IgA肾病外周血B淋巴细胞微核糖核酸差异表达及临床意义

目的通过检测人外周血B淋巴细胞微核糖核酸(microRNA)的差异表达,并分析其与IgA肾病临床病理特点、IgA1分子O-糖基化异常之间的关系,探索microRNA在IgA肾病发病中的可能机制。方法收集7例IgA肾病患者及4例正常人外周血5 ml,磁珠法分选出CD19~+B淋巴细胞,提取RNA,采用表达谱芯片筛选差异表达的microRNA。在另外29例IgA肾病患者和16例正常对照者中,对候选microRNAs用实时荧光定量聚合酶链反应(quantificational real-time polymerase chain reaction,QRT-PCR)进行验证,并分析它们与临床病理、IgA1分子半乳糖缺陷(galatose-defecient IgA1,Gd-IgA1)水平的关系。结果 IgA肾病患者外周血B淋巴细胞microRNA表达明显异常,其中85个明显上调,30个明显下调。对5个候选microRNA:miR-3189-5p、let-7g-5p、miR-4258-5p、miR-4695-3p及miR-99b-5p,进一步验证显示,其表达水平在IgA肾病患者与正常对照之间差异无统计学意义(P0.05)。且上述5个microRNA表达量与IgA肾病患者的临床病理指标没有明显的相关性。IgA肾病组血清IgA1、Gd-IgA1明显高于正常对照(P0.05或P0.01)。5个候选microRNA:miR-3189-5p、let-7g-5p、miR-4258-5p、miR-4695-3p及miR-99b-5p的水平与IgA肾病患者IgA1分子O-连接半乳糖缺陷之间没有明显相关性。结论 IgA肾病患者和正常人外周血CD19~+B淋巴细胞microRNA表达谱存在明显差异。初步验证显示miR-3189-5p、let-7g-5p、miR-4258-5p、miR-4695-3p及miR-99b-5p的表达水平在IgA肾病患者与正常对照之间差异无统计学意义,且与IgA肾病的临床病理特点和Gd-IgA1之间无明显相关性,提示这5个microRNA可能不是参与IgA肾病发病和进展的重要microRNA。     

原发性局灶节段硬化性肾小球肾炎患者循环microRNA表达谱研究

目的:本研究通过芯片分析原发性局灶节段硬化性肾小球肾炎(p FSGS)患者血浆中microRNA(miRNA)表达谱变化,寻找与p FSGS相关的miRNA及其与临床指标的相关性。方法:采用Exiqon miRNA表达谱芯片技术,检测人成熟miRNA在p FSGS患者和健康对照中表达水平差异,应用分层聚类分析获得p FSGS差异表达的miRNA谱。并采用实时荧光定量PCR在扩大样本的FSGS患者中验证芯片结果。结果:(1)MiRNA芯片检测结果表明存在p FSGS特异性的miRNA表达谱,共筛选出95个差异表达的miRNA,均为低表达(P0.05)。(2)选取的4个表达差异较为显著的miRNA(miR-3678-3p,miR-4670-5p,miR-583,miR-30c-2-3p)进行定量PCR检测,其表达均低于正常对照组,其中miR-4670-5p、miR-583及miR-30c-2-3p三个差异较明显,比值均在0.5以下(P0.05),结果与芯片相符性较好。(3)纳入的12例患者,顶端型4例,非特异型8例,不同病理亚型,上述验证的4个miRNAs表达差异均无统计学意义(P0.05);Pearson相关性分析显示:miR-4670-5p表达量与BMI显著正相关(r=0.638,P=0.035);miR-583表达量与Scr正相关(r=0.672,P=0.047)、与GFR负相关(r=-0.723,P=0.028);miR-3678-3p和miR-30c-2-3p与患者GFR、BMI、Scr、Alb、24 h尿蛋白定量等指标无明显相关性(P0.05)。结论:多种miRNA在p FSGS患者血浆中异常表达,提示它们可能在FSGS的发生发展中起调控作用。     

动脉重建术后再狭窄相关miRNA表达谱分析及靶基因鉴定

目的 筛查动脉粥样硬化闭塞症( ASO)血管重建术后再狭窄相关miRNA基因表达谱,分析并鉴定表达差异显著的miRNA及其潜在靶基因.方法 取下肢ASO患者股动脉标本6例,3例未行血管重建术(A组),3例动脉重建术后再狭窄(R组),另取正常股动脉3例为正常对照(N组).利用miRNA基因芯片检测miRNA差异表达谱,以实时逆转录-聚合酶链反应(real-time RT-PCR)验证其表达,并通过构建双荧光素酶报告基因系统鉴定预测靶基因.结果 与N组比较,病变组(A组+R组)miRNA-1和miRNA-335表达下调,没有miRNA表达上调;R组miRNA-623表达上调,17个miRNAs下调;A组miRNA-1和miRNA-335表达下调,没有miRNA表达上调.与A组比较,R组17个miRNAs上调,9个miRNAs下调.表达下调以miRNA-1最显著,并经real-time RT-PCR证实(P＜0.05).双荧光素酶实验证实miRNA-1靶向抑制Kruppel样因子4(KLF4)的表达(P＜0.05).结论 miRNA可能参与ASO及动脉重建术后再狭窄的发病机制,其中miRNA-1可能起重要作用.     

微小RNA在结肠慢传输型便秘病变组织中的差异表达

目的 观察微小RNA(miRNA)在结肠慢传输型便秘(STC)病变结肠组织和正常结肠组织中的差异表达.方法 收集6例STC病变结肠组织和正常结肠组织标本,应用miRNA芯片检测miRNA在STC病变结肠组织和正常结肠组织中的表达.结果 5种miRNA在STC病变结肠组织正常结肠组织中的表达差异有统计学意义(P＜0.05).与正常结肠组织比较,miR-20b、miR-27b、miR-30b、miR-128及miR-129-3p在STC结肠组织中表达下调,统计学组间差异倍数均在1.2倍以上,其中miR-128及miR-129-3p下调明显,统计学组间差异倍数大于2倍.结论 部分miRNA在STC结肠组织和正常结肠组织中存在差异表达,可能参与了STC发生的分子机制.     

miR-30b 在肾癌中的表达和临床意义

目的：通过检测 miR-30b 在肾癌组织及其配对癌旁正常组织中的表达水平,探讨其与临床病理特征之间的相关性,为进一步研究在肾癌发生、发展过程中 miR-30b 的作用奠定基础.方法从33例经手术切除的肾癌组织及其配对癌旁正常组织中分别提取各自的RNA,经逆转录得到 cDNA,使用 RT-qPCR检测两者 miR-30b 的表达水平,通过统计学软件进一步分析其表达量与患者临床病理特征的相关性.同时,通过检测 miR-30b 在不同肾癌细胞系的表达量,分析 miR-30b在正常细胞系和肾癌细胞系的表达差异.结果 miR-30b 在肾癌组织中的表达量明显高于配对的癌旁正常组织(P＜0.001),其中22例肾癌标本 miR-30b呈现高表达.肾癌组织中 miR-30b的表达水平与患者的年龄、性别、肾癌组织类型、TNM分期及 UICC/AJCC 临床分期均无显著相关性(P＞0.05).miR-30b在不同肾癌细胞系表达水平不同,但均高于正常组织细胞系(P＜0.05).结论肾癌组织中 miR-30b的表达明显上调,提示其可能与肾癌的发生、发展相关.     

miR-34a与乳腺癌复发及预后的相关性研究

目的 探讨miR-34a在乳腺癌复发及预后中的作用.方法 88例乳腺癌患者均施行改良根治术,并有完整的随访资料.采用实时定量PCR(real-time qPCR)对原发肿瘤蜡块提取的microRNA进行miR-34a表达水平的测定,配对t检验比较癌组织和正常组织中miR-34a的水平差异,Mann Whitney-U非参数检验比较miR-34a表达水平和乳腺癌临床病理参数的关系,预后分析采用Kaplan-Meier生存分析和Log-rank计算,多因素统计分析采用Cox回归.结果 相比癌旁正常组织,在癌组织中miR-34a表达明显下调(P＜0.001),在组织学高分级的乳腺癌中miR-34a表达水平明显低于中低分级的乳腺癌(P=0.024);在随访中复发的乳腺癌患者中,miR-34a表达水平明显低于无复发的乳腺癌(P =0.008).miR-34a表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、激素受体ER/PR表达、HER2状态、脉管瘤栓、组织学类型、肿瘤病理分期及月经状态等未见明显关联(P＞0.05).以中位值2-△Ct =0.117为截断值,Kaplan-Meier生存分析表明,miR-34a高表达患者其乳腺癌无复发生存率(P =0.026)及总生存率(P=0.019)均高于miR-34a低表达患者.结论 miR-34a可促进组织分化,其表达下调增加肿瘤复发,可做为乳腺癌侵袭潜能的预测指标.     

糖尿病足动脉缺血患者骨骼肌血管内皮生长因子基因表达

目的　研究糖尿病患者缺血下肢肌肉组织内源性血管内皮生长因子 (VEGF)基因表达及其与糖尿病足发病机理的关系。　方法　将 2 4例患者 ,33条肢体分为 3组 :无下肢动脉缺血的糖尿病 (DM) 5例 ,10条肢体 ;无糖尿病的下肢动脉粥样硬化闭塞症 (ASO) 10例 ,13条肢体 ;糖尿病下肢动脉硬化闭塞症 (DLASO) 9例 ,10条肢体。对照组为正常志愿者 (NOR) 5例 ,10条肢体。通过肌肉穿刺获取小腿骨骼肌组织 ,采用RT PCR法测定肌肉组织中hVEGF16 5mRNA表达。　结果　DM组和NOR组小腿骨骼肌组织中hVEGF16 5mRNA无表达。DLASO组小腿骨骼肌组织有hVEGF16 5mRNA表达 (0 0 2 1± 0 0 13) μg ,但明显低于ASO组 (0 133± 0 0 2 4 ) μg ,(t=13 32P <0 0 1)。　 结论　DLASO组缺血下肢肌组织内源性VEGF基因表达水平明显低于ASO组 ,是糖尿病足部溃疡发生发展的重要内在原因。     

miR-215在进展期结肠直肠癌中的表达及其临床意义

目的:研究miR-215在结肠直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中的表达及其临床意义。方法:研究对象是我院2007年1月至6月的进展期CRC病人,从入选病人的石蜡包埋组织中提取microRNA,进行实时定量PCR检测。结果:共有42例CRC病人入选,男25例,女17例;直肠癌18例,结肠癌24例。miR-215在CRC组织中的表达水平低于配对的癌旁正常组织(P<0.001)。结论:miR-215可能成为CRC的预后标志物。     

自发性2型糖尿病KKAy小鼠肾小球microRNA表达谱和氯沙坦治疗效应

目的 分析糖尿病肾病(DN)发病过程中肾小球miRNA表达谱的变化,观察血管紧张素受体拮抗剂(ARB)氯沙坦对DN肾小球miRNA表达谱的影响,确认在DN发病过程中发挥关键作用的miRNA.方法 8周龄KKAy小鼠随机分为氧沙坦治疗组(10 mg·kg-1·d-1)和非治疗组,C57BL/6小鼠作为正常对照组.于20周龄检测体质量、随机血糖、尿微量白蛋白、尿肌酐,观察肾脏形态改变.应用磁珠灌注法分离肾小球,提取总RNA,应用Affymetrix GeneChip miRNA芯片,分析KKAv小鼠肾小球microRNA表达谱的变化,以及氯沙坦对microRNA表达谱的影响.结果 KKAy小鼠的体质量和血糖较正常对照C57BL/6组小鼠显著升高(均P＜ 0.05),氯沙坦治疗显著改善2型糖尿病KKAy小鼠的尿白蛋白/肌酐比值[( 539.71±100.23) mg/g比(728.00±177.19) mg/g,P＜0.05]和肾脏病理损害,而对血糖无影响.miRNA芯片分析结果发现,与正常对照C57BL/6小鼠相比,20周龄KKAy小鼠肾小球内10个miRNA的表达上调;12个miRNA的表达下调.与KKAy非治疗组小鼠相比,20周龄氯沙坦治疗组KKAy小鼠肾小球内共有4个miRNA表达下调,其中miR-503和miR-181d在KKAy非治疗组小鼠肾小球内的表达显著上调,氯沙坦治疗可抑制其过表达.结论 miR-503和miR-181d在糖尿病KKAy小鼠肾小球内的表达显著上调,氯沙坦治疗可抑制其在糖尿病状态下的异常表达,可能为糖尿病肾病新的治疗靶点.     

动脉闭塞性疾病中一氧化氮合酶的表达

目的 探讨一氧化氮合酶(NOS)异构体的表达差异在血栓闭塞性脉管炎(TAO)和动脉硬化闭塞症(ASO)血管壁改变过程中所起的作用.方法 免疫组织化学染色方法分析TAO、ASO以及正常对照的血管标本中3种NOS蛋白表达情况.结果 TAO和ASO动脉内膜的eNOS表达较正常对照明显减少,差异有显著性(P<0.01);TAO动脉内膜的eNOS表达较ASO中明显减少,差异有显著性(P<0.05).与正常对照比较,TAO和ASO中膜的iNOS表达增高,差异有显著性(P<0.05).TAO、ASO动脉与正常对照动脉的各层组织中的nNOS表达,差异无显著性.结论 eNOS蛋白表达在TAO和ASO的内膜减少可能是动脉闭塞性疾病发生的因素之一.TAO动脉内膜中eNOS蛋白的表达较ASO更少,可能是TAO患者的年龄较ASO患者更年轻,是TAO血管壁的炎症性变化更严重的影响因素之一.     

肝再生磷酸酶-3和微小RNA17-92家族成员在结肠癌细胞中异常表达的意义

目的 探讨肝再生磷酸酶-3(PRL-3)和微小RNA17-92 (miR-17-92)家族成员在结肠癌中异常表达的意义.方法 构建稳定转染PRL-3基因和空白对照质粒的结肠癌细胞株LoVo-PRL-3和LoVo-VC,用MicroRNA芯片筛查表达异常的促癌microRNA,从中选取miR-17-92家族成员miR-17、miR-19a行荧光实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)进行验证.在LoVo-PRL-3细胞中对STAT3信号传导与转录激活因子-3(STAT3)进行RNA干扰,检测miR-17、miR-19a的表达,在稳转细胞株中转染miR-17、miR-19a或对其进行敲除,用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Tanswell试验对细胞增殖侵袭能力的变化进行研究.在13例患者结肠癌原发灶、转移灶及癌旁正常组织中行免疫组织化学及qRT-PCR检测PRL-3、pSTAT3和miR-17、miR-19a的表达.结果 在结肠癌细胞株LoVo-PRL-3中miR-17、miR-19a的表达明显上调(P＜0.05),干扰STAT3可以抑制miR-17、miR-19a的表达.在LoVo-VC细胞中过表达miR-17、miR-19a促进了细胞的增殖(P＜0.05及P＜0.01)和侵袭(P＜0.01),而在LoVo-PRL-3细胞中敲除miR-17、miR-19a抑制了细胞的增殖侵袭(P＜0.05).在结肠癌组织中PRL-3、pSTAT3和miR-17、miR-19a的表达呈正相关.结论 PRL-3通过上调miR-17、miR-19a的表达在结肠癌细胞增殖侵袭中起到促进作用.     

细胞外基底刚度调控宫颈癌细胞迁移的microRNA的筛选

目的通过microRNA芯片筛选不同基底刚度影响宫颈癌细胞迁移过程中的关键microRNA的候选者。方法用丙烯酰胺及双丙烯酰胺的不同比例配置基底刚度为1、20 k Pa的人工基底膜,在其上种植宫颈癌细胞系Siha,36 h后收取细胞提取总RNA,用microRNA芯片及qRT-PCR方法筛选2种基底刚度条件下的差异表达microRNA。结果在2种不同刚度条件下生长的宫颈癌细胞系Siha共有173个表达差异的microRNA,其中包括70个表达上调的microRNA和103个表达下调的microRNA。在宫颈癌细胞系Siha、Hela、Caski中,检测与宫颈癌细胞迁移相关的miR-21、miR-125a、miR-75b、miR-150、miR-595、miR-218、miR-200b、miR-107、miR-183等表达与microRNA芯片结果一致。结论不同基底刚度可引起宫颈癌细胞系Siha的microRNA表达谱不同,microRNA在基底刚度调控宫颈癌细胞迁移的过程中可能具有重要作用。     

miR-143-3p在胃癌组织中的表达和临床意义研究以及生信分析

目的探索miR-143-3p在胃癌细胞和胃癌组织中的表达、并分析其异常表达的临床意义;同时采用生物信息学方法,进行靶基因和信号通路富集分析。方法采用实时荧光定量PCR法检测miR-143-3p在正常胃黏膜细胞和5种胃癌细胞,以及胃癌组织和癌旁组织中的表达,并分析其临床意义。采用OncomiR和YM500数据库分析miR-143-3p在胃癌组织和癌旁组织中的表达。采用miRecords网站数据库的预测软件预测其靶基因,选择至少3个以上软件支持的靶基因,运用DAVID 6.7软件在线富集分析其靶基因参与的信号通路。结果实验结果表明:相对于正常胃黏膜上皮细胞GES-1,miR-143-3p在不同分化程度的胃癌细胞,包括SGC-7901(中分化)、MKN-45(中分化)、MGC-803(低分化)、BGC-823(低分化)和HGC-27(未分化)细胞中的表达量均明显下调(P0.001)。实时荧光定量PCR检测结果表明:相对于癌旁组织,miR-143-3p在胃癌组织中的表达在36例中下调,在18例中上调,4例变化不明显。miR-143-3p在胃癌组织中的表达与胃癌淋巴结转移以及浸润深度相关(P0.05)。生信分析结果显示,miR-143-3p的靶基因富集在38个与肿瘤相关的信号通路中。结论 miR-143-3p是胃癌中表达下调的分子标志物,是潜在的具有临床相关性的抑癌基因,可能参与胃癌发生发展过程中的生物学行为。     

Preliminary study of microRNA expression profiles in human pancreatic cancer

目的:探讨微小RNA(miRNA)在人胰腺癌中的表达谱,为进一步研究miRNA在胰腺癌发生发展中的分子机制奠定基础。方法:利用miRNA芯片技术比较胰腺癌组织和癌旁正常胰腺组织的miRNA表达差异;挑选其中两个差异表达的miRNA运用荧光定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)验证。结果:与正常胰腺组织相比,胰腺癌组织中表达上调超过1.5倍的miRNA有15个,表达下调超过1.5倍的miRNA有11个;qRT-PCR检测8例胰腺癌组织和相应癌旁正常胰腺组织中miR-10b的相对表达量分别为0.0743±0.0222和0.0287±0.0129;miR-21相对表达量分别为0.3062±0.1117和0.0240±0.0137(均P<0.05),与miRNA芯片结果相符合。结论:miRNA芯片筛选出的26种差异表达的miRNA可能与胰腺癌的发生发展相关,其各自在胰腺癌中的作用值得进一步研究。     

IL-6高表达对下肢动脉硬化闭塞症患者继发下肢深静脉血栓形成发生率的影响

目的研究IL-6高表达对下肢动脉硬化闭塞症(ASO)患者继发下肢深静脉血栓形成(DVT)发生率的影响。方法连续选取2020年5月至2021年11月广州医科大学附属第三医院血管外科收治的下肢ASO患者45例(ASO组)和随机数字表法选取同期体检中心的健康者30例(正常组)为研究对象, 比较分析两组的IL-6情况。ASO组根据IL-6是否升高分为观察组和对照组, 比较分析两组的DVT发生率。结果 ASO组IL-6水平高于正常组, 差异具有统计学意义[9.14(4.47, 21.39)pg/ml 比 2.06(0.94, 3.33)pg/ml, Z=-4.707, P<0.001]。IL-6水平升高30例(观察组), IL-6水平未升高15例(对照组);观察组下肢ASO继发DVT的发生率高于对照组, 差异具有统计学意义(40.0% 比 6.7%, χ2=3.908, P=0.048)。结论 IL-6高表达的下肢ASO患者继发下肢DVT的概率升高。     

miRNA-141在结肠癌患者血浆及肿瘤组织中的表达及意义

目的:探讨miRNA-141(miR-141)在结肠癌患者血浆及组织中的表达及意义。方法:选取89例行手术切除的结肠癌患者和60例健康志愿者,利用实时荧光定量PCR技术检测所有研究对象血清及肿瘤组织和癌旁组织中miR-141表达,分析miR-141在血清及肿瘤组织中的表达与临床病理特征之间的相关性。结果:miR-141在结肠癌患者血清中相对表达量(5.97±1.38),显著高于正常对照组(2.13±0.92);miR-141在结肠癌组织中相对表达量(3.64±1.05),显著高于癌旁组织的(1.12±0.67),差异均有统计学意义(P0.001);miR-141在结肠癌患者血清中的相对表达量与浸润程度、分化程度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期和癌胚抗原水平有关(P0.05),miR-141在结肠癌组织中的相对表达量与浸润程度、分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关(P0.05);Pearson相关分析显示,miR-141在结肠癌患者血清中的相对表达量与在肿瘤组织中的相对表达量呈正相关(r=0.345,P=0.001)。结论:miR-141在结肠癌患者血清及肿瘤组织中均呈高表达,可能作为癌基因参与结肠癌发生、进展及转移过程,有望成为结肠癌早期诊断的指标及基因治疗的新的靶位。     

阿托伐他汀预处理对脊髓缺血再灌注损伤大鼠损伤脊髓microRNA表达的影响

目的:检测他汀类药物预处理对脊髓缺血再灌注损伤大鼠损伤脊髓组织中microRNA(miRNA,miR)表达谱的影响,探讨他汀神经保护作用的机制.方法:18只雄性SD大鼠随机分为假手术组、手术组和药物组,每组6只,其中手术组和药物组以阻断腹主动脉的方法建立大鼠急性脊髓缺血再灌注损伤模型,假手术组在开腹后于腹主动脉上绕线而不阻断动脉.药物组大鼠给予胃内灌注10mg/kg/d阿托伐他汀14d后再行建模手术,手术组在建模术前仅给予等容量生理盐水.对各组分别在术后6、12、24和48h应用BBB评分评价脊髓神经功能.在术后48h处死动物,取腰骶段脊髓组织.对组织切片后采用HE染色和2,3,5,-triphenyltetrazoliumchloride (TTC)染色明确神经组织病理变化及损伤情况,对缺血面积和脊髓横断面面积行定量检测并计算缺血百分比;应用miRNA芯片检测组织中miRNA表达谱;分别用假手术组和手术组RNA为模板,采用实时定量PCR对芯片结果进行验证.结果:手术组在术后各时间点的BBB评分较假手术组显著下降(P＜0.05),药物组在术后各时间点的BBB评分均较手术组明显增高(P＜0.05)但仍低于假手术组(P＜0.05).HE染色显示手术组和药物组均存在脊髓缺血性损伤,但药物组较手术组减轻.TTC染色显示假手术组、手术组和药物组的缺血百分比分别为(2.1±0.1)％、(77.3±5.1)％和(43±3.2)％,手术组缺血百分比较假手术组显著增大(P＜0.05),而药物组缺血百分比与手术组比较显著缩小(P＜0.05)但仍显著高于假手术组(P＜0.01).芯片检测miRNA表达谱显示,手术组与假手术组相比,其中48种miRNA表达明显改变,38种上调1.6～4.9倍,另有10种miRNA表达下调;与手术组相比,药物组有13种miRNA表达发生改变,并可逆转缺血再灌注损伤后的8种miRNA,包括miR-365、miR-323、miR-672*、miR-760-5p、miR-376b-5p、miR-369-5p、miR-210和miR-199a.miRNA表达的实时定量PCR结果和芯片结果比较无显著性差异(P＞0.05).结论:阿托伐他汀预处理可对大鼠脊髓缺血再灌注损伤发挥神经保护作用,其机制可能与其对miRNA的调控有关.     

microRNA-196b、microRNA-217与TGFβR1蛋白在胰腺导管腺癌组织中的表达及其意义

目的检测胰腺导管腺癌组织中微小RNA(microRNA,miR)-196b、miR-217与转化生长因子β受体1(transforming growth factorβreceptor 1,TGFβR1)蛋白的表达水平,并探讨其临床意义。方法前瞻性收集2014年3月到2017年3月期间在重庆医科大学附属第二医院行胰腺癌根治术的30例胰腺导管腺癌患者的组织标本(包括胰腺导管腺癌组织及其癌旁组织),利用实时荧光定量聚合酶链反应法检测miR-196b和miR-217的表达水平,采用Western blotting法检测TGFβR1蛋白的表达水平。结果胰腺导管腺癌组织中miR-196b和TGFβR1蛋白的表达水平均高于癌旁组织(P0.001),而miR-217的表达水平低于癌旁组织(P=0.001)。胰腺导管腺癌组织中miR-196b的表达水平与TGFβR1蛋白的表达水平呈正相关(r=0.803,P0.001),而miR-217的表达水平与TGFβR1蛋白的表达水平呈负相关(r=–0.839,P0.001)。结论胰腺导管腺癌组织中TGFβR1蛋白的表达可能同时受miR-196b和miR-217的双向调控,这种双向调控机制可能是制约胰腺导管腺癌发生和发展的重要机制之一,也可能是治疗胰腺导管腺癌的潜在靶点。     

直肠癌患者肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD与miR-454表达水平及其相关性

目的:研究肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD及miR-454在直肠癌患者中的表达水平。方法:2016年1~3月,21例直肠癌患者分别检测癌灶组织、癌病灶周围组织以及直肠正常组织中的肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD及miR-454表达水平,分析肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD与miR-454的相关性,探讨三者在直肠癌发生、发展中的作用。结果:癌组织、癌旁组织以及正常组织中的SEMA3F、CYLD与miR-454表达差异均具有统计学意义(P0.01)。转移组患者癌组织中SEMA3F、CYLD均显著低于无转移组,miR-454显著高于无转移组(P0.01)。高分化组CRC组织中SEMA3F、CYLD表达水平显著高于中低分化组,miR-454表达显著低于中低分化组(P0.01)。肿瘤抑制因子CYLD与miR-454具有显著负相关性(r=-0.971,P0.01)。肿瘤抑制因子SEMA3F与miR-454具有显著负相关性(r=-0.955,P0.01)。结论:肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD在直肠癌早期可见高表达,随着病情进展表达水平逐渐下降;而miR-454则起到促进直肠癌细胞异常增殖及转移的作用,随着疾病进展表达水平逐渐升高,且与SEMA3F、CYLD均呈显著负相关;肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD及miR-454表达对于直肠癌的诊断及病情进展、预后的评估均具有重要的参考价值。     

miR-181b及其关键靶基因PTEN和TIMP-3在肝细胞肝癌中的表达和意义

目的:研究miR-181b对PTEN和TIMP3基因表达的影响,探讨其在肝细胞肝癌(HCC)发生、发展中的作用及意义。方法:应用免疫组化和实时荧光定量PCR检测30例HCC及相应癌旁组织,10例正常肝脏组织中miR-181b、PTEN、TIMP-3表达情况,分析miR-181b、PTEN和TIMP-3的表达水平与HCC临床病理特征之间的关系。探讨miR-181b水平与PTEN、TIMP3表达的相关性。结果:在HCC组织中PTEN和TIMP-3的m RNA和蛋白的表达水平均明显低于癌旁组织及正常肝组织(P0.01),调控二者表达的miR-181b在HCC组织中的的表达明显增高。miR-181b、PTEN和TIMP-3的表达水平与HCC细胞的分化程度、血清中AFP表达水平、HBV感染明显有关,与患者年龄、性别、肿瘤大小等因素无关。结论:miR-181b在HCC中的表达量显著高于癌旁和正常肝组织,其表达水平与肿瘤组织细胞的分化程度、血清AFP水平及是否合并HBV感染明显相关;在HCC组织中,miR-181b的表达水平与PTEN、TIMP3的水平呈负相关。miR-181b可能通过靶向调控PTEN和TIMP3的表达来发挥其促进HCC侵袭转移的生物学作用。