氟化物对DNA损伤的机理探讨

氟化物对ＤＮＡ损伤的机理探讨山东医科大学（２５００１２）高希宝李文生＊史丽＊＊许之张宁朱振平据ＷＨＯ估计，全世界因职业及饮水等接触高氟的人群至少有５亿，氟的致癌性是当今世界研究的热点之一。有关氟遗传毒性短期测试的报道很多，但一直无定论。为探讨氟化物损...     

氟化物的致畸作用

自１９３７年Ｓｈｏｒｔｔ首次报道印度盂德拉斯邦的地方性氟骨症以来,国内外学者围绕“氟与疾病”进行了大量的研究。氟化物的致畸性研究始于７０年代,研究者利用各种动物和人体细胞的离体培养及活体实验,探索氟的致突变及遗传毒性。但由于采用的载体细胞、氟化物剂量及作用途经、时间等的不同,致使结果各异。在大部分体外活化系统中,氟有致突变作用,而活体染毒则多为阴性结果。1 染色体畸变近年来,妹妹染色单体互换（ＳＣＥ）在突变和癌变等研究领域日益显示其重要性,各种因子诱发ＳＣＥ的能力与其诱变、致癌能力之间呈现明显相关…     

氟化物与线粒体损伤

氟是有潜在毒性，同时又具有某些必需功能的元素，在骨骼和牙齿发育形成中起重要作用。长期摄人过量的氟可引起慢性氟中毒．主要表现在牙齿和骨骼上，即氟斑牙和氟骨症。而线粒体是氟化物作用的主要细胞器．并且成为目前氟中毒研究的热点。已知线粒体是一个敏感而多变的细胞器．普遍存在于除哺乳动物成熟红细胞以外的所有真核细胞中。细胞生命所需能量的80％是由线粒体提供，线粒体也是细胞进行生物氧化和能量转换的主要场所。作者就氟化物致线粒体损伤作用做如下综述。[第一段]     

氟化钠与小牛胸腺DNA直接结合作用的研究

目的 探讨氟化钠与DNA的直接结合作用。方法 应用自动程序升温紫外分光光度计和高效液相LC-VP离子色谱分析仪对氟化钠与小牛胸腺DNA的直接结合作用进行了研究。结果 6.3,483.0,987.0mg/L氟化钠对5.0,10.0,22.5mg/L小牛胸腺DNA在260nm的吸收光谱未造成任何影响，在205nm处吸收峰虽有随氟化钠浓度升高而逐渐降低的倾向，但结果的可重复性较差：1.0mg/L的溴化乙锭可使10.0mg/L浓度的小牛胸腺DNA融点温度显著升高，而210.0mg/L的氟化钠对其无明显影响；不同浓度小牛胸腺DNA与氟化钠作用后，冰乙醇变性洗涤，经高效液相色谱分析仪检测，DNA水溶液中无氟离子检出。结论 氟化钠未与小牛胸腺DNA发生稳定结合。     

氟化物的自然分布和在人体代谢及其生理作用

氟（Flworine）广布于自然界，是生物体所必需的微量元素之一犤１犦。自１９３２年Moller和Gudjonnsson发现氟骨症后，人们对氟的危害做了大量的研究。笔者综合以往有关资料，在此讨论氟化物的自然分布和有益作用及其代谢，旨在使人们对氟这种微量元素有更加深入的了解和认识。１氟的来源与分布氟是自然界中固有的化学物质，它普遍存在于自然环境的各种介质当中犤２犦。１．１岩石及矿石中的氟氟存在于各种岩石中，但不同的岩石其氟的含量不同，同一种岩石在不同地区氟的含量也有差异，不同地质年代的各种岩石含氟量也不尽相同，其含量大…     

氟化物的成骨作用

氟对硬组织有很强的亲和力．一旦经胃肠道吸收进入体内，绝大部分存在于骨和牙齿等硬组织中。氟在体内长期大量蓄积，可引起骨代谢紊乱，导致慢性中毒，引起全身性骨骼病变，对成骨细胞株的作用主要表现为细胞功能明显活跃，不仅细胞数增多，而且细胞胞体肥大。但确切机制尚未完全阐明。作者就氟化物对成骨影响的调控作用及可能机制作一综述。[第一段]     

氟化物的防龋作用

龋病（caries）是局部的多因素疾病,严重影响儿童青少年的健康和生长发育,世界卫生组织已把龋病列为危害人类健康的三大非传染性疾病之一。20世纪口腔预防医学对人类最大的贡献之一就是发现氟化物能够预防龋病。研究发现,在弱酸性情况下,极低浓度的氟化物就能抑制磷灰石晶体的溶解,增强牙齿的抗酸能力,并能促使已脱矿的表面下釉质再矿化。     

氟化物的毒性效应和作用机制

氟在自然环境中分布广泛,化学性质活泼,广泛参与了机体内许多化学反应及代谢过程.氟作为与人体健康密切相关的微量元素之一,适量摄入有益于动物机体的生长发育及维持骨骼、牙齿的正常结构和生理机能.但过量氟的摄入可引起机体急性或慢性氟中毒效应.同时,氟中毒作为在特定地理环境中的一种地方性疾病,严重危害人类健康.氟不仅损害骨骼和牙齿,也损伤机体的神经系统、内脏器官以及内分泌腺等非骨相组织器官.近年来,氟相关的毒理研究及其分子作用机制取得了阶段性的进展.本文中主要综述了氟化物对胚胎、器官和细胞的毒性效应和分子机制.     

氟致牛外周血淋巴细胞凋亡及DNA损伤的效应观察

目的 探讨氟化钠(NaF)致体外培养的黄牛外周血淋巴细胞损伤和诱导细胞凋亡的作用.方法 应用淋巴细胞分离液分离黄牛外周血淋巴细胞,将不同剂量NaF[0(对照组)、4、8、12、16 mg/L]加入培养体系中,培养24 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活性,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法观察细胞核变化,琼脂糖凝胶电泳法检测DNA断裂情况,碱性单细胞凝胶电泳(SCGE)检测DNA损伤情况.结果 4、8、12、16 mg/L组淋巴细胞的存活率分别为(73.743±0.552)%、(69.184±0.724)%、(65.736±0.055)%、(63.651±0.287)%,较对照组[(100.000±0.003)%]明显下降(P＜0.01).观察到特征性凋亡细胞及有明显的DNA损伤,呈明显的剂量-效应关系(R2=0.7456).结论 一定剂量的NaF有致牛外周血淋巴细胞损伤和凋亡的作用.     

高氟对大鼠口腔粘膜细胞增殖周期和DNA合成的影响

目的研究高氟对大鼠口腔粘膜细胞增殖周期和DNA合成的影响。方法雄性SD大鼠饮用含150mg／LNaF的蒸馏水溶液4周，用流式细胞术研究大鼠口腔粘膜细胞增殖周期和DNA相对含量(DNARC)，用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。结果高氟能引起大鼠口腔粘膜细胞增殖周期的改变，使G2／M期细胞明显下降，DNARC也显著下降，DNA损伤率明显升高。另外，高氟也造成口腔粘膜组织的氧化应激，活性氧族、脂质过氧化产物显著增高，还原型谷胱甘肽明显下降。结论高氟不仅改变了大鼠口腔粘膜细胞的增殖周期，还造成氧化应激，引起DNA损伤并影响DNA合成使DNA相对含量显著下降。     

氟铝联合对大鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的探讨氟铝联合对大鼠胚胎的发育毒性及其作用机制。方法将9．5d大鼠胚胎于体外培养系统中培养，按给予不同剂量的氟化钠和硫酸铝（氟＋铝）分成9组，氟＋铝的剂量分别为（0＋0）、（5．0＋0）、（5．0＋、1．2）、（5．0＋2．4）、（10．0＋0）、（10．0＋1．2）、（10．0＋2．4）、（0＋1．2）、（0＋2．4）mg／L。48h后测定卵黄囊（VYS）直径、胚胎体长、头长、胚胎干重，观察胚胎生长发育和器官形态分化状况：用改良的Brown形态学评分系统对其胚胎组织器官的形态分化终点进行形态评分，评价胚胎各器官形态分化发育情况。应用3×3析因方差分析判断联合作用类型。结果氟铝共存时，反映胚胎生长发育的指标VYS直径，体长及胚胎干重均存在交互作用（F=29．75，P〈0．01），其生长发育情况随铝增加而好转，且组织形态分化指标VYS血管形成、体屈、心脏、鳃弓、上下颌、前后肢、神经管、体节数亦存在交互作用（P〈0．05）；（10．0＋2．4）mg／L与（10．0＋0）mg／L组比较，表现出拮抗作用（P〈0．05）。结论氟铝对大鼠胚胎发育均有潜在的致畸性和胚胎毒性，氟铝联合在全胚胎培养中对大鼠胚胎发育具有拮抗作用。     

砖茶含氟量测定方法实验研究

目的：研究建立砖茶氟含量测定方法,方法：利用氟离子选择电极测定砖茶氟含量。结果：沸水浴加热,水浸提砖茶样品,总离子强度缓冲液的拧檬酸钠浓度为120g/L,电极法测定样品含氟量,加标回收率平均为94．0％,平均变异系数CV＝1．02％（0．51％－1．61％）,测定国家茶叶标准物质氟含量与标准值相符,结论：本实验方法测定砖茶样品氟含量结果可靠,操作简便,有实际应用意义。     

DNA damage, apoptosis and cell cycle changes induced by fluoride in rat oral mucosal cells and hepatocytes

AIM:To study the effect of fluoride on oxidative stress,DNA damage and apoptosis as well as cell cycle of ratoral mucosal cells and hepatocytes.METHODS:Ten male SD rats weighing 80～120 g wererandomly divided into control group and fluoride group,5 animals each group.The animals in fluoride group hadfree access to deionized water containing 150 mg/L so-dium fluoride(NaF).The animals in control group weregiven distilled water.Four weeks later,the animals werekilled.Reactive oxygen species(ROS)in oral mucosa andliver were measured by Fenton reaction,lipid peroxida-tion product,malondialdehyde(MDA),was detected bythiobarbituric acid(TBA)reaction,reduced glutathione(GSH)was assayed by dithionitrobenzoic acid(DTNB)reaction.DNA damage in oral mucosal cells and hepa-tocytes was determined by single cell gel(SCG)electro-phoresis or comet assay.Apoptosis and cell cycle in oralmucosal cells and hepatocytes were detected by flowcytometry.RESULTS:The contents of ROS and MDA in oral mucosaand liver tissue of fluoride group were significantly high-er than those of control group(P<0.01),but the level ofGSH was markedly decreased(P<0.01).The contents ofROS,MDA and GSH were(134.73±12.63) U/mg protein,(1.48±0.13)mmol/mg protein and(76.38±6.71)mmol/mg protein in oral mucosa respectively,and(143.45±11.76)U/mg protein,(1.444-0.12)mmol/mg protein and(78.83±7.72)mmol/mg protein in liver tissue respective-ly.The DNA damage rate in fluoride group was 50.20%in oral mucosal cells and 44.80% in hepatocytes,higherthan those in the control group(P<0.01).The apop-tosis rate in oral mucosal cells was(13.63±1.81)% influoride group,and(12.76±1.67)% in hepatocytes,higher than those in control group.Excess fluoride coulddifferently lower the number of oral mucosal cells andhepatocytes at G_0/G_1 and S G_2/M phases(P<0.05).CONCLUSION:Excess fluoride can induce oxidative stress and DNA damage and lead to apoptosis and cellcycle change in rat oral mucosal cells and hepatocytes.     

氟在胎儿组织中的分布研究

本文对31具胎儿组织氟测定观察,氟能透过母体胎盘进入胎儿,胎儿组织氟含量以骨骼中最高,脑组织中最低,并随母体摄氟量和胎龄的增加而增高。     

砷与氟单独及联合染毒对SGC-7901细胞基因组DNA损伤作用的SCGE法观察

目的观察砷、氟及砷氟联合染毒对SGC-7901细胞基因组DNA的损伤作用及特点。方法砷、氟染毒剂量10μmol／L，染毒后4h应用单细胞凝胶电泳技术结合彗星图像分析系统检测DNA损伤。结果①NaAsO2组尾长和尾动量明显大于对照组，NaF组拖尾率显著高于对照组；②氟砷联合染毒组拖尾率、尾DNA含量、尾长和尾动量与对照组差异均有显著意义，但氟与砷引起的DNA损伤作用之间没有观察到交互作用。结论NaAsO2与NaF均可引起DNA损伤，但它们的损伤机理可能是不同的；氟与砷联合染毒仅表现为简单相加作用。     

安替氟对高骨氟负荷大鼠的降氟解毒作用

为研究安替氟是否对高骨氟负荷大鼠具有明显的降氟解毒作用,给幼龄大鼠饮高氟水（含氟５０ｍｇ／Ｌ）８周后停止给氟,同时在饮水中添加安替氟（６ｇ／Ｌ）,连续４周。结果表明,安替氟可使氟致肾小管上皮细胞损伤修复以及骨、牙氟负荷下降过程加速,尿氟排出也呈增加趋势,但其机理尚不清楚。     

空气氟测定的几个问题的探讨

目的 对空气氟测定方法存在的几个问题进行探讨。方法 用２层都经碳酸氢钠甘油溶液浸渍的超细纤滤纸采集空气氟,对ＴＩＳＡＢ的柠檬酸钠浓度进行选择,滤纸本底值、前处理方法、回收实验和方法现场应用进行研究。结果 选用ｌｍｏｌ／Ｌ柠檬酸钠作ＴＩＳＢＡ测定偏差〈５．２％;经浸渍处理的滤纸本底氟略有升高,但对气态或气溶胶态都能更好地阻留吸收;前处理方法可用于酸浸搅拌成纸浆浸放１ｈ代替４０℃超声１５ｍｉｎ;用煤飞     

高氟与补硒对大鼠甲状腺影响的实验研究

观察了６０只饮用３０ｍｇ／Ｌ或５０ｍｇ／Ｌ高氟水及加硒大鼠的尿氟、甲状腺组织结构及其激素变化。结果显示尿氟随饮高氟水时间延长而升高，补硒在早期可增加尿氟排泄；早期甲状腺滤泡上皮增生活跃、游离甲状腺激素升高；后期甲状腺滤泡上皮出现退行性变，ＦＴ３和Ｔ４水平降低。提示高氟使甲状腺早期兴奋，甲功高度代偿，后期抑制甲状腺使甲功低下；氟与甲状腺组织及功能的改变与摄氟时间密切相关。