颅咽管瘤细胞系的初步建立

目的 初步建立颅咽管瘤细胞系,为该肿瘤永生型细胞株的最终建立提供实验基础和理论依据.方法 经我院影像学和病理学确诊的颅咽管瘤患者,取得新鲜手术标本共36例.其中釉质型21例,鳞状乳头型15例.进行肿瘤细胞原代培养、纯化、传代、冻存、复苏,采用免疫细胞化学SP法对培养细胞行角蛋白(Ck)7染色鉴定细胞来源.通过细胞计数、...     

巨大颅咽管瘤1例

1病例介绍 患者杨某，男，17岁，以进行性鼻阻塞伴双耳听力减退2年之主诉曾于1989年3月11日入院，用口呼吸，睡眠打鼾，1年前出现左眼视力减退，日渐加重。剧烈运动时觉前额及颞部头痛，无流涕带血，无烦渴、多饮及尿崩等症状。1983年曾作右侧筛窦囊肿摘除术。体格检查：发育良好，营养尚可，颈淋巴结不大，左眼瞳孔大于右侧，对光反射迟钝，左眼底呈原发性视神经萎缩，视力：数指30cm，右眼正常，心肺正常，肝脾不大，性器官发育正常，未引出病理反射。耳鼻咽喉科检查：     

颅咽管瘤的护理体会

颅咽管瘤是一种从胚胎期颅咽管的残余组织发生的良性先天肿瘤,又称鞍上囊肿,垂体管瘤和釉质细胞瘤.颅咽管瘤大部分位于鞍上.其中大多数突入第三脑室,极少数可局限于鞍内,其发病有明显的区域发病特点,以亚洲为高发区.     

颅咽管瘤的手术护理

为研究颅咽管瘤全切术后常见并发症的种类、发生原因及临床表现，制定相应的护理措施。术后监测颅咽管瘤患者的神志、瞳孔、体温，记录24h出人量，观察口角及四肢抽动情况，并观察呕吐物及大便颜色等，及时记录相关内容。颅咽管瘤全切术后常见的并发症主要有尿崩症、水电解质紊乱、高热、意识障碍、癫痫、上消化道出血等。经治疗护理均好转一作者认为，了解颅咽管瘤全切术后常见并发症的原因及临床表现，采取针对性的护理，可提高手术成功率。     

颅咽管瘤的MRI诊断

目的探讨颅咽管瘤的MRI特点,提高诊断水平。方法回顾性分析经病理证实的14例颅咽管瘤病例,所有患者均行MRI平扫及增强扫描,分析其MRI表现。结果 14例病灶中,8例位于鞍上,4例位于鞍内及鞍上,2例位于鞍旁;7例病灶呈分叶状,7例呈类圆形。病灶均为囊实性病灶,6例囊性部分呈T1WI低信号,5例为T1WI高信号,3例为T1WI等信号,T2WI均为高信号。实性部分在T2WI呈高信号或高低混杂信号,T1WI等信号（8例）或稍低信号（6例）。增强后病灶14例患者实性部分均见强化,其中11例为网格状强化,3例为均匀强化。结论颅咽管瘤具有一定的MRI特点,结合该特点有助于在术前正确诊断。     

颅咽管瘤的术后护理

颅咽管瘤是从胚胎期颅咽管的残余组织发生的良性先生性肿瘤，多发生于鞍内鞍上脑室内，但由于其生长部位累及下丘脑，肿瘤切除后部分患者可能发生严重的神经内分泌功能紊乱。我科手术治疗50例颅咽管瘤患者，在护理工作中，笔者总结出术后常见并发症的护理经验，总结报道如下。     

颅咽管瘤的MRI诊断

目的 探讨颅咽管瘤的MRI影像学表现,评价其诊断价值.方法 回顾性分析59例经手术病理证实的颅咽管瘤的MRI表现.结果 59例颅咽管瘤患者,40例(67.8%)病灶位于鞍上,16侧(27.1%)位于鞍内,3例(5.1%)位于鞍旁,视神经受压、变形、移位51例,垂体正常显示32倒,垂体受压变小15例,垂体未显示12例.肿瘤的信号在T2WI上多呈混杂高信号,而T1WI上可有高、等、低等多种表现.结论 MRI可清楚显示鞍区肿瘤与周围结构,其多信号变化反映了肿瘤囊液成分的不同,MRI是诊断颅咽管瘤的有效方法.     

颅咽管瘤的临床特点

目的了解颅咽管瘤的临床特点。方法作者收集了国内1999年～2004年9月五年间。在51种省级以上杂志发表的80篇有关颅咽管瘤的文章，所报道颅咽管瘤病例共3601例，来自全国21个省，直辖市，自治区的50家医院。根据如下条件进行病例选择：1经手术，病理证实为颅咽管瘤，2依照文章的作者。所报道病例的来源医院以及住院时间剔除重复病例，最后得到59篇文章的59组病例，共2837人，作者对其描述的颅咽管瘤的临床特点进行了统计分析。结果颅咽管瘤的年龄特点是发病不受年龄限制，年轻人稍微偏多。颅咽管瘤的性别特点是男多于女，男女人数比为1．4：1。颅咽管瘤肿块的特点是容易囊变，影像学平均囊变率为83．5％，实际囊变率更高；容易钙化，影像学平均钙化率为58．3％。实际钙化率更高；肿块的位置，按照yasargil的分类，最常见的是鞍上-视交叉旁-脑室外型，占一半以上。其次是鞍内-鞍上型和脑室旁型。其余三型。相对偏少。结论用统计学的方法对颅咽管瘤的临床特点进行量化分析。有利于更深刻地了解颅咽管瘤。     

颅咽管瘤组织炎症的研究及意义

目的研究不同病理类型颅咽管瘤组织炎症的差异、机制及意义。方法收集30例颅咽管瘤临床病例标本，采用免疫组化S—P法检测白细胞共同抗原CD45以标记炎症细胞，并检测细胞间黏附分子ICAM-1的表达。结果CD45标记的炎症反应在颅咽管瘤组织广泛存在，ICAM-1在肿瘤细胞、炎症细胞及血管内皮细胞都有表达。造釉细胞型颅咽管瘤组织炎症反应及ICAM-1的阳性表达显著高于鳞状乳头型颅咽管瘤（P〈0．05），肿瘤炎症与ICAM-1表达显著相关（P〈0．05）。结论不同病理类型颅咽管瘤组织炎症存在显著差异，颅咽管瘤组织炎症的差异与ICAM-1蛋白表达有关，颅咽管瘤细胞可产生ICAM-1参与炎症反应，不同病理类型颅咽管瘤组织炎症差异可能影响其预后。     

颅咽管瘤发病机制研究的新进展

颅咽管瘤是WHOI级肿瘤，是最难处理的肿瘤之一，目前其发病机制尚不清楚，相关发生学分子机制研究近年来有较大进展，但仍不足以说明其特殊的生物学特性，本文从肿瘤起源、肿瘤分子发生、增殖、复发以及细胞凋亡阐述其最新研究进展。     

体外循环再灌注血培养诱导肾小管细胞凋亡及乌司他丁的保护作用研究

目的探索乌司他丁对体外循环血清致人肾小管上皮细胞损伤的保护作用。方法以人近曲肾小管上皮细胞HK-2为研究对象,根据是否应用体外循环血清将细胞分为空白组:不含人血清的培养基;对照组:含正常人血清的培养基;试验组:含体外循环血清的培养基,进行缺氧复氧培养,通过流式细胞仪检测肾小管细胞凋亡情况,免疫组化检测caspase-3蛋白表达;乌司他丁组:以改良的缺血再灌注方式处理肾小管上皮细胞的过程中,施加乌司他丁干预。结果流式细胞仪检测结果显示,体外循环血清处理后,4组肾小管上皮细胞HK-2凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中试验组较空白组、对照组、乌司他丁组均明显升高,差异有统计学意义(P=0.00)。4组caspase-3蛋白积分分光光度值(IOD)值比较差异有统计学意义(P<0.05);其中试验组较空白组、对照组、乌司他丁组均明显升高,差异有统计学意义(P=0.00)。结论乌司他丁可通过抑制caspase-3激活,减轻体外循环缺血再灌注血清对HK-2损伤作用。     

乳鼠成骨细胞体外培养

目的建立乳鼠成骨细胞体外培养方法,探讨该方法的可行性和应用价值。方法用出生1~3 d乳鼠颅骨,采用多次胶原酶消化法进行细胞体外培养。倒置显微镜观察细胞形态,对其碱性磷酸酶(ALP)活性及矿化能力进行鉴定,并测定细胞生长曲线。结果原代培养24 h后,大量细胞贴壁生长,细胞呈圆形,48 h后,贴壁细胞呈长梭形、三角形或不规则多边形,并且贴壁细胞伸出2~3个突起,胞质透亮、饱满,7 d后细胞铺满整个平皿底面。经鉴定,培养细胞具有体内成骨细胞的生物学特性。细胞接种后第1与第2个24 h为细胞的潜伏适应期,第3与第7个24 h生长曲线基本为线性曲线,是细胞的对数生长期。结论采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞的方法切实可行。     

RA诱导SH—SY5Y细胞分化中NEF3基因表达的调控

目的 研究全反式维甲酸(RA)诱导神经母细胞瘤分化过程中NEF3表达的调控.方法 用RA诱导神经母细胞SH-SY5Y,用实时RT-PCR分析NEF3和BrgI的mRNA表达;并同时测定RGI蛋白的表达.共转染含有2.8kb NEF3上游序列的报告基因质粒、Brg1的表达质粒或者其负显性突变质粒,检测后两者对NEF3-CAT启动子活性的调控.结果 RA诱导12～24h,SH-SY5Y细胞中NEF3与Brg1几乎同时表达出现第1个高峰,之后表达量下降.共转染结果 显示Brgl可促进NEF3-CAT表达增加,而其突变型没有作用.结论 RA诱导初期,染色质重塑复合物ATP酶亚基Brg1可能导致NEF3上游调控序列所处的染色质结构发生改变,从而有利于NEF3基因的表达.     

银杏内酯对缺氧诱导的大鼠皮层神经元早期凋亡的影响

目的：观察银杏内酯(ginkgolide,Gin)对缺氧诱导的大鼠皮层神经元凋亡的保护作用。方法：选用胎龄14～16d的SD胎鼠的大脑皮层细胞进行原代培养,建立缺氧神经元损伤模型。实验分为药物实验组(Gin组)、空白对照组、阳性对照组(MK-801),每组均进行有糖和无糖培养两种处理。应用MTT法分析细胞存活率、AnnexinV-PE双标流式细胞仪法定量分析细胞早期凋亡。结果：MTT结果显示,Gin使皮层神经元存活率明显增加,且有糖的缺氧组皮层神经元存活率优于无糖组;流式细胞仪测定结果显示,预先加入Gin(终浓度37．5μg／m1)的一组神经元的凋亡峰明显低于空白组,而无糖处理组凋亡峰均高于有糖处理组。结论：银杏内酯(37．5μg/ml)对缺氧损伤的皮层神经元具有保护作用,可拮抗缺氧条件下体外培养的皮层神经元的早期凋亡。     

顺铂诱导肝细胞性肝癌细胞凋亡及其临床意义

日的 :探讨顺铂 (CDDP)体内诱导肝细胞性肝癌 (HCC)细胞凋亡的发生情况及其临床意义。方法 :18例HCC患者随机分成 2组 ,10例行CDDP诱导治疗 ,另 8例作对照。用流式细胞仪 (FCM )检测 2组患者手术切除之肿瘤组织 ,作凋亡及细胞周期分析。结果 :CDDP治疗组肝癌细胞凋亡率较对照组显著增高 (P <0 .0 1)。CDDP治疗组肿瘤细胞G0 -G1 期较对照组明显增加 (P <0 .0 5 ) ;而S期细胞有显著减少 (P <0 .0 1)。细胞增殖指数 (PI)在CDDP治疗组显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :CDDP在体内能显著增加HCC细胞的凋亡。小剂量CDDP诱导治疗为肝癌辅助治疗可行方法之一     

体外诱导培养人树突状细胞的生物学特性及其神经免疫调节功能分析

目的研究人表皮树突状细胞在皮肤的免疫反应和疾病发生发展过程中的作用。方法取胎儿脐带血分选单核细胞,在体外用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素-4(IL-4)进行定向诱导分化,培养树突状细胞(MoDC),观察培养细胞在不同阶段的变化;用流式细胞仪分析诱导分化细胞的细胞膜表面标志性抗原HLA-DR、CD1 a和CD80的表达;对诱导分化的细胞分别给予脂多糖体(LPS),LPS和降钙素相关基因肽(CGRF)和单纯CGRF刺激,检测不同处理后MoDC表达IL-12 mRNA变化。结果脐带血干细胞在体外诱导分化培养第7天呈现明显树突状分支,并可检测到HLA-DR和CD1 a分子的表达。结论CGRP对MoDC表达IL-12 mRNA的调节有双重性。     

无血清培养基中成釉细胞瘤细胞的生长特性

 【目的】 研究成釉细胞瘤细胞在无血清培养基中的生长特性，建立成釉细胞瘤细胞的无血清培养法。【方法】 用Defined Keratinocyte-SFM（DK-SFM）无血清培养基和DMEM培养成釉细胞瘤细胞，观察细胞的生长特性、细胞形态和传代次数，流式细胞仪（FCM）测定S期细胞比率（SPF）和增殖指数（PI）。【结果】在DK-SFM培养基中，细胞传代6次，平均生长92d；细胞形态清晰，仅见少许散在的成纤维细胞生长：SPF值为12．3％～14．5％，PI值为11．6％～15．3％。在DMEM中，细胞传代3次，平均生长61d；细胞境界不清．并可见较多的成纤维细胞；SPF值为7．9％～9．2％，PI值为8．3％～9．6％。【结论】成釉细胞瘤细胞在DK-SFM无血清培养基中存活时间长，DK-SFM较DMEM更适合体外培养成釉细胞瘤细胞。     

无血清培养基中成釉细胞瘤细胞的生长特性

【目的】 研究成釉细胞瘤细胞在无血清培养基中的生长特性，建立成釉细胞瘤细胞的无血清培养法。【方法】 用Defined Keratinocyte-SFM（DK-SFM）无血清培养基和DMEM培养成釉细胞瘤细胞，观察细胞的生长特性、细胞形态和传代次数，流式细胞仪（FCM）测定S期细胞比率（SPF）和增殖指数（PI）。【结果】在DK-SFM培养基中，细胞传代6次，平均生长92d；细胞形态清晰，仅见少许散在的成纤维细胞生长：SPF值为12．3％～14．5％，PI值为11．6％～15．3％。在DMEM中，细胞传代3次，平均生长61d；细胞境界不清．并可见较多的成纤维细胞；SPF值为7．9％～9．2％，PI值为8．3％～9．6％。【结论】成釉细胞瘤细胞在DK-SFM无血清培养基中存活时间长，DK-SFM较DMEM更适合体外培养成釉细胞瘤细胞。     

体外培养颌下腺细胞分泌功能的实验研究

目的：获取成活率高且保持分化及分泌功能的颌下腺细胞。方法：以改良合成培养基DMEM进行颌下腺细胞的原代及传代培养，观察颌下腺培养细胞生长状况。透射电镜观察颌下腺细胞的超微结构。免疫组化染色鉴定细胞来源及检测颌下腺培养细胞淀粉酶分泌功能。结果：免疫组化染色显示培养的颌下腺细胞特异性抗体：细胞角蛋白及角蛋白染色( )，胞浆内可见棕黄色点状分布的颗粒。透射电镜下腺泡上皮细胞表面可见到微碱毛、胞浆皱褶和细胞顶部的酶原颗粒，胞核大卵圆形，胞质内见线粒体和粗面内质网。颌下腺细胞培养上清淀粉酶含量测定显示不同代次颌下腺细胞淀粉酶含量随传代次数的增加而逐渐减弱，原代培养和传代培养第2代的培养上清淀粉酶含量较高并且可维持一定水平。传代培养第4代淀粉酶含量下降。结论：DMEM体外培养颌下腺细胞原代培养和传代培养第l代、第2代细胞分泌功能较强，保持了体内颌下腺细胞分泌功能的特点。