含GABA_A受体α_6亚单位神经元在大鼠脑内的分布──原位杂交组织化学技术观察

本实验应用原位杂交组织化学技术对ＧＡＢＡＡ受体的α６亚单位的ｍＲＮＡ在大鼠脑内的分布状况进行了观察。除得到与以往的报道相同的结果即发现小脑浦肯野氏细胞含α６亚单位ｍＲＮＡ外，还发现此ｍＲＮＡ也分布于耳蜗核。在背侧耳蜗核，标记神经元主要见于颗粒细胞层和中央区内；而在腹侧耳蜗核，标记神经元只见于颗粒细胞层。这些结果表明α６亚单位是耳蜗核中某些神经元的ＧＡＢＡＡ受体的重要组成成分。另外，在耳蜗核旁胶质成分区中也见到一些标记细胞，其意义有待进一步研究。     

含GABA_A受体α_6亚单位mRNA神经元在大鼠脑内的生后发育

用原位杂交组织化学方法观察了大鼠小脑皮质和耳蜗核中含ＧＡＢＡＡ受体α６亚单位ｍＲＮＡ神经元的生后发育过程。结果发现小脑在生后发育中，杂交信号在生后第５ｄ最早出现于内颗粒层，在生后第２１ｄ达到高峰并持续至成年期。但在外生发展始终未见到阳性信号。在耳蜗核中，α６亚单位ｍＲＮＡ到生后第７ｄ方出现，其表达水平在此后的阶段内迅速增加，从生后第１４ｄ开始，杂交信号的增强趋于缓慢，至生后第３ｗ达到成年水平。α６亚单位ｍＲＮＡ在小脑及耳蜗核的生后发育早期即有较强表达，提示其与上述两个系统的成熟过程有关。     

GABAA和GABAC受体各亚单位基因在鲫鱼视网膜内的分布—原位杂…

应用原位杂交组织化学技术，利用同位素［＾３５Ｓ］－ｄＡＴＰ标记的寡核苷酸探针，在鲫鱼视网膜观察了含ＧＡＢＡＡ受体α１、α３、α４、α６，β１－３，γ１－２及ＧＡＢＡＣ受体ρ１亚单位ｍＲＮＡ的神经元分布。在外核层，所有测试的亚单位均无表达；而在内核层和神经节细胞层，除α４和γ２亚单位外，均有不同程度的表达。在不同区域标记神经元的数量主要分布在内核层近端和神经节细胞层，呈中等阳性；α４和α６亚单位几乎     

原位杂交及其在受体亚单位mRNA调节中的应用

本文介绍了原位杂交技术的实施与成功条件，并通过原位杂交技术证实了受体亚垢存在及受体的异质性，检测了癫痫基因的表答，为控制癫痫发作，发展新的治疗方案提供了理论依据。     

IL-6受体的多抗制备及其在正常大鼠脑内的分布

IL-6是神经 -免疫通讯的主要信息分子之一 ,获得其受体的抗体并研究该受体在脑内的分布对探讨 IL-6在脑内的功能是重要的基础工作。本研究用原核表达的大鼠 IL-6受体 ( IL-6R)蛋白免疫新西兰大白兔制备了其多克隆抗体 ,经 ELISA、Western blot和免疫细胞化学染色等方法进行了鉴定 ,并且将之用于免疫组织化学染色 ,观察了 IL-6R在正常成年大鼠脑内的表达。结果表明 :所获得的 IL-6R多抗具有较高的效价、特异性和亲和力 ;IL-6R在脑内的分布广泛 ,其中大脑皮质的颗粒细胞层和锥体细胞层、外侧隔核、海马、齿状回、下丘脑视上核、弓状核、小脑 Purkinje细胞以及延髓最后区都有浓染的 IL -6R阳性细胞 ;纹状体、下丘脑视前区、丘脑背侧核群、下丘脑室旁核、中脑导水管周围灰质和蓝斑等部位染色较淡 ;另外 ,胼胝体、视束和海马伞等白质内有许多胶质细胞也呈现 IL -6R阳性染色。本文观察到的 IL -6R在脑内的广泛分布表明 ,IL -6在中枢神经系统内可能具有重要的神经生物学意义     

在发育过程中小鼠脑N-甲基-D-门冬氨酸受体亚单位蛋白的表达

为了测定新生小鼠发育过程中脑组织中ＮＭＤＡ受体亚单位蛋白的表达水平，用ＮＭＤＡ受体亚单位特异的抗体，通过引入成年小鼠皮层组织系列稀释的样品作标准，建立了定量的免疫印迹分析法。并对出生后不同日龄新生儿小鼠脑和小脑组织中ＮＭＤＡ受体ζ１、ε１和ε２亚单位蛋白进行了测定，结果表明，ζ１，ε１和ε２三个亚单位在大鼠前脑组织中呈相似的增加趋势，只是ε１的表达明显的滞后。而小脑此３种单位的表达绝对一均明显低于     

大鼠三叉神经中脑核内GAD样阳性终末与PAG和GABAA受体α3亚单位阳性共存神经元的联系

目的：观察大鼠三叉神经中脑核（Vme)内谷氨酸脱羧酶（GAD）样阳性终末与磷酸激活的谷氨酰胺酶（PAG）、GABAA受体α3亚单位（GABAARα3）和小白蛋白（PV）样阳性神经元之间的联系。方法：免疫荧光组织化学三重染色技术，在激光共聚显微镜下进行观察。结果：在Vme内可观察到大量的GABAARα3样、PAG样和PV样免疫反应阳性神经元，吻尾方向几乎在其全长出现，多为大的假单极神经元（直径为25－50μm）。大约90％左右的PAG样阳性神经元同时呈GABAARα3样和PV样免疫阳性。在激光共聚焦显微镜下观察到，密集分布的GAD样阳性终扣聚集在PAG样和GABAARα3样双重标记的Vme神经元胞体周围，并与之形成密切接触。结论：GABA能神经元投射至Vme的神经终末可能通过位于Vme神经元胞体内的GABAARα3亚单位对谷氨酸介导的面口部本体感觉信息的传递发挥抑制性调控作用。     

NMDARl和GABAA受体的α1及α3亚单位在成年猫小脑的定位分布

用免疫组织化学反应及Nissl染色探讨了NMDARl及GABAA受体α1和α3亚单位在成年猫小脑皮质及小脑核的定位分布。结果表明，NMDARl免疫反应产物主要分布在Purkinje细胞胞质和分子层的树突，分子层的星形细胞和篮细胞以及颗粒细胞层的颗粒细胞和胶质细胞呈中等强度的阳性反应，小脑核的神经元胞质和部分突起着色明显。GABAA受体的α1亚单位免疫反应产物主要分布在Purkinje细胞胞质和树突，分子层的星形细胞和胶质细胞呈弱阳性，小脑核的神经元阳性反应明显。GABAA受体的α3亚单位免疫反应产物主要分布在Purkinje细胞胞质和树突，分子层的星形细胞和篮细胞着色明显，胶质细胞呈免疫反应弱阳性，小脑核神经元及纤维着色明显。在Purkinje细胞层NMDARl、GABAA受体α1及α3亚单位免疫阳性神经元分别占Purkinje细胞总数的80％，61％，88％。结论：NMDAR1、GABAA受体的α1及α3亚单位在成年猫小脑具有广泛的分布。这些受体在介导小脑的复杂功能中可能发挥重要的作用。     

大鼠三叉神经尾侧亚核和脊髓内离子型谷氨酸受体,GABAA受体和甘氨…

为了搞清兴奋性和抑制性氨基酸受体在伤害性刺激信息传递和调制初级门户内的精确定位，本研究用免疫组织化学技术观察了大鼠三叉神经尾侧亚核和脊髓内离子型谷氨酸受体，ＧＡＢＡＡ受体和甘氨酸受体的分布。ＮＭＤＡ受体１亚型分布于ＶＣ和脊髓和各层，ＮＭＤＡ受体２Ａ／Ｂ亚型，Ｋａｉｎａｔｅ受体和ＧＡＢＡＡ受体α亚单位散在性地分布于ＶＣ和脊髓后角的Ⅱ层，ＧＡＢＡＡ受体α亚单位仅见于ＶＣ和脊髓Ⅱ层内轴突样结构。     

雌激素β受体免疫阳性神经元在成年雌性大鼠脑内的分布

目的　探讨雌激素对神经系统的作用 ,研究雌激素 β受体 (ER β)免疫阳性细胞在雌性大鼠脑内的分布。　方法　应用硫酸镍铵增强显色的免疫组织化学技术。　结果　ER β免疫阳性物质主要位于神经元的细胞核内。最强的免疫阳性信号见于前嗅核、大脑皮质、小脑浦肯野细胞、斜角带垂直部、前庭上核、梨状内核、杏仁外侧核、红核和蓝斑 ;中等强度的染色见于隔内侧核、杏仁皮质后核、海马CA3、CA4区、齿状回、终纹床核、视上核等部位 ;较弱的阳性细胞见于下丘脑核团、屏状核、动眼神经核以及杏仁复合体的部分核团。　结论　雌激素 β受体免疫阳性神经元在成年雌性大鼠脑组织内有较广泛的分布 ,可能参与了雌激素对多种脑功能如学习记忆等的调控     

血小板衍生生长因子受体α阳性细胞在成年大鼠脑中的分布规律

目的:研究少突胶质细胞前体细胞在成年大鼠脑中的分布规律。方法:成年Wistar大鼠脑组织血小板衍生生长因子受体α(PDGF-Rα)抗体免疫组化酶标染色。结果:PDGF-Rα免疫染色阳性物质在细胞核、细胞质和突起均有分布。阳性细胞主要分布在前脑和中脑的白质和灰质。嗅球、大脑皮质、海马、视交叉的分布密度高。阳性细胞胞体为长柱形。嗅球和海马的阳性细胞突起和分支较少。在基底节和嗅球见多突起,突起多分支的阳性细胞。结论:少突胶质细胞前体细胞在大鼠的大脑中非均匀分布。不同部位阳性细胞的形态差异主要在于突起的数量。突起的数量越多,突起的分级也就越多。     

大鼠脑内白细胞介素1I型受体mRNA的分布

目的 研究大鼠脑内白细胞介素１Ｉ型受体ｍＲＮＡ表达神经元的分布,材料和方法：以＾３６Ｓ标记的ＩＬ－１ＲｔＩｃＤＮＡ作为探针,采用原位杂交技术检测大鼠脑内ＩＬ－１ＲｔＩｍＲＮＡ表达神经元分布广泛而又不均匀,根据表达ＩＬ－１ＲｔＩｍＲＮＡ神经元的密度变化,大鼠脑可分为四种密度区,非常高,高,中等,低密度区,结论;提示脑内白细胞介素１通过其Ｉ型受体介导而发挥作用。     

大鼠丘脑前核神经元内γ-氨基丁酸及其受体的表达

目的:探讨大鼠丘脑前核内γ-氨基丁酸(GABA)及其GABAA受体(GABAARα1和β2subunits)的表达,从形态学角度为系统研究丘脑前核的功能提供依据。方法:分别采用包埋后胶体金免疫电镜技术和原位杂交检测丘脑前核内GABA及GABAARα1和β2mRNA的表达。结果:(1)在丘脑前核,GABAARα1和GABAARβ2阳性神经元分布较密集,细胞形态较一致。空白对照切片为阴性,未见GABAARα1和GABAARβ2mRNA表达阳性神经元。(2)GABA胶体金免疫反应切片上,GABA胶体金颗粒浓重标记GrayⅡ型轴突终末,而树突、神经元、胶质细胞及背景标记极少。GABA能阳性轴突终末与中小型树突形成对称性轴-树突触,也与神经元胞体形成对称性轴-体突触。结论:提示在丘脑前核能够合成GABAARα1和GABAARβ2,且GABA能轴突终末与神经元的树突或胞体形成对称性突触。     

大鼠三叉神经尾侧亚核内甘氨酸受体和甘氨酸阳性神经元的分布

目的 研究大鼠三叉神经尾侧亚核内甘氨酸受体和甘氨酸阳性神经元的分布及其匹配关系,方法：免疫细胞化学染色技术,结果：甘氨酸受体免疫组化染色阳性胞体和纤维分布于三叉神经尾侧亚核各层,尤以浅层密集,甘氨酸阳性胞体在每层均有广泛分布,甘氨酸阳性纤维及终末密集分布于三叉神经脊束核尾侧亚核的浅层,深层的阳性纤维及终末呈散在线性分析,结论 上述结果表明在三叉神经尾侧亚核浅层甘氨酸阳性纤维和终末的分布与甘氨酸受体     

GABA_A和GABA_C受体各亚单位基因在鲫鱼视网膜内的分布──原位杂交组织化学法研究

应用原位杂交组织化学技术，利用同位素［￣（３５）Ｓ］－ｄＡＴＰ标记的寡核苷酸探针，在鲫鱼视网膜观察了含ＧＡＢＡＡ受体α１、α３、α４、α６，β１－３，γ１－２及ＧＡＢＡＣ受体ρ１亚单位ｍＲＮＡ的神经元分布。在外核层，所有测试的亚单位均无表达；而在内核层和神经节细胞层，除α４和γ２亚单位外，均有不同程度的表达。在不同区域标记神经元的数量和标记强度各不相同，α１亚单位广泛分布在内核层的远端、中部及神经节细胞层，呈强阳性；α３亚单位相对稀少，主要分布在内核层近端和神经节细胞层，呈中等阳性；α４和α６亚单位几乎无阳性表达，仅α６亚单位在神经节细胞层呈弱阳性。β１和β２亚单位在内核层及神经节细胞层呈中等阳性；β３亚单位主要分布在内核层，在神经节细胞层标记细胞较少，呈弱阳性。γ１亚单位分布在整个内核层，在神经节细胞层有零星阳性表达。ＧＡＢＡＣ受体主要分布在内核层，ρ１亚单位主要分布在内核层的远端及中间部分，呈强阳性，而在神经节细胞层表达相对较弱。这种独特的表达型式与其功能密切相关。     

大鼠脑内代谢型谷氨酸受体1、1α亚型的定位分布

用代谢型谷氨酸受体１和１α亚型（ｍＧｌｕＲ１和ｍＧｌｕＲｌα）的特异性抗体的免疫细胞化学染色技术，研究了其在大鼠脑内的定位分布。结果显示，ｍＧｌｕＲ１阳性神经元密集地分布于Ｃａｌｌｅｊａ岛、伏核、斜角带核、外侧隔核背侧部、齿状回、下丘脑外侧区、内侧视前区、乳头体核、丘脑中线核团、脚周核、脚间核、中脑导水管周围灰质腹外侧区、被盖背外侧核、面神经上核和小脑Ｐｕｒｋｉｎｊｅ细胞层。ｍＧｌｕＲｌα阳性神经元主要分布在嗅球的小球层、副嗅核、斜角带核、外侧隔核背侧部、隔海马核、伏核、苍白球、腹侧苍白球、海马、外侧缰核、底丘脑核、下丘脑内侧核、外侧嗅束核、黑质网状部和小脑分子层。ｍＧｌｕＲ１和ｍＧｌｕＲｌα在大鼠脑内的分布如此广泛，说明ｍＧｌｕＲ１和ｍＧｌｕＲｌα在大鼠脑内谷氨酸能纤维联系通路的兴奋性突触传递方面扮演了重要角色。     

鱼藤酮对大鼠脑内代谢型谷氨酸受体1α表达的影响

目的:观察鱼藤酮对大鼠脑内代谢型谷氨酸受体(mGluR)1α表达的影响.方法:利用背部皮下注射鱼藤酮制备大鼠帕金森病模型,以免疫组织化学方法显示mGluR1α在大鼠脑内的免疫反应强度.结果:与对照组相比,鱼藤酮组大鼠尾壳核酪氨酸羟化酶(TH)免疫反应强度明显降低、黑质TH阳性神经元数目减少;尾壳核、内侧苍白球、外侧苍白球以及黑质网状部的mGluR1α免疫反应强度呈现不同程度的减弱,以黑质网状部降低最明显;内侧苍白球、外侧苍白球及黑质网状部mGluR1α免疫反应阳性突起减少;mGluR1α灰度值结果分析显示鱼藤酮组与对照组差异有统计学意义.结论:鱼藤酮降低大鼠脑内mGluR1α的表达.     

Mel—la,Mel—lb褪黑素受体在大鼠海马分布的原位杂交研究

Mel-la,Mel-1b为分别从人大脑和视网膜克隆的两种褪黑素膜受体。随着褪黑素的各种重要生理作用的不断发现,对其受体的研究也日益广泛和深入,本文采用原位杂交技术研究了Mel-1a,Mel-1b两种褪黑素膜受体mRNA在海马中的表达和分布,结果表明此两种受体mRNA在成年大鼠海马各区神经元中均有表达。由于褪黑素是通过细胞膜上与G蛋白耦联的Mel-1a,Mel-1b受体而发挥作用的,而海马又是与老化密切相关的脑区,提示褪黑素对海马的老化有调节作用。