LiCl对脐带血有核细胞增殖作用和信号传导研究

目的 探讨不同浓度LiCl对脐带血有核细胞增殖、集落形成以及细胞凋亡的影响,观察在此过程中LiCl对脐带血有核细胞β-catenin表达的作用.方法 应用红细胞裂解方法获得脐带血有核细胞,以5000个/孔细胞接种到96孔板和1×105个/孔细胞接种到24孔板,应用不同浓度(10、20和40mM)LiCl处理细胞,用MTT方法测定脐带血有核细胞增殖,以1×105个/孔细胞接种24孔细胞培养板,观察LiCl对细胞集落形成的影响;应用Hoechst33342试剂盒荧光显微镜下检测细胞凋亡和应用Western blotting方法检测脐带血有核细胞β-catenin基因表达情况.结果 随着LiCl浓度的不断增加(0～40mM)和培养时间的不断延长(0～72h),脐带血有核细胞增殖能力与相应对照组相比不断增加,分别呈现出不同程度的显著性差异(分别P＜0.05和P＜0.01);应用20mM浓度的LiCl培养10d后,发现脐带血有核细胞集落形成能力与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05),并呈现出明显的抑制细胞凋亡的作用;Western blotting结果发现,LiCl具有明显地诱导β-catenin基因表达的作用.结论 LiCl在一定条件下能够通过激活脐带血有核细胞内Wnt/β-catenin信号传导途径刺激细胞增殖,达到扩增脐带血有核细胞的目的.     

不同方法分离人脐血造血细胞的比较研究

目的:比较不同方法分离人脐血造血细胞的回收率.方法:分别用甲基纤维素、明胶、羟乙基淀粉、红细胞裂解液分离脐血造血细胞,计算有核细胞回收率.Giemsa染色计算单个核细胞百分率.结果:4种方法分离后回收率分别为66.13%、74.91%、66.13%、62.90%.结论:4种方法效果均较好,其中以明胶分离效果最佳.     

骨髓基质细胞体外扩增能力及支持造血的研究

目的 :观察成纤维细胞集落形成单位 (CFU- F)贴壁层的形成、体外传代培养、扩增的情况 ,研究各阶段 (CFU- F)对粒 -单核细胞集落形成单位 (CFU- GM)和红细胞集落形成单位 (CFU- E)生长及细胞因子对造血的支持作用 ,并测定骨髓有核细胞对基质细胞的粘附能力。方法 :利用改进的液体培养法 ,培养骨髓基质细胞并传代 ,利用甲基纤维素半固体培养法 ,培养人骨髓细胞 ,观察 CFU- GM、CFU- E集落数。结果 :人骨髓基质细胞在体外可以传代培养 4代并能扩增 2 8倍 ,其中 F3代对 CFU- GM和 CFU-E的促进增殖作用最强 ,且对骨髓有核细胞的粘附能力最强。结论 :人骨髓基质细胞可体外传代扩增并支持造血细胞生长     

甲基纤维素和羟乙基淀粉分离脐血有核细胞的比较

目的 :为寻找一种较好的脐血有核细胞分离法。方法 :分别采用甲基纤维素和羟乙基淀粉对 3 5例脐血进行分离 ,并以有核细胞的回收率 ,细胞活度 ,CD+34 细胞百分率及脐血干 /祖细胞体外培养下形成CFU GM ,BFU E和CFU Meg 3种祖细胞集落数对这 2种方法进行比较。结果 :有核细胞回收率的细胞活度 ,CD+34 细胞回收率的甲基纤维素法分别为 89% ,97% ,7 6%± 2 % ;羟乙基淀粉法分别为 80 5 % ,91% ,5 0 %± 1 6%。干细胞体外培养下形成CFU GM ,BFU E ,CFU Meg集落数的甲基纤维素法分别为 92 5± 5 ,14 5± 19,2 9± 8;羟乙基淀粉法分别为 80± 4 ,12 7±18,2 1± 5。结论 :甲基纤维素分离法具有有核细胞回收率高 ,祖细胞含量丰富 ,增殖能力强的优点     

人脐血间充质样细胞体外培养的形态学变化

目的:分离培养人脐血间充质样细胞,观察其形态学的变化.方法:取新鲜采集脐带血,用1.077 g/cm3的淋巴细胞分层液密度梯度离心法分离脐血单个核细胞.将脐血单个核细胞接种于37℃、体积分数5%CO2培养箱内培养.于不同时间观察细胞形态的变化.结果:从脐血中可以分离出单个核细胞;培养3 d出现大量的造血细胞集落,瑞氏染色显示粒-巨噬系集落形成单位与红系集落形成单位集落形成最多;培养5 d出现贴壁的扁平状上皮样细胞和长梭形的成纤维样细胞,同时有大量的破骨样细胞混杂;培养1周出现上皮样细胞和成纤维样细胞的集落,此时经胰蛋白酶消化机械吹打可以传代;培养2周以上,出现上皮样细胞的克隆,镜下呈现球形样结构,折光性强.结论:脐血成分复杂,在体外分离培养可以获得形态各异的脐血间充质样细胞.     

骨髓基质细胞体外扩增能力及支持造血的研究

目的：观察成纤维细胞集落形成单位（CFU－F）贴壁层的形成,体外传代培养,扩增的情况,研究各阶段（CFU－F）对粒－单核细胞集落形成单位（CFU－GM）和红细胞集落形成单位（CFU－E）生长及细胞因子对造血的支持作用,并测定骨髓有核细胞对基质细胞的粘附能力,方法：利用改进的液体培养法,培养骨髓基质细胞并传代,利用甲基纤维素半固体培养法,培养人骨髓细胞,观察CFU－GM,CFU－E集落数,：人骨髓基质细胞在体外可以传代培养4代并能扩增28倍,其中F3代对CFU－GM和CFUE的促进增殖作用最强,且对骨髓有核细胞的粘附能力最强,结论：人,骨髓基质细胞可体外传代扩增并支持造血细胞生长。     

小鼠骨髓红系祖细胞体外培养细胞分化的形态学观察

用改良Iscove甲基纤维素法体外培养小鼠骨髓红系祖细胞,对形成的红系集落细胞分化进行形态学观察。结果发现:(1)在低浓度红细胞生成素培养条件下,处于较晚发育期的红系祖细胞(CFU-E)可形成数十个细胞组成的集落,但各集落间的细胞数量及发育阶段的同步性有较大差异;(2)在高浓度红细胞生成素培养条件下,处于较早发育期的红系祖细胞(BFU-E)可形成数千个甚至上万个细胞组成的大集落,且集落内细胞的发育阶段具较高的同步性;(3)在CFu-E和BFu-E培养集落中均可观察到自然出现的核固缩及排核现象。以上发现为哺乳类红细胞自然排核学说及红系终末细胞中存在不利于细胞核增殖生长的“胞质因子”工作假说提供了有利的佐证。     

人胎盘提取物对脐带血造血干细胞的体外扩增实验研究

目的 研究人胎盘提取物对脐带血造血干细胞体外扩增的影响.方法 分离脐带血造血干细胞体,用常规培养法和加入人胎盘提取物的方法 进行体外扩增培养,扩增培养第1、2、3、4周分别进行单个核细胞(MNC)计数和造血祖细胞集落培养及计数.结果 到第4周时胎盘提取物组MNC扩增最高可达78.25倍,而常规培养组仅增加了8.32倍;造血祖细胞集落计数显示第3周达高峰,第4周逐渐下降,但胎盘提取物组扩增集落形成细胞(CFC)的能力明显高于常规培养组.结论 胎盘提取物能有效促进脐带血造血干细胞的体外增殖,但应避免长时间的体外扩增培养,以防止细胞发生分化,影响扩增质量.     

脐血造血细胞的冷冻保存方法的比较

目的 :比较程控降温和 - 70℃冰箱直接保存脐血造血细胞对细胞活性的影响及免疫磁珠分离法对细胞生物学活性的影响。方法 :用密度梯度离心法分离出脐血中单个核细胞后 ,采用联合冷冻保护剂经程控降温后存放于液氮和直接存放于 - 70℃冰箱两种方法冷冻保存一个月 ,从细胞活力、细胞回收率、集落形成能力、集落回收率等方面比较这两种冷冻方法的优劣。另外 ,用免疫磁珠分离法正性分选脐带血中CD34+细胞 ,流式细胞仪计数分选前后的CD34+细胞的纯度及回收率 ,并分别进行分选前后的细胞培养。结果 :细胞活力、细胞回收率、集落形成能力、集落回收率在冷冻的两组间差异不显著。用免疫磁珠分选后CD34+细胞纯度达 88.3% ,回收率为 4 6 .2 % ,分选后的CD34+细胞比分选后CD34 细胞的细胞活力及集落形成能力明显要高。结论 :两种方法均可对脐血造血细胞进行保存。免疫磁珠分选法能够提供高纯度的造血干细胞 ,其分选过程不会影响细胞的活力及集落形成能力 ,为CD34+细胞分选和移植的临床应用提供实验依据     

炙甘草汤及相应细胞培养上清对脐血BFU-E形成的影响

目的:探讨炙甘草汤及相应细胞培养上清对脐血单个核细胞BFU-E形成的影响。方法:新鲜脐血经淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,实验采用炙甘草汤与右归饮两个中药方剂,单个核细胞设空白对照组、炙甘草汤组、右归饮组、混合组及相应细胞培养上清组,每组分别加入中药液或细胞培养上清,甲基纤维素半固体培养基培养10 d后观察集落形成情况。结果:细胞培养上清组均能刺激细胞集落形成,其中尤以炙甘草汤组最为明显,其次是混合组与右归饮组。炙甘草汤培养上清组与混合培养上清组两组与空白培养上清组相比,刺激效果明显。结论:炙甘草汤细胞培养上清能明显刺激脐血单个核细胞集落形成,对脐血细胞扩增有明显效果。     

胰十二指肠切除术后住院时间影响因素分析-回顾性研究

Background. Postoperative hospital stay after pancreaticoduodenectomy (PD) was relatively longer than other gastrointestinal operations, The aim of current study was to investigate the risk factors of postoperative hospital stay after PD. Methods. Patients who were performed PD in Cancer Hospital Chinese Academy of Medical Sciences (CHCAMS) between December 2008 and November 2012 were selected for the retrospective study. The clinical and pathological data was collected and analyzed. The primary outcome was postoperative hospital stay. Normal discharge or recovery was defined as postoperative hospital stay no more than 10 days, otherwise it was defined as delayed discharge or recovery (including hospital death). Results. Finally, 152 patients were enrolled in present study. Postoperative hospital stay was 19.7±7.7 (7-57 d). 67 of 152 patients were normal discharge, and 85 of 152 patients were delayed discharge. The overall morbidity of complications was 62.5% (95/152), and the mortality rate was 3.29% (5/152). Multiple factors analysis showed that complication morbidity (adjusted OR=10.40, 95%CI=3.58-30.22), age (adjusted OR=4.09, 95%CI=1.16-14.39), BMI (body mass index) (adjusted OR=4.40, 95%CI=1.19-16.23), surgical procedure (adjusted OR=26.14, 95%CI=4.94-153.19), blood transfusion (adjusted OR=7.68, 95%CI=2.09-28.27) and fluid input (adjusted OR=3.47, 95%CI=1.24-11.57) were significantly associated with delayed discharge. Conclusions. Postoperative complications affects the postoperative hospital discharge. Furthermore, age, BMI, transfused red blood, surgical procedure and input might prolong LOS (length of hospital stay). Studies with more patients were needed in future.     

原子吸收火焰法测定合力康粉剂中钾、钠、钙、镁、锌、铁的含量

目的：采用原子吸收火焰法测定合力康粉剂中钾、钠、钙、镁、锌、铁的含量。方法：用盐酸-硝酸-水(9：1．5：25)混酸湿法水浴加热消化处理样品，硝酸锶作镁离子释放剂，乙炔-空气火焰原子吸收法。结果：钾、钠、钙镁、锌、铁加样回收率与RSD(n=5)分剐为98．3％、0．8％；100．8％、3．2％；101．8％、1．3％；102．5％、2．1％；101．2％、2．8％；97．4％、2．4％。特征浓度分别为(产生0．0044吸收所需要的浓度，μg/m1)0．02、0．01、0．07、0．003、0．0l、0．06。结论：该方法简便、快速、结果准确，适用于合力康粉剂粉剂中钾、钠、钙、镁、锌、铁的含量测定。     

电针刺激耻骨上四穴治疗女性压力性尿失禁临床疗效观察

目的 观察电针耻骨上四穴对女性压力性尿失禁患者的影响。方法 选取2020年12月-2022年11月期间经金华市中医医院临床确诊为压力性尿失禁的女性患者40例,采用数字随机法分为治疗组和对照组,对照组选用盆底肌锻炼治疗,隔日治疗1次,共治疗15次;治疗组在盆底肌锻炼治疗的基础上,采用电针刺激耻骨上四穴(气冲、冲门、横骨、曲骨等四穴),隔日治疗1次,共治疗15次;。分别记录治疗前、治疗结束后3周ICIQ-SF评分、72h尿失禁次数并进行疗效评价,分别于治疗前、治疗后第3周进行经会阴超声测量BND、PUVA、URA。结果 经治疗后第3周,2组间总有效率比较,治疗组明显优于对照组(p<0.01),治疗组ICIQ-SF评分、72h尿失禁次数均低于对照组(均p<0.05),且经会阴超声测量的BND、PUVA、URA均低于对照组(均p<0.05)。结论 电针治疗女性压力性尿失禁可有效降低患者BND、PUVA、URA,改善盆底结构,从而减少患者尿失禁的次数及降低ICIQ-SF评分。     

矮身材儿童血铅镉锌钙铁铜镁水平分析

目的探讨血铅、镉、锌、钙、铁、铜、镁水平对儿童生长发育的影响。方法通过采用钨舟原子吸收光谱仪测定我院儿保门诊53例矮身材儿童（矮身材组）及53例正常儿童（对照组）末梢静脉血中铅、镉、锌、钙、铁、铜、镁水平,并对其与儿童生长发育关系进行分析。结果矮身材儿童血铅明显高于正常对照组,锌、钙、铁明显低于正常对照组（P〈0．05）。而血镉、铜、镁与对照组则无明显差异。矮身材组血铅男童明显高于女童（P〈0．05）。结论矮身材儿童的生长发育迟缓可能与高血铅,低血锌、钙、铁密切相关。儿童铅中毒防治和合理的膳食结构是降低儿童矮身材发生率的重要措施。