从石蜡包埋组织中提取的间期核FISH分析

从石蜡包埋组织中提取的间期核ＦＩＳＨ分析从石蜡包埋的组织中提取细胞核的方法是１９８３年第一次由Ｈｅｄｌｅｙ等人提出的。这一方案在许多方面已得到修改。然而，其中３个重要步骤一直没有得到改进：①脱蜡和再水合过程中组织的沉降；②应用胃蛋白酶（和胃蛋白酶抑制...     

一种从石蜡包埋组织中快速提取DNA的方法

目的建立从甲醛固定石蜡包埋组织中高效、快速提取基因组DNA的方法。方法将一片10μm厚石蜡包埋大肠癌组织切片直接浸入150μl消化液中,56℃孵育0.5h、1h和2h,灭活蛋白酶K后离心取上清即为DNA提取物。琼脂糖凝胶电泳检测所提取DNA的片段分布,紫外分光光度法测定DNA的产量及纯度。以提取的DNA为模板,PCR扩增不同长度产物片段并进行产物的直接测序以评价提取方法。结果该提取方法能够获得较长片段的基因组DNA,从一片10μm厚石蜡切片中即可获得大约60μg的DNA,在0.5h消化条件下获取的模板DNA,即可实现对152bp、293bp、392bp和541bp等4种不同片段的100%扩增,1h消化组的PCR产物可直接用于DNA测序。结论建立了一种简单、快速地从甲醛固定石蜡包埋组织中提取DNA的方法,只需一步消化即可获得满足普通PCR及测序需要的基因组DNA。     

一种经济快速提取组织RNA的方法

关于ＲＮＡ表达的检测，无论是用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ还是用ＲＴＰＣＲ都要进行ＲＮＡ的提取，在ＲＮＡ提取的过程中，控制ＲＮＡ的降解是实验成功的关键，因此人们探索了许多提取ＲＮＡ的方法，已经使ＲＮＡ的提取大为简便，但仍需数小时，尤其对组织ＲＮＡ的提取，需剪碎匀浆，并且要经过数次换管和抽提，因此也会因操作不严，而致ＲＮＡ部分降解。我们采用的方法操作简便，经济快速，不用有机溶剂，既节省时间和试剂，又减少污染的机会，还免除有机溶剂对人体的损害，是一种非常实用的提取组织ＲＮＡ的方法。一、材料与方法１－组…     

冰冻组织特定区域的RNA快速提取及其RT-PCR分析

目的 为减少ＲＮＡ提取过程中不同细胞和组织间的交叉污染，提高逆转录ＰＣＲ（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ＰＣＲ，ＲＴ－ＰＣＲ）结果的特异性的可靠性。方法 建立冰冻组织特定区域的ＲＮＡ快速提取及ＲＴ－ＰＣＲ检测技术。首先，制备５μｍ和２０μｍ的连续冰冻切片，前者用于常规组织学染色和针对靶基因产物的免疫组织化学染色。依观察结果，在２０μｍ的切片上，分离某一特定区域做快速ＲＮＡ提取和ＲＴ－Ｐ     

介绍一种冰冻切片快速染色法

介绍一种冰冻切片快速染色法毕学杰，薛春梅冰冻切片在保证制片质量的前提下，所用时间越短，对临床越有利。我们配制了一种快速冰冻染色液，使染色时间在５ｍｉｎ内即可完成，染色效果和原来慢速染色法相同，现介绍如下。１材料和方法１．１染液配制所用试剂有１０％福尔...     

一种快速单管小量提取质粒方法

质拉提取是分子生物学实验室一项最基本的工作。本文介绍了一种简便、迅速、单曹操作的小量提取质位方法,此法提取的质粒可直接用于萌切鉴定或转化,探针标记等。苗种为转化了重组PUC19质粒的DllsaE．ed。重组pUC19质值为在HiucH位点播人不同的PCR产物连接而成。挑一个单自落接种于5ndLB／Arnp（含系节青霉素100吨／L）培养液中,37t振荡过夜,将1．5nd茵液倒人1．5ml＄心管中,室温下12000r／ndn离心158,吸去上清;沉淀中加人100…STET（10％蔗糖,50nUnol／LTris－CIpHS．0,10rnmol／LEDTApHS．0,2．0％TritonX－100）…     

一种用于蛋白质分析的快速聚丙烯酰胺凝胶电泳方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）是蛋白质研究中必不可少的一项技术。它不仅是明确原核、真核细胞中蛋白质表达产物的金标准，还更广泛地应用于蛋白质层析过程中各个组分的鉴定和纯化分析。通常，完成整个过程至少需要５ｈ～８ｈ。因此，如能采用一种快速电泳、染色和脱色的方法，无疑可有效地提高工作效率。我们在实验中采用连续凝胶电泳系统，将微波炉用于染色过程，并将染色液配方加以改进，使整个过程可在６０ｍｉｎ～９０ｍｉｎ内完成，大大节省了实验的时间，不失为一种简便、快速、经济有效的蛋白电泳分析方法。１　材料和方法１－１…     

从OCT包埋冰冻组织提取组织RNA和检测病毒RNA

目的探讨如何从OCT包埋冰冻组织提取组织RNA和检测病毒RNA。为临床有限标本的保存和利用提供一简便的方法。方法用汉坦病毒感染的小鼠组织标本，经质量浓度25％蔗糖磷酸缓冲液固定OCT包埋，在-20℃冰箱中保存2年后，对冰冻的OCT包埋的感染组织标本进行RNA提取，用凝胶电泳、紫外分光光度计及RT—PCR等方法检测组织总RNA和病毒RNA。结果组织经质量浓度25％蔗糖磷酸缓冲液固定OCT包埋冰冻保存后，从中提取的RNA仍保持较好的完整性，可扩增出较长片段的病毒RNA。结论OCT包埋的冰冻组织标本不影响提取组织RNA并检测病毒RNA。     

一种从琼脂糖凝胶中分离DNA的快速方法

本文介绍一种冷冻挤压离心法从琼脂糖凝胶中分离ＤＮＡ片段，适合从０．５％￣１．８％的凝胶中分离几十到几万ｂｐ的不同ＤＮＡ，ＤＮＡ回收率与凝胶浓度、ＤＮＡ大小有关，介于２５％￣８０％。本方法快速、简单、经济、重复性好，值得推广应用。     

一种用于病理切片封固剂快速干燥的方法

<正>封固也叫封片,是制做常规组织切片标准步骤的最后一道工序~([1]),封片的过程是将染色好的切片用封固剂封固起来,即把盖玻片与载玻片用封固剂粘合在一起。切片完全干燥的衡量标准是在用两手指较用力搓时,盖玻片与载玻片间不应有滑动。此后可将切片竖立,前后叠放,相互不会粘连。目前     

从尿素保存血样或血块中提取DNA并用于PCR

从尿素保存血样或血块中提取ＤＮＡ并用于ＰＣＲ用ＰＣＲ方法扩增基因组ＤＮＡ，已经成为生物医学和常规临床检验中广泛应用的一种标准方法，白细胞是研究人和其它哺乳类动物基因组ＤＮＡ的常规来源。在研究大量大群时，简单快速地从血液中提取基因组ＤＮＡ已成必需。这里...     

一种可用于PCR和RAPD分析的基因组DNA单管快速提取法

PCR技术是一种非常有用的遗传操作技术，但它在群体分析中常常因从大量样品中提取基因组DNA的繁重劳动而受限制．理想的DNA提取方法应该可以应用于各种组织，减少处理时的工作量和提取费用，尽量缩减用于分析的组织样品量，并且不应产生对环境有害的废弃物。我们发现了一种新的组织DNA单将快速提取法．提取的DNA经大量稀释后仍能用于PCR反应。这种方法不需要离心，每天可提取6000个样品，每个样品中提取的DNA可完成4000次PCR扩增，而且这种方法可广泛用于提取动物、植物和微生物中的DNA．这种快速提取法包括两个步骤：DNA样品的…     

一种从琼脂糠凝胶中分离DNA的快速方法

本文介绍一种冷冻挤压离心法从琼脂糖凝胶中分离ＤＮＡ片段，适合从０．５％～１．８％的凝胶中分离几十到几万ｂｐ的不同ＤＮＡ，ＤＮＡ回收率与凝胶浓度、ＤＮＡ大小有关，介于２５％～８０％。本方法快速、简单、经济、重复性好，值得推广应用。     

一种改进的用于心率估计的峰值提取方法

本文为解决传统心冲击图(BCG)提取心率不足的问题,提出了一种改进的心冲击图检测心率的方法,首先通过嵌入式传感器实时采集微弱的心脏活动信号,对信号滤波、转换获得局部BCG节拍,然后不经由心跳模板而直接由BCG节拍估计心率。与其他方法相比,本文所提方法在心率数据准确性和抗干扰性方面具有较强优势,也实现了非接触式的在线检测,最终通过分析13名受试者约20 000次的心率数据,达到了平均节拍误差为0.86%,覆盖率96.71%的满意结果,或可为医院临床和居家养老提供一种估计心率的新方法。     

组织包埋组织的冰冻切片方法

近几年我科采用大组织包埋小组织的冰冻切片,对小活检组织的快速诊断、免疫荧光组化检查,取得了较满意的效果,现介绍如下。1 方法我们将手术、尸检的肝、脾脏,切成1.5cm×1.0cm×0.2cm大的组织块,用纱布块     

一种培养细胞RNA快速提取及鉴定方法

逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＲＣＲ）已被越来越多地应用于检测病毒感染、基因表达及原癌基因的激话，而提供高质量的模板ＲＮＡ是ＲＴ－ＰＣＲ的关键。传统的ＲＮＡ提取方法步骤繁琐，而且需要特殊的仪器设备。我们在去污剂／酚／氯仿法［１］提取ＲＮＡ的基础上加以改进，用于...     

肾组织切片图像分析中的一种细胞核区域提取方法

为了对肾脏组织切片图像中的肾小球内细胞核进行分析,需要解决因切片制作过程中多种因素导致的细胞核漏提取或误提取问题,我们提出了基于多通道特征量反馈的动态阈值处理方法。首先,根据RGB色彩空间的R通道信息与CMYK色彩空间C通道信息的综合,通过LOG滤波,得到细胞核的正确定位信息;其次,采用特征量反馈策略调整动态阈值曲面解决细胞核的粘连问题,并结合细胞核定位信息实现对粘连细胞核的精确分割。实验结果表明,该方法大大提高了细胞核提取的精度。     

一种可通用的快速提取高质量基因组DNA以用于PCR等技术的方法

研究任何有机体的分子机制和结构，都需要高质量的ＤＮＡ。到目前为止，仍没有一种普遍而简单的基因组ＤＮＡ提取法可大规模地应用于各种不同的真核生物，通常不同的组织需要不同的方法和不同的组织准备步骤。对于一种可通用的方法的需求非常迫切，尤其是当成百上千的样品...