奥曲肽联合多西他赛对胃癌细胞抑制作用的研究

通过奥曲肽联合多西他赛作用于人胃癌细胞株SGC-7901,观察奥曲肽联合多西他赛联合对SGC-7901细胞增殖抑制、诱导凋亡的作用,为进一步将奥曲肽联合多西他赛应用于临床提供依据。结果显示,奥曲肽能通过协同多西他赛诱发细胞凋亡,增强多西他赛对胃癌细胞SGC-7901生长的抑制作用。     

奥曲肽联合伊立替康对结肠癌细胞生长的抑制作用

目的旨在深入研究奥曲肽联合伊立替康对人结肠癌细胞的抑制作用。方法用噻唑蓝比色实验研究奥曲肽、伊立替康单药以及联合作用于体外培养的人结肠癌细胞HCT-116,了解其抑制作用,并用流式细胞仪检测其凋亡率。结果奥曲肽单药对人结肠癌细胞有生长抑制作用;奥曲肽联合伊立替康能增强对细胞的生长抑制作用。流式细胞仪检测细胞凋亡,奥曲肽联合伊立替康凋亡率为40.35%。结论奥曲肽和伊立替康对人结肠癌细胞HCT-116有生长抑制及诱导凋亡作用。     

奥曲肽与奥美拉唑联合应用对肝癌H22生长的抑制作用

目的观察奥曲肽与奥美拉唑联合应用对肝癌H22生长的抑制作用。方法建立小鼠肝癌H22肉瘤移植模型后,随机分为阴性对照组、顺铂组、奥曲肽组、奥美拉唑组和奥曲肽＋奥美拉唑组（联合用药组）,给药后计算肿瘤生长抑制率和肿瘤微血管密度的变化。结果奥曲肽组与奥美拉唑组的抑瘤率分别为33.5%、29.6%,联合用药组的抑瘤率为37.1%,差异无统计学意义（P〉0.05）。与阴性对照组比较,奥曲肽组与奥美拉唑组能够降低小鼠肝癌H22的微血管密度,差异有统计学意义（P〈0.05）,联合用药降低更加明显,其中奥曲肽组与奥美拉唑组的微血管密度分别为（29.34±8.78）、（40.95±9.23）,联合用药组为（23.89±5.76）。结论奥曲肽联合奥美拉唑能够显著抑制肝癌H22的生长,联合用药可能具有协同效果。     

奥曲肽对人胃癌细胞生长的影响

生长抑素(somatostatin,SS)具有广泛的生物活性,近年来的研究认为生长抑素有抗肿瘤作用。奥曲肽(OCT)是一种人工合成的生长抑素,本研究拟分析不同浓度的OCT对胃癌细胞生长的影响,并分析可能的抑癌机制。     

奥曲肽治疗原发性肝癌的31例报告

目的:观察奥曲肽单药治疗原发性肝癌的临床疗效和安全性,并探讨其作用机制。方法:对31例原发性肝癌患者(均为TNM分期ⅢB期)使用奥曲肽0.2mg皮下注射,q8h,连用2个月。观察患者一般状况及不良反应,检测血常规、肝功能、IgG、IgE、AFP、CEA、肝脏肿块的变化情况。结果:治疗前后31例患者的血常规、肝功能无明显变化,而IgG与IgE有明显升高,AFP、CEA较治疗前明显降低,差异均有显著性(P<0.05)。10例肿块缩小达PR,14例肿块无明显变化达NC,7例肿块增大,其中1例发生肝外转移为PD,差异无显著性(P>0.05)。6个月累积生存率为80.6%,12个月累积生存率为51.6%。生活质量明显改善,不良反应轻。结论:奥曲肽可使部分原发性肝癌患者肿块缩小,生存期延长,生存率增高,不良反应轻。     

奥曲肽诱导人胆管癌细胞凋亡过程中细胞内游离钙的变化

目的 探讨奥曲肽是否通过诱导人胆管癌细胞凋亡而抑制肿瘤生长，以及与细胞内游离钙的关系。方法 采用人胆管癌细胞SK－ChA-1，应用生长曲线，片段DNA琼脂糖凝胶电泳，Annexin V-FITC技术及激光共聚焦显微镜技术等方法进行检测和观察。结果 在奥曲肽作用下SK－ChA-1细胞生长受抑制。奥曲肽处理SK－ChA-1细胞后，Annexin V标记的凋亡细胞增多，DNA凝胶电泳显示典型的凋亡梯状图谱。细胞凋亡的同时细胞内游离钙浓度升高。结论 奥曲肽通过细胞内游离钙的变化，诱导人胆管癌细胞凋亡，是奥曲肽抑制胆管癌生长的机理之一。     

选择性COX-2抑制剂NS-398对宫颈癌细胞的作用及其作用机制

目的:研究选择性COX-2抑制剂NS-398对宫颈癌细胞的作用及其作用机制,探讨NS-398与卡铂在宫颈癌治疗中的协同作用.方法:用NS-398、卡铂及两者联合作用人宫颈癌Hela细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测NS-398、卡铂及两者联合对宫颈癌细胞增殖的影响,流式细胞仪PI染色法分析NS-398、卡铂处理后宫颈癌细胞凋亡率和细胞周期的改变.结果:NS-398、卡铂对人宫颈癌hela细胞的增殖具有抑制作用.卡铂联合NS-398对人宫颈癌hela细胞的增殖抑制作用显著增加,其联合抑制率近似于NS-398和卡铂单药抑制率之和,也近似于2倍卡铂剂量时的增殖抑制率.流式细胞仪检测发现,与对照组比较,NS-398处理组G1期细胞明显增加,而S期细胞明显减少,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);而卡铂处理组G1期细胞明显减少,S期细胞明显增加,两组比较有统计学意义(P＜0.05).NS-398(200 μmol/L)作用Hela细胞48 h后,流式细胞仪检测发现,NS-398处理组凋亡率为3.43%±0.02%,对照组凋亡率为1.48%±0.03%,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).而卡铂(80 mg/L)处理组凋亡率为9.32%±0.02%,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:选择性COX-2抑制剂NS-398对宫颈癌细胞的增殖具有抑制作用.NS-398对宫颈癌细胞的作用可能与凋亡无关.NS-398与卡铂在宫颈癌化疗中具有叠加作用.     

奥曲肽对人肝癌诱导肿瘤血管生成的抑制作用

目的　探讨生长抑素类似物奥曲肽对人肝癌诱导肿瘤血管生成的抑制作用。方法　采用人肝癌LCI D2 0裸鼠角膜微囊移植模型 ,利用体视显微镜和显微数码摄像系统 ,动态观测奥曲肽对人肝癌诱导肿瘤血管生成能力的影响。应用人肝癌LCI D2 0皮下移植瘤模型 ,采用CD34免疫组织化学SP法检测肿瘤标本微血管密度 (MVD) ,观察奥曲肽对人肝癌诱导的肿瘤血管生成和皮下移植瘤生长的影响。结果　LCI D2 0肝癌组织移植裸鼠角膜微囊能够诱导角膜新生血管形成 ;与对照组相比 ,奥曲肽组动物角膜新生血管芽生延迟 ,新生毛细血管网稀疏、生长缓慢 ;术后第 7、9、12、15、18、2 1天 ,奥曲肽组人肝癌诱导的角膜新生血管积分比对照组减少 (P <0 0 5 )。奥曲肽对LCI D2 0皮下肿瘤生长具有抑制作用 ,免疫组化研究表明 ,治疗组肿瘤内MVD(2 1 7± 4 2 7)比对照组MVD(31 8± 3 87)减少 (P <0 0 1)。结论　生长抑素类似物奥曲肽对人肝癌诱导肿瘤血管生成具有抑制作用 ,可能为肝癌的治疗提供一个新的途径。     

吉西他滨与奥曲肽联合应用对前列腺癌细胞PC-3的抑制作用

目的 研究吉西他滨与奥曲肽联合用药对去势抵抗性前列腺癌细胞PC-3增殖的抑制作用及对凋亡的影响.方法 体外培养人前列腺癌细胞株PC-3,应用MTT细胞实验研究空白组、对照组、不同浓度的奥曲肽组(0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL)与吉西他滨组(1μg/mL)单独使用以及联合使用不同时间段对PC-3细胞增殖抑制的影响;应用流式细胞仪检测对照组、奥曲肽组(8μg/mL)与吉西他滨组(1μg/mL)单独使用及联合使用对PC-3细胞凋亡的影响;并用Western-blot实验研究对照组、奥曲肽组(8μg/mL)与吉西他滨(1μg/mL)单独使用及联合使用对凋亡指标Bax、Bcl-2、Caspase3、Caspase9表达的影响.结果 MTT细胞实验显示,联合用药组作用72 h后,抑制率可达62%,显著高于对照组、奥曲肽组和吉西他滨组,差异均有显著统计学意义(P<0.05);AnnexinV-FITC细胞凋亡实验结果表明,联合用药组凋亡率25%,显著高于对照组、奥曲肽组和吉西他滨组,差异均有显著统计学意义(P<0.05);Western-blot结果显示,联合用药组Bcl-2表达低于对照组、奥曲肽组和吉西他滨组,而其Bax,Caspase3、Caspase9蛋白表达量显著高于对照组、奥曲肽组和吉西他滨组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 吉西他滨和奥曲肽可以协同作用,增强对去势抵抗性前列腺癌细胞系PC-3的增殖抑制和促凋亡作用,提示临床上两者联合应用于去势抵抗性前列腺癌治疗的可行性.     

反相高效液相色谱法测定醋酸奥曲肽中奥曲肽含量

[目的]建立高效液相色谱法测定醋酸奥曲肽中奥曲肽含量的方法.[方法]色谱柱:ZORBAX 300SB-C8柱(2.1mm×150mm,5μm),流动相:A:0.1％TFA水B:0.1％TFA乙腈,流速:0.25 ml/min,柱温:40℃,检测波长:210nm,进样量:20μl.[结果]奥曲肽浓度在0.08 ～ 0.2 mg/ml范围内,线性关系良好,r=0.9999;检测限为0.02 mg/ml;加样回收率平均为101.28％,RSD为0.58％.[结论]分析方法可行,准确度高,此法可用于醋酸奥曲肽中奥曲肽含量的测定.     

美洛昔康联合奥曲肽增强对肝癌生长的抑制作用

目的美洛昔康和奥曲肽以各自不同的作用机制均能抑制肝癌生长,两者联用其抗肿瘤作用将如何,并不清楚.从不增加不良反应但又能最大限度增加抗肿瘤作用的角度考虑,我们将探讨美洛昔康联合奥曲肽能否协同抑制肝癌细胞生长.方法采用 3H-TdR掺入法探讨美洛昔康和奥曲肽单独或联合应用对人肝癌细胞株HepG2生长的影响,根据中效原理判断两者相互作用的关系;并观察它们对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的影响.结果美洛昔康联合奥曲肽在体外能显著抑制HepG2肝癌细胞的生长,其浓度与 3H-TdR掺入值呈负相关(r=-0.980, P<0.01).美洛昔康联合奥曲肽能显著抑制人肝癌裸鼠原位移植瘤生长,抑瘤率为75.4%,较单药美洛昔康抑瘤率55.1%明显增高(P<0.05 ).各组裸鼠的体内实验中未见明显不良反应.结论体外细胞培养及裸鼠原位移植瘤实验均表明:美洛昔康联合奥曲肽能显著增强抑制肝癌生长的作用,美洛昔康和奥曲肽呈协同作用.     

塞来昔布对人肝癌细胞增殖的抑制作用

目的 观察塞来昔布对肝癌增殖的抑制作用.方法 以人肝癌细胞株SMMC-7721为研究对象,四唑氮蓝还原法(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞增殖的抑制作用,流式细胞技术检测细胞周期,并用小鼠肝癌细胞株H22建立昆明鼠移植瘤模型,观察塞来昔布对移植瘤生长的抑制效果.结果 MTT显示塞来昔布对人肝癌细胞SMMC-7721生长有显著的抑制作用,且呈现出时间和剂量依赖性;塞来昔布(40 μmol/L)作用于SMMC-7721细胞36h后,G1期细胞比率由44.7%上升至49.9%,S G2/M期细胞比率由55.4%下降至50.1%,细胞增殖受抑制.在体动物实验表明,塞来昔布对移植瘤的生长和局部转移有显著的抑制效果.结论 环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对不同来源的肝癌细胞株均有增殖抑制作用,可能是预防和治疗肝癌的重要候选药物之一.     

环氧合酶-2及其特异性抑制剂NS-398对膀胱癌细胞体外生长与侵袭能力的影响

目的 研究环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2，COX-2)及其特异性抑制剂NS-398在膀胱癌细胞生长和侵袭转移中的作用。方法 利用转基因技术将COX-2 cDNA基因导入低表达COX-2的膀胱癌细胞株EJ，获得高表达COX-2的永久转染细胞EJ-COX2。观察转染前后细胞生长速度的变化；在NS-398作用下，Boyden小室检测细胞的侵袭能力的改变，用RT-PCR和Western blotting检测uPA的表达变化。结果 转染COX-2的EJ-COX2细胞体外增殖能力增强；穿过人工基底膜的体外侵袭能力增强；尿激酶型纤溶酶原激活因子(Urokinase plasminogen activatoi，uPA)的表达上升；NS-398能呈剂量依赖地抑制COX-2、uPA的表达和EJ-COX2细胞的侵袭能力。结论 COX-2能促进膀胱癌细胞生长，并通过促进uPA的表达从而促进其侵袭转移的能力，NS-398能呈剂量依赖地抑制COX-2、uPA的表达和EJ-COX1细胞的侵袭能力。     

奥曲肽诱导人肝癌细胞HepG2凋亡

目的探讨奥曲肽诱导人肝癌细胞HepG2凋亡作用及机理.方法采用DNA末端原位标记染色法(TUNEL)、Annexin Ⅴ荧光标记法分别检测肝癌细胞早期和晚期凋亡,细胞免疫化学法检测p53表达.结果 1×10-5mol/L奥曲肽使HepG2细胞早期凋亡阳性率和凋亡指数(AI)增加至(14.2±2.6)%和(18.8±3.3)%,与对照组(1.2±0.1)%(P＜0.05)和(3.6士0.9)%(P＜0.01)比较差异显著;该浓度奥曲肽能明显增加HepG2细胞野生型wp53表达(P＜0.05).结论奥曲肽能诱导肝癌细胞早期及晚期凋亡,这和奥曲肽能使HepG2肝癌细胞wp53表达增加有关.     

奥曲肽抑制人肝癌BEL-7402细胞生长的实验研究

目的　探讨生长抑素类似物奥曲肽 (OCT)在体内对人肝癌BEL - 74 0 2细胞生长的影响。方法　建立人肝癌细胞株BEL - 74 0 2裸鼠移植瘤模型 ,实验组皮下注射奥曲肽 10 0 μg·kg- 1 ·d- 1 ,对照组给予生理盐水 2 0μl d ,给药 2 8天后处死裸鼠。取瘤 ,测量瘤重、瘤体积后 ,检测移植瘤组织中血管内皮细胞生长因子 (VEGF)、微血管密度 (MVD)的表达。结果　奥曲肽组瘤重、瘤体积与生理盐水组间有显著性差异 (P <0 .0 5 )。奥曲肽组VEGF的表达明显低于生理盐水组 (P <0 .0 5 ) ,而MVD在奥曲肽组的表达虽然低于生理盐水组 ,但统计学差异无显著性 (P =0 .0 5 5 )。结论　生长抑素类似物奥曲肽能够抑制裸鼠人肝癌移植瘤的生长 ,并能抑制瘤组织中VEGF的表达 ,同期移植瘤组织中微血管密度呈下降趋势。     

奥曲肽联合TACE对肝癌患者肿瘤增殖和血清VEGF变化的影响

目的 研究奥曲肽联合经导管肝动脉栓塞化疗（TACE）对肝细胞肝癌患者血清血管内皮生长因子（VEGF）水平变化及疗效的影响.方法 51例肝癌患者分为2组,联合治疗组给予奥曲肽＋TACE,单纯TACE组仅给予TACE.分别于TACE前和TACE后1、7、14、21、28天检测血清AFP和VEGF水平.结果 2组TACE后血清AFP均显著降低,其中联合治疗组TACE后21、28天血清AFP水平又显著低于单纯TACE组.2组TACE后1天血清 VEGF水平较治疗前显著升高,TACE后7天则显著下降,至TACE后14天再次升高;2组TACE后21、28天血清 VEGF水平又再度下降,其中联合治疗组血清VEGF水平显著低于单纯TACE组.联合治疗组的部分缓解（PR）和总有效率（RR）显著高于单纯TACE组.结论 奥曲肽联合TACE较单纯TACE能更显著抑制肝癌增殖,其协同抗癌的部分作用可能是通过降低VEGF水平.     

环氧化酶-2抑制剂NS398对肾癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨环氧化酶-2(Cyelooxygenase-2,COX-2)抑制剂NS398对肾癌细胞786-0增殖和凋亡的影响.方法:不同浓度NS398作用体外培养的786-0细胞后,采用噻唑蓝(MTT)法检测24、48、72、96 h后肾癌细胞786-0的增殖活性.终浓度为30、180μmol/L的NS398作用786-O细胞72 h后,免疫细胞化学检测COX-2蛋白表达;RT-PCR法检测COX-2mRNA表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果:NS398可以抑制786-O细胞的增殖,呈时间和剂量依赖型.RT-PCR法检测显示NS398作用后能降低COX-2mRNA表达.免疫细胞化学结果显示NS398作用后能降低COX-2蛋白表达.流式细胞仪检测表明,30、180 μmol/L NS398处理组凋亡率分别为14.3%±1.4%、31.5%±2.1%,与对照组凋亡率2.1%±0.4%比较,凋亡率显著上升(P<0.05).结论:NS398可能通过降低COX-2表达,抑制肾癌细胞增殖和诱导其凋亡.     

上调XB130表达对人肝癌HepG2细胞凋亡和增殖的影响

目的观察XB130 表达上调后人肝癌细胞HepG2 增殖和凋亡的变化,并探讨其作用机制。方法Western blot及实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测肝癌细胞株中XB130表达;构建过表达质粒pCMVEGFP-XB130 转染HepG2 细胞,实验分为pCMV-EGFP-XB130 组（pCMV-EGFP-XB130 转染）,空白对照组（EGFP 转染）。以免疫荧光、Western blot法及qRT-PCR 法检测上调效率。Western blot 法检测PI3K/Akt通路相关基因表达;采用MTT法检测转染后细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果XB130 蛋白及其mRNA在肝癌细胞株Hep3B、Huh7、HepG2 和MHCC97H 中均有表达,在HepG2 细胞株中表达量最低（ F=6.342 和5.424,均P=0.001）。与EGFP 组比较,pCMV-EGFP-XB130 组中p-p21、p-p27、p-FOXO3a 及Pro Capase-9蛋白表达上调（t =4.652,3.558,6.743 和3.021,均P<0.05）;XB130 表达上调后在72 及96 h HepG2 细胞增殖能力增强（ t=4.752 和8.542,均P=0.001）;XB130 表达上调后HepG2 细胞凋亡率降低（t =7.467,P =0.001）。结论XB130 表达上调通过PI3K/Akt信号通路促进肝细胞癌细胞增殖,抑制凋亡。     

NS398对白血病细胞K562凋亡的时间和剂量效应机制

目的 探讨非甾体药物选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS398对白血病细胞株K562细胞增殖及凋亡的效应关系和机制.方法 采用噻唑蓝还原法(MTT法)检测NS398对K562细胞增殖抑制作用,流式细胞仪(FCM)和单细胞凝胶电泳技术(comet assay)测定K562细胞的凋亡,免疫印迹实验检测相关蛋白的表达.结果 NS398抑制K562细胞增殖存在时间和剂量效应关系,各浓度间差异有显著性(P<0.05).NS398激活caspase-3和caspase-9,促进P53蛋白的积聚、Bax蛋白表达的上调和Bcl-xL蛋白表达的下调,进而导致细胞色素C的释放,致使K562细胞凋亡.结论 NS398可抑制K562细胞增殖,其诱导细胞凋亡的途径可能经过P53介导Bax的Caspase-3、Caspase-9的激活,揭示COX-2抑制剂可能存在着一个影响细胞翻译的新机制.