及其评分均明显高于乳腺良性病变(P＜0.05或P＜0.01);导管内癌、组织学分级Ⅰ,Ⅱ级、无淋巴结转移、ER阳性及CA15-3阴性患者Kal-1 mRNA及Kiss-1 mRNA表达阳性率及其评分明显高于浸润性导管癌、组织学分级Ⅲ级、淋巴结转移、ER阴性及CA15-3阳性者(P＜0.05或P＜0.01),而MTA1表达阳性率及其评分则相反(P＜0.05或P＜0.01).Kal-1 mRNA与Kiss-1 mRNA表达呈正相关(r=0.85,P=0.000);MTA1与Kal-1 mRNA及Kiss-1 mRNA两者表达均呈负相关(r=-0.64,r=-0.72,P=0.000).Kal-1 mRNA和/或Kiss-1 mRNA表达阳性患者术后5年生存率及中位生存期均明显高于阴性者(P=0.000),而MTA1则相反(P=0.000).结论 KAI-1 mRNA,Kiss-1 mRNA和MTA1表达可能是反映乳腺癌发生、进展、转移或侵袭潜力及评估预后的重要生物学标记物.     

Polo样激酶1、真核翻译起始因子5A2在人脑胶质瘤组织的表达及其临床意义

目的:探讨Polo样激酶1(PLK1)和真核翻译起始因子5A2(EIF5A2)在正常脑组织和胶质瘤组织中的表达,分析两者与胶质瘤临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测2015年3月至2021年8月大庆市人民医院11例正常脑组织和66例胶质瘤组织中PLK1和EIF5A2的表达水平,结合临床资料行 ...     

甲状腺癌相关基因1 mRNA和蛋白在甲状腺乳头状癌组织的表达及其相关性

目的 探讨甲状腺癌相关基因1(TC-1) mRNA和蛋白表达及其相关性.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、Western blot和免疫组织化学[链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法]检测50例甲状腺乳头状癌(PTC)及其癌旁组织(NCE)中TC-1基因mRNA及其蛋白的表达水平,并与临床病理特征进行相关性分析.结果 FQ-PCR结果显示,在PTC中TC-1 mRNA的表达明显高于相应的癌旁组织,且与PTC的TNM分期、病理分级及淋巴结转移明显相关(P＜0.05).免疫组织化学结果显示TC-1阳性表达主要位于细胞质中,并与相应的癌旁组织的表达比较差异有统计学意义(P＜0.05).并且与PTC的TNM分期、病理分级及淋巴结转移明显相关(P＜0.05).Western blot结果显示,TC-1蛋白在PTC的相对表达量为(2 546±195)明显高于相应的癌旁组织(992±75,P＜0.05).TC-1蛋白表达与患者的TNM分期、病理分级及淋巴结转移明显相关(P＜0.05).TC-1基因mRNA的表达与蛋白的表达明显相关性(P＜0.05).结论 TC-1基因的表达在PTC的发生、发展中起重要作用.     

膜联蛋白A2和锌指转录因子Snail在人脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的 探讨膜联蛋白A2(Annexin A2)和锌指转录因子Snail在胶质瘤组织的表达水平及两者与胶质瘤病理学特征的关系.方法 应用免疫组织化学法检测52例胶质瘤组织和22例正常脑组织中Annexin A2和Snail表达水平.结果 Annexin A2在胶质瘤组织中阳性表达率明显高于正常脑组织(80.77％比9.09％,P＜0.01),Snail在胶质瘤组织中阳性表达率明显高于正常脑组织(67.31％比13.64％,P＜0.01);Annexin A2及Snail表达水平与胶质瘤组织学分级有关(P＜0.05).结论 Annexin A2及Snail的过度表达与胶质瘤的发生发展和恶性程度有关,联合检测Annexin A2及Snail有助于判断胶质瘤患者预后.     

良性增生前列腺组织中TGFβ1mRNA和蛋白的表达

目的：在转录和翻译水平探讨转化生长因子β1（TGFβ1）在良性前列腺增生症（BPH）前列腺组织中的表达及意义。方法：应用原位杂交和 免疫组织化学法对22例BPH和10例正常前列腺（NP）组织标本中TGFβ1的表达进行定性、定位检测。结果：BPH前列腺和NP组织的上皮和间质都有明显的TGFβ1mRNA表达,其表达在BPH和NP间差异无显著性意义（P＞0．05）;在两组间,基质细胞TGFβ1mRNA表达明显高于上皮细胞（P＜0．01）。BPH前列腺和NP的上皮组织中TGFβ1蛋白表达较弱,且两者之间差异无显著性意义（P＞0．05）;间质中TGFβ1表达均为阳性,BPH前列腺间质中阳性表达显著强于NP的间质（P＜0．01）,以基质为主要成分的增生结节中表达更高。结论：TGFβ1是导致BPH前列腺间质增生的重要物质,启动BPH发生发展的因素在转录后水平调控TGFβ1的表达。     

人脑胶质瘤U251细胞中hMLH1、hMSH2基因启动子区的甲基化状态研究

目的观察人脑胶质瘤U251细胞系中hMLHl、hMSH2基因启动子区的甲基化状态及其在肿瘤发生中的作用。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）法对人脑胶质瘤U251细胞系的hMLHl、hMSH2基因启动子CpG岛甲基化进行检测；培养人脑胶质瘤U251细胞系，MSP法检测加入5-aza-2’-deoxycytidine前后hMSH2基因在人脑胶质瘤U251细胞中的甲基化状态改变；逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）法检测加入5-aga-2’-deoxycytidine前后hMSH2在人脑胶质瘤U251细胞中的mRNA表达改变。结果人脑胶质瘤U251细胞中未发生hMLHl启动子甲基化，而发生了hMSH2启动子甲基化；5-aza-2’-deoxycytidine处理细胞株后，可逆转hMSH2启动子甲基化，细胞株的mRNA表达增加，加药前后的平均灰度比值分别为（0．40±0．18；0．85±0．32，P〈0．01），差异有统计学意义。结论人脑胶质瘤U251细胞系中hMSH2基因启动子CpG岛高甲基化，5-aza．2’-deoxycytidine能完全逆转hMSH2基因高甲基化状态，可为临床诊断人脑胶质瘤提供新的检测指标和治疗靶点。     

Heparanase基因mRNA在肝癌、癌旁组织及正常肝组织的表达及意义

近年研究发现内切糖苷酶(Hep aranase) 〔1,2〕与肿瘤转移的关系密切,而转移是肝癌的重要特点〔3〕,为此我们应用半定量RT PCR检测7例正常肝组织,4 5例肝癌及癌旁组织内Heparanase基因mRNA的表达,以揭示Heparanase与肝癌侵袭转移的关系,并探索以Heparanase来判断肝癌侵袭转移能     

人脑胶质瘤中EMP3和PCDH-γ-A11基因的甲基化调控

目的 研究胶质瘤中EMP3和PCDH-γ-A11基因的启动子甲基化与mRNA表达的关系,分析其在胶质瘤恶性进展中的启动子甲基化调控机制.方法 使用甲基化PCR(MSP)检测EMP3和PCDH-γ-A11基因在胶质瘤、正常脑组织及胶质瘤细胞株中的基因启动子甲基化情况;Real-time PCR检测部分胶质瘤中两个基因的mRNA表达情况;统计学方法分析其基因启动子甲基化、mRNA表达及临床情况间的关系.检测去甲基化试剂5-Aza-CdR对U251和SHG-44细胞株中两个基因启动子甲基化和mRNA表达的影响.结果 在88例胶质瘤中,EMP3基因启动子甲基化发生率为47.7%(42/88),其甲基化率随胶质瘤恶性程度的增加而增高;PCDH-γ-A11基因启动子甲基化发生率为86.4%(76/88),其甲基化率随胶质瘤恶性程度的增加而降低.各级别胶质瘤中EMP3和PCDH-γ-A11基因的mRNA表达与正常脑组织相比均下调(P<0.01).U251和SHG-44细胞株中均检测到EMP3和PCDH-γ-A11基因的启动子甲基化,并且5-Aza-CdR能重新激活两个基因的表达.结论 胶质瘤中EMP3和PCDH-γ-A11基因启动子甲基化可能导致了其mRNA表达下调.EMP3和PCDH-γ-A11基因启动子甲基化可能成为胶质瘤恶性程度和预后评价的分子生物学标记,也可为胶质瘤的基因治疗提供新的靶点.     

肝细胞癌组织中CT9基因mRNA表达的初步研究

目的 探讨肿瘤-睾丸抗原9（CT9）基因mRNA在肝细胞癌中的表达情况。方法 用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法对45例肝细胞癌患者癌组织和相应癌旁组织中CT9基因mRNA的表达情况进行检测，并对其中3例RT—PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定。结果 45例肝细胞癌患者中，23例表达CT9mRNA，表达阳性率为51．1％，相应的癌旁组织中则均为阴性；3例DNA测序结果表明RT—PCR产物确为CT9 cDNA。CT9 mRNA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清AFP水平、HBV和HCV感染无相关性（P〉0．05）。结论 CT9 mRNA在肝细胞癌中呈高比例、特异性表达，可望成为肝细胞癌免疫治疗的理想靶位。     

肝细胞癌中SFRP1和APC基因启动子甲基化与其mRNA的表达

目的探讨肝细胞癌（HCC）中SFRP1和APC基因启动子甲基化状态及其mRNA表达的关系。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术，检测30例肝细胞癌（HCC组）及相应的癌旁组织（癌旁组）和10例正常肝组织（正常对照组）中SFRP1及APC基因启动子甲基化状态和mRNA的表达水平，分析甲基化与某些临床参数与mRNA表达的关系。结果HCC组、癌旁组及正常对照组中的SFRP1和APC基因启动子甲基化率分别是11／30，4／30，0／10和14／30，5／30，0／10；HCC组明显高于其余两组（P〈0．05）。SFRP1基因启动子甲基化与临床资料无关（P〉0．05）；APC基因启动子甲基化与年龄（〈60）岁和癌肿无假包膜有关（P〈0．05）。HCC组SFRP1基因mRNA表达明显低于其余两组（P〈0．05），各组APC基因mRNA表达差异无显著性。两基因甲基化之间无相关性。结论SFRP1和APC基因启动子甲基化与HCC的形成和进展有关，但HCC组织中基因甲基化与mRNA表达的关系尚不明确。     

骨肉瘤组织中COX-2 mRNA、CD44 mRNA和蛋白表达及其两者相关性

我们用逆转录.聚合酶链反应(Rt-PCR)和免疫组织化学染色的方法研究骨肉瘤组织中COX-2 mRNA、CD44 mR-NA和蛋白的表达及两者的相关性.