尾加压素Ⅱ和组织型转谷氨酰胺酶在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义

目的：探讨尾加压素Ⅱ（UⅡ）和组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义,为进一步明确UⅡ致纤维化的机制提供实验依据。方法：雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（n=8）和模型组（n=8）,采用左侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型。术后第2周末处死各组大鼠。采用HE和Masson染色观察肾组织病理学改变;采用免疫组化法检测肾间质中UⅡ、tTG和纤维连接蛋白(FN)的表达;采用RT-PCR技术检测UⅡ和tTG mRNA的表达水平。结果：HE和Masson染色可见,模型组大鼠肾间质增宽,胶原纤维明显增生。免疫组化显示,假手术组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管、肾间质区有少量表达,肾小球内除UⅡ有微量表达外,tTG和FN无阳性表达;模型组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管和肾间质区的表达信号较假手术组明显增强(P<0.01),模型组大鼠UⅡ的蛋白表达与FN的蛋白表达呈正相关关系（r=0.724,P<0.05）。模型组UⅡ和tTG的基因表达明显高于假手术组(P<0.05),模型组大鼠肾内UⅡ基因和蛋白表达与tTG基因和蛋白表达均呈正相关关系（r=0.647,P<0.05 ;r=0.787,P<0.01）。结论：UⅡ和tTG可能共同参与肾间质纤维化,UⅡ的致纤维化作用可能部分是通过tTG的活化而实现的。     

转谷氨酰胺酶4在前列腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨转谷氨酰胺酶4（transglutaminase 4, TGM4）在前列腺癌诊断及预后评价中的可能价值。 方法 对159例前列腺癌患者的存档石蜡标本行TGM4免疫组织化学染色;根据染色情况将TGM4表达水平分为4级：不表达,弱表达,中表达和高表达。通过查阅病历、调用我院前列腺癌随访数据库和电话随访等方式获得患者临床病理资料及随访信息;进而对TGM4表达水平与前列腺癌临床病理特征及预后信息的关系进行统计学分析。 结果 与癌旁组织相比,TGM4在前列腺癌组织中高表达（P<0.001）,且表达水平在不同Gleason分级（P<0.001）和前列腺特异抗原（PSA）水平（P=0.005）间差异有统计学意义。单因素Cox回归分析提示TGM4高表达是前列腺癌生化复发的高危因素（P=0.020）,但多因素Cox回归分析并不支持TGM4高表达是前列腺癌生化复发的高危因素（P=0.139）。 结论 TGM4在前列腺癌中高表达,且在高Gleason分级和高PSA水平的前列腺癌中表达更高,值得进一步研究。     

基因沉默组织型转谷氨酰胺酶抑制SaOS-2细胞成骨分化

目的 研究组织型转谷氨酰胺酶（tissue transglutaminase, TG2）是否参与人SaOS-2细胞系成骨分化过程。方法 使用携带短发夹RNA（short hairpin RNA, shRNA）的慢病毒转染SaOS-2细胞以敲减TG2表达,以SaOS-2细胞及转染了含阴性对照shRNA病毒的SaOS-2作为对照组,分别进行体外成骨诱导培养,并进行以下检测：1）诱导14 d后各组矿化情况（茜素红染色）,2）诱导4 d、7 d后碱性磷酸酶活性及I型胶原、骨钙素、骨形态发生蛋白-2（BMP-2）的mRNA表达,并与诱导前的表达水平相比较。结果 SaOS-2细胞组及转染阴性对照shRNA组在体外成骨诱导过程中I型胶原、骨钙素、BMP-2的mRNA表达和ALP活性逐渐增加,14 d时形成明显矿化结节,而TG2敲减后的SaOS-2细胞在诱导14 d时矿化水平显著低于对照组,诱导7 d时ALP活性及I型胶原、骨钙素、BMP-2的mRNA表达水平显著低于对照组。结论 组织型转谷氨酰胺酶参与SaOS-2细胞体外成骨分化及矿化。     

转谷氨酰胺酶2对乳腺癌耐药性的影响

目的：探讨人乳腺癌耐药机制和转谷氨酰胺酶2（TG2）表达水平对化疗效果的影响。方法以TGM2慢病毒干扰载体（TGM2－RNAi －LV）构建转染细胞,设立3个组：RNAi 组,转染沉默 TGM2重组慢病毒颗粒;NC 组,转染阴性对照病毒颗粒;Con 组,仅在培养基中培养。 Western blot 检测 MCF －7／ADR 细胞 TG2、Bcl －2和 E －cadherin 蛋白表达。3组 MCF －7／ADR 细胞加阿霉素处理,相应细胞分组为 RNAi ＋Dox 组、NC ＋Dox 组和Dox 组。 TUNEL 法检测阿霉素诱导肿瘤细胞凋亡,MTT 法检测阿霉素对乳腺癌细胞作用的半数抑制浓度（IC50）。结果RNAi 组与 NC 组和 Con 组比较,TG2和 Bcl －2表达水平明显下降,E －cadherin 表达升高,差异有统计学意义（P ＜0．05）。 RNAi ＋Dox 组细胞的凋亡率为（31．37±1．30）％,与 NC ＋Dox 组和 Dox 组等比较差异有统计学意义（P ＜0．05）。 RNAi ＋Dox 组的 IC50为（20．41±0．87）μmol／L,而 NC ＋Dox 组和 Dox 组的 IC50分别为（40．68±1．23）μmol／L 和（41．97±1．29）μmol／L,RNAi ＋Dox 组的 IC50明显低于 NC ＋Dox 组和 Dox 组（P ＜0．05）。结论RNA 干扰 TGM2表达,增强人乳腺癌细胞对阿霉素化疗的敏感性,下调 TG2表达水平可能是预防乳腺癌患者耐药的一种新的方法。     

肾间质纤维化组织中组织型转谷氨酰胺酶和结缔组织生长因子共表达

目的:探讨组织型转谷氨酰胺酶(tTG)和结缔组织生长因子(CTGF)在肾间质纤维化组织中的表达及二者的关系.方法: 采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化大鼠模型.将大鼠随机分为假手术组(5只)、模型组(6只)、依那普利治疗组(6只).术后9天处死各组大鼠,肾组织标本用过碘酸-席夫染色(PAS)确证肾间质纤维化病变.以免疫组织化学染色方法观察肾组织内tTG 和CTGF的表达部位,以及细胞外基质成份纤维连接蛋白(FN)的表达变化.用Western蛋白印迹方法分析肾组织内tTG 和CTGF蛋白表达水平.结果: 假手术组大鼠tTG,CTGF和FN分别在肾小管、肾间质区仅有微量表达,肾小球内无阳性表达;模型组大鼠tTG、CTGF和FN在肾小管、肾间质区的表达信号比假手术组强;依那普利治疗后三者表达减少.双重染色结果显示,在模型组肾间质tTG阳性表达部位同时表达CTGF,并且强度相似.Western blot结果显示,模型组tTG和CTGF蛋白水平明显高于假手术组;依那普利治疗组tTG和CTGF蛋白水平明显低于模型组.各组大鼠肾内tTG蛋白水平与CTGF蛋白水平之间(r=0.683,P<0.05)以及tTG蛋白水平与肾间质内FN半定量水平之间(r=0.737,P<0.05)均有显著相关关系.结论: tTG和CTGF可能共同参与肾间质纤维化,依那普利减轻肾间质纤维化的作用可能通过下调两者的表达而实现.     

慢性肾脏疾病并发心房颤动的治疗

慢性肾脏疾病(CKD)与心血管疾病有非常密切的关联性。CKD 3期以上患者死于心血管疾病的风险高于死于肾衰竭的风险。心房颤动(房颤)是CKD患者较为常见的并发症,其发生率是普通人群的2~3倍。而10%~15%的房颤患者患有CKD。目前研究认为,不是所有控制心率和节律的治疗措施均适用于CKD的房颤患者。此外,对CKD房颤患者是否给予抗凝治疗以及如何给予抗凝治疗也是十分棘手的问题。该文就CKD并发房颤的治疗予以综述。     

慢性肾脏疾病和代谢综合征对2型糖尿病外周血管疾病的影响比较

2型糖尿病(T2DM)发病率近年呈明显上升的趋势,而糖尿病外周血管病变(peripheral artery dis-ease,PAD)是糖尿病常见的大血管并发症,是导致糖尿病足部溃疡、下肢截肢的主要原因。代谢综合征(metabolic syndrome,MS)由于存在高血糖、高血     

人组织型谷氨酰胺转氨酶基因的克隆 表达及纯化

目的:克隆人组织型谷氨酰胺转氨酶基因,并进行原核表达及纯化.方法:从Caco-2细胞中提取总RNA,利用RT-PCR克隆人组织型谷氨酰胺转氨酶基因,然后将其连接到原核表达载体pET-32a.将构建成功的重组表达载体pET-32a-TG2导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达His-TG2融合蛋白.用Ni-NTA蛋白纯化柱对融合蛋白进行纯化,采用Western Blotting检测重组蛋白的特异性.结果:成功克隆出人组织型谷氨酰胺转氨酶基因,构建了pET-32a-TG2原核表达载体,并成功诱导了重组融合蛋白His-TG2的表达.结论:构建了表达人组织型谷氨酰胺转氨酶基因的原核表达系统,并成功对重组蛋白进行了纯化.     

血、尿中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白在慢性肾脏病3期中的变化及意义

目的 探讨血、尿中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL）在慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）3期患者中的变化及意义。方法 选择CKD3期患者80例,采用ELISA法测定随访者的血、尿NGAL水平,同时检测患者尿蛋白、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）、肾小球滤过率（GFR）、血清白蛋白等指标,并与30例体检健康者作比较,分析血清和尿液中NGAL的变化以及与其他肾脏指标的相关性。结果 CKD3期组血、尿NGAL与健康对照组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）;CKD3期患者血清NGAL与GFR呈负相关,线性方程为y=-0.204x+26.869,r=-0.204,P<0.05;尿液NGAL与GFR亦呈负相关,线性方程为y=-0.072x+7.615,r=-0.072,P<0.05。CKD3期患者血清NGAL与血清白蛋白呈负相关,线性方程为y=-0.071x+8.065,r=-0.071,P<0.05。此外,CKD3期患者中2型糖尿病肾病患者的尿NGAL与其尿总蛋白/尿肌酐呈正相关,线性方程为y=0.005x-0.783,r=0.005,P<0.05;痛风性肾病患者的尿NGAL与尿NAG呈正相关,线性方程为y=0.426x-11.32,r=0.426,P<0.05。结论 血、尿NGAL能够有效评价慢性肾脏病的肾损伤程度及其进展预后。     

C反应蛋白及CD_(146)在慢性肾脏病中的诊断意义

目的探讨CD146、C反应蛋白(CRP)在慢性肾脏病(CKD)诊断中的意义。方法回顾性分析104例非透析CKD患者血CRP及肾功能指标,采用ELISA方法对104例CKD患者与20例健康体检者进行外周血CD146检测,并进行统计分析。结果血液循环CRP随肾功能减退而增高(P<0.01),CRP与肾小球滤过率(GFR)呈负相关(r=-0.646);与正常对照组比较,各期肾损伤疾病患者的外周血CD146均有不同程度的升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CRP和CD146的联合检测能较好地反映CKD患者的肾功能损伤、进展及严重程度。     

早期纠正慢性肾脏病患者代谢性酸中毒的临床意义

目的：探讨早期纠正慢性肾脏病患者代谢性酸中毒的临床意义。方法将该院于2014年1月-2014年12月收治的符合慢性肾脏病2、3期且TCO2跃22 mmol/L的80例患者随机分为治疗组和对照组。对照组给予常规治疗,治疗组在对照组的基础上给予NaHCO3片1.0~1.5 g/d,分次口服,同时给予产碱的水果蔬菜。主要观察指标为血尿素氮、血肌酐、血pH值、血TCO2、电解质及血压。结果治疗组血pH值、血TCO2有所提高,血尿素氮、血肌酐略有升高,但差异无统计学意义。对照组血pH值、血TCO2进一步下降,血尿素氮、血肌酐明显升高,差异有统计学意义。两组治疗前后电解质、血压均无明显变化。结论NaHCO3片和产碱的水果蔬菜饮食疗法能纠正血浆TCO2跃22 mmol/L慢性肾脏病患者的代谢性酸中毒,并延缓肾功能进展,具有肾脏保护作用,且不引起电解质紊乱及血压升高。     

慢性肾脏病患者贫血发病情况分析

目的探讨CKD患者贫血的发病情况及其相关因素.方法收集2007年1月至2010年1月在云南省第三人民医院肾脏血液风湿免疫科住院的CKD患者465例,对其临床和实验室资料进行回顾性分析.结果 465例CKD患者中,贫血的发病率为72.04%,其中年龄〈30岁、30～50岁、50～70岁、〉70岁的患者贫血的发病率依次为47.06%、60.94%、74.42%、86.26%;CKDⅠ～Ⅴ期的患者贫血的发病率依次为24.19%、43.84%、63.22%、88.61%和99.39%;经eGFR矫正后,不同肾脏基础疾病患者贫血的发病率由高到低依次为糖尿病肾病（78.78%）、高血压肾病（66.00%）、慢性肾小球肾炎（65.61%）和多囊肾（60.00%）;透析组与非透析组患者贫血的发病率分别为99.00%和51.75%（P〈0.001）.单因素分析表明,年龄、肾功能情况及透析与否均与贫血的发病率相关.结论慢性肾脏病患者贫血的发病率较高,肾功能减退、年龄等是其发生的危险因素.     

胰岛素抵抗与慢性肾脏病的研究进展

在慢性肾脏病患者中,瘦素、脂联素、抵抗素和甲状旁腺功能亢进等多种因素在胰岛素抵抗和高胰岛素血症的发生和发展中起重要作用。随着胰岛素抵抗的出现,肾功能即出现损害的趋势,表现为在胰岛素受体前水平、受体水平和受体后水平均存在胰岛素抵抗,使胰岛素分泌、利用和灭活等均表现异常。     

慢性肾脏病与维生素D代谢

慢性肾脏病(CKD)患者以骨化三醇合成逐步减少为始动因素,导致甲状旁腺激素水平增加、矿物及骨骼代谢紊乱,肾脏和心血管损伤加速、异位钙化,病死率增加。补充骨化三醇、抑制甲状旁腺素(PTH)水平几十年来一直作为治疗CKD必要的治疗手段之一。但最新循证证据表明,骨化三醇改善肾脏预后和心脏保护作用与抑制PTH水平无关。此外,维生素D缺乏在肾脏疾病发生率显著增加,其加速肾脏疾病进展和增加病死率的风险高于骨化三醇缺乏。CKD患者存在维生素D和骨化三醇异常,影响了维生素D/骨化三醇的肾脏保护作用,形成病理生理恶性循环。     

慢性肾脏病碱性磷酸酶与甲状旁腺素相关性分析

目的探讨慢性肾脏病（CKD）患者血清碱性磷酸酶（ALP）与甲状旁腺素（PTH）的相关性,并评估两者在肾性骨病（ROD）诊断及治疗中的意义。方法选择CKD3—5期患者60例,均抽取空腹静脉血,分别测定ALP及PTH,进行相关性分析。结果当PTH〉300pg／ml时,ALP与PTH相关性良好,且呈正相关,有统计学意义（r=0．865,P〈0．05）;当PTH≤300pm／dl时,ALP与PTH无相关性。结论ALP与PTH相关性良好,随着PTH的增高,ALP增高越明显。两者结合,对诊断和治疗高转运骨病（HTO）有重要的临床价值。且ALP检测方法简单,花费少。     

慢性肾疾病继发性甲状旁腺功能亢进的治疗现状及研究

继发性甲状旁腺功能亢进是慢性肾脏疾病中最常见的并发症之一,临床上常表现为各种骨病和钙磷代谢紊乱,如骨质疏松、骨折、顽固性皮肤搔痒、心血管钙化等等,严重影响患者的生存质量。现就目前临床上在治疗中存在的问题和近期的研究新进展进行讨论。