神经营养因子调节肠道动力的研究进展

神经营养因子是由神经元、神经支配的靶组织或胶质细胞产生,能促进中枢和外周神经元存活、生长和分化的活性蛋白因子.近年来发现神经营养因子可影响肠壁内的肌间神经丛和黏膜下神经丛、肠肌神经丛-肠道神经系统(enteric nervous system,ENS)[1],调节肠道动力.本文就神经营养因子在调节肠道动力方面的研究作一综述.     

氯化苄烷氨处理后大鼠十二指肠肌间神经丛和黏膜下神经丛的变化

目的 探讨0.5%氯化苄烷氨(BAC)对大鼠十二指肠肌间神经丛和黏膜下神经丛的去神经作用和意义.方法 将40只SD大鼠随机分为5组(正常对照组、假手术组和模型1、2、4周组),每组8只.应用免疫组化SP法观察大鼠在BAC作用后不同时间点十二指肠肌间神经丛和黏膜下神经丛的形态和数量的变化.结果 模型1、2、4周组的黏膜下...     

针灸对IBS内脏痛大鼠结肠肌间神经丛神经元P2X_2受体表达的调节

目的观察针灸对肠易激综合征(IBS)内脏痛大鼠结肠肌间神经丛神经元嘌呤受体亚型P2X2表达的调节。方法应用直结肠球囊扩张刺激法制备慢性内脏高敏感IBS大鼠模型,随机分为正常组、模型组、电针组,电针组采用电针"天枢""上巨虚"穴进行治疗。治疗结束后,进行腹部撤回反射评分(AWR),应用免疫荧光法检测肠结肠肌间神经丛P2X2表达变化。结果模型大鼠AWR评分升高,电针治疗后降低;模型组大鼠结肠肌间神经丛神经元中P2X2表达与正常组大鼠相比异常增加,电针组显著降低。结论电针(天枢、上巨虚)能抑制结肠肌间神经丛神经元P2X2受体异常表达,改善IBS大鼠的内脏痛觉敏感状态。     

肝门阻断对大鼠肠肌间神经丛内AchE阳性神经元的影响

目的:研究肝门阻断后大鼠肠肌间神经丛内乙酰胆碱酯酶(AchE)阳性神经元表达的变化规律,以探讨肝门阻断对肠道功能影响的神经机制.方法:SD大鼠分成实验组(再按阻断时间分为肝门阻断20 min组、40 min组和60 min组)及对照组,取相同部位的部分小肠和结肠,制作肠肌间神经丛铺片标本行AchE染色,观察和比较各组AchE阳性神经元的分布密度和染色情况.结果:各实验组与对照组比较,肠肌间神经丛内AchE阳性神经元数量减少(P＜0.05或P＜0.01),且AchE阳性表达减弱;各实验组比较,肝门阻断60 min组的AchE阳性神经元数量明显少于20 min组(P＜0.05),20 min组的AchE阳性神经元胞体内可见强阳性染色颗粒,40 min组和60 min组不易见强阳性染色颗粒,染色较浅.结论:肝门阻断会影响或损伤肠神经系统的胆碱能神经,这可能是术后肠道运动功能障碍发生的神经机制.     

CRF1 IR神经元在豚鼠胃肠道神经系统中的分布

【目的】研究促皮质激素释放激素受体1免疫阳性(corticotrophin releasingfactorreceptor limmunoreactive，CRF1 IR)神经元在豚鼠胃肠道神经系统的分布及CRF1与其他神经元标志物的共存情况。【方法】 RT～PCR、Western blot检测CRF1在肠道神经系统中的表达，免疫荧光组织化学染色或双重染色观察细胞形态和分布。【结果】 小肠黏膜下层和肠肌层神经丛均有CRF1表达；CRF1 IR神经元分布于从胃、十二指肠、空肠、回肠、近端结肠和远端结肠的黏膜下神经丛及肠肌层神经丛；细胞形态为Dogiel Ⅱ型；CRF1与Calbindin、P物质、NF200可共同表达于同一神经元。【结论】CRF1 IR神经元可能是肠道神经系统的内在初级感觉神经元，参与应激时胃肠道功能的调节。     

有胃肠症状要高度警惕糖尿病

糖尿病引起胃肠道并发症的发病机制至今不清楚,糖尿病胃轻瘫的发生可能与糖尿病导致的自主神经损害有关,特别是迷走神经的损伤可以降低胃肠消化功能,还与肠肌间神经丛以及肠黏膜下神经丛的变性坏死有关.     

糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛内氮能神经和Cajal间质细胞的变化

目的:研究糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛氮能神经和Cajal间质细胞(ICC)的变化规律,并探讨肠功能异常的机制.方法:用链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)建立糖尿病大鼠模型(n=12),同时设同批次同种系大鼠6只作为对照组(n=6).3个月后采用NOS组织化学染色法观察糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛的形态学变化,并对两组大鼠十二指肠肌间神经丛内NOS阳性神经元、神经节、节间束和Cajal间质细胞的密度进行了测定.结果:糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元、神经节、节间束和ICC数量均减少(P＜0.01).结论:糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛氮能神经和ICC的改变可能是糖尿病引起肠功能障碍的原因.     

四君子汤对泻剂结肠模型大鼠肠道肌间神经丛乙酰胆碱脂酶活性的影响

目的：观察四君子汤对泻剂结肠模型大鼠肠道肌间神经丛乙酰胆碱脂酶活性的影响,探讨四君子汤对泻剂结肠的治疗作用。方法：应用大黄浸液建立大鼠泻剂结肠模型,建模后给予四君子汤治疗,观察回肠和横结肠肌间神经丛乙酰胆碱脂酶活性的变化。结果：治疗组回肠及横结肠肌间神经丛AchE活性与对照组无差异（P〉0.05）,明显高于模型组及自然恢复组（P〈0.01）。结论：四君子汤对于泻剂结肠神经递质的改变有明显的恢复作用。     

CRF1 IR神经元在豚鼠胃肠道神经系统中的分布

【目的】研究促皮质激素释放激素受体1免疫阳性(corticotrophin releasing factor receptor 1 immunoreac-tive,CRF1 IR)神经元在豚鼠胃肠道神经系统的分布及CRF1与其他神经元标志物的共存情况。【方法】RT-PCR、Western blot检测CRF1在肠道神经系统中的表达,免疫荧光组织化学染色或双重染色观察细胞形态和分布。【结果】小肠黏膜下层和肠肌层神经丛均有CRF1表达;CRF1 IR神经元分布于从胃、十二指肠、空肠、回肠、近端结肠和远端结肠的黏膜下神经丛及肠肌层神经丛;细胞形态为Dogiel Ⅱ型;CRF1与Calbindin、P物质、NF200可共同表达于同一神经元。【结论】CRF1 IR神经元可能是肠道神经系统的内在初级感觉神经元,参与应激时胃肠道功能的调节。     

多巴胺受体在大鼠胃体肌间神经丛氮能神经元的定位

目的研究5种多巴胺受体在大鼠胃体肌间神经丛一氧化氮能神经元的分布。方法本文主要采用冰冻切片和全层铺片的免疫荧光组织化学方法观察胃体肌间神经丛中多巴胺受体的分布,以及与一氧化氮能神经元的共定位情况。结果 5种多巴胺受体亚型的免疫荧光和一氧化氮合酶的免疫荧光在胃体肌间神经丛均有分布,而且在一氧化氮合酶免疫阳性的神经元上存在有多巴胺受体D_1、D_2、D_3和D_5的免疫阳性,而D_4没有明显的免疫阳性表达。结论多巴胺受体D_1、D_2、D_3和D_5分布在胃体肌间神经丛一氧化氮能神经元上,可能通过调节一氧化氮的合成和释放进而调节胃体平滑肌的运动。     

全反式维甲酸诱导大鼠肠神经系统发育异常的实验研究

目的利用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)制作大鼠肠神经系统发育异常的动物模型,检测蛋白基因产物9.5(protein gene product 9.5,PGP9.5)及突触素(synaptophysin,SY)在胎鼠直肠肠壁胚胎发育过程中的分布,了解视黄酸(retinoie acid,RA)信号系统在鼠肠神经系统发育中的作用。方法妊娠SD母鼠共16只,随机分为两组,实验组在孕10d予ATRA一次性灌胃,对照组仅给等量橄榄油。孕20 d剖宫取出胎鼠,进行形态学观察和伴发畸形统计,HE染色和以PGP9.5、SY为肠神经系统(enteric nervous system,ENS)发育标志物的免疫组化SP法。结果对照组获胚胎70只,未见畸形,末端结肠及直肠壁内有神经节细胞,肠壁肌层及黏膜肌层PGP9.5及SY大量阳性表达,沿肠壁呈棕黄色颗粒分布;实验组获胚胎98只,可见先天性肛门直肠畸形及伴发畸形,直肠末端PGP9.5及SY阳性表达分布均比对照组减少。用QWIN3000生物图像分析软件测定随机选定切片视野内的平均阳性面积百分比,所有数据经秩和检验得出PGP 9.5及SY在对照组的表达高于实验组(PGP 9.5:W=1035.00,Z=-8.386,P=0.000<0.01;SY:W=820,Z=-8.121,P值=0.000<0.01),差异有统计学意义。结论 ATRA可成功诱导大鼠肠神经系统发育异常,提示视黄酸信号系统在消化道和神经嵴源性器官胚胎发育中起重要作用。     

Improvement of mount preparations in showing myenteric nerve plexus from intestines of mice

Objective: The whole mount preparations of digestive tract is an effective experimental way to study the appearance and distribution of nerve plexus in digestive tract. Although myentric nerve plexus preparations technique was reported very early. But we have done experiment over and over during our research work in order to improve this traditional method and to meet the needs of our research work, we made some progresses in regular mount preparations after many experiments, which helped offer better situation in observing myentric nerve plexus. Methods: Five healthy male adult Kunming mice (20 -30 g in weight) were used in this study. After intraperitoneal injection of muscle relaxant,with dislocation of cervical vertebra method, the abdominal cavity was exposed through abdominal median incision. After several steps of mount preparations the mucous layer and longitudinal muscle layer mount preparations with myentric nerve plexus were stripped under anatomical microscope. Immunohistochemical staining was also used in our study.Results: The mount preparation samples with myentric nerve plexus from intestines of mice showed positive SP immunoreaction. The positive cells were dark brown. Many of the cytons appeared circular and oval, while some appeared triangular or irregular. Conclusion: Our improved method is really a good method to show enteric nerve plexus. The method has many advantages and is particularly applied to small animals such as Kunming mice and BALB/c mice,weighing from 20 g to 30 g.     

大鼠胃肠道肌间神经丛铺片的制备和染色法的研究

目的：对传统的消化道全层铺片技术和染色方法加以改进,以提高实验结果的准确性.方法：运用改进的方法制作消化道全层铺片,运用免疫荧光染色法显示胃肠道肌间神经丛,并以第I组代谢型谷氨酸受体mGluR1,mGluR5和神经型一氧化氮合酶（nNOS）为例进行染色,显示大鼠胃和小肠肌间神经丛.结果：采用免疫荧光染色并运用荧光显微镜进行观察,得到了较好的结果,可以更加清楚的显示肌间神经丛的整体结构以及单个神经元及神经纤维.结论：胃肠道肌间神经丛铺片结合免疫荧光染色方法是研究胃肠道肌间神经丛的理想方法,精确度较高,为实验结果的准确性打下了良好的基础.     

人消化管壁内粘膜下神经丛分布的初步观察

本文报道人各段消化管壁内粘膜下神经丛在数量和分布上的差异。在光镜下,食管和胃壁内此神经丛偶见,而且靠近肌层。食管的粘膜下神经丛内有神经元的细胞体。此神经丛在小肠多见,大肠为最多见。一些神经丛靠近肌层,另一些靠近粘膜肌层,因此在小肠和大肠的粘膜下层内的神经丛相似于Gunn提出的Henle丛和Meissner丛,但在食管和胃的粘膜下神经丛却无此种相似性。从食管到大肠,粘膜下神经丛有增多趋势。本文还讨论了粘膜下神经丛内神经元的类型和功能。     

犬心脏表面主要神经节丛的组织学观察

目的：为了研究犬心房和心室表现神经节丛的分布。方法：用尼氏染色法光镜下观察犬心脏表现主要神经节丛。结果：在犬心房表面的右房侧壁、左房背介、房间隔区脂肪垫内和心室表面们于主动脉和肺动态之间、主动脉右侧、左冠状动脉根部周围脂肪垫内有许多神经节和神经纤维交织成的神经节丛。心房与心室表面各神经节丛内神经节和神经元分布不均衡，ＲＡＧＰ、ＤＡＧＰ和Ａ－ＰＧＰ内神经节和神经元较多。在犬心脏各部位脂肪垫内和心肌间隙等处均见有大量神经纤维，聚集成束或丛，有的与神经节相连。结论：犬心脏表现神经节和神经元分布不均衡。     

孤啡肽在大鼠胃肠道的分布及意义

目的：观察孤啡肽在大鼠胃肠道的分布．方法：选用正常雄性Wistar大鼠食管、胃、小肠、结肠切片进行免疫组化染色，观察孤啡肽免疫阳性物质在大鼠胃肠道的定位情况．结果：孤啡肽免疫阳性产物定位于大鼠食管、胃和肠道的肌间神经丛内．结论：孤啡肽与经典的阿片肽一样定位于大鼠的肠神经系统，可能参与肠神经系统对胃肠动力、内分泌、黏膜血流及免疫功能的调节．     

盆丛的形态学观察

本文在20具40侧成人男性盆腔标本上观察了盆丛的来源、组成、形态、分支和分布。盆丛由腹下神经、盆内脏神经和骶交感于支所组成。盆丛可分为主部和次级丛二部分,主部分为二型,Ⅰ型为集聚型占25％;Ⅱ型为散在型占75％。由主部后方发支到直肠,由前和前下方发支到膀胱前列腺等部,这些支在所支配的脏器附近相互吻合成次级丛,再发支到相应脏器。     

小剂量利左布合剂在双侧颈深丛阻滞时的应用

目的探讨应用小剂量、低浓度利多卡因和左布比卡因合剂在双侧颈深浅丛均阻滞时的麻醉效果。方法采用传统的改良一点深丛阻滞法,但两侧深丛各只注药4ml;浅丛于胸锁乳突肌后缘,在皮肤与颈阔肌间向头、足、对侧各注药3 ml,胸锁乳突肌中点处注药2 ml。采用视觉模拟评分法（VAS）评估镇痛效果,分别对麻醉前、麻醉后5 min、10 min、切皮时、术中探查时和手术后6个时间点进行评估。观察并记录起效时间、完善时间,并发症及麻醉效果。结果利左布合剂组（L组）在阻滞后的10 min、切皮时和术中探查时阻滞效果优于单纯用0.25%布比卡因组（B组）,P〈0.05;L组起效时间短、完善时间快,与B组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 0.67%利多卡因和0.25%左布比卡因合剂应用于双侧颈深浅丛均阻滞是相对安全,可行的。     

伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎大鼠结肠肠肌间神经丛一氧化氮合成酶神经元的变化

目的观察伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠结肠肠神经系统(enteric nervous system,ENS)肌间神经丛一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,NOS)神经元的变化,以探讨SAP胃肠动力障碍的神经机制。方法20只SD大鼠随机均分为假手术组和SAP组,逆行胰胆管穿刺逆行注射5%牛磺胆酸钠制作SAP模型。检测腹部X线、小肠推进比,胰腺病理评分。制作肌间神经丛全层标本,应用双重免疫荧光染色法观察NOS神经元的形态及占总神经元的百分比。结果与假手术组相比,SAP组大鼠肠管明显扩张,SAP组小肠推进比显著降低(P<0.01),胰腺病理评分明显增高(P<0.01),NOS神经元胞体大而染色深,结间束NOS神经纤维粗大,NOS神经元比例为(40.74±5.15)%明显高于假手术组(P<0.01)。结论结肠肌间丛NOS神经元表达增多可能是大鼠SAP胃肠动力障碍神经机制之一。