母爱剥夺诱导的抑郁大鼠海马miR-16的表达

目的:研究母爱剥夺是否诱发成年大鼠抑郁样行为表现,miR-16是否参与母爱剥夺诱发抑郁的病理过程。方法:在SD大鼠出生后第1天按窝随机分为母爱剥夺组(n=17)和正常对照组(n=17)。母爱剥夺组大鼠在出生后第1至14天每天接受6 h的母爱剥夺应激,正常对照组大鼠不接受任何实验处理。在大鼠13周龄时采用强迫游泳和糖水偏爱实验评定大鼠的抑郁水平;采用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠海马miR-16的表达水平。结果:在强迫游泳实验中,母爱剥夺组大鼠的被动漂浮时间显著长于对照组大鼠,糖水偏爱率显著低于对照组(P<0.05);与对照组比较,母爱剥夺组大鼠海马内miR-16的表达水平显著增加(P<0.05),miR-16表达水平与抑郁样行为水平显著相关(P<0.05)。结论:母爱剥夺能使大鼠成年后表现出抑郁样行为,海马内miR-16表达水平升高,miR-16可能参与母爱剥夺诱发大鼠抑郁样行为的病理过程。     

母爱剥夺合并慢性疼痛对新生大鼠空间学习记忆能力的影响

目的 研究母爱剥夺、弗氏完全佐剂(CFA)引起的慢性疼痛以及两者合并对幼鼠空间学习记忆行为影响.方法 10窝新生SD大鼠,每窝取4只随机均分为疼痛组(P组),空白对照组(C组),母爱剥夺组(MD组),母爱剥夺合并疼痛组(MD+P组)(n=10).在幼鼠出生后第7天(P7),P组左足底皮下注射弗氏完全佐剂(CFA)30μl;C组注射0.9%生理盐水30μ1;MD组左足底皮下注射0.9%生理盐水30μl后每天上午9:00至12:00将幼鼠与母鼠分离3h,从P7持续至P21;MD+P组左足底皮下注射30μl CFA,随后处理同MD组.检测幼鼠在P7、P14和P21的体质量变化;幼鼠从P22至P29进行Morris水迷宫实验(n=10).结果 MD组和MD+P组幼鼠体质量增加[分别为(17.13±1.13)g,(17.67±1.27)g]明显少于对照组[(22.36±1.55)g,P＜0.01,P＜0.05],而P组体质量增加与C组差异无显著性.Morris水迷宫实验中,MD组幼鼠寻找隐蔽平台的潜伏期[(34.22±5.86)s]较C组[(22.77±2.59)s]、P组[(21.29±1.01)s]、MD+P组[(25.29±2.45)s]显著延长(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),而C组、P组、MD+P组差异无显著性;母爱剥夺对潜伏期变化趋势的影响差异具有显著性(F=7.31,P＜0.05),但疼痛的影响差异无显著性.结论 重复性长时间的母爱剥夺损害了幼鼠的空间学习记忆能力,而CFA诱导的疼痛应激不会导致P7幼鼠的空间学习能力缺陷,并且可以减弱母爱剥夺对空间学习能力的损害.     

母爱剥夺对成年大鼠情绪及多巴胺转运蛋白基因表达的影响

目的：研究母爱剥夺对雄性大鼠成年后情绪及脑纹状体多巴胺转运蛋白（dopamine transporter,DAT）基因表达的影响,探讨DNA甲基化是否参与调控DAT基因的表达。方法：新生幼鼠随机分为实验组和对照组,实验组出生后第1至14天,每天母子分离6 h。12周龄时,采用高架十字迷宫、旷场实验评定2组大鼠的情绪水平,采用RT-PCR法检测纹状体DAT mRNA表达水平,亚硫酸测序法检测DAT基因启动子区DNA甲基化水平。结果：实验组大鼠在新异环境中的探索能力下降、焦虑水平较低,大脑纹状体DAT mRNA表达显著低于对照组(P＜0.05),DAT基因启动子区的DNA甲基化水平差异没有统计学意义（P＞0.05）。结论：母爱剥夺对雄性大鼠成年后的情绪有持久的影响,且抑制纹状体DAT mRNA的表达;DNA甲基化可能不是DAT表达下降的机制。     

早期母爱剥夺致大鼠成年后疼痛情绪加剧的神经机制

目的：探讨早期母爱剥夺致大鼠疼痛情绪加剧的中枢神经机制。方法：根据随机数字表法将新生大鼠按笼别随机分为母爱剥夺组和对照组,建立大鼠母爱剥夺（限制筑巢材料）模型,对照组给予足量的筑巢材料,母爱剥夺组给予对照组1/3的筑巢材料,其他条件均相同。2月龄时记录大鼠的体质量,进行福尔马林诱导的条件性位置回避模型（F-CPA）实验,随后麻醉大鼠,抽取脑脊液及血,取脑,采用ELISA法测定脑脊液促肾上腺皮质激素（ACTH）、血皮质醇水平。采用免疫组化染色观察大鼠大脑组织中c-Fos蛋白阳性细胞数目改变。结果：2月龄时,母爱剥夺组大鼠体质量（300.1±67.2）g,对照组（294.3±59.3）g,两组差异无统计学意义（P>0.05）。对照组大鼠第4天试验后的脑脊液ACTH浓度为（173.6±21.7）ng/mL,而母爱剥夺组为（186.2±16.0）ng/mL,母爱剥夺组明显高于对照组（P<0.05）。对照组大鼠第4天试验后的血皮质醇浓度为（141.7±15.4）ng/mL,而母爱剥夺组为（158.0±22.7）ng/mL,母爱剥夺组明显高于对照组（P<0.05）。母爱剥夺组在髓...     

不同应激方式引发的抑郁大鼠行为特征比较

目的 了解经历不同类型的应激后大鼠抑郁样行为的差异.方法 将新生的SD大鼠随机分为母爱剥夺应激组(27只)、慢性温和应激组(29只)、双重应激组(31只)和正常对照组(30只).母爱剥夺组大鼠于出生后即接受母爱剥夺应激,慢性温和应激组大鼠在成年后接受慢性温和应激,双重应激组大鼠先接受母爱剥夺应激,成年后再接受慢性温和应激,对照组不接受任何实验处理.采用强迫游泳实验和糖水偏爱实验作为评估大鼠抑郁样行为的指标.结果 在强迫游泳实验中,母爱剥夺组[( 119.30±65.56)s]、慢性温和应激组[(145.00±80.24)s]及双重应激组[(170.03±61.75)s]大鼠静止漂浮时间长于对照组[(81.14±52.40)s,F=11.53,P＜0.01],其中双重应激组长于母爱剥夺应激组(P＜0.01),慢性应激组和双重应激组、母爱剥夺组大鼠差异无统计学意义(均P＞0.01);在糖水偏爱实验中,慢性温和应激组[(0.43±0.28)]、双重应激组[(0.50±0.26)]和对照组[ (0.54±0.28)]大鼠的糖水偏爱率差异有统计学意义(F=4.33,P＞0.01),母爱剥夺组[(0.32±0.22)]的糖水偏爱率低于对照组和双重应激组(均P＜0.05);雌、雄大鼠的静止漂浮时间和糖水偏爱率在不同应激方式下的差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 3种应激方式均可导致大鼠表现出某种抑郁样行为.不同应激方式所致的抑郁样行为在不同性别的大鼠间无差异.     

新生期大鼠母爱剥夺对成年后自发活动的影响

目的:观察新生期母爱剥夺对大鼠成年后自发活动的影响。方法:将母鼠随机分为母爱剥夺(MD)组(所生仔鼠在出生后第2～21 d每天母婴分离1 h)和正常对照(N)组(所生仔鼠不做任何处理)。仔鼠成年后予慢性应激,用开场试验观察大鼠自发活动的改变。结果:MD组再次受到慢性应激后可引起自发活动总路程与周边路程的显著减少(P<0.001),休息时间增加(P<0.01)。结论:新生期大鼠母爱剥夺可引起成年后自发活动减少,导致抑郁样行为。     

慢性睡眠限制对幼鼠空间学习记忆能力的影响

目的 探讨慢性睡眠限制对幼鼠空间学习记忆能力的影响.方法 将24只1月龄SD雄性鼠随机分为慢性睡眠限制组、睡眠剥夺组和对照组,每组8只.对慢性睡眠限制组幼鼠进行连续5d每天6h的睡眠限制,采用“温和处理法”;对睡眠剥夺组幼鼠进行连续5d每天6h的睡眠剥夺,采用“多平台水环境法”.分别在睡眠干预前和干预第1、3、5天应用Morris水迷宫方法检测幼鼠的空间学习记忆能力.结果 水迷宫实验显示睡眠限制组、睡眠剥夺组幼鼠在睡眠干预的第3天、第5天,到达平台的平均潜伏期、探索路程较对照组延长（P＜0.05）,其中睡眠剥夺组在第5天的影响最显著（P＜0.01）;在睡眠干预的第5天,睡眠限制组、睡眠剥夺组幼鼠之间出现了差别,睡眠剥夺组幼鼠的潜伏期、探索路程较睡眠限制组延长（P＜0.05）;而在空间探测实验中,3组幼鼠在平台所在象限时间的百分比、穿环次数有显著差异：睡眠剥夺组较睡眠限制组减少（P＜0.05）,较对照组显著减少（P＜0.01）;睡眠限制组较对照组减少（P＜ 0.05）.结论 连续5d、每天6h的慢性睡眠限制可减弱幼鼠的空间学习记忆能力,但其影响程度小于同等时间的睡眠剥夺.     

不同时段哺乳期母爱剥夺对子代小鼠抑郁行为及脑儿茶酚胺水平的影响

目的 探讨不同时段哺乳期母爱剥夺对子代小鼠成年后抑郁情绪的影响.方法 新生SD大鼠随机分为5个不同时段母爱剥夺组（n=5×5）和对照组（n=7）.母爱剥夺组在不同的年龄阶段进行连续5d母爱剥夺（出生当天为p0,出生后第5天为p5,出生后第10天为p10,出生后第15天为p15,出生后第20天为p20）,剥夺期间每天进行6h的母婴分离.当这些大鼠长到10周通过强迫性游泳训练、毛发梳理、葡萄糖消耗实验来评定抑郁行为,同时通过高效液相色谱法测定大脑中儿茶酚胺类神经调质的改变.结果 母爱剥夺组大鼠表现出明显的主动游泳降低,静止漂浮时间从对照组的（58.5±7.5）s,增加到p0：（75.6±9.4） s,p5：（150.4±12.5） s,p10：（174.5±14.3） s,p15：（155.4±11.4） s,p20：（112.4±10.3）s（均P＜0,01,n=5～7）.与对照组（0.87±0.1）比较,母爱剥夺组糖水消耗降低[p0（0.73±0.12）,p5（0.53±0.09）,p10（0.5±0.06）,p15（0.54±0.07）,p20（0.67±0.05）].毛发梳理得分从对照组的（4.5±0.6）分,降低到p0：（3.3±0.6）分,p5：（2.3±0.4）分,p10：（1.9±0.3）分,p15：（2.4±0.4）分,p20：（4.4±0.4）分.与对照组相比,母爱剥夺组大鼠脑内儿茶酚胺水平降低（分别是p0：（94.5±11.5）％;p5：（78.5±9.6）％;p10：（67.6±7.4）％;p15：（64.5±6.6）％;p20：（88.5±7.5）％,均P＜0.01,n=5～7）.结论 出生后哺乳期内10 d左右的母爱剥夺可以明显引起抑郁行为,导致大脑内儿茶酚胺类神经调质的改变.     

睡眠剥夺减弱幼鼠空间学习记忆能力及海马信号转导

目的对pERK在幼鼠睡眠剥夺所致的学习记忆障碍中的作用进行初步探讨,以明确睡眠剥夺对儿童学习记忆的影响及其信号机制。方法 1月龄幼鼠分为正常对照组、大平台对照组、睡眠剥夺组,使用睡眠剥夺箱建立睡眠剥夺模型,使用Morris水迷宫训练检测幼鼠学习与记忆能力,使用免疫组织化学染色方法检测水迷宫测试后幼鼠海马CA1、CA2区pERK1/2表达水平。结果睡眠剥夺组幼鼠CA1、CA2脑区pERK1/2表达则明显少于两对照组（P值均小于0.01）,且着色浅淡。训练第1天,各组平均潜伏期无明显差异,但从第2天开始,睡眠剥夺组幼鼠的平台潜伏期较其它两个对照组出现延长（P〈0.05）,而且在最后1天进行的空间探索试验中,睡眠剥夺组幼鼠穿环数与正常及大平台对照组相比均明显减少（P〈0.01）。结论 幼鼠海马容易受到睡眠剥夺的影响,从而导致空间记忆的破坏和海马ERK磷酸化的减弱。同时也说明海马ERK激活的下降参与了睡眠剥夺导致的空间记忆的破坏。     

睡眠剥夺对幼鼠学习记忆的影响及相关基因

目的 研究完全性睡眠剥夺对幼鼠学习记忆的影响,并对其可能的神经学机制进行深入探讨.方法 将12只出生后3周刚断奶的雄性SD幼鼠随机分为实验组和对照组.利用小站台水平面方法 对幼鼠进行48h的完全性睡眠剥夺,分别在睡眠剥夺前、剥夺后24h及48h后采用Morris水迷宫对幼鼠的学习记忆进行测试,之后处死并采用基因芯片技术对幼鼠脑内基因谱表达进行研究,2组幼鼠基因表达差异2.0或者<0.5的被定义为差异有显著性.结果 完全性睡眠剥夺48 h后,实验组幼鼠在水迷宫第1轮次测试中从第3个入水点入水找到平台的路程[(499.57±92.63)cm]与时间[(29.83±6.26)s]均长于对照组[分别为(283.84±20.40)cm,(15.33±0.95)s],差异均有显著性(P<0.01),第4个入水点实验组找到平台的路程[(1042.51±367)cm]与时间[(38.17±8.97)s]均长于对照组[分别是(489.02±160.38)cm,(20.00±4.52)s],均差异有显著性(P<0.01).完全性睡眠剥夺后48h幼鼠大脑中有11个与学习记忆相关的基因出现显著变化.结论 幼鼠在完全性睡眠剥夺后出现的记忆受损形式与成年大鼠不同,其空间参考记忆维持能力受损可能与脑内影响突触传递的基因变化有关.     

雷公藤多苷对雄性幼鼠生殖损伤作用的可逆性研究

目的:研究雷公藤多苷所致雄性幼鼠生殖损伤的可逆性。方法:第一部分:3~4周龄SD雄性幼鼠14只,随机分为空白组和多苷组,每组7只。空白组给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)灌胃,多苷组给予雷公藤多苷混悬液(9 mg·kg-1·d-1)灌胃,持续给药12周后停药4周。观察停药4周后大鼠睾丸组织的病理变化及睾丸组织雄激素受体(AR)蛋白的表达情况。第二部分:3~4周龄SD雄性幼鼠20只,随机分为空白组和多苷组,每组10只。各组大鼠灌胃药物与剂量及给药周期同"第一部分"。给药12周、停药4周后,将大鼠分笼喂养,每笼1只,按照1∶1比例放入成年雌性大鼠1只,合笼时间为2周,分3次合笼,观察雌鼠受孕率、仔鼠存活率及仔鼠发育情况。结果:1停药4周后,多苷组大鼠的睾丸曲细精管恢复良好,间距正常,细胞层次排列分明,无变性、水肿,间质细胞、精原细胞、精母细胞明显恢复,精子细胞及精子清晰可见。2停药4周后,多苷组大鼠睾丸组织AR蛋白的表达与空白组比较,差异无统计学意义(P0.05)。3合笼后,两组的雌鼠受孕数、受孕率、产仔数、离乳存活率比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:雷公藤多苷对雄性幼鼠的生殖损伤作用具有可逆性恢复,且不影响大鼠的生殖能力。     

72h睡眠剥夺大鼠回肠溶菌酶与分泌成分的变化

目的观察睡眠剥夺大鼠回肠粘膜超微结构以及溶菌酶和分泌成分 (SC)的变化 ,探讨睡眠剥夺引起细菌移位的机制。方法 2 4只大鼠分为睡眠剥夺组、实验对照组和正常对照组 ,睡眠给予剥夺组72h睡眠剥夺处理。透射电镜观察回肠粘膜的超微结构 ,免疫组织化学方法检测溶菌酶、SC阳性肠隐窝的数目。结果睡眠剥夺组回肠粘膜固有层的组织、毛细血管和毛细淋巴管内可见大量细菌。正常对照组、实验对照组和睡眠剥夺组的溶菌酶阳性肠隐窝数分别为 86.8± 16.3、78.8± 13 .0和 5 6.6± 9.4,SC阳性肠隐窝数分别为 89.3± 14 .9、71.7± 10 .7和 5 8.4± 14 .6,睡眠剥夺组均少于正常对照组和实验对照组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。SC特异性地分布于潘氏细胞 ,与文献报道不一致。结论sIgA与溶菌酶共存于潘氏细胞的分泌颗粒 ,并协同发挥免疫屏障功能。睡眠剥夺引起的细菌移位可能与潘氏细胞的变化有关。     

母爱剥夺雄性大鼠成年后的行为特征

目的 研究经历了新生期母爱剥夺应激的雄性大鼠成年以后的行为特征.方法 在SD大鼠出生后的第1天,随机分为实验组(16只)和对照组(14只).实验组在出生后第1～14天,每天接受6 h(9:00～15:00)的母爱剥夺,对照组不接受任何处理.出生后第21天断乳并分笼饲养直至第10周.采用Morris水迷宫实验、高架十字迷宫、旷场实验对2组大鼠的空间学习记忆能力、焦虑水平、探索行为进行评定.结果 Morris水迷宫实验中,实验组大鼠逃避潜伏期的时间[(83.66±22.91)s]明显长于对照组[(56.98±20.89)s,t =3.32,P <0.05],穿越平台的次数实验组[(2.56±1.55)次]明显少于对照组[(4.21±1.58)s,t =2.89,P <0.05],在目标象限停留的时间实验组[(25±9.52)s]少于对照组[(32.87±8.27)s,t =2.39,P <0.05];旷场实验中,实验组大鼠爬行的总距离[(17.41±2.24)m]明显短于对照组[(22.86±2.89)m,t =5.81,P <0.01],而在中央格停留的时间2组之间的差异无显著性意义( t =2.38,P ＞0.05);高架十字迷宫实验中,实验组在开臂中停留的时间长于对照组大鼠( u =2.35,P <0.05),进入开臂的次数2组之间差异无显著性( u =-0.99,P ＞0.05),进入闭臂次数实验组明显多于对照组大鼠( u =2.351,P <0.05).结论 经历了新生期母爱剥夺的雄性大鼠成年以后的行为能力在多方面受到了不同程度的损害.     

生命早期前爪感觉和精细动作剥夺对大鼠空间学习记忆的影响

目的 研究生命早期前爪感觉和精细动作剥夺对大鼠海马依赖性空间参考学习记忆能力的影响。方法 新生SD大鼠随机分为前爪感觉和精细动作剥夺组（实验组,n=53）和假手术组（对照组,n=55)。取13日龄（PN13）实验组大鼠,运用显微外科技术建立幼鼠前爪感觉和精细动作剥夺模型。于PN25(PN21~31)、PN35(PN31~39)、PN45(PN41~50)和PN60(PN56~64)4个时间段,对两组大鼠分别进行旷场测试评估自发活动和探索能力;Morris 水迷宫测试评估空间参考学习记忆能力。结果 旷场测试中,两组大鼠于各时间段的自发活动各项指标比较差异无统计学意义 (P>0.05)。Morris水迷宫测试显示,在PN25和PN35时间段,对照组大鼠训练和测试阶段的成绩均显著高于实验组 (P<0.05);在PN45时间段,训练阶段两组大鼠成绩比较差异无统计学意义(P>0.05),测试阶段对照组大鼠成绩显著高于实验组 (P<0.05)。结论 生命早期前爪感觉和精细动作剥夺,对大鼠自发性粗大运动能力无明显影响,但可损伤其空间参考学习记忆能力。     

72h睡眠剥夺大鼠回肠溶菌酶与分泌成分的变化

目的观察睡眠剥夺大鼠回肠粘膜超微结构以及溶菌酶和分泌成分(SC)的变化,探讨睡眠剥夺引起细菌移位的机制.方法 24只大鼠分为睡眠剥夺组、实验对照组和正常对照组,睡眠给予剥夺组72h睡眠剥夺处理.透射电镜观察回肠粘膜的超微结构,免疫组织化学方法检测溶菌酶、SC阳性肠隐窝的数目.结果 睡眠剥夺组回肠粘膜固有层的组织、毛细血管和毛细淋巴管内可见大量细菌.正常对照组、实验对照组和睡眠剥夺组的溶菌酶阳性肠隐窝数分别为86.8±16.3、78.8±13.0和56.6±9.4,SC阳性肠隐窝数分别为89.3±14.9、71.7±10.7和58.4±14.6,睡眠剥夺组均少于正常对照组和实验对照组(P<0.01或P<0.05).SC特异性地分布于潘氏细胞,与文献报道不一致.结论 sIgA与溶菌酶共存于潘氏细胞的分泌颗粒,并协同发挥免疫屏障功能.睡眠剥夺引起的细菌移位可能与潘氏细胞的变化有关.     

母爱剥夺缺氧缺血性脑损伤大鼠海马UCHL-1的表达

目的 探讨泛素羧基末端水解酶-1(ubiquitin carboxyl-terminal esterase L-1,UCHL-1)在母爱剥夺缺氧缺血性脑损伤大鼠海马中的定位及蛋白表达变化.方法 选取7日龄SD大鼠作为母爱剥夺缺氧缺血性脑损伤实验模型,随机分为3组:假手术组(Sham组)、缺氧缺血性脑损伤(HIBD)组、母爱剥夺(maternal deprivation,MD)组.实验第35天留取大脑海马组织,通过免疫组织化学法观察UCHL-1的定位表达变化,采用Western Blot (WB)观察UCHL-1的蛋白表达变化.结果 免疫组织化学结果显示,与Sham组比较,HIBD组和MD组UCHL-1的阳性细胞数量均显著减少(P＜0.001);与HIBD组相比,MD组UCHL-1的阳性细胞数显著减少(P=0.002).WB结果显示,与Sham组比较,HIBD组和MD组UCHL-1蛋白表达含量均显著下降(P＜0.001);与HIBD组相比,MD组UCHL-1蛋白表达含量显著下降(P=0.002).结论 UCHL-1在母爱剥夺脑缺氧缺血大鼠海马中表达显著下降,UCHL-1可能对母爱剥夺缺氧缺血性脑损伤海马神经细胞修复发挥重要作用.     

宫内发育迟缓幼鼠NMDA受体表达异常和中枢神经系统功能变化

目的 :探讨宫内发育迟缓 (IUGR)幼鼠是否出现中枢神经系统功能障碍及其可能的机制。方法 :SD雌性大鼠随机分为对照组和模型组 ,每组 12只。模型组于妊娠第 5～ 2 0d ,采用被动吸烟法建立大鼠胎儿IUGR模型。根据IUGR诊断标准 ,将幼鼠分为IUGR组与对照组。称量 1,7,14 ,2 1,30日龄幼鼠脑组织重量。于 2 3日龄开始连续 6dMorris水迷宫试验 ,2 9日龄开始消极回避试验 ,测试幼鼠的学习记忆能力。采用WesternBlotting技术及RT PCR技术检测经过学习记忆测试后 30日龄幼鼠海马NMDA受体NR1亚基蛋白及mRNA表达情况。结果 :①各日龄IUGR组幼鼠脑组织重量均低于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。②Morris水迷宫试验中 ,训练第 2～ 6dIUGR组幼鼠平台潜伏期均高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 0 5 )。③消极回避试验中 ,IUGR组幼鼠所需电击次数为 (7.8± 1.2 )次 ,明显高于对照组 (P <0 .0 0 1)。 2 4h后保持潜伏期为 (2 38.2± 11.5 )s ,明显低于对照组(P <0 .0 0 1)。④IUGR组幼鼠海马NMDA受体NR1亚基蛋白相对表达量为 0 .3777± 0 .0 76 7,明显低于对照组(P <0 .0 0 1) ;NR1亚基mRNA相对表达量为 0 .2 4 6 6± 0 .0 6 0 8,明显低于对照组 (P <0 .0 0 1)。结论 :①IUGR幼鼠可出现脑发育障碍及学习记忆能力下降?     

睡眠剥夺对大鼠心肌细胞bcl-2、bax表达的影响及相关机制的研究

目的:探讨睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对大鼠心肌细胞bcl-2、bax表达的影响.方法:利用"小平台水环境法"(flower pot)建立大鼠睡眠剥夺模型,将实验大鼠随机分为睡眠剥夺1、3、5、7日组及大平台对照组、正常对照组共6组,用免疫组织化学方法观察睡眠剥夺后心肌细胞bcl-2、 bax基因表达的变化.结果:睡眠剥夺各组 bcl-2、bax活性均高于大平台对照组及正常对照组(P<0.05),睡眠剥夺5日组心肌细胞bax表达达到最高值,睡眠剥夺7日组心肌细胞bax表达有降低趋势. 睡眠剥夺各组心肌细胞bcl-2表达随睡眠剥夺时间的延长而逐渐降低.大平台对照组与正常对照组比较无差异(P>0.05).结论:睡眠剥夺可引起心肌细胞凋亡,并通过此途径导致心肌细胞死亡.睡眠剥夺引起的心肌细胞凋亡机制与bax大量表达、bcl-2/bax比值降低有关.     

七氟醚在亚麻醉浓度下对新生大鼠脑皮质凋亡和磷酸化JNK1/2、ATP合成酶β亚基表达的影响

目的研究七氟醚在亚麻醉浓度(1.8%,相当于0.5 MAC)下对新生大鼠脑皮质凋亡和磷酸化JNK(c-Jun氨基末端激酶)1/2、ATP合成酶β亚基表达的影响。方法新生7 d SD大鼠6窝,每窝取10只,共60只,随机平均分配至七氟醚组和对照组。七氟醚组新生鼠吸入1.8%七氟醚4 h,对照组新生鼠暴露于空气4 h。在吸入七氟醚或空气结束时每窝每组各取1只幼鼠心脏穿刺抽血检测血糖和血气变化(n=6)。在麻醉恢复后2h和3 d,每窝每组各取1只幼鼠取新鲜脑皮质(n=6),Western blot检测各组磷酸化JNK1/2、ATP合成酶β亚基和Caspase-3的表达。结果 1.8%七氟醚麻醉4 h对幼鼠呼吸抑制轻微,血糖、血气分析结果与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。恢复2 h后,七氟醚组Caspase-3表达较对照组上升419.9%(P<0.05),ATP合成酶β亚基较对照组下降39.6%(P<0.01);3 d后,七氟醚组与对照组Caspase-3和ATP合成酶β亚基的表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。七氟醚麻醉对磷酸化JNK1和JNK2的表达无明显影响。结论亚麻醉浓度七氟醚麻醉可增加新生7 d幼鼠脑皮层神经元凋亡,ATP合成酶β亚基表达下降可能是其诱导凋亡的机制之一。     

雌鼠母爱剥夺模型在应激反应中的特征

目的:探讨母爱剥夺对雌鼠成年后下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamo-pituitary-adrenal axis,HPA)轴活性和急性应激反应,以及下丘脑室旁核中性激素受体表达水平的影响。方法:建立雌性Sprague-Dawley大鼠母爱剥夺模型。成年后在其动情周期的不同阶段给予急性足底电击刺激。采用放射免疫法测定血浆中雌二醇和睾酮及促肾上腺皮质激素浓度,酶联免疫法测定血浆皮质酮浓度,免疫组织化学法检测下丘脑中雄激素和雌激素受体表达。结果:母爱剥夺后雌鼠血浆促肾上腺皮质激素和皮质酮水平在动情前期明显下降(P=0.012和P=0.019),下丘脑室旁核中雄激素受体在动情期表达下调(P=0.008)。结论:新生鼠母爱剥夺可以降低雌鼠HPA轴基础活性,该变化与外周性激素水平波动相关。SD雌性大鼠下丘脑内雄激素比雌激素对于CRH活性的调节作用更为显著。