大连地区100名随机汉族人群血小板抗原基因多态性分析

笔者应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对大连地区随机汉族人群血小板抗原(HPA)基因多态性进行分析,现报告如下。 1 材料与方法 1.1 材料①检测对象随机选取大连地区经体检合格的无血缘关系的汉族献血者100名;②仪器、试剂美国PE公司9600型DNA扩增仪,美国G&T公司提供的HPA 基因分型试剂盒。     

河南汉族人群血小板抗原HPA1-16bw基因多态性研究

摘要：目的：研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据。 方法：用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型。 结果：HPA1-6和HPA-15基因频率分别为1a 0.987 5,1b 0.012 5; 2a 0.946 9,2b 0.053 1; 3a 0.590 6,3b 0.409 4; 4a 0.996 9,4b 0.003 1; 5a 0.990 6,5b 0.009 4; 6a 0.981 2,6b 0.018 8;15a 0.540 6,15b 0.459 4。 HPA7-14bw,16bw仅检测到a/a等位基因,基因频率均为1.000 0。经χ²检验各系统HPA符合Hardy-Weinberg平衡法则。HPA基因分布存在种族和地区差异。 结论:河南汉族人HPA-15 和HPA-3基因型杂合率最高。HPA基因分型有助于输注血小板时降低免疫性血小板减少症的发生概率。     

徐州地区汉族人群血小板HPA基因多态性的研究

目的 采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)检测徐州地区汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性.方法 2010年期间对徐州地区100名无血缘关系的汉族成年人进行HPA1～17基因及新等位基因Caba+分型研究.根据HPA基因分型试剂盒的要求,调整DNA模板浓度;根据人类生长激素基因(HGH)的保守片段设计内参引物进行PCR-SSP,在包含引物混合液的96孔反应板中,按照相同的循环条件扩增PCR产物;用x2检验比较基因分布期望值与观察值,以验证是否符合Hardy-Weinberg遗传平衡.结果 在徐州地区汉族人群的HPA1～17系统中,呈多态性分布的等位基因是HPA1a,HPA2a,HPA3a,HPA4a,HPA5a,HPA6a和HPA15a,其频率分别为0.995 0,0.935 0,0.590 0,0.9950,0.980 0,0.975 0和0.575 0,HPA7～14,16～17及新等位基因Caba+呈单线性分布.结论 徐州地区汉族人群HPA的基因有地区特点,人类血小板抗原HPA的基因具有民族多态性.     

血小板特异性抗原HPA-17bw基因分型及基因频率调查

目的对HPA-17bw基因分型并调查其在部分汉族人群中的分布。方法采用PCR-SSP方法对无亲缘关系的健康无偿献血者HPA-17bw进行基因分型,采用基因计数法进行基因频率、基因型频率的计算。结果259名正常人的HPA-17bw基因频率为0.000;HPA-17bw/bw的基因型频率为0.000。结论HPA-17bw为低频抗原,259份汉族样本中尚检测不出HPA-17bw。     

血小板新等位基因Cab~(a+)在汉族人群中的调查

目的对血小板新等位基因Caba+进行分型并调查其在中国汉族部分人群中的分布。方法采用PCR-SSP方法对无亲缘关系的健康无偿献血者进行Caba+基因分型,采用基因计数法进行基因频率、基因型频率的计算。结果 299例正常人的Caba-基因频率为1.000,Caba+基因频率为0.000;Caba+/+、Caba+/-的基因型频率均为0.000,Caba-/-基因型频率为1.000。结论 Caba-(2235G)为高频抗原,Caba+(2235T)为低频抗原,299份标本中尚检测不出Caba+基因。     

140名随机献血者血小板抗原1～5系统基因多态性调查

人类血小板抗原(HPA)的研究在临床和输血实践中有着十分重要意义.血小板上有血小板特异性抗原,血小板抗原不合可导致血小板输注无效(PTR)、输血后紫癜(PTP)以及新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜(NAITP)等[1～3].传统的血清学方法受难以获得高质量、高特异性抗血清等多种因素的制约,使HPA分型工作始终无法深入.随着分子生物学技术的进步及对HPA基因研究的深入,国外已将基因检测技术用于血小板分型研究中[4～7].笔者应用聚合酶链-序列特异性引物技术(PCR-SSP)对南京地区140名随机献血者HPA 1～5系统等位基因作了分型,现报告如下.     

南京地区汉族人群中人类血小板抗原基因多态性及分析

人类血小板抗原(Ｈｕｍａｎｐｌａｔｅｌｅｔａｎｔｉｇｅｎ,ＨＰＡ)分型对临床上一些因血小板同种免疫反应导致的同种免疫性疾病,如新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜(ＮＡＩＴＰ),输血后紫癜(ＰＴＰ)及血小板输注无效(ＰＴＲ)等的诊断和治疗有重要意义[13]。长时期来,人们一直沿用传统的血清学方法进行ＨＰＡ分型,但由于难以获得高质量、特异性抗血清等多种因素的制约,ＨＰＡ分型工作始终无法深入下去。随着对ＨＰＡ基因研究的深入,近年来国外陆续报道将基因检测技术用于血小板分型研究中。本文应用聚合酶链序列特异性引物(ＰＣＲＳＳＰ)…     

大连地区汉族人群HPA-15基因多态性分析

目的分析大连地区汉族人群血小板特异性抗原HPA-15基因多态性,探讨其在血小板输注中的临床意义。方法采用PCR-SSP法对大连地区100名汉族无血缘关系血小板捐献者的HPA-15系统进行基因分型。结果大连地区汉族人群HPA-15aa、HPA-15ab、HPA-15bb基因型频率分别为0.3600、0.4400、0.2000。HPA-15a、HPA-15b的基因频率分别为0.5800、0.4200。与我国其他地区汉族人群比较,分布差异无统计学意义。在随机输血中,HPA-15抗原不配合概率为0.3685。结论在随机输血中,HPA-15抗原不配合概率高,在血小板输注中应加以重视。     

广州地区汉族人群血小板抗原基因多态性及频率分布

目的 探讨广州地区汉族人群人类血小板抗原(HPA)-7Hita及HPA-12,-18,-19,-20,-21等位基因多态性及其频率分布情况.方法 选取2010年9月至2011年9月于广州血液中心参与志愿无偿献血,且符合《献血者健康要求(GB18467-2001)》的广州地区汉族献血者中,采用系统随机抽样方法随机选择95例献血者作为研究对象.采集并留取献血者血液标本;分别采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)及序列特异性引物-多重聚合酶链反应(multi-PCR-SSP)对研究对象血液标本进行HPA-7Hita及HPA-12,-18,-19,-20,-21等位基因分型检测,并对广州地区汉族人群HPA-7Hita及HPA-12bw、-18bw、-19bw、-20bw、-21bw等位基因频率与不同国家、地区人群进行比较.结果 ①95例广州汉族志愿无偿献血者均为HPA-7a、-12a、-18a、-19a、-20a、-21a,等位基因频率均为100％,均未发现HPA-7Hita及HPA-12bw、-18bw、-19bw、-20bw、-21bw等位基因;②进一步分析调查结果显示,广州地区汉族人群中HPA-7Hita等位基因频率低于日本人群,且差异有统计学意义(P＜0.05),HPA-12bw等位基因频率亦低于德国人群,且差异有统计学意义(P＜0.05);HPA-18bw、-19bw、-20bw、-21bw等位基因频率则分别与法国、巴西、中国、日本的报道相符.结论 本研究初步获得广州地区汉族人群HPA-7Hita及HPA-12,-18,-19,-20,-21等位基因频率分布情况,为临床相关疾病的诊治及预测提供一定实验数据基础及检测方法.     

南昌汉族人群人类中性粒细胞抗原3(HNA-3)基因频率分析

目的探讨人类中性粒细胞抗原3(human neutrophil antigen-3,HNA-3)在南昌汉族人群中的分布频率。方法本研究采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法对265例南昌地区献血者进行HNA-3的基因分型和多态性分析。结果HNA-3a/3a、3a/3b、3b/3b基因型在南昌地区分别为119例、126例、20例,实验结果符合Hardy-Wenberg遗传定律。HNA-3a和HNA-3b在南昌地区的频率分别为0.69和0.31。HNA-3a同种免疫风险为8.84%。结论南昌汉族人群HNA-3分布具有多态性,抗HN A-3a可能导致的同种免疫风险应引起临床关注。     

用PCR-SSP方法分析南方汉族人群MICA基因多态性

目的调查南方汉族人群MICA基因外显子2~6的多态性。方法采用聚合酶链反应/序列特异性引物(PCR-SSP)方法,调查113例江苏省扬州地区汉族正常人群MICA等位基因的分布情况。结果共检测出18个MICA等位基因,最常见的3种等位基因分别是MICA*008(23.0%),MICA*010(17.6%)和MICA*002/020(11.2%),最罕见的3种等位基因是MICA*042(0.4%),MICA*045(1.3%)和MICA*044(1.3%)。结论中国南方汉族人群MICA等位基因分布频率具有自己的种族特异性。     

青岛地区汉族HPA、MN、NA血型系统的基因多态性调查

笔者采用PCR-SSP(序列特异性引物)方法,选择H PA(人类血小板抗原)、MN、NA(中性粒细胞抗原)3个血型系统进行基因多态性调查,现报告如下。 1 材料与方法 1.1 调查对象随机选择青岛市无血缘关系、不分年龄、性别、职业的无偿献血者(汉族人群)348人。     

以VNTR多态性分析检测人类白血病RB基因的杂合子性缺失

对30个正常个体进行RB1.20 PCR-VNTR分析,其多态性为86.7％。28例白血病的VNTR多态性为64.3％,显著低于正常对照(P<0.05)。以各种不同类型白血病分组分析,发现其中急淋组仅为37.5％,显著低于正常(P<0.05),其它各型白血病与正常比较无显著差异(P>0.05)。进一步对24例急性白血病病例作发作期和完全缓解期的配对VNTR分析,发现其中1例急淋在完全缓解期是多态性,但发作期呈均一性。提示一些急淋病例有RB基因杂合子性缺失。RB基因功能失活在急淋的发病中可能也起一定的作用。     

CR1基因多态性与汉族人迟发性阿尔茨海默病关系

目的研究补体受体1（CR1）基因多态性与汉族人迟发性阿尔茨海默病（LOAD）的关系。方法选取611例中国北方汉族人,其中LOAD病人（LOAD组）254例,正常人（对照组）357例。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）,检测两组CR1基因、载脂蛋白E（ApoE）基因多态性,并进行关联分析。结果携带ApoEε4等位基因可增加LOAD的发病风险（χ2=5.52,P〈0.05,OR=2.91,95%CI=2.06～4.12）;LOAD组与对照组CR1基因rs6656401的基因型和等位基因频率差异有显著性（χ2=6.56、7.16,P〈0.05）;等位基因A显著增加了LOAD的发病风险（OR=2.60,95%CI=1.13～5.98）。多因素Logistic回归分析显示,CR1基因rs6656401等位基因A携带者（基因型AA和AG）较基因型GG纯合子导致LOAD的风险高2.40倍（OR=2.40,95%CI=1.00～5.73）。结论 CR1基因多态性在汉族散发LOAD的发病机制中起着重要作用。     

19名RhD(-)经产妇的RHD基因多态性分析

在人类血型系统中,目前最复杂的当属Rh血型系统,因其能导致新生儿溶血病,溶血性输血反应,其临床意义仅次于ABO血型系统[1].研究证明RH基因是由RHD和RHCE 2个结合基因组成[2],这两个结构基因均含有10个外显子,但在RhD(-)人中只有单独的1个RHCE基因[3].特别应引起注意的是RHD基因的结构存在种族差异[4,5],在汉族人的RhD(-)个体中,RHD基因外显子具有多态性[6].笔者用聚合酶链-序列特异性引物(PCR-SSP)方法对19名中国汉族常规血清学RhD(-)经产妇的RHD基因进行检测,以探讨中国汉族RHD基因多态性及同抗-D产生的关系.     

散发性乳癌WIF-1基因启动子区多态性研究

目的探讨WIF-1基因启动子区rs58172684 A/G与rs2336433 C/T位点单核苷酸多态性与散发性乳癌发生的关系。方法采用等位基因特异性扩增（ASA）法对200例乳癌病人和200例正常对照者的WIF-1基因启动子区rs58172684 A/G与rs2336433 C/T位点单核苷酸多态性进行分析,PCR产物进行测序。结果乳癌病人WIF-1基因启动子区rs58172684 A/G与rs2336433 C/T位点基因型频率与正常对照者比较差异具有显著性（χ2=117.475、38.798,P〈0.001）;乳癌病人rs58172684 G等位基因频率显著高于正常对照者（χ2=11.620,P〈0.001）。rs58172684 A/G位点AA、AG、GG等3种基因型和rs2336433 C/T位点CC、CT、TT等3种基因型与年龄、病理分级、组织分型及淋巴结转移无关（P〉0.05）。结论乳癌病人WIF-1基因启动子区rs58172684 A/G与rs2336433 C/T单核苷酸多态性可能与散发性乳癌的发生相关,G等位基因可能为其发生的遗传危险因素。     

5-羟色胺2A受体基因多态性与精神疾病患者自杀未遂的关联性研究

目的　探讨 5 -羟色胺 2A(5- HT2A)受体基因A 14 3 8G、T10 2C多态性与精神疾病患者的自杀未遂之间的关系。方法　对 5 2例有自杀未遂的精神疾病患者和 64例无自杀的精神疾病患者及 63例正常人 ,按常规方法提取DNA ,用限制性片段长度多态性方法分析 5 - HT2A受体基因的多态性。结果　 5 -HT2A受体基因A 14 3 8G和T10 2C两位点多态性呈完全连锁不平衡 ;自杀未遂组的A 14 3 8G、T10 2C多态性位点的T/G等位基因频率高于正常对照组 (P <0 . 0 5 ) ,自杀未遂组与正常对照组间的基因型分布的差异也有显著性 (P <0 . 0 5 )。结论　精神疾病患者的自杀未遂与 5 - HT2A受体基因的A -14 3 8G、T10 2C多态性有关 ,T/G等位基因可能是自杀行为的危险因素。     

西藏高原世居藏族和移居汉族青年血液流变性的观察

对在西藏高原的世居藏族和移居汉族青年各２４例进行血液流变学１０项指标检测观察。结果表明：移居汉族青年的ＰＦＣ、ＴＦＬ、ＨＣＴ、ηｂ、ＴＫ和ηｐ、ｍｓＴ增高有显著差异（Ｐ〈０．００１ Ｐ〈０．０１和Ｐ〈０．０５）、而ηｒ、ＩＲ、ＶＡＩ无显著性（Ｐ〉０．０５）。认为血流变指标变化受诸多因素的影响,特别是民族生活的习惯不同、地理、气候、自然环境及居住时间长短等有一定关系。     

正常人及急性心肌梗死患者心率变异频谱分析

目的：运用心率变异（HRV）频谱分析法研究正常人和急性心肌梗死（AMI）患者心脏植物神经功能变化。方法：114例正常人和27例AMI患者先记录24h动态心电图，将全部窦性心率经计算机HRV软件处理后使心电信号转换为心率功率频谱（HRPS）。结果：正常人HRPS的低频段功率密度（PSD）、高频段功率密度在白天和夜间有明显的差异性（P＜0．01），白天低频段PSD明显增加，夜间高频段PSD明显增加；随着年龄的增加，低频段PSD和高频段PSD逐渐下降。AMI患者低频段PSD和高频段PSD与正常人比较明显降低（P＜0．01），且无白昼生理波动，这说明AMI患者支配心脏的交感神经和迷走神经均受损。结论：HRV频谱分析对评价心脏植物神经功能是一种敏感而无创的检测指标。     

SCN9A基因多态性与肺癌疼痛发生及阿片镇痛剂量的相关性

目的:探讨SCN9A基因多态性与肺癌病人疼痛发生之间的相关性,同时分析其与阿片类药物镇痛剂量间的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法检测246例肺癌病人和106例对照者的SCN9A-rs6746030位点基因分型。对影响肺癌疼痛发生的混杂因素进行单因素分析及多因素logistic回归分析。采用Mann-Whitney检验比较不同基因型间阿片类药物用量的差异。结果:(1)疼痛组、无痛组和对照组的rs6746030等位基因(G/A)频率分别为0.83/0.17、0.94/0.06和0.95/0.05,无痛组和对照组基因分型无统计学差异;(2)疼痛组与无痛组相比,基因型GA/AA为肺癌疼痛发生的独立危险因素(P <0.001, OR=3.695, 95%CI=1.883-7.253);Ⅲ-Ⅳ期肺癌病人的疼痛发生风险显著增高(P=0.009, OR=2.339, 95%CI=1.235-4.431);(3)中、重度疼痛组病人不同基因型间24 h阿片类药物用量无统计学差异。结论:尚不认为SCN9A-rs6746030多态性影响肺癌疼痛病人阿片类药物的镇痛剂量,但基因型GA/AA可能是影响肺癌病人疼痛发生的独立危险因素之一。