钩藤总碱中钩藤碱和异钩藤碱定量方法的建立及稳定性试验

目的建立钩藤总碱中钩藤碱和异构藤碱的含量测定方法并对其稳定性进行研究。方法采用C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),甲醇∶0.1 mol/L三乙胺溶液(冰醋酸调pH 7.5)44∶56为流动相,流速为1.0 ml/min。检测波长254 nm。比较分别放置在室温、6℃条件下的同一批次2份总碱中钩藤碱、异构藤碱的含量变化。结果钩藤碱进样量在0.020 2～0.101 mg/ml线性关系良好,r=0.999 9;异构藤碱进样量在0.020 6～0.103 mg/ml线性关系良好,r=0.999 9,钩藤碱平均回收率为99.67%,RSD为0.97%;异钩藤碱平均回收率为99.95%,RSD为1.02%。结论建立的方法简便、准确,可作为钩藤总碱的含量测定方法;钩藤碱、异构藤碱不稳定,可随时间延长含量下降,且温度对二者皆有影响,对钩藤碱影响较大。     

钩藤碱对麻醉大鼠颈动脉窦压力感受器活动的抑制作用(英文)

目的探讨钩藤碱(Rhy)对大鼠颈动脉窦压力感受器活动的影响及其有关机制。方法通过隔离灌流颈动脉窦区的方法来获得颈动脉窦压力感受器活动的各项参数,阈压(TP)、饱和压(SP)、最大斜率(PS)和窦神经放电的最大积分值(PIV)。① Rhy10, 50和100μmo·lL-1用K-H液稀释后,隔离灌流颈动脉窦区。待钩藤碱发挥作用后,用K-H液冲洗恢复,在给药前后以阶梯方式升降窦内压以刺激颈动脉窦压力感受器,同时记录窦神经传入放电及积分。②分别预先灌流一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、K+通道阻断剂四乙胺(TEA)和L-钙通道开放剂Bay K8644,观察他们对钩藤碱效应的影响。结果①Rhy 10μmol.L-1灌流隔离的颈动脉窦区,PS从(19.2±0.3)%降至(18.2±0.1)%·kPa-1,PIV从(219.3±3.3)%降至(199.1±3.8)%,同时TP和SP分别从(8.2±0.3)和(21.5±0.1)增加至(9.1±0.1)kPa和(22.1±0.1)kPa。用Rhy 50和100μmol·L-1进行灌流时,如PS,TP和SP的变化均呈浓度依赖性,表明Rhy可以抑制CBA。②预先灌流L-NAME不能阻断Rhy的效应。③预先灌流K+通道阻断剂TEA 1mmol·L-1也不能阻断Rhy对颈动脉窦压力感受器放电活动的抑制。④预先灌流L-钙通道开放剂Bay K8644可大部分阻断Rhy的作用。结论 Rhy可直接抑制大鼠颈动脉窦压力感受器传入神经放电活动,其机制可能为Rhy抑制了动脉压力感受器上的Ca2+内流。     

钩藤中钩藤碱的成分分析

目的:探讨钩藤中所提取的钩藤总碱的有效成分之一钩藤碱进行鉴定和含量测定。方法:采用TLC通过显色剂的显色比较有相同的Rf(比移值)进行鉴定;采用紫外分光光度法对钩藤总碱中的钩藤碱进行含量测定。结果:本品定性鉴定薄层色谱特征明显,与标准品有相同的Rf;紫外分光光度法在246.0nm波长处测得钩藤总碱中钩藤碱的含量为0.71%。结论:此方法快速、简便、经济、准确、重现性好。     

钩藤碱对苯丙胺依赖大鼠神经核团中NR2B mRNA表达的影响

目的研究钩藤碱对苯丙胺诱导的条件性位置偏爱大鼠伏核和杏仁核中NR2B mRNA表达的影响。方法将56只♂SPF级SD大鼠分为正常对照组、苯丙胺模型组、氯胺酮+苯丙胺组、钩藤碱低、中、高剂量+苯丙胺组和钩藤碱+生理盐水组,每组8只。按要求分别给予相应药物。d5用条件性位置偏爱箱观察大鼠在白箱中的停留时间,并用原位杂交技术对伏核和杏仁核NR2B mRNA表达进行检测。结果①连续4d给予苯丙胺2mg.kg-1建立了位置偏爱模型,氯胺酮及钩藤碱低、中、高剂量均可消除位置偏爱效应,随钩藤碱剂量增加效应加强,且钩藤碱自身无精神依赖性;②苯丙胺模型大鼠伏核和杏仁核NR2B mRNA表达较正常对照大鼠明显增加,氯胺酮及中、高剂量钩藤碱抑制NR2B mRNA的表达,低剂量无明显影响。钩藤碱本身不影响正常大鼠NR2B mRNA的表达。结论伏核和杏仁核NR2B mRNA的表达参与了钩藤碱抗苯丙胺依赖作用的分子生物学机制。     

钩藤植物不同药用部位中钩藤碱的含量分析

目的 分析广西不同产地钩藤植物不同药用部位钩藤碱的含量.方法 采用HPLC法分别测定10批钩藤药材中带钩茎枝、无茎枝钩、无钩茎枝、主杆和叶的钩藤碱含量.采用Gemini C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(含2 mmol·L-1三乙胺,冰乙酸调pH7.5)(64∶36),流速1.0 mL· min-1,检测波长254 nm.结果 广西10个产地钩藤植物各个不同部位大部分可检出钩藤碱成分,钩藤碱的含量主杆＞带钩茎枝、无茎枝钩、无钩茎枝＞叶.结论 钩藤植物不同药用部位大部分含钩藤碱成分,这为扩展钩藤植物的药用部位、充分利用钩藤资源提供了试验依据.     

钩藤药材中异钩藤碱含量的超高效液相色谱和高效液相色谱法的测定

目的对超高效液相色谱和高效液相色谱法在钩藤药材中异钩藤碱含量测定中的应用情况进行分析探讨,为今后的研究工作提供可靠的参考依据。方法试验中高效液相色谱法所需色谱柱为Alltech C18柱,流动相为乙腈-水,流速为1.0 mL/min,检测波长为246 nm,柱温为25℃,超高液相色谱法色谱柱为Waters AC-QIITY UPLCTMT3 C18柱,流动相为乙腈-水,流速为0.6 mL/min,检测波长为246 nm,柱温为50℃。结果对比发现两种检测方法的检测结果一致,无明显差异。结论采取超高液相色谱法和高效液相色谱法对钩藤中钩藤碱以及异钩藤碱含量进行测定的方法简单、可靠,值得关注并推广。     

钩藤碱对苯丙胺依赖大鼠伏核和杏仁核中NR2B蛋白表达的影响

目的:研究钩藤碱对苯丙胺依赖大鼠伏核和杏仁核中NR2B蛋白表达的影响。方法:采用条件性位置偏爱实验和免疫组化技术。结果:(1)建立了苯丙胺(2mg.kg-1,连续4d)诱导的位置偏爱模型,氯胺酮及钩藤碱低、中、高剂量均可消除苯丙胺诱导的位置偏爱效应,随钩藤碱剂量增加其效应加强,且本身无精神依赖性;(2)苯丙胺模型组大鼠伏核和杏仁核NR2B蛋白表达增加,氯胺酮及钩藤碱中、高剂量抑制NR2B表达,低剂量及本身对NR2B表达无影响。结论:伏核和杏仁核NR2B蛋白表达参与了钩藤碱抗苯丙胺依赖作用的分子机制。     

异钩藤碱对猫的心血管作用与血药浓度的关系

目的　用麻醉猫研究异钩藤碱 (Iso)的心血管药理效应与血药浓度的关系。方法　异钩藤碱粉末 ,分别临用时配制 (FPI)和配好后室温放置 1周备用 (DPI)。以RM 6 0 0 0八道生理仪记录猫的收缩压、舒张压和心率的变化 ,相应时间点取血 1.0mL。用反相高效液相色谱法测定血药浓度。结果　Iso的降压及负性频率效应与其给药剂量及血药浓度呈明显的量 效关系 ,同剂量的DPI和FPI给药 ,FPI的起效时间、疗效维持时间及最大效应均强于DPI。结论　Iso的降压及负性频率效应与其给药剂量及血药浓度呈明显的量 效关系 ;Iso的溶液剂型不稳定 ,室温放置 1周后可降低其心血管药理效应。     

钩藤碱对糖尿病大鼠神经病理性疼痛的镇痛作用观察

目的：探讨钩藤碱对糖尿病神经病理痛大鼠的镇痛作用。方法：雄性SD大鼠（180-200g）腹腔注射链脲佐菌豢（STZ）制备成糖尿病神经病理痛模型,出现痛敏症状后,随机分为4组,采用von Frey测试针和冷板（5度）法,测量腹腔给予钩藤碱后大鼠不同时间机械缩腿阈值和冷刺激后抬足次数的（次/5分钟）变化。结果：钩藤碱以剂量依赖方式提高糖尿病神经痛大鼠机械缩腿闽值、降低冷刺激后的抬足次数,给予钩藤碱2h后,40、80、160mg／kg剂量钩藤碱的机械缩腿阈值明显增高,而冷刺激抬足次数湿菁卜降,分别与用药前和对照组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：钩藤碱能显著提高糖尿病神经痛大鼠的机械缩腿阈值．有效减少冷刺激的抬足次数．对神经源性疼痛具有明显的镇痛作用。     

高效液相色谱-蒸发散射检测器法测定中药钩藤中钩藤碱的含量

目的：探究利用高效液相色谱-蒸发散射检测器法测定中药钩藤中钩藤碱的含量的效果。方法选择15 g钩藤药粉，将其分为两份，对照组进行高效液相色谱-紫外检测器检测，实验组进行高效液相色谱-蒸发散射检测器检测，观察两组方法检测的准确率和所需时间。结果以精密钩藤碱样品的含量为“金标准”，发现高效液相色谱-蒸发散射检测器检测可以更加准确地判定中药钩藤中钩藤碱的含量情况（P＜0.05）。同时实验组检测的天数少于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论高效液相色谱-蒸发散射检测器检测的方法更有利于对中药钩藤中钩藤碱的测定，值得临床进一步研究。     

Effects of anesthetics on Fos protein expression in autonomic brain nuclei related to cardiovascular regulation

We tested the influence of urethane, chloral hydrate and a mixture of ketamine/xylazine on Fos protein expression in autonomic brain regions related to blood pressure. We conclude that ketamine/xylazine is a suitable anesthetic to be used in studies looking at c-fos expression in neural circuits serving cardiovascular regulation.     

Effect of single intracerebroventricular injection of alpha-interferon on monoamine concentrations in the rat brain.

The effect of a single intracerebroventricular (i.c.v.) injection of alpha-IFN on levels of central monoamines and their metabolites in six brain regions (frontal cortex, striatum, hypothalamus, hippocampus, mid brain and medulla) of the rat was investigated. Wistar rats (n=10) were decapitated 2 h after i.c.v. injection of alpha-IFN. The brain tissues were homogenized, and monoamine concentrations were measured by high-performance liquid chromatography with an electrochemical detector. The levels of 5-hydroxytryptamine (5-HT) were significantly reduced in the frontal cortex in a dose-dependent manner, and the levels of both 5-HT and 5-hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA) were reduced in the mid brain and the striatum. The levels of noradrenaline (NA) were also significantly reduced in a dose-dependent manner in the frontal cortex. Some neurophysiological changes that affect activity of the noradrenergic or/and the serotonergic neuron system may occur during IFN therapy.     

Dissection of peripheral and central endogenous opioid modulation of systemic interleukin-1beta responses using c-fos expression in the rat brain

In opiate addicts or patients receiving morphine treatment, it has been reported that the immune system is often compromised. The mechanisms responsible for the adverse effects of opioids on responses to infection are not clear but it is possible that central and/or peripheral opioid receptors may be important. We have utilised an experimental immune challenge model in rats, the systemic administration of the human pro-inflammatory cytokine interleukin-1beta (IL-1beta) to study the effects of selectively blocking peripheral opioid receptors only (using naloxone methiodide) or after blocking both central and peripheral opioid receptors (using naloxone). Pre-treatment with naloxone methiodide decreased (15%) IL-1beta-induced Fos-immunoreactivity (Fos-IR) in medial parvocellular paraventricular nucleus (mPVN) corticotropin-releasing hormone (CRH) neurons but increased responses in the ventrolateral medulla (VLM) C1 (65%) and nucleus tractus solitarius (NTS) A2 (110%) catecholamine cell groups and area postrema (136%). However no effect of blocking peripheral opioid receptors was detected in the central nucleus of the amygdala (CeA) or dorsal bed nucleus of the stria terminalis (BNST). We next determined the effect of blocking both central and peripheral opioid receptors with naloxone and, when compared to the naloxone methiodide pre-treated group, a further 60% decrease in Fos-IR mPVN CRH neurons induced by IL-1beta was detected, which was attributed to block of central opioid receptors. Similar comparisons also detected decreases in Fos-IR neurons induced by IL-1beta in the VLM A1, VLM C1 and NTS A2 catecholamine cell groups, area postrema, and parabrachial nucleus. In contrast, pre-treatment with naloxone increased Fos-IR neurons in CeA (98%) and dorsal BNST (72%). These results provide novel evidence that endogenous opioids can influence central neural responses to systemic IL-1beta and also suggest that the differential patterns of activation may arise because of actions at central and/or peripheral opioid receptors that might be important in regulating behavioural, hypothalamic-pituitary-adrenal axis and sympathetic nervous system responses during an immune challenge.     

醒脑静注射液对大鼠脑外伤后脑组织c-fos基因表达的影响

目的：探讨醒脑静注射液对创伤性脑损伤后脑组织c-fos基因表达的影响。方法：制作自由落体脑挫裂伤大鼠动物模型，设立对照组，外伤组和醒脑静治疗组，使用免疫组化方法检测c-fos基因在脑组织的表达情况。结果：伤后24h外伤组及醒脑静治疗组均检测到高水平表达的Fos蛋白，但醒脑静治疗组Fos蛋白表达水平明显低于外伤组。结论：醒脑静注射液对创伤性脑损伤后脑组织c-fos的表达具有显著的抑制作用，醒脑静对创伤性脑损伤的治疗作用可能通过抑制细胞凋亡的机制。     

Effect of intracerebroventricular injection of pentagastrin on rat drinking behavior

Intracerebroventricular (icv) injection of pentagastrin showed a powerful, dose dependent antidipsogenic effect in the rat. Drinking behavior stimulated by 48 h water deprivation was inhibited by 2000 ng of pentagastrin which also blocked, at lower doses, water intake induced by icv injection of angiotensin II (100 ng) and carbachol (150 ng). Pentagastrin was less effective on food intake stimulated by 24 h starvation. The antidipsogenic effect was not a consequence of behavioral alteration. It is suggested that gastrin-like peptides in the brain may play a role in the regulation drinking, acting as thirst inhibitors.     

氟比洛芬酯对切口痛大鼠痛行为及脊髓c-fos蛋白表达的影响

目的通过术前和术后尾静脉注射不同剂量的氟比洛芬酯对切口痛大鼠镇痛效果的比较,探讨氟比洛芬酯的预防性镇痛效果。方法雄性SD大鼠64只,随机分为8组,每组8只。本实验分为F部分和C部分;F部分于术前20min给予生理盐水或不同剂量的氟比洛芬酯,C部分于术后20min给予生理盐水或不同剂量的氟比洛芬酯。F部分和C部分各分为4组,即生理盐水组(F1,C1组),氟比洛芬酯1,5,9mg/kg组(F2,F3,F4组,C2,C3,C4组)。采用累积疼痛评分方法对其进行行为学评价,并于术后2h将大鼠处死取其脊髓膨大处,用免疫组织化学方法研究脊髓背角c-fos蛋白的表达情况。结果①F部分:与F1组比较,F2、F3和F4组累积疼痛评分均降低(P<0.05),c-fos阳性表达细胞数量均减少(P<0.05);②C部分:与C1组比较,C2、C3和C4组累积疼痛评分均降低(P<0.05),c-fos阳性表达细胞数量减少(P<0.05);③F和C部分比较:免疫组织化学结果显示F3组与C4组比较差异无统计学意义(P>0.05),即术前中剂量组就产生了术后大剂量组的镇痛效果。结论术前使用氟比洛芬酯能产生预防性的镇痛效果,且镇痛效果较好。     

侧脑室注射环丙沙星对大鼠脑电和脑超微结构的影响

以３００μｇ／ｋｇ环丙沙星注入大鼠右侧脑室后，于皮层感觉运动区记录皮层脑电图。结果：注射后分别约经１５３．９±８８．１７和２９７．８８±１２５．５５ｓ潜伏期后，右、左皮层先后出现痫样放电，以注射侧先出现。放电波形多变，频率２０～４０次／分，波幅１～２ｍＶ。同时伴有皮层、海马以细胞核损伤为主的超微结构变化。提示：环丙沙星对中枢神经系统具有刺激和损伤作用。     

脑室注射生长抑素或GABA对大鼠痛阈和脑内GABA或生长抑素含量的影响(英文)

目的:研究脑内Som和GABA的相互影响及其与痛觉调制的关系.方法:应用放射免疫,氨基酸分析仪和痛阈测定法.结果:发现Som 10 μg icv可使大鼠海马,脑干内GABA含量显著减少,分别由对照组的2.3±0.3和2.2±0.4 μmol g~(-1)降至1.6±0.4和1.5±0.2μmol g~(-1),痛阈由对照组的4.2±0.2 s升高到7.0±1.1 s;半胱胺600 μg icv降低脑内Som后,海马和脑干内GABA含量也明显减少,但痛阈不变.GABA 1500 μg icv后,痛阈变化不明显,而海马、脑干内Som含量均显著减少,分别由对照组的55±4和84 4 ng g~(-1)降至37±5和55±6 ng g~(-1)这一效应可被荷包牡丹碱10 μg阻断;以异烟肼300 mg kg~(-1)降低脑内GABA后,海马和脑干内Som含量即明显增多.结论:脑内Som和GABA之间存在着相互抑制作用,但与它们在痛觉调制中的作用无关.     

粉防己碱对大鼠大脑c—fos原癌基因表达的影响

目的：本研究旨在探讨Ｔｅｔ对林丹－一种通过细胞内游离钙（Ｃａ＾２＋）ｉ）介导大脑ｃ－ｆｏｓ基因表达的神经毒剂－诱导大鼠大脑ｃ－ｆｏｓ基因表达的影响。方法：Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交斑点杂交技术及双波长薄层长色谱扫功分析，结果：大鼠口服林丹３０ｍｇ．ｋｇ＾－１小时后大脑ｃ－ｆｏｓ基因表达明显增强至１４６ｍｍ＾２而在口服林丹前３０ｍｉｎ分别口服Ｔｅｔ１，２及４ｍｇ．ｋｇ＾－１大鼠大脑ｃ－ｆｏｓ基因表达被