HCMV感染对2型糖尿病糖代谢的影响研究

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染状态与2型糖尿病糖代谢指标之间的关系。方法选取2018年1-8月医院住院的2型糖尿病患者53例为研究对象,其中HCMV-DNA阳性组22例和HCMV-DNA阴性组31例,比较两组患者糖代谢指标的变化情况。结果两组患者空腹血糖、胰岛素和C肽指标水平比较差异有统计学意义(P<0.05),餐后2h血糖、胰岛素和C肽及HbA1c指标比较差异无统计学意义。HCMV-DNA滴度对数值与空腹血糖水平呈正相关(P<0.05),相关系数r=0.982;与空腹胰岛素水平呈负相关(P<0.05),相关系数r=-0.983;与空腹C肽水平呈负相关(P<0.05),相关系数r=-0.993。结论 HCMV感染只对2型糖尿病患者空腹状态下糖代谢指标有影响,并且严重程度与DNA的载量水平密切相关。     

妊娠期HCMV感染对妊娠结局的影响

目的:了解孕妇HCMV感染状况及其与不良妊娠结局之间的关系。方法:应用ELISA抗体夹心法检测6 022名孕妇血清中HCMV-Ig M水平。结果:孕妇血清中HCMV-IgM阳性率为1.11%,其中正常孕妇为0.78%,习惯性流产孕妇为14.72%。在随访的50例HCMV感染孕妇中,妊娠结局为自然流产者占32.00%(16/50);生理性黄疸者占26.00%(13/50),显著高于其他异常妊娠结局者(P<0.001)。结论:HCMV宫内感染可导致不良妊娠结局,尤其是自然流产和新生儿病理性黄疸。应重视对育龄妇女的HCMV感染的筛查,增强孕期的保健水平,在妊娠的早、中、晚期进行复查,降低不良妊娠结局的发生率。     

DNA扩增制备探针并用于临床白色念珠菌感染鉴定

目的应用聚合酶链反应技术扩增特异DNA片段,并制备成为可应用于临床鉴定白色念珠菌的基因探针. 方法采用聚合酶链反应技术特异地扩增白色念珠菌标准株DNA EO3 125 bp基因片段,然后用半抗原地高辛配基标记,在完成基因探针显色敏感度检测之后,应用该基因探针分别对血液病病房分离的白色念珠菌、热带念珠菌及大肠埃希菌等多种细菌进行斑点杂交测试. 结果基因扩增制备Dig-125 bp DNA探针显色敏感度为0.01 pg,具有白色念珠菌特异性,与其他念珠菌和细菌不发生杂交. 结论基因扩增制备EO3 125 bp DNA探针方法简便可靠,具有很强特异性,可应用于临床鉴定白色念珠菌感染.     

DNA—DNA分子杂交技术检测EIEC侵袭力基因的探讨

本文用福氏志贺氏菌5型致病性质粒PWR100,内切酶ECORl限制产生的17kb片段为探针,经~(32)P缺口翻译(Nick translation)标记,对30株EIEC进行DNA-DNA分子杂交。结果杂交阳性率为90%,高于豚鼠角膜结膜侵袭力试验(67%)。不同血清型两项实验结果看不出明显差别。证实EIEC与志贺氏菌侵袭力基因序列具有同源性。     

基于非对称发夹探针的杂交链反应技术应用于病原菌检测的实验研究

目的 应用基于非对称发夹探针的杂交链反应技术,检测肺炎克雷伯菌不对称PCR产物,建立一种新的病原菌快速检测方法.方法 采用Array Designer 4.0软件,针对肺炎克雷伯菌的16S rDNA可变区域设计非对称发夹式DNA探针,优化探针浓度,以不对称PCR扩增肺炎克雷伯菌16rDNA可变区所制备的单链DNA为靶序列,采用HCR进行检测和分析.结果 HCR体系中发夹探针最佳浓度为1μmol/L;当靶序列初始浓度≥0.05μmol/L时,通过琼脂糖凝胶电泳可观察到明显的HCR聚合物;不对称PCR法制备的单链DNA可以启动杂交反应.结论 应用基于非对称发夹探针的杂交链反应技术检测病原菌具有反应体系简单,无需酶促反应等优点,可对血流感染病原菌基因组进行简便、快速、特异的检测.     

HCMV宫内感染对新生儿行为神经发育影响的研究

目的:探讨人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)宫内感染对新生儿行为神经发育的影响.方法:选择胎龄37～42周、脐血或外周血检查HCMV IgM阳性、母亲产前筛查或产时监测HCMV IgM阳性的24例新生儿作为感染组,同期检查母亲及新生儿脐血或外周血HCMV感染均为阴性的100例新生儿为对照组,两组新生儿均在出生后48～72 h、12 ～14天、26 ～ 28天测查NBNA评分.结果:新生儿HCMV宫内感染率为1.48％; 48～72 h、12 ～ 14天、26 ～ 28天三个时间段,HCMV感染组患儿的行为能力、被动肌张力及主动肌张力评分与对照组新生儿比较差异均有统计学意义(P＜0.05),原始反射评分与对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05),一般评估评分在48 ～ 72 h差异有统计学意义(P＜0.05),而在12 ～ 14天、26 ～28天评分均为满分,与对照组比较无显著差异;三个时间段,HCMV感染组新生儿NBNA评分总分均低于对照组(P＜0.05).结论:HCMV宫内感染可影响新生儿行为神经的发育,主要导致行为能力及主被动肌张力的下降.     

DNA混合池技术在遗传及分子流行病学中的应用进展

许多慢性非传染性疾病的病因机制复杂,其发病与环境暴露因素有关,也与遗传易感性及交互作用关系密切.     

用DNA探针鉴别诊断有钩绦虫和无钩绦虫的研究

通过用无钩绦虫提取的DNA制做一段遗传DNA:这段DNA是用ECORI限制性内切酶对2～4kb的碱基片段作用,选择超密度片段分离,克隆在λgt10噬菌体内。这组绦虫DNA包括有钩绦虫、无钩绦虫、巨颈绦虫、马的巨颈绦虫、细粒棘球绦虫和牛DNA,同时用猪或人DNA连同杂交分析以确定两组重组噬菌体。第一种探针称作HDP_1,只与无钩绦虫反应。第二种称为HDP_2,能与无钩绦虫和有钩绦虫两种DNA发生反应,但不能与其他种类DNA起反应,这样就为确定人粪便中绦虫节片及碎片提供了广泛的试剂,如果两种探针联合使用确定无钩绦虫,那么在诊断中是极其重要的,并足以区别有钩绦虫和无钩绦虫的感染。因此,类似于这种类型的探针在鉴别诊断中将是非常有用的。     

用二种基因探针对肠毒性大肠杆菌腹泻的初步分子流行病学研究

应用肠毒性大肠杆菌三种肠毒素(LT、ST-P、ST-H)基因探针对近年来从广州、武汉、四川、沈阳、湖南等部分省市搜集到的921株致急性腹泻的大肠杆菌进行DNA-DNA菌落原位杂交检测。LT198株占21.5%(198/921)、ST-H 131株占14.2%(131/921)、ST-P 54株占5.9%(54/92l),ST+LT 19株占2.1%(19/921)。表明我国ETEC腹泻病原体中以LT⁺ ETEC为主,其次为ST-H⁺郊区农村ST-P⁺也占相当比例。为国内ETEC腹泻的分子流行病学研究提供了基本数据和较先进的诊检工具。     

国产生物素化脱氧尿嘧啶核苷酸和光敏生物素标记DNA探针及其应用

本文报告应用国产Bio-11-dUTP(生物素化脱氧尿嘧啶核苷酸)和光敏生物素标记DNA探针,并用于细菌核酸分子杂交的初步实验结果。用亲和素一辣根过氧化物酶(A-HRP)显色表阴,通过二步缺口翻译法制备的Bio-11-dUTP探针,标记活性可达20pg,较常规一步法至少高出10倍;而光照标记的探针显色敏感性略低,为40～80pg;标记探针检测靶DNA的敏感性分别为1～2ng和5～10ng,而与无关DNA不发生非特异反应,可用于斑点杂交和菌落杂交。     

孕妇感染HCMV时IgG抗体亲和力与HCMV DNA联合检测的临床意义

目的：本文通过研究HCMV-IgG亲和力指数（avidity index,AI）以及HCMV-DNA的检测,对孕产妇原发性感染及继发性感染进行综合评价。旨在为防止和减少围产期感染、流产及新生儿先天畸形、听力障碍和智力障碍提供有效而准确的检测数据及临床诊断依据。方法：采用德国Virion/serion公司酶联免疫吸附试验（ELISA）定量试剂,检测孕妇血清中HCMV的IgM和IgG抗体、IgG抗体亲和力;采用中山医科大学达安公司RV核酸扩增（PCR）荧光定量检测孕妇血清中HCMV-DNA,并对其结果进行分析。结果：341例孕妇中,HCMV-IgG低亲和力样本孕产史不良孕妇组所占比例显著高于初次妊娠孕妇。孕产史不良孕妇HCMV-DNA阳性例数所占比例显著高于初次妊娠孕妇。结论：341例孕妇中存在一定比例的HCMV现症感染,建议妊娠妇女尤其是有不良孕产史者尽可能同时进行HCMV-IgG亲和力指数及HCMV-DNA检查,以便尽早采取措施,避免由于HCMV感染导致的新生儿出生缺陷的发生。     

应用DNA探针检测食品等标本中的沙门氏菌

我们采用缺口翻译技术,以放射性32~p标记来自鼠伤寒沙门氏菌23566的染色体DNA 8.0kb片段,作为特异性探针,对从食品、污水标本中分离出的13种(型)16株沙门氏菌及1株亚利桑那菌进行了菌落杂交检测,同时对17株非沙门氏菌进行了检测。结果表明:该特异性探针可100％地检出实验沙门氏菌而不与非沙门氏菌发生交叉。接种的菌量在10~2时,经培养就可得到良好的杂交结果。     

人巨细胞病毒对母婴的影响

为探讨人巨细胞病毒感染对母儿的影响,采用ＥＬＩＳＡ法对１８１８例早、中、晚孕期孕妇进行ＨＣＭＶ病原体血清学监测,并对部分感染者的羊水、胎盘组织、脐血等采用ＰＣＲ方法监测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ,同时采用Ｂ超监测胎儿的生长发育及新生儿结局。结果发现早、中晚期孕妇中有７８例为活动性感染（４．３％）,并发胎膜早破和早产１７例。新生儿先天感染２２例（２８．２１％）,２例 流产、４例畸形、１３例头颅Ｂ超异常,９只耳     

人巨细胞病毒感染与自然流产关系的研究

目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染与自然流产之间的关系。方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)及聚合酶链试验(PCR)检测39例自然流产患者(流产组)血清中HCMV-IgM及外周血、胎儿组织中HCMV-DNA,并选择23例人工流产孕妇做对照组。结果 流产组患者血清中HCMV-IgM、外周血、胎儿组织HCMV-DNA阳性率分别为38.46%、43.58%、33.33%.对照组分别是8.69%、8.69%、4.31%.两者比较差别有显着性意义(P<0.05).结论 HCMV感染是引起自然流产的重要原因之一。     

孕妇巨细胞病毒激活感染及对胎儿影响研究

目的 探讨孕妇巨细胞病毒激活感染的危险因素及对胎儿的影响.方法 收集孕妇血清标本351份,母婴血清标本245对,检测HCMV-IgM抗体.并对孕妇的年龄、孕次、产次及病理性流产史等因素进行调查,观察对婴儿的影响.结果 上述因素对HCMV激活感染有一定作用,其中孕次是激活感染的危险因素.孕妇激活感染可影响胎儿发育,引起胎儿生长发育迟缓,新生儿呈低体重,多种脏器均有HCMV包涵体及病毒颗粒.在孕早期能使胎儿发育受阻而产生难免流产.结论 减少怀孕次数有利于优生优育,避免早期的HCMV激活感染,可减少流产及畸形儿出生.     

母婴人巨细胞病毒感染相关性数学模型研究

目的：建立母婴人类巨细胞病毒感染相关性数学模型。方法：以ELISA及PCR技术对母婴血浆HCMV－IgM及血浆和P（C）BMCsHCMV-DNA进行了检测。结果：母婴HCMV感染之间存在明显的相关性,而且母亲血浆中HCMV DNA与HCMV先天性感染相关性最大,其Spearman等级相关系数在0．7018（P＜0．0001）。另外也作了从母亲HCMV检测结果判断HCMV先天性感染的Fisher二类判别分析,并建立了Fisher二类判别函数。经回代判别,本判别函数用于判断HCMV先天性感染准确性达91．2％。结论：母婴HCMV感染之间存在明显的相关性,并且可以通过检测母亲HCMV来推测其胎儿HMCV先天感染的可能性。     

原位杂交技术检测子宫内单纯疱疹病毒感染与自然流产的关系

目的探讨单纯疱疹病毒(HSV)感染与自然流产的关系。方法应用非放射性核酸分子原位杂交技术检测56例自然流产者的流产组织或子宫内膜组织中HSVDNA的存在情况,其中40例为流产组织(均可见蜕膜和绒毛组织)、16例为自然流产后子宫内膜;20例同龄人流胎盘组织和20例正常子宫内膜分别作为对照组。结果自然流产后子宫内膜HSVDNA的检出率为56.3%(9/16例),明显高于正常子宫内膜,差异有有显著性(P<0.05);自然流产组蜕膜组织HSVDNA的检出率为47.5%(19/40例),明显高于人工流产组,差异有显著性(P<0.05);胎盘绒毛滋养细胞核内存在HSVDNA,自然流产组有14.7%(5/34例)、人工流产组有5%(1/20例)。结论宫内HSV感染与部分自然流产有关;HSVDNA可进入胎盘,但几率较小。     

不同年龄段儿童呼吸道感染肺炎支原体IgM与DNA的相关性研究

目的研究不同年龄段儿童呼吸道感染肺炎支原体IgM与DNA的相关性。方法采用ELISA法检测320例患儿就诊当日和7d后血清标本，用分子信标实时荧光PCR检测患儿咽拭子标本，根据不同年龄段进行对比分析。结果320例患儿MP-DNA阳性率为40％，就诊当日标本MP—IgM阳性率11％，7d后标本阳性率为30％；就诊当日和7d后血清学结果与PCR结果差异有统计学意义（P〈0.01）；7d后血清学结果以1～3岁患儿阳性率最高（42％），与其他组比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论不同年龄段的儿童由于免疫系统发育处于不同阶段，对肺炎支原体的免疫应答可能存在差异。