腰骶背根全切猫脊髓Ⅱ板层突触性终末的代偿性变化──电镜定量分析

为深入探索脊髓的可塑性变化规律，用５只单侧腰骶背根全切猫，术后存活３～４个月。发现实验侧脊髓Ⅱ板层内背根来源的复合终末数下降至正常的２４％；非背根来源的简单终末数却增加至正常的１３４％；还新发现了一类双重突触性终末，本文将之称为非典型复合终末。上述变化使突触总数仍维持在正常水平。在Ｌ＿６节段的简单终末中，形成对称性突触的简单终末，其增幅（７１％）显著地大于形成非对称性突触者（３６％）；含有致密核心小泡的简单终末，其增幅（１１９％）又明显地大于仅含清亮小泡者（３４％）。这种简单终末各亚类的增幅不同，可能与丢失大量背根来源的复合终末后进行的机能调整有关。还发现一个树突截面上同时与两个简单终末形成突触的机率增加了４４％。其中含一个对称性突触者更成倍增加，达正常的２１９％。表明新形成的简单终末，除与丢失终末存留的突触后部位恢复突触性联系外，还可能有新的突触性联系形成。     

吗啡对坐骨神经钳夹伤大鼠脊髓Ⅱ板层初级传入纤维终末突触重建的影响

目的 探讨吗啡能否促进大鼠受损伤的初级传人纤维终末在脊髓Ⅱ板层再生及其突触重建。方法 采用电镜定量方法计数吗啡组、生理盐水组和纳络酮吗啡组坐骨神经损伤后15d和30d，L4脊髓Ⅱ板层背根无髓传人纤维来源的Ⅰ型复合终末、背根有髓传人纤维来源的Ⅱ型复合终末和由中间神经元轴突和下行传导束轴突形成的简单终末。结果 吗啡组大鼠脊髓Ⅱ板层的Ⅰ型复合终末数比生理盐水组和纳络酮吗啡组明显增多，然而，Ⅱ型复合终末却比生理盐水组和纳络酮吗啡组少。3组大鼠脊髓Ⅱ板层的突触性终末总数，复合终末数和简单终末数没有差异。结论 吗啡能够促进大鼠脊髓Ⅱ板层受损伤的初级无髓传人纤维终末再生及其突触重建，这可能通过阿片受体介导。     

针刺对猫部分去传入脊髓Ⅱ板层可塑性的影响──电镜定量研究

既往研究已经表明针刺能促进脊髓的可塑性变化。本研究的目的是探讨针刺引起可塑性变化的最小疗程以及是否对非针刺侧也有影响。１０只猫切断一侧Ｌ１～Ｌ５、Ｌ７～Ｓ２背根及背根节，保留Ｌ６。术后电针刺激手术侧后肢Ｌ６神经支配范围的足三里和悬钟，伏兔和三阴交穴位。用电镜定量方法计数针刺一疗程（５只）和二疗程（５只）对脊髓Ⅱ板层不同突触性终末数的影响。结果表明：两组动物对照侧两类突触性终末数与非针刺动物比无明显变化，实验侧背根来源的复合终末数分别为对照侧的４５％与８８％，二疗程组比一疗程组和非针刺动物都明显增加。非背根来源的简单终末数在二疗程组虽有增加，但增加幅度与非针刺动物一致。表明针刺促进备用根纤维可塑性变化在二疗程时才明显，而对非针刺侧却无明显影响。     

猫后肢背根全切后背核突触性终末的可塑性—电镜定量研究

用超微结构定量法,观察分析了猫脊髓L_3节段背核内三种突触性终末在后肢背根(L_1～S_2)全切后的数量变化。术后动物存活4～10个月,以对侧为对照。在测得实验侧背核面积无变化的情况下,比较了两侧单位面积内终末的数目变化。结果证明,背核单位面积内终末总数保持不变。其中背根来源的巨大终末数还残存正常水平的50％;而来源于中间神经元和下行传导束的小型终扣样终末数明显增加(增加了109％);来源于背核边缘细胞的扁平小泡终末数目无显著性变化。此结果说明,当去除了背核全部后肢背根传入后,发生了相邻部位背根,如尾侧骶尾背根和非背根来源的神经纤维的侧支出芽和突触重建,以代偿损伤脱落的背根终末。此结果支持背核具有可塑性的看法,为中枢神经系统突触水平的可塑性增添了新的资料。     

大鼠脊髓后角内甲啡肽标记及非标记结构与C纤维间关系的免疫电镜研究

向大鼠蛛网膜下腔注射辣椒素导致一级传入纤维中的Ｃ纤维变性后，用免疫电镜技术在大鼠脊髓后角浅层内观察到：（１）大量含甲啡肽的轴突终末与未标记树突（或棘）形成对称性（少数为非对称性）突触；（２）含甲啡肽的轴突终未与变性终末共同会聚于同一甲啡肽阴性树突；（３）少量含甲啡肽轴突终末与变性终末间形成轴－轴突触或接触；（４）变性终末与含甲啡肽的树突形成非对称性轴－树突触；（５）甲啡肽阴性轴突终末与变性终末会聚于同一未标记树突并与变性终末间形成轴－轴突触或接触．以上结果表明，在脊髓后角内，脑啡肽除主要以突触后抑制方式调节Ｃ纤维传入外，也可通过轴－轴突触或接触对Ｃ纤维传入进行突触前抑制；非甲啡肽能神经元也能对Ｃ纤维传入进行突出后又突触前抑制．此外，Ｃ纤维在脊髓后角内可通过兴奋性轴－树突触直接影响甲啡肽能中间神经元的活性．     

大鼠臂旁核内接受孤束核内脏传入之神经元同时接受中央杏仁核的反馈调节──溃变、HRP法结合包埋后免疫电镜研究

为研究来自孤束核的内脏传导信息在臂旁核水平是否接受中央杏仁核的反馈调节及其递质性质，以及孤束核—臂旁核—中央杏仁核传导通路中，在臂旁核水平是否接受ＧＡＢＡ的调节，本文将ＨＲＰ注入中央杏仁核进行顺、逆行标记，同时将兴奋性氨基酸毒素海人酸注入孤束核进行损毁，观实其顺行溃变终末，取外侧臂旁核超薄切片后结合抗ＧＡＢＡ的免疫电镜染色，观察发现有下列几种标记；（１）顺行溃变终末，所有的都与臂旁核神经元形成非对称性突触；（２）ＨＲＰ标记终末有两类：第一类和臂旁核神经元形成对称性突触，占ＨＲＰ标记终末总数的８０％以上，第二类与臂旁核神经元形成非对称性突触，另外有大量的ＨＲＰ标记的胞体和树突；（３）胶体金标记的ＧＡＢＡ阳性终末，皆与突触后结构形成对称性突触；（４）ＧＡＢＡ／ＨＲＰ双标记终末，具有ＧＡＢＡ免疫阳性终末和第一类ＨＲＰ标记终末的共同特征。上述几种标记在臂旁核内有以下几种关系：（１）溃变终末和ＧＡＢＡ阳性终末与同一个ＨＲＰ标记或非标记的突形成轴－树突触；（２）溃变终末和第一类ＨＲＰ标记终末共同终止于同一非标记讨突；（３）溃变终末与ＨＲＰ标记树突或胞位形成非对称性突触；（４）ＧＡＢＡ／ＨＲＰ双标记终末与非标记树突或胞体?     

猫丘脑中央外侧核内脊丘系终末与丘脑-皮质投射神经元之间的突触联系

本实验应用顺行溃变和HRP逆行追踪相结合的方法，首次在电镜水平对猫丘脑中央外侧核内脊丘系终末与丘脑-皮质投射神经元之间的突触联系进行了研究．在脊髓第4颈段刀切损毁一侧侧索和前索后，将HRP注射于同侧大脑前上薛氏回和中上薛氏回前端。在电镜下于损毁同侧中央外侧核内可见下列突触连结：（1）溃变的脊丘系轴突终末与标记树突形成的轴-树突触；（2）溃变的脊丘系轴突终末与非标记树突形成的轴-树突触，个别非标记树突含有突触小泡；（3）正常的轴突终末与HRP标记树突和胞体形成的轴-树突触和轮一体突触；（4）正常的两个轴突终末与HRP标记树突形成的轴-轴-树连续性突触；（5）非标记的含突触小泡的突触前树突与HRP标记树突形成的树-树突触。同时可见大量汇聚型突触复合体。本文首次报道在丘脑中央外侧核内，脊丘系终末与丘脑-皮质投射神经元之间存在着直接的突触联系。     

大鼠脊髓后角内甲啡肽标记及其标记结构与C纤维间关系的免疫电镜观察

向大鼠蛛网膜下腔注射辣椒素导致一级传入纤维中的Ｃ纤维变性后，用免疫电镜技术在大鼠脊髓后角浅层内观察到：（１）大量含甲啡肽的轴突终末与末标记树突形成对称性突触；（２）含甲啡肽的轴突终末与突性终末共同会聚于同一甲啡肽阴性树突；（３）少量含甲啡肽轴突终末与变性终末间形成轴－轴突触或接触（４）变性终末与含甲啡肽的树突形成非对称性轴－树突触；（５）甲啡肽阴性轴突终末与变性终末会聚于同一未标记树突并与变性终末     

阿片μ受体在猫脊髓背角浅层内的超微定位分布

用免疫电镜技术观察了阿片μ受体（ＭＯＲ）在猫脊髓背角浅层内的超微定位分布。电镜下观察发现ＭＯＲ样免疫反应产物主要位于小树突和无髓纤维内，偶见有阳性的胞体。ＭＯＲ阳性树突多与阴性轴突终末形成对称性突触，个别为非对称性突触。背角浅层内分布有一定数量的ＭＯＲ阳性无缝纤维，但仅观察到少量阳性轴突终末，且其中大部分并不与其周转形成突触连接。本研究结果为ＭＯＲ在脊髓水平参与阿片类物质镇痛过程中存在突触前和突触     

大鼠脊髓背角CGRP、IB4阳性终末与GABA能神经元之间的联系及GABABR1阳性终末的超微结构观察

背根神经节小型神经元初级传入末梢上的GABAB受体在脊髓背角接受中间神经元的突触前抑制,是脊髓水平痛觉调节的途径之一。为研究大鼠脊髓背角胶状质中背根神经节神经元传入纤维末梢同脊髓背角GABA能中间神经元之间的联系,本实验用免疫组织化学法,通过激光共聚焦显微镜观察了正常大鼠CGRP阳性和IB4阳性背根节神经元的中枢突同脊髓背角GA-BA能中间神经元之间的联系。同时,用免疫电镜(IEM)技术研究了脊髓背角GABABR1阳性的背根神经节神经元中枢突末梢形成突触的特点。结果显示:CGRP阳性和IB4阳性背根节神经元的中枢突和脊髓背角GABA能中间神经元之间形成密切联系;电镜下许多脊髓背角胶状质中突触小球的中央末梢为GABABR1免疫阳性,并作为突触前或突触后成分与周围末梢之间形成对称性和非对称性突触。提示脊髓背角GABA能中间神经元可能通过分布在背根节神经元初级传入末梢上的GABAB受体产生突触前抑制,参与脊髓水平的痛觉调制。     

猫外侧颈核内脊颈纤维终末与颈丘脑投射神经元间的突触联系

本实验采用顺行溃变和ＨＲＰ逆行追踪结合的方法研究了猫脊颈丘脑通路在外侧颈核水平的突触联系。在脊髓颈段刀切损毁一侧背外侧索后将ＨＲＰ注射于对侧丘脑腹后外侧核。在电镜下于损毁同侧的外侧颈核内可见到下列突触联系：（１）溃变的轴突终末与ＨＲＰ标记的树突形成的轴—树突触；（２）溃变的轴突终末与标记的神经元胞体形成的轴—体突触；（３）溃变的轴突终末及正常的轴突终末与标记的中央树突形成的汇聚型突触复合体；（４）溃变的轴突终末与非标记的神经元树突和胞体形成的轴—树和轴—体突触；（５）正常轴突终末与标记的神经元树突和胞体形成的轴—树和轴—体突触。此外，在正常的神经元成分之间还可见到许多类型的突触。     

电针对脊髓背核突触性终末可塑性的影响——电镜定量研究

实验采用切断猫一侧L_1-L_5、L_7-S_2脊神经背根,保留L_6背根(备用根)模型,研究电针刺激足三里与悬钟、伏兔与三阴交两组穴位30天后对背核可塑性的影响。应用体视学方法测知背核及其神经毯面积均未缩小的情况下,在电镜下比较了两侧背核神经毯单位面积内三种突触性终末的数量变化。发现:针刺的手术侧来自背根有髓纤维的巨大终末数恢复到非手术侧的正常水平,与本室另一组非针刺资料(单纯备用根,其手术侧巨大终末数为正常数量的75%)比较,巨大终末数有显著性增加。表明电针刺激能促进同侧备用根有髓纤维的侧支出芽和突触重建。非背根来源的小扣型终末数在手术侧虽有增多,但其增加幅度与单纯备用根手术侧比较无显著差异。说明针刺对小扣型终末的数量无明显影响。     

猫脊髓半横贯损伤的电镜观察

用成年猫作脊髓半横贯切割损伤模型，即从SZ节段在右侧半切取约3mm长的脊髓。术后28天经左心室主动脉插管冲洗，然后经多聚甲醛戊二醛灌注固定。取L6、SZ、S4节段背侧Ⅱ板层电镜观察。术后SZ节段Ⅱ板层的简单终末（小、单突触）、粗细有髓纤维、Ⅰ型复合终末（电子密度较高，会大小不一分布均匀的突触小泡，线粒体量少）和Ⅱ型复合终未（电子密度较低，含大小相近但密度不一的突触小泡，粒线体数量多）均增多。左侧半从上至下（L6、SZ、S4）粗钢有髓纤维，简单终末数、Ⅰ型复会终未均逐步增多（Ⅱ型逐步减少）。右侧半，与术前SZ节相比，L6节的简单终未、细有髓纤维和髓鞘增厚且玻璃样变的粗有髓纤维大量存，同时有对称性突触的小偏平终末出现；S4节则无髓纤维和Ⅰ型复合终天增多，简单终末数减少，Ⅱ型复合终未很少。术后与术前相比，神经元胞质内溶酶体、线粒体、粗面内质网明显增多。线粒体脊变明显；神经胶质细胞胞突内的胶质丝明显增多。上述结果表明：满脊髓半横贯损伤后结构上是增生与演变同时存在，但增生在损伤侧以上和以下的节段及两侧之间有较大差别，即损伤平面以上及对侧半可能是来自后根的无髓纤维和下行的投射纤维的出芽同时发生，而损伤平面以下可能只有来自后根的无阻纤维出芽。     

吗啡依赖大鼠脊髓Ⅱ板层初级传入纤维突触性终末数量变化 …

目的 应用电镜定量方法探讨在吗啡依赖条件下,大鼠背根节感觉神经元发出的初级传入纤维能否在脊髓Ⅱ板层侧出支芽和建立新的突触。方法 用光镜体视学方法测知吗啡依赖组和对照组大鼠Ｌ４脊髓Ⅱ板层横切面积没有差异的情况下,直接比较了两组动物脊髓Ⅱ板层神经毡单位面积内突触性终末的数量变化。结果 吗啡依赖组脊髓Ⅱ板层来自初级传入纤维的突触性终末数,明显多于对照组的初级传入纤维突触性终末数,其终末数比对照组增多７０     

部分去传入猫脊髓背核突触性终末的可塑性变化——电镜定量研究

本实验用猫单侧后肢背根备用模型(切断L_1-L_5、L_7-S_2背根,保留L_6背根),应用光镜体视学计量分析背核和背核神经毡的横切面积;电镜定量研究背核神经毡内三种突触性终末的数量变化。结果显示:实验侧L_3背核及背核神经毡的横切面积未因去传入而发生皱缩;实验侧单位面积内突触性终末总数和活性带数量保持不变,其中来源于背根的巨大终末数还保留对照侧的75%,而来源于L_4以下脊髓中间神经元的小扣型终末数增加了70%;上述两类含圆形小泡的终末总数保持不变;来源于背核边缘细胞的扁平小泡终末数与列照侧无显著性差异。上述结果表明去大部分后肢背根后,在背核内引起了备用背根(L_6)的同型出芽和其它来源轴突的异型出芽,并重建了突触联系。因而从数量上完全代偿了丢失的终末。     

吗啡依赖大鼠脊髓Ⅱ板层初级传入纤维突触性终末数量变化的电镜定量研究

目的　应用电镜定量方法探讨在吗啡依赖条件下 ,大鼠背根节感觉神经元发出的初级传入纤维能否在脊髓 板层侧支出芽和建立新的突触。　方法　用光镜体视学方法测知吗啡依赖组和对照组大鼠 L4脊髓 板层横切面积没有差异的情况下 ,直接比较了两组动物脊髓 板层神经毡单位面积内突触性终末的数量变化。　结果　吗啡依赖组脊髓 板层来自初级传入纤维的突触性终末数 ,明显多于对照组的初级传入纤维突触性终末数。其中来自无髓传入纤维的突触性终末数与对照组同类型的突触性终末数比较增加 6 1%。来自有髓传入纤维的突触性终末数比对照组增多 70 %。尤其是来自含有致密核芯小泡的初级传入纤维突触性终末数比对照组多 98%。　结论　吗啡可能促进初级传入纤维在脊髓 板层侧支出芽和建立新的突触     

应用超微结构定量法探讨针剌对猫脊髓后角第Ⅱ板层的可塑性影响

本实验采用双侧备用根模型(切断双侧L_1-L_5,L_7—S_2脊神经背根,保留L_6背根),针刺动物一侧后肢L_6背根支配范围内的足三里、悬钟、伏兔和三阴交四穴,应用电镜超微结构定量方法,观察电针刺激穴位28天后,对脊髓后角第Ⅱ板层终末可塑性的影响。结果显示,第Ⅱ板层单位面积中复合终末的数量,针刺侧比未针刺侧增多32％。提示针刺能促进完好背根纤维更快地侧支出芽和重建突触联系,以代偿损伤的背根纤维终末。本文也对针刺后第Ⅱ板层中复合终末的形态、面积,简单终末的数量以及电针刺激的某些条件进行了初步的探讨。     

大鼠丘脑前核内海马下托复合体谷氨酸能传入终末与皮质投射神经元的突触联系

目的 探讨大鼠丘脑前核-海马下托复合体神经元环路的突触结构及谷氨酸分布特征.方法 应用HRP束路追踪结合包埋后胶体金免疫电镜技术.结果 在丘脑前核内,可见HRP顺行标记的海马下托复合体传入轴突终末,终末多为卵圆形,内含圆形透亮突触小泡和数个线粒体.其做为突触前成分与HRP标记的树突或非HRP标记的树突形成非对称性突触.在谷氨酸胶体金免疫反应切片上,胶体金颗粒标记胞体、树突、轴突终末等.HRP标记的轴突终末和一些非HRP标记的与突触后成分形成非对称性突触的轴突终末(Gray Ⅰ型)内,胶体金颗粒密度明显大于背景(胞体、树突、Gray Ⅱ型轴突终末等)的胶体金颗粒密度.其平均胶体金颗粒密度为突触后树突的3倍多,为对称性轴突终末(Gray Ⅱ型)的6倍多.在两张邻近的连续切片,γ-氨基丁酸(GABA)胶体金免疫反应切片上,GABA胶体金颗粒浓重标记Gray Ⅱ型轴突终末,背景标记极少;而非对称性轴突终末(Gray Ⅰ型)胶体金颗粒标记极弱.谷氨酸胶体金免疫反应切片上,Gray Ⅱ型轴突终末胶体金颗粒标记极弱.GABA阳性轴突终末与HRP标记的树突形成对称性突触,在同一树突上可见GABA能轴突终末形成的对称性突触和其他轴突终末形成的非对称性突触.结论 丘脑前核内来自海马下托复合体投射神经元的轴突终末是谷氨酸能的;来自海马下托复合体皮质投射神经元轴突终末,在丘脑前核与投射至海马下托皮质的神经元树突形成非对称性轴-树突触.     

大鼠脊髓背角内吗啡肽阳性终末与μ阿片受体阳性神经元的突触联系

目的观察大鼠脊髓背角内吗啡肽阳性终末与μ阿片受体阳性神经元的突触联系.方法包埋前内吗啡肽免疫组织化学方法结合包埋前μ阿片受体免疫金颗粒标记的免疫电镜双标技术.结果内吗啡肽阳性终末以及μ阿片受体阳性胞体、纤维和终末主要分布于脊髓背角浅层（Ⅰ、Ⅱ层）;在电镜下可见二氨基联苯胺（DAB）反应产物标记的内吗啡肽阳性终末与免疫金颗粒标记的μ阿片受体阳性神经元胞体及其树突之间形成以非对称性为主的突触联系,其中的轴-树突触明显多于轴-体突触. 结论脊髓背角浅层内内吗啡肽与μ阿片受体阳性结构在分布方式上互相匹配,这种分布方式为其在外周痛信息传递的过程中发挥镇痛效应提供了形态学基础.     

猫脊髓后角浅层内GABA能神经终末与表达阿片μ受体神经元之间的突触联系

为了研究ＧＡＢＡ与ＭＯＲ在吗啡镇痛中的相互关系，用包埋前免疫组织化学方法结合包埋后胶体金电镜技术，观察了猫脊髓后角浅层内γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）能轴突终末与表达阿片μ受体神经元之间的突触联系。结果表明，后角浅层内约有三分之一的ＭＯＲ阳性树突和胞体与ＧＡＢＡ阳性终末形成突触连接，这些突触均为对称性突触。本实验结果提示猫脊髓后角浅层内ＭＯＲ阳性神经元的功能活动可能受到突触前成分释放的ＧＡＢＡ的影响