家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因复合纯合突变一例

目的 检测家族性高胆固醇血症(FH)患者低密度脂蛋白受体(LDL—R)基因点突变，分析基因型与临床表型间的关系，探讨其分子病理机制。方法以1例临床诊断为FH纯合子患儿及其父母的基因组DNA为模板，用降落PCR方法，在同一程序中分别对LDL—R基因的启动子和全部18个外显子片段进行扩增，琼脂糖凝胶电泳检测，扩增产物直接进行核苷酸序列分析，并检索FH突变数据库(www．ucl．ac．uk／fh)。此外采用PCR-限制性内切酶技术，检测载脂蛋白(Apo)B100基因Q3500R突变，以排除家族性Apo B100缺陷症。结果该患儿及其父亲第4外显子发生Cys^122→Tyr(C122Y)杂合错义突变，同时患儿及其母第9外显子发生Thr^273→Ile(17383I)杂合错义突变，因此该患儿LDLR基因第4、9外显子各存在一个杂合突变，上述突变尚未在FH突变数据库见到。未检测出患儿及其父母Apo B100Q3500R突变。结论此患儿为LDL—R基因存在C122Y、T3831合纯合突变并分别来自其父母；以上两位点突变可引起FH；是FH患者LDL-R基因的一种新突变类型。     

家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因突变分析

目的:检测1例家族性高胆固醇血症(FH)先证者及其4代家系成员低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因突变,探讨该家族FH可能发病分子机制.方法:收集先证者及其家系成员临床资料和基因组DNA,以基因组DNA为模板,用PCR方法扩增LDL-R基因的启动子和全部18个外显子,PCR产物进行限制性内切酶技术结合DNA测序,核苷酸序列分析结果与Gen Bank比对寻找突变;采用PCR-DNA测序技术检测apoB100基因R3500Q、R3531C和R3500W位点以及枯草溶菌素转化酶9(PCSK9)基因,以排除家族性apoB100缺陷症和PCSK9基因突变.结果:先证者及其部分家系成员第6号外显子发生Cys276X杂合无义突变,为半胱氨酸改变为提前终止密码子,使终止密码子在第276位提前出现,为致病性突变,国内尚无报道;另外,第15号外显子发生Arg744Arg同义突变.其母未发现上述突变,未检测出患者及其家系apoB100基因R3500Q、R3531C和R3500W突变以及枯草溶菌素转化酶9基因突变.结论:此患者及家系LDL-R基因存在Cys276X无义突变,可能是FH的致病突变,该突变是我国FH患者LDLR基因的一种新突变类型.     

家族性高胆固醇血症基因突变及临床表型研究

目的 筛查家族性高胆同醇血症家系载脂蛋白(Apo)B100基因及低密度脂蛋白受体(LDLR)基因突变,并探讨其临床表现.方法 采用PCR扩增ApoB100基因包含3500、3501、3531和3480位点的序列;扩增LDLR启动子和全部18个外显子片段,产物电泳鉴定后直接序列分析,结果 与GenBank公布的基因正常序列比对,找出突变.结果 该家系LDLR基因第10外显子的第1581位碱基发生G＞A突变,导致G496E突变;未检出ApoB100基因突变.结论 此突变为一新突变,为该家系致病性突变.

Abstract：

Objective To investigate the low density lipoprotein receptor (LDLR)gene and apolipoprotein (Apo) B gene mutation in a Chinese family with familial hypercholesterolemia(FH) and give the kindrids clinical check-ups. Methods After physical examination, the kindreds underwent ECG and ultrasound checks. Blood samples were tested for lipid profiles. The promoter and all eighteen exons of LDLR gene were investigated by using PCR and agarose gel electrophoresis in combination with DNA sequence analysis. The results were compared with the normal sequences in GenBank and FH database ( www. ucl. ac. uk/fh ) to find mutations. In addition, the apolipoprotein B100 gene for known mutations (R3500Q,R3531C,R3501W and R3480W)that cause familial defective ApoB100 (FDB)was also tested using the same method. Results A novel homozygous G ＞ A mutation at the 1581 bp of exon 10 was detected in the proband and his siblings. It caused a substitution of amimo acid Glu to Gly at codon 496. A novel heterozygous G ＞A mutation at the 1581 bp of exon 10 was detected in his parents. No mutations of R3500Q,R3531C,R3501W and R3480W of ApoB100 were observed. ECGs were normal. Atherosclerosis were found in all family members by ultrasound checks. Conclusions The homozygous G ＞ A mutation at the 1581 bp of exon 10 was first determined in our country. The change of amino acid Glu to Gly is responsible for FH of the family. The type of the gene mutation was not found in the FH database( www. ucl.ac. uk/ih). It's a new type of LDLR mutation.     

用变性高效液相色谱检测和脱氧核糖核酸测序方法对三个肥厚型心肌病家系β肌球蛋白重链基因突变的分析结果

目的:研究家族性肥厚型心肌病(HCM)的主要致病基因β肌球蛋白重链(MYH7)基因突变情况.方法:用变性高效液相色谱(DHPLC)检测和脱氧核糖核酸(DNA)测序方法对三个肥厚型心肌病家系成员的MYH7基因8、14外显子及附近上下游序列进行检测分析;另选正常对照者50例.结果:三个家系其中一个家系发现MYH7基因14外显子中存在Thr441Met突变,外显子8也存在一个点突变.另外两个家系均存在外显子8的C到T的突变,但表型不一.其中一个家系还存在内含子13和19的多态位点.此外,三个家系MYH7基因第3外显子均发现同义突变.结论:MYH7基因在肥厚型心肌病家系中具有较高的突变率.运用变性高效液相色谱技术,能够快速有效的进行基因突变筛查.     

家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因新突变位点的鉴定——附1例报告

目的 分析家族性高胆固醇血症(FH)患者低密度脂蛋白受体(LDLR)的基因突变.方法 收集2004年10月至2006年10月在北京大学第一医院诊断的1例FH患者,以同期北京大学第一医院门诊51名血脂正常者为对照.以患者的基因组DNA为模板,用聚合酶链反应扩增该基因的启动子和18个外显子,对PCR产物进行DNA测序.结果 DNA测序结果发现先证者和其母亲LDLR第4外显子的一种新突变,即编码区外显子第385位核苷酸由G突变为T(G385T),相应的第108位氨基酸由天冬氨酸变化为酪氨酸(D108Y).结论 LDLR基因此位点的突变可引起FH,该突变为LDLR基因的一种新突变.     

家族性高胆固醇血症家系低密度脂蛋白受体活性及其基因突变分析

目的:对1例临床诊断为家族性高胆固醇血症(FH)纯合子患者家系进行低密度脂蛋白受体(LDL-R)活性研究及其基因突变分析,旨在探讨其分子病理机制。方法:对先证者及其父母进行血脂、颈动脉超声等检查;采用流式细胞仪检测先证者及其父母外周血淋巴细胞LDL-R表达量和功能;以先证者基因组DNA为模板,扩增载脂蛋白B100(ApoB100)基因3500区域片断,PCR产物进行核苷酸序列分析,排除由该突变导致家族性ApoB100缺陷症;用降落式PCR方法,在同一程序中分别扩增LDL-R基因的启动子和全部18个外显子片段,扩增产物进行核苷酸序列分析;发现突变后验证其父母是否存在相同基因突变。结果:先证者血清TC和LDL水平明显升高、颈动脉内中膜明显增厚;LDL-R的表达量和结合功能显著下降(分别为正常人的13.6%和21.1%);ApoB100基因3500区域未见突变,LDL-R基因第1864位碱基T取代了G发生纯合错义突变,导致第601位氨基酸天冬氨酸变成脯氨酸(D601Y)。其父母LDL-R基因发现了相同的杂合突变,经检索该突变在我国未见报道。结论:证实家系先证者存在LDL-R基因突变,分别来源于父系和母系的遗传,该突变可能是家系发病的分子基础;D601Y也可能是我国FH患者LDL-R基因一种新的突变类型。     

家族性高胆固醇血症三个家系的基因测序研究

目的 检测3个家族性高胆固醇血症（fmilial hypercholesterolemia,FH)家系的基因突变位点，评价双脱氧链终止基因测序法诊断FH的价值。方法 应用双脱氧链终止基因测序法对各样本DNA进行低密度脂蛋白受体（low density lipoprotein receptor,LDLR)基因测序。结果 临床诊断3个家系43例中纯合子FH5例，杂合子FH者10例，正常28例；对照组30例，LDLR基因测序发现三个突变位点：Exon10TGG1448TAG(Trp-Stop),Exonll ATG1592AAG(Met-Lys),Exon4GAG683GCG(Glu-Ala)；后两者为首次发现，临床判断和基因测序结果69例一致。符合率为94.5%。对于4例不一致的结果，分析认为基因测序结果更合理。结论 双脱氧链终止基因测序法对LDLR基因进行突变的检测是确诊家族性高胆固醇血症的有效方法。     

家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因新突变一例

目的 分析中国家族性高胆固醇血症（FH）患儿低密度脂蛋白受体（LDL－R）基因突变的情况，并为在婴幼儿时期此病的症前筛查提供确诊方法。方法 以患儿及其父母的基因组DNA为模板，首先用聚合酶链反应（PCR）扩增该基因的启动子和全部18个外显子，然后用单链构象多态性（SSCP）方法分析PCR产物，最后对电泳结果异常进行DNA测序。结果 在1个家系中检测出患儿和其父亲LDL－R基因的一种新突变，即在第4外显子的444位碱基发生杂合突变（T→A），相应的氨基酸由半胱氨酸变成终止密码子，其母亲LDL－R基因正常。结论 LDL－R基因此位点的突变可引起FH，PCR－SSCP方法可用于筛查出的高危人群的确诊。     

WASP基因突变所致Wiskott-Aldrich综合征1例并文献复习

目的:分析1例Wiskott-Aldrich综合征患儿的临床特征、基因突变及蛋白表达。方法:总结患儿的临床特征,提取患儿外周血基因组DNA,针对WASP基因所有编码外显子及外显子和内含子交界处进行PCR扩增测序,并采用流式细胞术(FCW)检测WASP表达。结果:本例患儿具有典型的WAS表型,并伴有自身抗体ANA阳性,临床评分为3分。患儿为WASP基因第8外显子剪接位点突变:c.777+1GA,编码蛋白质终止于aa246;FCW检测WASP表达阴性。结论:本例男性Wiskott-Aldrich综合征患儿具有典型的WAS表型与自身抗体阳性的临床特点,其发病是由少见的WASP基因剪接位点突变所致。     

十个汉族家族性肥厚型心肌病MYH7、MYBPC3和TNNT2基因筛查结果及相应的临床特征

目的研究10个汉族家族性肥厚型心肌病的致病基因及突变特点,分析基因型与临床表型的相互关系。方法对10个无血缘关系的汉族家族性肥厚型心肌病的家系的MYH7基因、MYBPC3基因和TNNT2基因进行扫描,聚合酶链式反应扩增其外显子及剪接部位基因组DNA片段,直接测序分析,并分析各突变患者相应临床表型特点。结果10个汉族家族性肥厚型心肌病的家系中5个家系发现上述基因突变,3个家系MYH7基因发生错义突变,分别为Arg663His、Glu924Lys和Ile736Thr,Glu924Lya在中国患者中首次发现。这3个家系中3例患者猝死;2个家系MYBPC3基因发生错义突变、剪接突变和移码突变,1个家系先证者为复合突变即18外显子错义突变ArgS02Trp及27外显子剪接突变即IVS27＋12C〉T,先证者之母携带错义突变,先证者之父携带剪接突变;在另一家系首次发现Gly347fa移码突变,该家系中1例猝死。10个家系中未发现TNNT2基因的功能区突变,但在内含子3中发现一个STR多态性即CTTCT5个碱基的插入／缺失,7个家系先证者发现D基因型。结论MYH7基因为中国汉族家族性肥厚型心肌病最常见致病基因,临床表现较重,猝死率较高。MYBPC3突变也较常见,症状较轻,发病较晚,但复合突变发病早、症状重。同一突变的临床表型存在异质性提示多因素参与了肥厚型心肌病的发生与发展。     

What a difference a day makes

With the availability of group A beta-hemolytic streptococcal (GABHS) antigen detection tests, the management of adult pharyngitis is being reassessed. A decision analytic model was developed which considered four strategies: immediate treatment, no treatment, performing a rapid antigen test, or obtaining a bacterial culture. Patient outcomes were expressed in “well” days, which were reduced by the “sick” days associated with adverse reactions to treatment or complications of GABHS infection. When immediate test results are available, testing is the optimal strategy for probabilities of GABHS between 1 and 49 per cent. This range includes almost all patients, using probability estimates based on clinical criteria. The absolute benefit of testing was 0.1 days. The major advantage of a rapid test is the avoidance of penicillin reactions. Variations in the symptomatic benefits of treatment had minimal effects on the analysis. The analysis supports the use of an antigen test for adult patients with pharyngitis. Received from the Division of General Medicine and Primary Care. Department of Internal Medicine, Medical College of Virginia, Virginia Commonwealth University, Richmond. Virginia. A preliminary version of this work was presented at the seventh annual meeting of the Society for Medical Decision Making, October 21, 1985.