辐射损伤防护药及细胞因子治疗研究动态

硝基氧、氨磷汀和甾族类化合物是目前较受关注的防护辐射损伤的候选药,其中氨磷汀1999年已被美国FDA(食品与药物管理局)批准为放射治疗的辐射防护药。辐射损伤的细胞因子治疗已由过去单一造血细胞刺激因子的使用发展到针对多种造血细胞以及与造血及免疫细胞生长发育有关的微环境的不同功能因子的组合使用,大大改善了大剂量辐射损伤治疗的效果。     

细胞因子与急性辐射损伤的防护和治疗

细胞因子是由机体的免疫细胞和非免疫细胞合成和分泌的小分子多肽 ,它们具有调节机体免疫、神经和内分泌功能 ,参与炎症发生、创伤愈合及造血调控等作用。第 1个细胞因子是在 195 7年由Ｉｓｓａｘａ和Ｌｉｎｄｅｎｍａｎ首先发现的 ,被称之谓干扰素 ,是由机体免疫细胞与热灭活的流感病毒相互作用后分泌的一种可溶性因子。此后 ,一系列细胞因子相继问世。随着基因工程、细胞工程和分子生物学技术的飞速发展 ,对细胞因子的研究已从蛋白水平的分析进入基因水平的调节 ,而且通过转基因和敲除基因动物实验 ,揭示了细胞因子在人体生理和病理过程中…     

急性辐射损伤的细胞因子联合治疗研究进展

细胞因子对急性辐射损伤的治疗作用日益受到重视,尤其是造血生长因子抗辐射作用的研究取得了长足进展。但随着照射剂量的增加,造血干,祖细胞大量死亡及皮肤和胃肠道等非造血系统损伤加重,单一的细胞因子难以逆转严重损伤,因此细胞因子的联合应用成为必然。当前,细胞因子联合治疗急性辐射损伤的研究主要集中于造血生长因子及抗凋亡细胞因子联合应用效果的评价,结果提示,照射后早期细胞因子联合应用是事故性辐射损伤的有效治疗措施。     

国外辐射损伤治疗的研究近况

国外有关辐射损伤治疗的研究近年有不少新进展。细胞因子仍是辐射损伤治疗相关研究中的热点；败血症及其引起的休克是近年来的研究重点；造血干细胞移植重新受到重视；对消化道和皮肤的辐射损伤治疗也有一些新认识。     

中药对辐射损伤的防护作用

随着核能广泛应用于科技、生产及日常生活,不可避免地会给人们造成辐射损害.临床上对癌症患者进行的放疗、职业性受照人员的辐射性损害和航天飞行中人员受到的空间辐射等受到高度重视.人们一直在探索有效的防治辐射作用的药物.目前已知的一些具有防治辐射作用的药物,多数毒性较大,因此,期待开发出毒性较小、可用于临床的中药.笔者简述中药的辐射防护作用.     

蔓荆子提取物对小鼠造血系统辐射损伤的防护作用

目的 探讨蔓荆子提取物对小鼠造血系统辐射损伤的防护作用。 方法 （1）体外细胞实验：提取小鼠骨髓细胞,将骨髓细胞分为对照组、蔓荆子组、照射组和蔓荆子+照射组,蔓荆子组的给药浓度为0.01 mg/ml和0.001 mg/ml,蔓荆子+照射组的给药浓度为0.001 mg/mL,照射组和蔓荆子+照射组细胞经1 Gy照射。使用酶标仪检测细胞活力,异硫氰酸荧光素（FITC）通道检测细胞的活性氧（ROS）水平,FITC和藻红蛋白（PE）通道检测细胞的凋亡水平。（2）体内实验：采用简单随机抽样法将15只C57BL/6小鼠分为对照组（n=5）、照射组（n=5）和蔓荆子+照射组（n=5）。对照组小鼠进行假照射（0 Gy）,照射组和蔓荆子+照射组小鼠进行一次性2 Gy全身照射。将蔓荆子提取物用二甲基亚砜（DMSO）配制为 500 mg/ml 的蔓荆子溶液,灌胃前用生理盐水稀释,蔓荆子+照射组小鼠于照射前给予蔓荆子提取物（400 mg/kg）0.2 ml,连续给药7 d,照射后10 d处死小鼠。使用全自动血液分析仪分别对外周血血细胞和骨髓有核细胞（BMNC）计数,使用流式细胞仪分析造血干/祖细胞的数量和百分比,检测骨髓造血细胞内ROS水平、人磷酸化组蛋白H2A变异体（γH2AX）和磷酸化的p38（pp38）的表达。符合正态分布的计量资料的2组间比较采用独立样本t检验（方差齐）。 结果 （1）体外细胞实验：与照射组比较,0.001 mg/mL蔓荆子+照射组的骨髓细胞活力明显提高（585 485.00±37 335.80对460 384.55±53 786.37）,ROS水平降低（12 260.67±232.34对17 969.67±467.24）,凋亡细胞百分比显著降低[（28.97±0.32）% 对 （35.33±0.35）%],且差异均有统计学意义（t=4.245、18.950、23.161,均P<0.01）。（2）体内实验：与照射组相比,蔓荆子+照射组小鼠的BMNC数量[（23.34±3.01）×106个/只对（16.73±2.57）×106个/只]、白细胞数量[（2.80±0.35）×109个/L对（2.21±0.24）×109个/L]、红细胞数量[（10.54±0.51）×1012个/L对（9.68±0.26）×1012个/L]、血小板数量[（339.80±49.42）×109个/L对（289.40±54.08）×109个/L]和血红蛋白含量[（139.20±3.66） g/L对（129.20±3.87） g/L]均升高,且差异均有统计学意义（t=2.582、2.824、2.999、1.376、9.739,均P<0.01）。与照射组比校,蔓荆子+照射组小鼠造血祖细胞的数量[（34916.03±697.36）个/只对（26388.04±241.78）个/只]和百分比[（29.83±4.32）%对（22.76±2.20）%]升高,造血干细胞的数量[（2 074.00±23.12）个/只对（929.40±166.52）个/只]升高,且差异均有统计学意义（t=5.423、9.171、3.175,均P<0.01）;造血干/祖细胞中的ROS水平下降[（7 750.20±589.05）对（8 515.20±1 036.46）,（9 360.20±831.97）对（10 291.40±767.57）],差异均无统计学意义（t=1.435、1.839,P=0.189、0.103）;造血干/祖细胞中γH2AX的表达降低（693.20±4.82对751.60±32.72）, 且差异有统计学意义（t=3.064,P<0.01）;造血干/祖细胞中pp38表达降低（1 181.20±11.28对1 183.60±49.70,1 411.20±50.25对1 424.40±80.95）,差异均无统计学意义（t=0.105、0.765, P=0.014、0.310）。 结论 蔓荆子提取物通过降低造血细胞的氧化应激和抑制造血干细胞内的DNA损伤来达到辐射防护效果。     

细胞因子在放射医学及辐射防护中的应用

细胞因子在放射医学及辐射防护中的应用贺福初，宫锋细胞团子的研究已持续十几年。近年来ｄ于分于生物学尤其是基因重组技术的应用，３基础和临床方面的研究取得了长足的进展。Ｅ前一般将细胞因子分成三类：（１）造血生长Ｂ子：如ＧＭ－ＣＳＦ（ｓｒａｎｕｌｏｃｖｔｅ－...     

五鹤续断对辐射损伤小鼠保护作用的研究

目的 研究五鹤续断(WHDA)注射液对辐射损伤小鼠的保护作用.方法 将160只昆明种雌性小鼠分为正常对照组、照射组和低剂量WHDA+照射组、高剂量WHDA+照射组,观察其30 d存活率;测定辐射后6 h、3 d、6 d、9 d小鼠的外周血象;测定辐射后小鼠的胸腺、脾脏和肝脏质量;测定辐射后小鼠外周血和肝脏的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)及丙二酰二醛(MDA)水平.结果 WHDA可提高辐射后小鼠的存活率,对其白细胞及血小板的数量变化有显著影响,但对其胸腺、脾脏、肝脏质量均无明显影响.WHDA还能显著提高辐射后小鼠的SOD活性,增加GSH水平,降低MDA水平.结论 WHDA对辐射损伤小鼠有明显的保护作用.     

细胞因子在急性辐射损伤治疗中的作用

急性辐射损伤以及肿瘤患者在放疗或化疗后,均可发生程度不等的骨髓功能抑制。一些细胞因子通过刺激不同分化时期、不同类型的靶细胞影响其增殖和分化,从而对骨髓造血细胞起辐射防护和促进骨髓造血恢复的作用。随着基因工程的发展,人们可以获得越来越多的高纯度重组造血因子,这些因子在急性辐射损伤的实验研究和临床救治中发挥了极其重要的作用。同时,细胞因子治疗也存在一些问题,有待进一步研究和解决。     

穿心莲药物对辐射损伤效应影响的初步研究

目的 探讨市售穿心莲药物制剂对辐射损伤的影响。 方法 采用高效液相色谱法分析市售的穿心莲注射液和穿心莲内酯滴丸两种不同剂型药物中穿心莲内酯含量;体外实验采用乳腺癌细胞系（MCF-7和MDA-MB-231）研究穿心莲药物对γ射线照射后乳腺癌细胞生存率的影响;体内实验采用C57 BL/6鼠研究穿心莲药物对5.0 Gy和9.0 Gy的γ射线照射后的小鼠的辐射损伤的影响。 结果 穿心莲注射液和穿心莲内酯滴丸的穿心莲内酯含量分别为0.214 mg/ml和5.82 mg/粒;两种药物都上调了体外培养的乳腺癌细胞的放射敏感性;对5.0 Gy照射的C57 BL/6鼠的造血系统表现出一定保护作用,但是对9.0 Gy照射的C57 BL/6鼠则表现出辐射损伤协同作用。 结论 穿心莲药物在不同照射剂量下可对辐射损伤既表现出保护又表现出协同损伤的双向作用。     

芳香烃受体抑制剂SR1对小鼠造血系统辐射损伤的防护作用

目的 研究芳香烃受体抑制剂StemRegenin 1（SR1）对全身照射后小鼠造血系统辐射损伤的防护作用。 方法 采用随机化区组设计,将15只健康C57BL/6J小鼠分为3组：对照组、4 Gy照射组（简称照射组）和4 Gy照射+SR1组（简称照射给药组）,每组5只。照射给药组在照射前5 d至照射后5 d连续灌胃给予SR1（50 mg/kg）,4 Gy γ射线全身照射后第9天处死小鼠,取外周血和单侧股骨细胞,使用全自动血液分析仪检测外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、骨髓有核细胞（BMNC）等计数;采用粒细胞-巨噬细胞集落形成单位（CFU-GM）实验检测骨髓细胞增殖能力;使用流式细胞仪检测BMNC和造血干细胞（HSC）中的活性氧（ROS）水平、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX4）水平和外周血中免疫细胞百分比。组间两两比较采用Student t检验。 结果 与照射组相比,照射给药组小鼠外周血中WBC[（3.060±0.650）×109个/mL对（4.680±1.134）×109个/mL,t=2.770,P<0.05]和BMNC[（28.375±6.811）×109个/mL对（49.125±12.532）×109个/mL,t=3.231,P<0.05）]数量均明显增加;与对照组相比,照射给药组RBC数量明显减少（t=4.301,P<0.05）。与照射组相比,照射给药组CFU-GM明显升高（3.4±1.7对13.6±6.7）,且差异有统计学意义（t=3.323,P<0.05）;照射给药组小鼠的BMNC和HSC中ROS水平明显降低（ t=3.962、2.530,均P<0.05）,同时BMNC和HSC中NOX4水平亦明显降低（ t=2.310、2.848,均P<0.05）;照射给药组小鼠CD3+ T细胞百分比明显升高 [（8.512±3.716）%对（16.140±1.969）%,t=4.056,P<0.05],B220+ B细胞百分比亦明显升高 [（0.608±0.267）% 对（7.240±2.828）%,t=4.027,P<0.05]。 结论 芳香烃受体抑制剂SR1对全身照射造成的小鼠造血系统辐射损伤有一定的保护作用。     

N-草酰基-D-苯丙氨酸对小鼠造血系统辐射损伤的防护作用

目的 研究N-草酰基-D-苯丙氨酸（NOFD）对小鼠造血系统辐射损伤的防护作用。 方法 将18只6 ~ 8周龄的健康C57BL/6J雄性小鼠按区组随机法分为3组：对照组、4 Gy γ射线全身照射组（简称照射组）和4 Gy γ射线全身照射 + 5 mg/kg NOFD组（简称照射给药组）,每组6只。照射给药组于照射前2、16 h及照射后3 d分别腹腔给予5 mg/kg NOFD,对照组和照射组给予等量生理盐水,给药时间和次数与照射给药组相同。采用血细胞计数仪分析各组小鼠外周血血细胞数量;采用流式细胞仪检测外周血中B细胞、T细胞、髓系细胞的百分比,骨髓细胞中造血干细胞（HSC）和造血祖细胞（HPC）的数量及百分比,骨髓细胞中磷酸化组蛋白H2AX（γ-H2AX）和线粒体活性氧（ROS）水平;采用粒细胞-巨噬细胞集落形成单位（CFU-GM）实验和脾集落形成单位（CFU-S）实验检测骨髓细胞的增殖能力。组间两两比较采用Student t 检验。 结果 与照射组相比,照射给药组小鼠外周血中红细胞数量明显增加[（9.05±0.16）×109个/mL对（9.57±0.15）×109个/mL],T细胞的百分比升高[（11.54±0.20）%对（15.31±1.88）%],髓系细胞的百分比降低[（32.67±2.87）%对（24.90±2.19）%],HSC的数量增加[（2.24±0.54）×103个/股骨对（6.77±1.67）×103个/股骨],同时HSC和HPC在骨髓细胞中的百分比[（0.09±0.02）%对（0.59±0.13）%;（0.62±0.14）%对（1.82±0.43）%]升高,且差异均有统计学意义（t=1.998~3.633,均P<0.05）。流式细胞仪检测结果显示,与照射组相比,照射给药组小鼠的骨髓有核细胞（BMNC）和HPC中线粒体ROS自由基（MitoSOX）的平均荧光强度（MFI）明显降低[（6.66±0.56）×103对（3.19±0.25）×103;（2.51±0.46）×103对（1.20±0.35）×103],且差异均有统计学意义（t=6.350、2.282,均P<0.05）;同时照射给药组小鼠BMNC、HPC和HSC中γ-H2AX的MFI明显降低[（10.25±0.77）×103对（7.22±0.15）×103;（18.37±2.52）×103对（12.44±0.34）×103;（26.05±2.64）×103对（17.16±1.20）×103],且差异均有统计学意义（t=4.356、2.577、3.070,均P<0.05）。集落形成单位实验结果显示,与照射组相比,照射给药组CFU-GM（12.33±1.48对24.00±3.92）和CFU-S（6.00±1.07对10.83±1.01）明显增加,且差异均有统计学意义（t=2.788、3.288,均P<0.05）。 结论 NOFD对小鼠造血系统辐射损伤有明显的保护作用。     

护生宝口服液对辐射的防护作用研究

目的　研究中药辐射防护剂护生宝 (HSB)对60 Coγ射线损伤的防护作用 ,为HSB的临床应用提供实验依据。方法　用 3种不同浓度的HSB和生理盐水灌胃实验组和单纯照射组小鼠 ,各组受试鼠给予 7 5Gy60 Coγ射线一次性全身照射 ,观察不同处理组小鼠的存活率及血象变化情况。结果　HSB保护组小鼠的 30d存活率、外周血白细胞 (WBC)和血小板 (PLT)均显著高于单纯照射组 (P <0 0 1) ,平均保护系数高达 1 77。结论　HSB具有较强的抗辐射作用、能显著提高受致死剂量60 Coγ射线照射小鼠的存活率 ,降低辐射对小鼠外周血WBC和PLT的损伤作用     

Flt3配体联合其他细胞因子对受照射小鼠免疫系统的作用研究

目的：研究Flt3配体（FL）在受照射小鼠免疫系统恢复中的作用。方法：采用F－800血细胞自动计数仪行外周血细胞计数及血细胞分类计数，流式细胞仪分析外周血淋巴细胞表型。结果：照射前应用FL或照射后联合应用FL，IL－11，EPO和G－CSF等细胞因子，能有效地促进受照小鼠外周血白细胞和淋巴细胞的恢复，对CD8^ 细胞的恢复作用尤为明显，同时使CD4^ /CD8^ 细胞比值较早恢复正常，提高受照射小鼠的生存率，结论：FL不但能促进辐射损伤机体造血功能的恢复，对免疫系统的亦具有重要的作用，FL单独或与其他细胞因子联合应用，对辐射损伤动物具有明显的防护和治疗效应。     

穿心莲内酯对大鼠辐射损伤防护的实验研究

目的 探讨中药穿心莲内酯对大鼠放射性损伤的防护作用.方法 将60只雄性sD大鼠随机分为健康对照组、模型组和中药组.中药组大鼠定期进行穿心莲内酯溶液(分为2个剂量组)灌胃,模型组大鼠给予生理盐水灌胃,健康对照组大鼠正常饮水.10 d后给予60Coγ射线一次性全身均匀照射,1、2和4 Gy.继续饲养1 d后,处死全部动物,取其肝脏,立即用4%多聚甲醛固定,常规制作石蜡切片,采用HE染色检测肝组织细胞形态学变化,TUNEL法染色检测不同组细胞凋亡情况.结果 健康对照组和模型组大鼠肝脏HE染色显示病变相似,随辐射剂量的增大,肝细胞水肿、肝窦扩张充血、炎性反应等组织损伤程度加重;TUNEL法检测肝细胞凋亡率无明显差别.同等剂量下,中药组大鼠HE染色病变较对照组和模型组轻,且肝细胞凋亡率显著降低(t=2.19～4.80,P<0.05).结论 穿心莲内酯对辐射损伤有一定的防护作用.

Abstract：

Objective To explore the effects of andrographolide(AP),extracted from the traditional Chinese herb Andrographlis paniculata(AP),on injury induced by radiation exposure.Methods Sixty male rats were randomly divided into 4 equal groups and irradiated with 60Co γ-rays at the doses of 1,2,and 4 Gy,respectively:low dose AP group(intragnstrically administered with AP at the dose of 100 ms/kg daily for 10 d before irradiation),and high dose AP group(intragastrically administered with AP at the dose of 200 ms/kg daily for 10 d before irradiation),model group(administered with the same volume of normal saline instead of AP for 10 d before irradiation),and control group(irradiated only at 3 different doses).One day after irradiation all rats were killed with their livers being fixed to make paraffin section.The morphological feature was observed under light microscope after HE staining,and the cell apoptosis was detected by TUNEL technology.Results Compared to the control and model groups,the pathological changes of liver were significantly gentler in the AP treatment groups.The apoptosis rates of the liver cells of all the AP sub-groups were significantly lower than those of the control and model subgroup(t=2.19-4.80.P<0.05).Conclusions AP might have prevention effect against radiation exposure.     

穿心莲内酯对大鼠辐射损伤防护的实验研究

Objective To explore the effects of andrographolide(AP),extracted from the traditional Chinese herb Andrographlis paniculata(AP),on injury induced by radiation exposure.Methods Sixty male rats were randomly divided into 4 equal groups and irradiated with 60Co γ-rays at the doses of 1,2,and 4 Gy,respectively:low dose AP group(intragnstrically administered with AP at the dose of 100 ms/kg daily for 10 d before irradiation),and high dose AP group(intragastrically administered with AP at the dose of 200 ms/kg daily for 10 d before irradiation),model group(administered with the same volume of normal saline instead of AP for 10 d before irradiation),and control group(irradiated only at 3 different doses).One day after irradiation all rats were killed with their livers being fixed to make paraffin section.The morphological feature was observed under light microscope after HE staining,and the cell apoptosis was detected by TUNEL technology.Results Compared to the control and model groups,the pathological changes of liver were significantly gentler in the AP treatment groups.The apoptosis rates of the liver cells of all the AP sub-groups were significantly lower than those of the control and model subgroup(t=2.19-4.80.P<0.05).Conclusions AP might have prevention effect against radiation exposure.     

褪黑素对重离子辐射损伤小鼠肺的防护作用研究

目的探讨褪黑素(melatonin,MLT)对重离子辐射损伤小鼠肺的防护作用。方法预先给小鼠腹腔注射10mg/kg的MLT,1h后给予0、0.5、1.0、2.0及4.0Gy的全身12C6+束均匀照射,剂量率约1.4Gy/min,辐射后8h,检测辐射损伤小鼠肺组织的SOD活性和MDA、GSH含量,并通过单细胞凝胶电泳技术检测辐射损伤小鼠肺细胞的拖尾长度和尾距。结果和单纯辐射组相比,10mg/kg的MLT腹腔注射能有效抑制重离子辐射引起的小鼠肺组织SOD活性降低、GSH含量下降和MDA含量提高;同时,MLT还能使受损小鼠肺细胞的拖尾长度和尾距显著降低,且都存在剂量效应关系。结论MIT对重离子全身辐射所致小鼠的抗氧化系统有一定的激活效应,对辐射损伤有一定的防护作用,这可能与对抗膜脂质过氧化、清除自由基及其减轻DNA损伤有一定的关系。     

苏州急性辐射损伤诊断与治疗学术研讨会概况

1999年7月5～9日由苏州医学院和ＩＡＥＡ共同主办了“急性辐射损伤诊断与治疗”小型学术研讨会(Ｗｏｒｋｓｈｏｐ)。ＩＡＥＡ的3位专家(Ｉ.Ｔｕｒａｉ、Ｊ.Ｆ.Ｒｏｓｓｉ及Ｂ.Ｇ櫣ｎａｌｐ)与来自北京、天津、长春、南京、济南等地的学者及该院有关人员约40余人与会。会议由苏州医学院副院长张学光教授主持,院长阮长耿院士致开幕词和闭幕词。英语为会议用语。会上ＩＡＥＡ专家及与会人员进行了交流。参观了苏州医学院附属二院作为核工业总公司应急救治中心的病房设施及有关重点仪器和设备。观看了《辐射的生物效应》和《美国橡树岭ＲＥＡＣ/…