黑色素瘤抗原基因在胃癌组织中表达的研究

目的：探讨黑色素瘤抗原(MAGE)基因在胃癌组织中的表达，为应用MAGE基因产物对胃癌患者进行特异性抗肿瘤免疫治疗提供理论依据。方法：用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测30例胃癌组织及相应癌旁组织中MAGE-1、MAGE-2和MAGE-3基因的表达。结果：30例胃癌组织标本MAGE-1、MAGE-2和MAGE-3基因的表达率分别为46．7％、30．0％，和36．7％，有20例至少表达其中1种基因，而相应的癌旁组织均不表达MAGE。结论：MAGE基因在胃癌组织中有较高的表达率，其编码蛋白有望作为疫苗用于胃癌患者的免疫治疗。     

原发性肺癌中DMBT1基因的表达

目的探讨原发性肺癌组织中DMBT1基因表达水平与肺癌临床和病理特征的关系。方法以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测原发性肺癌中DMBT1基因的表达水平。结果37例原发性肺癌中10例DMBT1表达正常(27.03%,10/37),有27例DMBT1表达低下或完全无表达(72.97%,27/37);DMBT1的表达与原发性肺癌的病理类型、TNM分期、吸烟史等均无明显相关(P>0.05),但与肺癌组织分化程度及有无淋巴结和(或)远处转移有相关性(P<0.01)。结论DMBT1基因的表达水平与肺癌的发生和肿瘤细胞分化程度及是否存在转移明显相关。     

骨肉瘤中抑癌基因p33/ING1 mRNA的表达及意义

目的研究骨肉瘤中抑癌基因p33/ING1 mRNA的表达与临床病理特征的关系。方法应用RT-PCR技术对40例骨肉瘤标本及其相邻的正常软组织、2例骨肉瘤细胞株(OS732和SaOS2)和1例原代培养的骨膜细胞中ING1基因的表达进行研究。结果在40例骨肉瘤标本中,27例(67.5%)检测到p33/ING1 mRNA较其相邻的正常软组织高表达。p33/ING1 mRNA高表达患者肿瘤转移发生率明显高于低表达的患者,两者比较差异有显著意义(t=2.52,P<0.05);而在临床分期方面差异无显著意义。2例骨肉瘤细胞株与原代培养的骨膜细胞相比较,1例(OS732)检测到p33/ING1 mRNA的低表达,1例(SaOS2)检测到p33/INC1 mRNA的高表达。结论抑癌基因p33/ING1mRNA的高表达在骨肉瘤的发生发展中起到一定作用,且与肿瘤转移有关。     

黑色素瘤抗原基因在胃癌组织中表达的研究

目的 :探讨黑色素瘤抗原 (MAGE)基因在胃癌组织中的表达 ,为应用MAGE基因产物对胃癌患者进行特异性抗肿瘤免疫治疗提供理论依据。方法 :用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 30例胃癌组织及相应癌旁组织中MAGE 1、MAGE 2和MAGE 3基因的表达。结果 :30例胃癌组织标本MAGE 1、MAGE 2和MAGE 3基因的表达率分别为 4 6 7%、30 0 %和 36 7% ,有 2 0例至少表达其中 1种基因 ,而相应的癌旁组织均不表达MAGE。结论 :MAGE基因在胃癌组织中有较高的表达率 ,其编码蛋白有望作为疫苗用于胃癌患者的免疫治疗     

抑癌基因RASSF1在胃癌中的表达及临床意义

目的:探讨RASSF1抑癌基因二种不同转录本在胃癌中的表达情况及与临床的关系。方法:采用RT-PCR方法检测32例胃癌组织及相应的癌旁正常组织,以及51例胃良性病变中RASSF1A、RASSF1B mRNA的表达情况。结果:RASSF1A、RASSF1B在癌旁正常组织中表达缺失率为0,在胃良性病变中有表达缺失,在胃癌组织中的表达缺失率分别为59.4%(19/32)和28.1%(9/32)。RASSF1A、RASSF1B表达与胃癌分化程度及组织学类型无显著相关性。结论:RASSF1二种不同转录本RASSF1A、RASSF1B在癌旁正常组织中可完全表达,在胃癌中的表达缺失率不同,与胃癌的分化程度无明显相关。RASSF1A在胃癌中表达缺失明显,表明RASSF1A是一种具有抑癌作用的基因。     

p53 、MDR 基因在食管癌及癌旁组织中表达的分析

 目的 探讨食管癌和癌旁组织中p53、MDR基因的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化ABC法及逆转录酶-聚合酶链反应的方法，对50例食管癌和37例癌旁组织中p53、MDR基因的表达情况进行检测。结果 p53基因蛋白在食管癌中有显著表达为68％（34／50），癌旁组织中有表达为59％（22／37）；其中在癌旁正常组织中占54％（13／24），在癌旁非典型增生中占69％（9／13）。MDR基因在食管癌高、中、低分化中的表达水平有极显著意义，癌与正常组织有极显著意义。在不同年龄、性别、肿瘤大小上p53、MDR基因的表达无显著意义。结论 p53、MDR基因在食管癌中均呈高水平表达，癌旁组织中MDR有表达，p53基因突变早于组织形态学改变。     

抑癌基因ING1在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨ING1基因在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌发生发展的作用。方法采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PER）方法检测51例乳腺癌组织、30例癌旁正常组织、12例乳腺良性肿瘤组织中ING1基因mRNA的表达情况。分析乳腺癌组织中ING1mRNA的表达与临床病理特征的关系。结果乳腺癌组织中ING1mRNA的表达水平（0．5458±0．2310）低于癌旁正常组织（0．6625±0．1699）。ING1mRNA表达水平在癌组织与癌旁正常组织、良性肿瘤三组间比较的差异有统计学意义（P〈0．05）;ING1mRNA在乳腺癌组织中的表达水平与病理类型及淋巴结转移有密切关系（P〈0．05）,与其他病理学特征无关（P〉0．05）。结论ING1mRNA表达水平低下可能与乳腺癌的发生发展及预后密切相关,有可能成为乳腺癌基因治疗的新靶点。     

肺癌p53基因表达和突变的研究

目的探讨肺癌p53基因表达和突变的临床意义.方法采用流式细胞术、聚合酶链反应及单链构象多态技术对23例肺癌p53基因表达和突变进行了研究.结果p53基因表达的阳性率为43.5%,p53基因突变率为39.2%;p53基因表达与突变基本一致且倾向分布于中低分化的病例,而与临床分期及组织学类型的关系不明显.结论p53基因的异常在肺癌的发生过程中可能属早期事件,有助于判断肺癌的分化程度.     

大肠癌组织中p53蛋白和基因的表达及意义

目的:观察以抑癌基因p53编码蛋白在正常肠黏膜、肠上皮化生及结直肠癌组织中的表达,探讨结直肠癌组织中p53和mRNA的表达及意义。方法:用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测64例结直肠癌及其癌旁肠上皮化生组织中p53蛋白的表达水平,比较其与结直肠癌组织学分型、临床病理分期的关系。结果:1)结直肠癌组织中p53蛋白的表达明显低于正常组织(66.7%,26/39)。结直肠癌组织p53蛋白mRNA的表达水平与正常黏膜组织相比较,显著偏低(1.12±1.07,2.32±1.05,P<0.05)。2)蛋白和基因表达呈显著正相关(r=0.875,P<0.01)。3)黏液腺癌组为3/4,管状、乳头状腺癌为19/35,p53蛋白和基因表达与结直肠癌临床病理、组织学分型无明显相关性,P>0.05。结论:p53失活或低表达与结直肠癌的发生有密切相关性。提示p53 mRNA表达水平的检测可作为判定结直肠癌发生及侵袭转移能力的一项客观指标。     

MAGE-3 原核重组表达载体的构建和表达

 目的 构建原核重组表达载体pGEX-4T-1-MAGE-3并检测其在大肠杆菌（E.coli）BL21中的表达。方法 RT-PCR法制备MAGE-3目的基因,采用DNA重组技术将其克隆至pGEM-TEasy和亚克隆至pGEX-4T-1载体,转化E.coliBL21株,经IPTG诱导,12%SDS-PAGE电泳分离和Western Blot表达鉴定。结果 扩增出349bp的MAGE-3目的基因并构建了原核重组表达载体pGEX-4T-1-MAGE-3;测序结果与Gen Bank收录序列相一致;在E.coli BL21中检测到含该重组表达载体的转化菌表达出分子量约35kD的融合蛋白并证实其为目的蛋白。结论 成功构建的原核重组表达载体pGEX-4T-1-MAGE-3及其所表达的融合蛋白,为以MAGE-3为基础的肽疫苗及特异诊断试剂的研制提供抗原打下了基础,为后续实验提供了依据。     

MAGE-1 MAGE-3及AFP基因在肝癌组织中的表达

目的:探讨MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA在肝癌组织中的表达及用于检测微小转移的可能性。方法:应用聚合酶链反应(PCR)检测86例原发性肝癌患者肝癌组织中MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA的表达。结果:86例原发性肝癌患者肝癌组织中MAGE-1、MAGE-3和AFP mRNA的阳性率分别为34.9%(30/86)、60.5%(52/86)和69.8%(60/86);所有患者肝癌组织至少表达其中一种mRNA。结论:MAGE-1、MAGE-3结合AFP mRNA在肝癌组织中表达率较高,有可能用于联合检测肝癌血行微小转移。     

Polymorphisms in DNA repair genes XPD and XRCC1 and p53 mutations in lung carcinomas of never-smokers

The etiology of lung cancer in population with little or no tobacco exposure is not well understood. Individual genetic susceptibility factors have been suggested to contribute to lung cancer risk in this population. Mutations in the p53 tumor suppressor gene are implicated in the development of lung cancer as they are frequently found in lung tumors from both smokers and never-smokers. In order to determine whether genetic polymorphisms affecting DNA repair capacity modulate p53 mutations in lung tumors from never-smokers, we compared p53 mutations with genotypes of XPD 312, XPD 751, and XRCC1 399 in lung tumors from 43 lifetime never-smokers. p53 mutations were identified in 10 (23%) cases and consisted mostly of G/C to A/T transitions. No statistically significant association was found between p53 mutations and genotypes of XPD 312 or XPD 751. However, patients with the XRCC1 399 Gln allele, that results in a lower base excision repair capacity, were more likely to have p53 mutations, compared with patients the wild-type Arg allele (P = 0.03). In addition, the p53 mutation frequency increased with an increasing number of combined genotypes associated with a lower DNA repair capacity of XPD 312, XPD 751, and XRCC1 399 (P = 0.02). These results suggest that individuals who never smoked and had XRCC1 399 Gln allele may be at a greater risk of p53 mutations, especially if combined with the genotypes of XPD 312 and XPD 751 that may result in a lower DNA repair capacity.     

端粒酶与p53、p16基因在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的研究端粒酶与p53、p16基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其意义.方法应用SP法免疫组化技术和TRAP法分别检测40例肺癌组织中端粒酶和p53、p16基因的表达.结果端粒酶及p53、p16基因在NSCLC中的阳性率分别为92.5%、37.5%和66.7%;p53基因阳性表达率与NSCLC及病理分期显著相关(P＜0.05).p16基因阳性表达率与性别、年龄、病理分期、吸烟史、组织学类型和分化程度无显著相关(P＞0.05).端粒酶活性与年龄呈负相关,并与p53基因表达情况和病理分期有关(P＜0.05).结论端粒酶和p53基因的表达与NSCLC的病期进展有关.     

EGR-1与p53，p16，Cyclin D1在鼻咽癌中的表达及意义

 目的 探讨早期生长反应基因（EGR-1）与p53，p16，Cyclin D1在鼻咽癌中的表达及其意义。方法 应用免疫组化SABC法检测29例鼻咽黏膜慢性炎组织、45例鼻咽癌组织、24例鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中EGR-1与p53，p16，Cyclin D1表达。结果 鼻咽癌原发灶及其颈部淋巴结转移灶中EGR-1表达较鼻咽黏膜慢性炎降低，p53，Cyclin D1表达则增高，差异有统计学意义（P＜0.05）；p16在三种病变中的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 EGR-1的表达降低与p53，Cyclin D1的高表达可能与鼻咽癌的发生、发展有关；p16可能在鼻咽癌的发生、发展中不起作用。     

脑胶质瘤组织p14ARF、p53和p21WAF1的表达及其意义

目的:探讨p14ARF、p53和p21WAF1蛋白在不同级别脑胶质瘤组织中的表达及其在胶质瘤发生、发展中的生物学意义.方法:应用免疫组化SP法检测Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤组织中p14ARF、p53和p21WAF1蛋白的表达,并分析其与胶质瘤组织学分级之间的关系.结果:Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤中,p53蛋白的阳性表达率分别为28.00%(7/25)及60.87%(14/23)(P＝0.022),其阳性表达率随胶质瘤恶性程度的增加而升高,Spearman等级相关分析显示,p53的表达与胶质瘤分级呈正相关(P<0.05);p21WAF1的阳性表达率分别为76.00%(19/25)及39.13%(9/23)(P＝0.010) ,p14ARF的阳性表达率分别为76.00%(19/25)及 34.78%(8/23)(P＝0.004),二者阳性表达率均随胶质瘤恶性程度的增加而降低,Spearman等级相关分析显示,p21WAF1、p14ARF的表达与胶质瘤分级呈负相关(P<0.05).结论:胶质瘤组织中,p53呈不同程度的过表达,且随胶质瘤恶性程度的增加而表达水平升高;p21WAF1、p14ARF随胶质瘤恶性程度的增加表达水平降低.突变型p53蛋白的过表达以及p21WAF1、p14ARF蛋白的低表达,可促进胶质瘤的发生、发展.     

食管癌中p33ING 1p53蛋白的表达及临床意义

目的:探讨p33ING1、p53基因蛋白在食管癌中表达的临床意义及其相互关系.方法:采用免疫组织化学S-P法检测65例食管鳞状细胞癌组织中p33INGI(inhibitor of growth,ING1)、p53基因蛋白的表达.结果:食管癌中p33ING1蛋白阳性表达率为64.62%,食管癌中p33ING1表达与肿瘤的浸润、淋巴结的转移及分化有关;p53在食管癌中表达率为61.54%,食管癌中p53表达与肿瘤的浸润、淋巴结的转移及分化有关.p33ING1和p53在食管癌中表达呈负相关.结论:p33ING1是抑癌基因,在食管癌的发生、发展中可能起重要作用.p331NG1与野生型p53基因相互协同、相互依赖,抑制细胞生长,促进凋亡.检测食管癌患者p33ING1的水平,对p53介导的基因治疗有重要意义.     

MMP-3和p53蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤转移的关系

目的细胞外基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和p53在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化S-P法检测58例临床资料完整的乳腺癌组织标本中MMP-3和p53的表达情况并进行对比观察, 结合临床资料作统计学分析。结果 58例乳腺癌组织中MMP-3的阳性表达为44.83%, MMP-3的高表达与肿瘤的淋巴结转移呈正相关, P＜0.05;p53的阳性表达为37.93%, 其表达与肿块大小有相关性, P＜0.05。结论 MMP-3和p53在乳腺浸润性导管癌中的表达可以作为估计乳腺癌预后及术后综合治疗的生物学指标。     

脑胶质瘤组织p14^ARF、p53和p21^WAF1的表达及其意义

目的：探讨p14^ARF、p53和p21^WAF1蛋白在不同级别脑胶质瘤组织中的表达及其在胶质瘤发生、发展中的生物学意义。方法：应用免疫组化SP法检测Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤组织中p14^ARF、p53和p21^WAF1蛋白的表达,并分析其与胶质瘤组织学分级之间的关系。结果：Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤中,p53蛋白的阳性表达率分别为28．00％（7／25）及60．87％（14／23）（P=0．022）,其阳性表达率随胶质瘤恶性程度的增加而升高,Spearman等级相关分析显示,p53的表达与胶质瘤分级呈正相关（P〈0．05）;p21^WAF1的阳性表达率分别为76．00％（19／25）及39．13％（9／23）（P=0．010）,P14^ARF的阳性表达率分别为76．00％（19／25）及34．78％（8／23）（P=0．004）,二者阳性表达率均随胶质瘤恶性程度的增加而降低,Spearman等级相关分析显示,p21^WAF1、p14^ARF的表达与胶质瘤分级呈负相关（P〈0．05）。结论 胶质瘤组织中,p53呈不同程度的过表达,且随胶质瘤恶性程度的增加而表达水平升高;p21^WAF1、p14^ARF随胶质瘤恶性程度的增加表达水平降低。突变型p53蛋白的过表达以及p21^WAF1、p14^ARF蛋白的低表达,可促进胶质瘤的发生、发展。     

Bub1和p53在胃癌中的表达及意义

目的:了解胃癌中Bub1和p53表达情况,在胃癌及正常胃黏膜中的表达差异,初步分析其临床意义。方法:免疫组织化学法检测胃癌及正常胃黏膜中Bub1和p53的表达。结果:胃癌组织中Bub1的阳性表达低于正常黏膜中Bub1的阳性表达(P<0.05)。Bub1的阳性表达与胃癌分化、淋巴结转移和手术后生存时间有关(P<0.05)。正常黏膜中p53表达均为阴性,胃癌中阳性表达率为50%,两者比较差异有显著性(P<0.001)。结论:基因Bub1和p53表达异常是胃癌产生的机制之一,与胃癌的发生及发展有关,是胃癌预后的重要指标。     

肛管癌p53表达及细胞形态定量分析的研究

本研究对４９例不同组织类型的肛管癌从ｐ５３蛋白表达的改变和细胞形态定量分析的角度探讨该肿瘤的发生机理及ｐ５３蛋白免疫组化的临床意义。研究结果：（１）６１２％的肛管癌有ｐ５３的过度表达，说明ｐ５３表达改变是肛管癌的一个常见现象；（２）免疫组化结果积分与ＤＮＡ含量改变有相关性。３分以上组与小于等于３分组ＤＮＡ指数均值有统计学差异，表明两组生物学行为可能不同，故ｐ５３积分可作为估计病人预后的又一个辅助指标；（３）在某些良性病变的鳞状上皮中也检测到有ｐ５３表达，表明ｐ５３免疫组化不能作为区别良恶性的指标。