聚合酶链反应诊断结核性腹膜为的评价

评价聚合酶链反应方法对结核性腹膜炎的诊断价值。方法 用ＰＣＲ技术检测３０例结核腹水中结核分支村菌ＤＮＡ。并与腹水涂片抗酸染色及酶联免疫吸附试验检测腹水中抗ＰＰＤ抗体进行比较。结果 ＰＣＲ的阳性率为６０％，特异性９４．４％，ＥＬＩＳＡ法阳生率６３．３％，特异性７２．２％涂片镜检均为阴性。     

聚合酶链反应快速诊断结核性胸腔积液的研究

聚合酶链反应快速诊断结核性胸腔积液的研究赵瑞贞，袁淑平，李冀文对７８例胸水标本行聚合酶链反应（ＰＣＲ）结核菌检测，以探明其诊断价值。结核性胸液组共５４例，男３９例，女１５例，年龄６～７８岁。诊断符合下列之一标准：（１）胸液、痰涂片和（或）结核菌培养（...     

结核性腹膜炎的实验室诊断

目的评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对结核性腹膜炎的诊断价值。方法用ＰＣＲ结合地高辛标记核酸探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术检测４２例结核性腹水中结核分支杆菌ＤＮＡ，并与常规细菌学检测及ＥＬＩＳＡ对比。引物来自结核分支杆菌特异重复插入序列ＩＳ６１１０。特异性通过杂交及限制性内切酶ＳａｌⅠ酶切证实。同时比较了Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测与凝胶电泳检测的敏感性。结果ＰＣＲ的敏感性为６９％，ＥＬＩＳＡ为７１％，培养为９％，涂片镜检均为阴性。并发现杂交较凝胶电泳检测更敏感。结论ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ法对结核性腹膜炎有较高的诊断价值，但前者更具有特异性。将Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术与ＰＣＲ技术结合，可进一步提高检测的敏感性和特异性。     

聚合酶链反应快速诊断结核性脑膜炎

聚合酶链反应快速诊断结核性脑膜炎唐小平，罗惠娟，黄已实，卢群馨近年来，国外陆续报道用聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断结核性脑膜炎（结脑），显示出独特的优点。我们应用ＰＣＲ技术检测了５０例结脑患者的脑脊液（ＣＳＦ）标本，并与其它方法的检测结果进行比较，现将结...     

聚合酶链反应在淋巴结结核诊断中的应用

聚合酶链反应在淋巴结结核诊断中的应用梁树旗李江珍李明吾对象７３例颈部包块患者中男２４例，女４９例。年龄３～７９岁。淋巴结结核组３５例。根据病史、临床表现、体征、实验室检查及其他检查结果诊断。包括结核纯蛋白衍生物（ＰＰＤ）皮试阳性、血沉加快、胸片检查发...     

聚合酶链反应法诊断结核病临床价值探讨

目的 探讨ＰＣＲ法对结核病的诊断价值。方法 用ＰＣＲ法检测痰、纤支镜抽吸物、胸水和血液标本中结核杆菌ＤＮＡ。结果 ＰＣＲ法敏感性为２１．９％，特异性为９２．６％，总的阳性预测值、阴性预测值和诊断效率分别为６４．６％，６５．９％和６５．８％，不同标本敏感性有较大的差异。结论 ＰＣＲ法诊断结核病的敏感性、特异性尚远不能完全满足临床的需要，需进一步完善和改进 。     

聚合酶链反应快速诊断结核性心包炎

应用聚合酶链反应(PCR)技术建立了扩增结核杆菌复合物MPB64蛋白基因的方法。对6种抗酸分枝杆菌和4种普通菌进行检测,结果仅人型结核杆菌、牛型结核杆菌及卡介菌(BCG)扩增出240bp特异性条带;用~(32)P标记的寡聚核苷酸探针进行斑点杂交进一步证实了该结果。PCR检测人型结核杆菌的敏感性可达10fgDNA或10个菌体。应用PCR检测36例临床诊断为心包炎(Pericarditis)的心包液标本,结果结核菌的阳性率为72.22％,明显高于抗酸染色(8.33％)及细菌培养(19.44％)的阳性率(P<0.001)。表明:PCR是一种特异、敏感、快速的诊断结核性心包炎(Tuberculous pericarditis)的方法。     

聚合酶链反应早期诊断结核性胸膜炎的临床价值

聚合酶链反应早期诊断结核性胸膜炎的临床价值肖志坚，崔秀琴，肖志敏，张菊萍，杨素敏为提高对结核性胸膜炎（结胸）的早期确诊率，对４８例结胸患者进行了胸水、血清中ＰＣＲ－ＴＢ－ＤＮＡ（用聚合酶链反应技术检测结核菌特异性ＤＮＡ片段）和结核抗体检测，胸水涂片结...     

聚合酶链反应在诊断结核性胸腔积液中的应用

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对６２例胸水进行结核菌ＤＮＡ检则，并同时与胸水涂片及培养结果进行比较。结果显示：３４例结核性胸水涂片抗酸染色、结核菌培养和ｐＣＲ检测阳性率分别为５．９％、８．８％和５２．９％，后者显著高于前二者（Ｐ均＜０．０１）。２８例非结核性胸水涂片和培养结果均呈阴性，但ＰＣＲ有４例（１４．３％）出现阳性。结果表明ＰＣＲ直接检测胸水中结核菌显示出快速、敏感和高效等优点。同时还对影响ＰＣＲ检测结核菌的某些因素作了分析。     

用聚合酶链反应技术对粉尘螨和屋尘螨进行鉴别和检测

目的用聚合酶链反应（PCR）技术对粉尘螨和屋尘螨进行鉴别和检测。方法用随机引物PCR对粉尘螨和屋尘螨的DNA进行扩增,选择3个扩增条带进行测序和分析。根据测序结果再次设计PCR引物用于粉尘螨和屋尘螨的鉴别和检测,并对该引物的特异性和敏感性进行了分析。结果随机引物扩增反应,粉尘螨在750bp和500bp左右均有明显条带;而屋尘螨仅500bp左右条带较清晰,无大于500bp的扩增产物出现。测定了3个新的尘螨DNA片段的序列结构。新设计的引物用于两种尘螨的检测有较好的特异性和敏感性。结论随机引物PCR技术可用于粉尘螨和屋尘螨的鉴别。本研究方法具有检测环境中粉尘螨和屋尘螨的潜力。     

聚合酶链反应技术在隐孢子虫检测中的应用研究

根据Laxer等克隆的微小隐孢子虫（C．parvum）核酸序列片断（pHCl）设计并合成一对长度为20hp的寡核苷酸引物。应用聚合酶链反应，对隐孢子虫核酸进行扩增，结果扩增出452hP的特异性条带，阴性对照无扩增。结果表明所合成引物有高度特异性。用PCR检测隐抱子虫感染动物模型，36份镜检卵囊阳性小鼠粪便均为阳性，18份镜检阴性小鼠粪便17份阴性，一份阳性。     

聚合酶链反应在诊断结核性胸膜炎中的应用

目的：应用ＰＣＲ技术对７０例胸水进行结核菌ＤＮＡ检测。方法：７０例胸水做ＴＢ－ＰＣＲ、胸水抗酸菌涂片，皮肤结素试验及血结核菌抗体检测，并与临床诊断标准进行比较。结果：７０例胸水中，结核性胸腔积液４６例，ＰＣＲ阳性率４５．７％，涂片镜检、结素强阳性、结核菌抗体（＋）则分别为２．２％，８．７％，１０．９％，前者明显高于后三者（Ｐ值均＜０．００５），但其ＰＣＲ敏感性与临床诊断标准比较相关性仍低，非结核性胸水２４例中，ＰＣＲ阳性率８．３％。结论：ＰＣＲ检测结核菌尚有一些条件需进一步完善，目前临床尚不能将其作为诊断结核病包括结核性胸膜炎的标准，仍需结合病人的临床表现及其它检查结果来综合判断。     

多聚酶链反应快速检测衣原体

应用沙眼衣原体内源性质粒引物和鹦鹉热衣原体１６ｓｒＲＮＡ基因引物，对沙眼衣原体眼部感染和尿道感染进行快速检测，４９份临床诊断为沙眼的标本经ＰＣＲ检测，阳性３１份，阴性１８份；２８份临床诊断为非淋菌性尿道炎的标本，经ＰＣＲ检测，阳性１１份；阴性１７份。以上结果分别与国际公认的免疫荧光试剂盒和酶联免疫试剂盒对同一标本的检测结果进行了比较，表明多聚酶链反应技术远较ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ灵敏，是快速检测沙眼衣     

聚合酶链反应DNA扩增对活动性肺结核的诊断价值

为探讨聚合酶链反应(PCR)DNA扩增对诊断活动性肺结核的临床价值,本文用PCR技术扩增结核杆菌特有的MPB64蛋白基因序列,对121例病人临床标本进行检测。发现34例活动性肺结核中有28例PCR阳性;疑诊为肺结核者33例中有18例阳性;非结核肺疾患54例中有10例阳性,其中有肺结核既往史者阳性6例,有结核接触史者阳性3例。提示PCR阳性并非为活动性肺结核所特有。     

聚合酶链反应检测致病性钩端螺旋体DNA的研究

以黄疸出血型ＲＧＡ菌株对所有致病性钩端螺旋体特异的ＤＮＡ克隆片段序列为基础合成聚合酶链反应引物Ｇ１Ｇ２。用该对引物扩增各群型致病性钩端螺旋体微量ＤＮＡ，均获阳性结果，对非致病性钩端螺旋体和其他细菌不扩增。纯化的钩端螺旋体ＤＮＡ５ｐｇ经聚合酶链反应后，琼脂糖凝胶电泳可以目测。用地高辛配基标记的特异性探针可检测到５ｆｇ即相当于１条钩端螺旋体ＤＮＡ量的扩增产物。将该对引物扩增早期钩体病患者血清标本，阳性率为８２％，显著高于ＭＡＴ和ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阳性率。由此表明，ＰＣＲ技术是灵敏、特异、快速的钩端螺旋体病早期诊断方法，还可用于流行病学调查。     

聚合酶链反应检测蚊体内马来丝虫幼虫的实验

目的　建立一种特异、灵敏和简捷的聚合酶链反应 (PCR)检测蚊体内马来丝虫幼虫的方法。方法　在应用一种新的模板纯化处理技术 (Microcon 10 0 )基础上 ,采用适应于检测我国马来丝虫的两套DNA扩增引物(P1、P2与P3、P4) ,对实验感染马来丝虫的中华按蚊进行扩增检测。结果　两套引物均可检出蚊体内不同发育期幼丝虫 (L1、L2 和L3) ,其灵敏度达 1只蚊体内 1/ 6 4条L1和 2 0 0只群体蚊中含有 1只感染蚊 (体内有 1条L3)的水平 ,而对犬恶丝虫及未感染蚊却不能扩增出特异条带。结论　初步建立特异、灵敏和简捷的PCR检测蚊体内马来丝虫幼虫的方法。     

结核分支杆菌镜检、培养和PCR技术诊断结核病的临床评估

目的　评估结核分支杆菌PCR、培养、镜检对结核病诊断的临床效果。方法 对1217例临床可疑结核病人用PCR、培养和镜检三种方法的阳性检出率进行比较。结果 不同临床标本用PCR技术诊断结核病,其敏感性高于培养和涂片镜检,阳性检出率分别为:88.7%,43.4%,26.5%。结论 通过三种方法比较分析,说明PCR技术是一种速度快、检出率高的检测结核分支杆菌的重要方法,对结核病的诊断有重要的参考价值。     

巢式PCR检测猴免疫缺陷病毒基因

位于ＳＩＶ的ｇａｇ保守基因区内的特异巢式ＰＣＲ引物用于体外扩增ＳＩＶ病毒基因，其检出敏感性达到０．１ｆｇ水平，较常规ＰＣＲ敏感性高１００倍。巢式ＰＣＲ检测粗提ＳＩＶｍａｃ感染猴后期或经过药物治疗后的猴外周血淋巴细胞ＤＮＡ，证明９６．５％（２８／２９）的猴体内仍有ＳＩＶ病毒感染存在。巢式ＰＣＲ是一种敏感性极高，特异性强，操作简便易行的ＳＩＶ基因检测技术，它对确证ＳＩＶ病毒感染和正确评价药物和疫苗在猴艾滋病模型中的体内治疗效果提供了良好依据。     

用PCR方法检测粪便难辨梭状芽胞杆菌

目的：采用PCR方法检测粪便难辨梭状芽胞杆菌。方法：北京协和医院的36例应用抗生素后腹泻的病人粪便标本,采用PCR方法对难辨梭状芽胞杆菌（以下简称C．D）的毒素B基因和毒素A基因进行扩增,同时进行厌氧细菌培养。结果：PCR法毒素B基因的阳性率为46．7％（16／36）,毒素A基因为36．1％（13／36）;用厌氧菌培养的阳性率为19．2％（7／36）。PCR检测C．D毒素基因方法与厌氧培养法的一致性为100％。结论：用PCR方法检测C．D比厌氧培养法检出率明显增高（P＜0．05）,与厌氧菌培养法的一致性高。