细胞增殖和细胞凋亡与口腔鳞癌研究进展

细胞增殖和细胞凋亡的平衡关系在胚胎发育，造血，免疫系统的成熟和维持正常组织的器官的细胞数目恒定与生长平衡乃至机体衰老方面都起着重要作用。目前认为它们在肿瘤的发病机制中有重要意义。本文对其概念，转导机制，诱导因素，基因调控以及其在口腔鳞癌的诊断和治疗方面的研究进展进行综述。     

VM方案术前诱导化疗对口腔鳞癌细胞凋亡和增殖的影响

本研究采用原位末端标记法 (ｉｎｓｕｉｔｅｎｄ ｌａｂｅｌｉｎｇ ,ＩＳＥＬ)和免疫组织化学技术 ,检测 2 4例口腔鳞癌 (ｏｒａｌｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ ,ＯＳＣＣ)经ＶＭ(长春新碱、甲氨蝶呤二药 )方案化疗前后的细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ,ＡＰＯ )和细胞核增殖抗原(ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ ,ＰＣＮＡ)的变化 ,并结合疗效分析化疗抗癌机制。1 材料和方法 :(1)标本收集 :2 4例病理确诊未经治疗的ＯＳＣＣ ,经ＶＭ方案诱导化疗再手术切除 ,手术切取癌组织为化疗后标本 ,…     

口腔异常增生上皮及鳞癌组织细胞凋亡和增殖的研究

目的：了解细胞凋亡、增殖及p53、Bcl—2在口腔异常增生上皮及鳞癌组织中的变化规律。方法：采用TUNEL技术检测细胞凋亡，免疫组化SP法检测PCNA、p53和Bcl—2。结果：从单纯性增生、轻度异常增生、中度异常增生至原位癌、鳞癌，增殖指数逐渐上升；凋亡指数在前三个阶段和增殖指数同时上升，而从原位癌开始，凋亡指数开始下降，鳞癌时达最低峰。p53表达依次增高到鳞癌时出现高峰；Bcl—2在原位癌时表达升高。结论：细胞凋亡和增殖比例失调在口腔鳞癌发生过程中起着重要作用。Bcl—2、p53参与了口腔鳞癌的发生、发展，p53异常是早期且相对持续行为。     

口腔鳞癌细胞增殖特性的流式细胞光度分析

作者应用流式细胞术对33例口腔鳞癌标本进行了回顾性核DNA定量分析,对反映肿瘤增殖活动的DNA合成期细胞百分比(％S)、增殖指数(PI),及其与DNA倍体水平、患者预后的相互关系进行了研究,结果显示异倍体肿瘤较2C或近2C肿瘤有更旺盛的增殖活动。作者认为:将DNA倍体水平与细胞周期分布特点结合起来作为判断预后的一项指标,可能会提供较可靠的信息。     

局部注射IL-2联合化疗对口腔鳞癌浸润淋巴细胞的影响

目的　评价IL-2局部注射联合化疗对口腔鳞癌局部免疫反应的影响。方法　34例T3、T4期口腔鳞癌患者随机分成2组接受术前治疗,其中23例行免疫化疗(IL-2局部注射合并PVP化疗),11例行单纯化疗。比较 2组患者治疗前后肿瘤浸润T淋巴细胞亚群和B淋巴细胞的变化。结果　免疫化疗组治疗前后CD4+,CD8+, CD20+相对值分别为36·96,35·65,28·65和56·61,38·52,38·70。治疗后CD4+,CD20+细胞数较治疗前明显增加 (P<0·01)。单纯化疗组治疗前后CD4+,CD8+,CD20+细胞数均无显著差异(P>0·05)。结论　IL-2局部注射联合化疗对增强口腔鳞癌患者局部免疫功能具有重要意义。     

化疗对患者口腔黏膜细胞生长状态的影响

目的：了解化疗药物对患者口腔黏膜细胞的生长更新状态的影响。方法：选取21例因胃部肿瘤行胃大部切除术后接受化疗患者,其中10例为术后第1次化疗,11例为术后第6次化疗。用流式细胞术亚G1峰法和增殖抗原Ki67标记法分别检测口腔黏膜的凋亡率和增殖率,常规留取患者的血常规资料,通过统计学分析化疗患者的口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率与骨髓抑制之间的关系。结果：第6次化疗组的白细胞计数较第1次化疗组和健康对照组显著下降（P〈0．01）;第6次化疗组口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率较第1次化疗组和健康对照组显著下降（P〈0．05）。结论：化疗可以影响口腔黏膜细胞的凋亡和增殖状态。     

膜联蛋白A1的表达对口腔鳞癌TPF化疗效果的影响

目的探讨在口腔鳞癌中,膜联蛋白A1的表达水平对TPF（T=多西他赛,P=顺铂,F=5氟尿嘧啶）化疗药物杀伤癌细胞疗效的影响。方法构建Annexin A1 siRNA的反转录病毒载体,对口腔鳞癌细胞系进行干预,通过细胞增殖实验、细胞毒性实验和免疫印迹方法,分析Annexin A1表达干预对TPF化疗药物作用的影响,以及PI3K/AKT相关信号通路和细胞凋亡的影响。采用SPSS18.0软件包对数据进行双因素方差分析。结果下调Annexin A1的表达,口腔鳞癌细胞的增殖能力增强。通过PI3K/AKT途径抑制P27kip1的表达,口腔鳞癌细胞对TPF化疗药物的敏感性提高,促进了癌细胞的凋亡。结论Annexin A1低表达能增强口腔鳞癌细胞的增殖能力,提高对TPF的敏感性,促进癌细胞凋亡。     

舌鳞癌预后与细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨舌鳞癌预后与细胞增殖和凋亡的关系。方法：采用TUNEL法和免疫组织化学法检测52例舌鳞癌细胞中自发性凋亡水平及Bax、Bcl-2、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclea antigen,PCNA)的表达，及其与预后的关系。结果：舌鳞癌中凋亡指数（apoptosis index,AI)、Bcl-2、Bax和PCNA表达的阳性率分别为55．8％、65．4％、73．1％和100．0％。单因素生存分析显示：舌癌患者生存率降低与Bax低表达（P＝0．0020）、PCNA高表达（P＝0．0179）、Bcl-2/Bax比值＞1（P＝0．0072）和高TNM分期（P＝0．0351）有关，但与Bcl-2表达和凋亡指数无关（P＝0．885，P＝0．3536）。结论：Bax、PCNA、Bcl-2/Bax比值和TNM分期一样具有预后价值，综合分析这些指标有助于识别舌癌的生物学特性并准确判断患者的预后。     

口腔鳞癌癌旁上皮中细胞凋亡与细胞增殖的关系

目的 :探讨口腔鳞癌癌旁上皮中细胞凋亡与细胞增殖的病理意义及其相互关系。方法 :利用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记 (TUNEL)技术、增殖细胞核抗原 (PCNA)免疫组织化学染色对 30例口腔鳞癌标本癌旁上皮等4个不同区域中凋亡细胞及增殖细胞的分布和密度进行观察和比较。结果 :与正常区域相比较 ,癌旁上皮中凋亡细胞及增殖细胞分布异常且细胞密度增高 ;肿瘤组织中 ,凋亡细胞明显减少 ,增殖细胞明显增多。结论 :口腔鳞癌癌旁上皮中存在活跃的细胞凋亡及细胞增殖 ,它们在其癌变中具有重要意义。     

薯蓣皂苷对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨薯蓣皂苷对人口腔鳞癌细胞SCC-4和SCC-25增殖和凋亡的影响。方法:不同浓度(0、0.1、0.3、1、3、10、30μmol/L)薯蓣皂苷处理SCC-4和SCC-25细胞24、48、72 h后,CCK-8法检测薯蓣皂苷对SCC-4和SCC-25细胞存活的影响,根据IC₅₀值筛选出后续实验浓度(0、1、2、4μmol/L);EdU检测薯蓣皂苷对SCC-4和SCC-25细胞增殖的影响;流式细胞术检测薯蓣皂苷对SCC-4和SCC-25细胞凋亡的影响;Western Blot检测薯蓣皂苷处理48 h后,细胞中Noxa、Cleaved-Caspase 3蛋白的表达水平;qRT-PCR检测细胞中Noxa mRNA表达情况。结果:在一定浓度范围内,薯蓣皂苷可抑制口腔鳞癌细胞SCC-4和SCC-25的增殖,呈时间依赖性和剂量依赖性(P<0.05)。同时,实验组(1、2、4μmol/L)薯蓣皂苷干预48 h后可促进SCC-4和SCC-25细胞的凋亡(P<0.05),并上调细胞中Noxa、Cleaved-Caspase 3的表达水平,且SCC-4和SCC-2...     

局部应用IL-2联合化疗前后口腔鳞癌 PCNA、p53的表达

目的探讨IL-2局部应用联合化疗前后口腔鳞癌PCNA、p53的表达.方法34例T3、T4期口腔鳞癌患者随机分两组接受术前治疗,其中23例行免疫化疗(IL-2局部注射合并PVP化疗),11例行单纯PVP化疗.采用免疫组化法检测两组患者治疗前后肿瘤增殖细胞核抗原、p53的表达情况.结果免疫化疗组治疗后肿瘤细胞增殖指数明显低于单纯化疗组(P＜0.05).两组均有p53阳性表达,但无显著性差异(P＞0.05).结论PCNA、p53表达与口腔鳞癌的发生发展有关,PCNA的检测有助于判断免疫化疗的治疗效果.     

紫草素对口腔鳞癌Tca8113细胞增殖与凋亡的作用

目的：研究紫草素对体外培养的口腔鳞癌Tca8113细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察紫草素对Tca8113细胞的体外增殖抑制作用;采用光镜、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳技术及流式细胞术观察紫草素对Tca8113细胞凋亡的影响。采用SPSS12．0软件包对数据进行单因素方差分析及t检验。结果：MTr检测显示．紫草素在0-50μmol／L浓度范围内。对Tca8113细胞的增殖抑制作用呈现时间依赖性和浓度依赖性（P〈0．01）．电镜下可见典型的细胞核皱缩及凋亡小体,DNA琼脂糖凝胶电泳观察到典型梯状条带,流式细胞仪结果显示亚G1期细胞明显增加,各组细胞凋亡率均显著高于对照组（P〈0．01）。结论：紫草素对口腔鳞癌Tca8113细胞具有明显的增殖抑制及诱导凋亡作用．可用于口腔鳞癌化学防治的新尝试。     

TSA促进口腔鳞状细胞癌凋亡的实验研究

目的本实验探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(曲古抑菌素TSA)对口腔鳞状细胞癌(Tca-8113)生长抑制情况,以及促进凋亡的作用。方法采用0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.0μg/mLTSA对口腔鳞状细胞癌细胞进行干预,倒置相差显微镜观察细胞形态学改变;MTT法检测细胞增殖活性;Annexin-V-FITC/PI双染流式细胞仪定量检测细胞凋亡。结果①倒置相差显微镜下观察到对照组细胞呈多边形,贴壁,生长活跃;经0.1、0.2、0.4、0.8、1.0μg/mLTSA作用24小时后细胞形态变化不明显;经0.8、1.0μg/mL TSA作用72小时后,约80%细胞核固缩,细胞变小变圆,脱壁。②绘制细胞生长曲线示,随TSA浓度增加、作用时间延长,Tca-8113细胞生长明显受到抑制,各实验组细胞生长抑制率与对照组相比,P<0.05,差别有统计学意义。③0.2μg/mLTSA作用24、48小时,0.8μg/mLTSA作用24小时后,其早期凋亡率分别为3.54±1.36,3.59±1.21%,6.59±1.67%,与对照组相比有统计学意义(P<0.05);各实验组细胞总凋亡率与对照组相比均有统计学意义(P<0.05)。结...     

Acetylshikonin inhibits growth of oral squamous cell carcinoma by inducing apoptosis

ObjectivesRecently, shikonin derivatives from Lithospermum erythrorhizon have been suggested as potential chemotherapeutic agents against numerous types of cancers in addition to their traditional uses, e.g., as anti-inflammatory agents. Acetylshikonin, one of shikonin derivatives, has also been reported to possess anticancer activity. However, few studies of the effectiveness of acetylshikonin against cancer cells have been conducted, and there are no studies of oral cancers. In this study, we investigated the usefulness of acetylshikonin as a treatment regimen for oral cancers by observing the growth inhibitory function of acetylshikonin and the involved mechanisms.DesignsThe viability, cell cycle, and ratio of apoptotic cells of oral squamous cell carcinoma (OSCC) cells were observed after treatment with acetylshikonin using MTT assay, flow cytometric analysis, and Annexin V/PI staining, respectively. In addition, molecular changes of apoptosis-related pathways and the role of reactive oxygen species (ROS) were analyzed in acetylshikonin-treated cells.ResultsWe observed that acetylshikonin significantly suppressed the growth of OSCC cells by inducing apoptotic cell death, and acetylshikonin affected the viability of a normal keratinocyte cell line HaCaT to a lesser degree, suggesting that acetylshikonin may be a good chemotherapeutic reagent with less toxicity to normal tissues. In addition, we found that acetylshikonin-induced apoptosis of OSCC cells is mediated by ROS as well as G2 cell cycle arrest. ROS production in response to acetylshikonin treatment enhanced the phosphorylation of JNK and p38 MAPK, which are in the major pathways of apoptotic cell death mechanisms.ConclusionsIn summary, our data suggest that acetylshikonin is a strong candidate for use as a selective chemotherapeutic agent for the treatment of OSCC.     

TFAR19在口腔白斑和口腔鳞癌中表达的研究

目的研究凋亡相关基因tfar19在口腔正常黏膜、口腔白斑和口腔鳞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测17例正常口腔黏膜、60例口腔白斑,30例口腔鳞癌组织标本中TFAR19蛋白的表达。结果①口腔正常黏膜组TFAR19染色阳性率为88.2%,白斑组TFAR19染色阳性率为63.3%,口腔鳞癌组TFAR19染色阳性率为30%,3组间染色阳性率分别有统计学差异(分别为P≤0.05)。应用Crosstabs相关性统计分析,TFAR19染色阳性率与组织病变恶性度显负相关(r=-0.997,P<0.05)。②口腔正常黏膜、口腔白斑和口腔鳞癌组织的TFAR19细胞染色强度指数分别为199.34±25.33、130.23±19.21,和59.44±13.83,各组间分别有显著性差异。结论tfar19基因在口腔黏膜上皮成癌过程中的确发挥着重要的作用,并且可以推测tfar19基因的表达缺失发生在肿瘤形成的早期。     

KLF4对口腔鳞癌细胞增殖的抑制作用

目的 探讨KLF4对人口腔鳞癌细胞CAL27的增殖抑制作用.方法 构建KLF4慢病毒表达载体,并转染人口腔鳞癌细胞系CAL27,转染不含KLF4开放读码框的慢病毒载体LV105作为对照.采用RT-PCR、免疫细胞化学法对KLF4表达进行鉴定.MTT实验、流式细胞术检测KLF4对口腔鳞癌细胞系CAL27的增殖抑制作用.结果 RT-PCR、免疫细胞化学实验均表明实验组细胞KLF4的表达明显高于对照组(P＜0.01).MTT实验结果表明与对照组CAL27/LV105组相比,CAL27/KLF4能够抑制细胞的增殖能力(P＜0.01).CAL27/KLF4主要通过使细胞周期中的G2/M期阻滞来抑制CAL27细胞的增殖(P＜0.01).结论 KLF4转染能够抑制口腔鳞癌细胞系CAL27的增殖能力,可能在口腔鳞状细胞癌中作为抑癌基因发挥作用.     

鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)在口腔鳞癌患者血清中表达的临床意义

用化学发光法检测36例口腔鳞癌、11例口腔颌面部其他恶性肿瘤、45例口腔颌面部良性肿瘤患者以及70例正常人血清中鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)水平。鳞癌组SCC-Ag水平明显高于良性肿瘤组(P<0.01)、正常组(P<0.01)以及其他恶性肿瘤组(P<0.05)。SCC-Ag可作为口腔鳞癌患者辅助诊断指标。     

术前洛铂化疗对口腔鳞癌抑癌基因PTEN表达的影响

目的:研究口腔鳞癌在洛铂术前化疗后PTEN蛋白的表达变化及其临床意义。方法:60例口腔癌患者随机分为2组,术前未行化疗为对照组,术前化疗者为实验组,应用免疫组织化学SP法检测口腔癌患者正常口腔黏膜组织及其癌组织中PTEN蛋白的表达,HE染色法进行临床病理学分析。结果:2组60例正常口腔黏膜组织中PTEN蛋白全部表达,阳性率为100%;对照组中,口腔鳞癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率为76.7%,显著低于正常口腔黏膜组织;对照组在高、低分化口腔鳞癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率分别为100%、57.1%,差异有统计学意义(P<0.05);PTEN表达阳性率与患者的年龄、性别无显著相关性(P>0.05),与淋巴结转移、病理分级及其临床肿瘤大小之间相关(P<0.05)。实验组口腔鳞癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率为100%,显著高于对照组的76.7%(P<0.05),与正常口腔黏膜组织比较无显著相关性(P>0.05)。结论:PTEN基因在口腔鳞癌的发生发展过程起着一定的作用,对判断预后具有一定的意义。术前洛铂化疗可提高口腔鳞癌组织中PTEN的表达。     

Hypercalcemia in patients of oral squamous cell carcinoma

Purpose  

This study was performed to measure the total and ionic serum calcium levels and incidence of hypercalcemia in patients with Oral Squamous Cell Carcinoma (OSCC) and its clinical significance and relevance.