血液检测HBsAg酶联免疫吸附试验拖带现象分析

目的通过对使用永久性钢针在酶免检测中出现阳性拖带现象进行分析,以寻找解决拖带现象的办法。方法采用同一份标本和相同试剂进行手工反复检测比较,分析酶免阳性标本拖带污染对其他标本结果的影响。结果对Metis 200-8全自动血库系统使用永久性钢针时阳性标本产生拖带污染的后续3个标本,经重新检测,结果均为阴性,证实为拖带现象所致。结论永久性钢针在检测过程中对其他标本会带来不同程度的拖带污染,可以通过对同一份标本进行对比检测,以保证结果的可靠性。     

牡丹江市中小学生HBsAg及抗-HBs携带情况调查

为了搞好中小学生乙型肝炎的预防工作 ,我站于 1 996～ 1 998年对牡丹江市中小学生作了ＨＢｓＡｇ及抗 -ＨＢｓ携带情况调查。小学生 (8～ 1 0岁 ) ,初中生 (1 3～ 1 5岁 ) ,高中生 (1 6～ 1 8岁 )。ＨＢｓＡｇ检测采用ＥＬＩＳＡ法 ,测试剂盒由中外合资上海宝业科华生物技术有限公司提供。抗 -ＨＢｓ的检测 1 996～1 997年采用反向间接血凝法 ,1 998年同ＨＢ ｓＡｇ检测。1 996年ＨＢｓＡｇ检测小学生 90 5 9名 ,ＨＢ ｓＡｇ阳性 32 8名 ,阳性率为 3 6 2 %;1 997年 91 0 3名 ,ＨＢｓＡｇ阳性 36 2名 ,阳性率为 3 97%;1 998年 86 76名 ,ＨＢ…     

红谷滩新区入托儿童HBsAg、抗-HBs检测结果分析

我省是乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）的高流行区，随着我国计划免疫工作的发展．乙肝已经列为计划免疫重点控制的疾病之一．乙肝控制已经取得显著成效．主要表现为乙肝表面抗原（HBsAg）携带率．HBV感染均有不同程度的下降。为了解红谷滩新区入托儿童HBsAg感染现状和乙肝免疫水平．为今后开展乙型肝炎防治工作提供科学依据．于2007年度对该区16所幼儿园入托儿童．3042人进行HBsAg和抗-HBs检测．现将结果报告如下。     

舟山市健康人群HBsAg、抗-HBs阳性率调查分析

我市是病毒性肝炎的高发区 ,近年来发病率维持在 2 0 0 1 0万左右 ,其中乙肝占 5 6 0 0 % ,年报告乙肝 1 0 0 0例 ,严重影响了我市人民群众的身体健康和经济发展。为了做好乙肝的预防 ,全市从1 987年开始接种乙肝疫苗 ,并于 1 992年列入计划免疫 ,儿童全程接种率已达 95 %以上     

点免疫结合法测定血清中的HBsAg

点免疫结合测定(Dot-Immunbinding Assay,DIBA)是1982年Hawkes等人建立起来的一种免疫学检测方法。基本原理是将待检标本直接加在硝酸纤维膜(NC)上,封闭后,经酶标记物作     

丙型肝炎病毒抗体检测中拖带污染的分析

目前,血站对丙型肝炎病毒（HCV）抗体的检测方法主要是ELISA法,该试验方法自1971年问世以来,以敏感度高、特异性强、操作简便、记录易保存等特点,被广泛应用。但由于ELISA法对仪器设备要求较高,一旦全免加样系统防污染功能不完善,常常会出现拖带污染现象。为此笔者对643份无偿献血者标本进行检测分析,结果如下。     

加样针污染致不同项目拖带情况分析

目的探讨不同项目、不同值域的拖带规律,为制订拖带克服措施和献血者(血液)保留淘汰策略提供依据。方法各个项目均用RSP100(4针型)全自动加样仪加样,用同样的冲洗程序和冲洗量进行加样针冲洗,用FAME16/20全自动酶免分析仪进行后处理,从第2列开始,以列为序,阳性孔后每间隔3孔有1孔有反应,取原标本和重采标本经手工加样复检阴性即纳入拖带污染统计。将阳性孔按S/CO值进行分组,对不同阈值造成拖带的情况进行评价。结果不同项目的拖带程度和频率有明显差异,抗-HIV项拖带最为严重,抗-HCV项次之,TP和HBsAg最低,拖带率随着S/CO值的升高而升高,当样本测定值在Cut off值的20倍以上时,抗-HIV项可有80%的样本发生拖带,抗-HCV项可有40%的样本发生拖带。结论加样针老化是造成拖带率逐年上升的主要原因,各项目拖带情况不一与样本的阳性程度、试剂灵敏度、加样量有关,拖带的预防应从做好仪器维护保养、加大加样针的洗涤时间和洗涤量、推广使用一次性加样针、献血前进行快速检测筛除阳性程度较高的标本等方面进行考虑。     

多次重复加样对HBsAg测定结果的影响

实验室在利用半自动生化分析仪测定生化项目的试验中存在着部分手工操作。按照相应试剂盒中的说明书进行手工加样本加试剂 ,反应一定时间后在半自动生化分析仪上进行比色测定。这样同一份血清标本往往要经过多次重复加样。为探讨其对定性试验ＨＢ ｓＡｇ检测结果的影响 ,作者对多次重复加样后的血清标本进行了ＨＢｓＡｇ复检 ,结果报告如下。资料与方法1 .1 .一般资料作者收集了乙肝患者ＨＢｓＡｇ阳性血清 87例 ,健康体检者ＨＢｓＡｇ阴性血清 87例。1 .2 .方法1 .2 .1 .将 87例ＨＢｓＡｇ阳性血清与 87例ＨＢｓＡｇ阴性血清进行分组 ,按照…     

抗-HBs抗体阳性血清中和确认HBsAg方法的建立

1 材料与方法 1．1 仪器、试剂及材料 1．1．1 WELLSCAN K3酶标仪、BHP9504化学发光仪、anthos fluido洗板机，分别是芬兰雷勃公司、北京滨松光子技术股份有限公司和郑州安图生物工程公司产品。     

酸解离HBsAg免疫复合物以提高HBsAg检出率的探讨

酸解离ＨＢｓＡｇ免疫复合物以提高ＨＢｓＡｇ检出率的探讨广州暨南大学医学院微生物和免疫学教研室（５１０６３２）林晨，罗伟中，刘小澄，韦静附属医院检验科宋爱华用ＥＬＩＳＡ检测乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）时。有时出现与临床不符的阴性结果。我们考虑是否病毒...     

乙型肝炎病毒表面抗原和抗体双阳性样本的产生机制研究

目的 研究乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和抗体(HBsAb)双阳性样本的产生机制.方法 运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测技术在血清HBsAg阳性样本中收集HBsAb同时阳性的样本作为研究组,利用HBsAg和HBsAb体外血清学中和反应为同时阳性的样本寻找配对的样本作为配对组,对筛选出的每一对样本进行乙型肝炎病毒(HBV)分型、HBV-DNA病毒载量测定、HBsAg亚型分析、HBV-S基因测序,记录结果.同时,收集HBsAg阳性并且HBsAb阴性的样本血清作为对照组,同步分析,记录结果.结果 20例研究组的血清学标志物中,乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)均为阳性,基因型均为B型,HBV-DNA病毒载量均大于105 copies/ml,HBsAg亚型均为adw,有7例样本HBV-S基因有突变;20例配对组的HBcAb均为阳性,基因型均为C型,HBV-DNA病毒载量均大于105 copies/ml,HBsAg亚型均为adr,有6例样本HBV-S基因有突变.25例对照组样本的HBcAb均为阳性,HBV-DNA均大于105 copies/ml,其中12例样本基因型为B型,11例样本基因型为C型,2例样本基因型为B+C型;HBsAg亚型16例为adr,7例为adw,2例为ayw;有8例样本HBV-S基因有突变.结论 HBsAg和HBsAb双阳性样本的产生机制可能由于机体在一定时期内感染了两种基因型和HBsAg亚型均不同的HBV而引起.     

HBsAg对医疗操作中乙型肝炎病毒传染源的预警效果

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)对医疗操作中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)传染源的预警效果。方法对解放军第454医院992例连续入院的手术患者采集空腹静脉血3ml,针对HBsAg阳性和阴性HBV携带者进行传染性定量检测和分类比较。结果 992例外科患者中检出HBsAg阳性者156例。HBsAg阳性和阴性者的HBV DNA阳性率分别为73.7%和9.0%;传染性范围分别在0～1×109 ID/ml、0～1×104 ID/ml。26.3%的HBsAg阳性者HBV DNA阴性;1.0%的HBsAg阴性HBV携带者HBV浓度=1×104 ID/ml;75.6%的HBsAg阳性者HBV浓度<1×105 ID/ml,3.8%的HBsAg阳性者HBV浓度>1×107.5 ID/ml。结论以HBsAg为传染源替代指标对医疗操作中非传染源的预警效果良好,而对传染源的预警效果较差,表明HBsAg监控法预防护理人员HBV职业感染的效价比较低,实用性值得探讨。     

低水平血清乙肝病毒表面抗原测定及其临床意义

目的：了解低水平血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg）的人群分布及其相关乙肝病毒血清标志物模式特征。方法：微粒子酶免疫分析技术测定8089例非肝炎病芡住院患者血清HBsAg及其表面抗体（抗－HBs）、乙肝病毒e抗原及其e抗体（HBeAg、抗－HBe）和乙肝病毒核心抗体（抗－HBc）;根据定值参比血清和样本的HBsAg荧光速率值／阴性对照荧光速率值之比值（S／N值）,并结合中和试验结果,确定浓度在5μg/L以下的HBsAg阳性例数,并分析相关乙肝病毒（HBV）血清标志物模式。结果:共检出HBsAg阳性816例,HBsAg浓度在5μg/L以下的有189例,占总数的2.34％,占HBsAg阳性人群的23.16％。其中,HBsAg浓度在1μg/L以下的有84例（44.40％）;1－2μg/L的有33例（17.5％）;2－5μg/L的有72例（38.10％）。对上述低水平HBsAg人群的5项HBV血清标志物检测获得8种模式,以“HBsAg、抗－HBc、抗－HBe阳性”,“HBeAg和抗－HBs阴性”模式为主（74.60％）;累计HBsAg和抗－HBc同时阳性者占94.17％;HBsAg与抗－HBs同时阳性只出现在HBsAg1μg/L以下人群中（6.45％）。结论：低水平血清HBsAg人群不容忽视,提高HBsAg检测灵敏度有重要意义;同时检测相关HBV血清标志物,对于确定上述人群有帮助。     

探讨ELISA一步法检测HBsAg的HD-Hook效应

目的 初步探讨ELISA一步法检测标本中高浓度HBsAg的钩状效应。方法 采用ELISA一步法检测427份乙肝患者的5项指标，共检出HBsAg阳性标本411例，其中有16份检测结果为乙肝病毒标志物少见模式（HBsAg阴性而HBeAg呈阳性）。将16份标本作适当稀释后再次测定，同时采用RPHA法作对照检测。结果 同步稀释法以及RPHA法测定结果均为阳性。结论 ELISA一步法检测HBsAg存在着不同程度的HD-Hook效应。     

乙型肝炎病毒表面抗原118位氨基酸变异研究

目的研究献血者乙型肝炎病毒表面抗原118位氮基酸变异对ELISA检测的影响。方法PCR扩增献血者表面抗原基因,恢复变异点氨基酸为野生型,构建不同的表达载体,在293T细胞株中表达,检测各自在不同试剂中的反应格局。结果117位点对检测反应格局不产生明显影响,118位点的变异明显影响检测格局,恢复变异点氨基酸明显提高了检出率和灵敏度。结论118位氮基酸变异影响了乙肝表面抗原的筛查,改变了其的免疫反应原性。     

荧光定量PCR对低水平HBsAg血液样本的检测效果分析

目的 探讨献血者携带低水平tlBsAg时初、复检试剂的选择,以减少HBsAg漏检。方法 从3万多人份用国产ELISA试剂（A）初检HBsAg阴性的血样中,留取S／CO值在临界下限30％的灰区样本50例,再用国产ELISA试剂（B）与进口ELISA试剂对50例样本同时复检,并进行HBVDNA定量分析。结果 50例国产试剂（A）初检阴性的血样中,进口试剂阳性检出率40％,国产试剂（B）的阳性检出率16％,差异有显著性。进口试剂阳性检出率40％与FQ-PCR法阳性检出率32％的差异无显著性。国产试剂（B）的阳性检出率与FQ-PCR阳性检出率的差异有显著性。结论 国产试剂检测低水平H＆sAg样本的灵敏度低于进口试剂,易发生漏检。     

72例HBV感染者配偶感染情况调查及影响因素分析

目的 调查72例 HBV感染者其配偶的感染情况,对家庭生活中可能导致配偶感染的影响因素进行详细调查并分析.方法 随机抽取已婚乙肝患者72例,采用ELISA法对其配偶进行乙肝表面抗原(HBsAg)的检测.将夫妻一方阳性者定义为配偶未感染组,双方阳性者定义为配偶感染组.2组均进行问卷调查,比较2组间各因素间的差异.结果 2组间卫生习惯、认知水平的差异有统计学意义(P＜0.05)；高危性行为评分、是否接种乙肝疫苗的差异有显著统计学意义(P＜0.01).结论 为控制HBV病毒在配偶中的传播,必须加强社区及家庭知识宣传,采取控制传播的有效措施如接种乙肝疫苗,安全卫生的性行为,提高认知水平,保持良好的卫生习惯.     

肝组织HBsAg及HBcAg的三种免疫组化方法标记效果比较

目的在EliVisionTMPlus二步法、ABC、SP三种常用免疫组化方法中,探索最适合标记肝组织中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)的方法。方法肝穿标本经常规脱水、石蜡包埋及切片等处理后,用EliVi-sionTMPlus二步法、ABC及SP法标记HBsAg、HBcAg,比较检测结果。结果 SP法标记肝组织中HBsAg、HBcAg的效果最好,ABC法次之,EliVisionTMPlus二步法效果不理想。结论对需要鉴别不明原因的肝功能异常疾病及进行抗病毒治疗的乙肝患者,首选SP免疫组化标记方法来标记肝组织中的HBsAg、HBcAg。     

血袋内抗凝血液标本对ELISA法检测HBsAg结果的影响

目的 探讨血袋内抗凝血液标本对ELISA法检测HBsAg结果的影响。方法 对3468人次街头无偿献血者留取2份血液标本：一份不抗凝,另一份同血袋里血液一样抗凝,所用试剂、仪器相同,并在同等条件下检测HBsAg;用HBsAg弱阳性参考品按比例加入抗凝剂进行检测;模拟同血袋内一样抗凝稀释血液检测HBsAg的漏检情况。结果 不抗凝血液标本中HBsAg阳性48份,同血袋一样抗凝血液标本中HBsAg阳性30份,两者差异有显著性。结论 血袋内抗凝血液标本被稀释可造成低浓度HBsAg漏检,应留取不抗凝血液标本或固体抗凝剂的抗凝血液标本。