内毒素脂多糖促进人牙髓成纤维细胞凋亡及其对caspase-3活性的影响

目的观察内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对体外培养的人牙髓成纤维细胞的致凋亡作用及其对凋亡相关的半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性的影响。方法不同浓度(0μg、100μg、200μg、400μg/mL)的LPS作用细胞,采用噻唑蓝比色法检测LPS对细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期及凋亡;化学比色法检测细胞凋亡过程中caspase-3活性的变化。结果不同浓度LPS组细胞的生长与对照组相比均受到显著的抑制(P<0.01),细胞增殖抑制率呈剂量依赖关系;Hoechst33258荧光染色显示,给药组部分细胞呈典型的凋亡表现;流式细胞术检测结果显示,不同浓度的LPS作用细胞48h,细胞的凋亡率分别为9.2%,23.8%,31.4%;caspase-3活性检测显示,其活性呈剂量依赖性增高,LPS浓度达到400μg/mL时,其活性为对照组的3.4倍。结论LPS可显著地抑制人牙髓成纤维细胞增殖、诱导细胞凋亡、升高caspase-3活性,并呈明显的量效关系。     

牙龈弥漫性大B细胞淋巴瘤2例

发生在口腔牙龈的弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）非常少见,易被误诊及误治。本文报道了2例口腔牙龈DLBCL,并结合2008—2023年间国内、外报道的21例牙龈DLBCL的文献,对其临床病理特征、诊断及鉴别诊断进行讨论。     

脂多糖对人牙周膜细胞COX-2蛋白表达的影响

目的：观察脂多糖对人牙周膜成纤维细胞COX-2表达的影响,探讨牙周病发生发展过程中脂多糖（LPS）与COX-2的关系。方法：使用不同浓度LPS刺激体外培养人牙周膜成纤维细胞,免疫组织化学法检测细胞COX-2蛋白表达,灰度分析并进行统计学处理。结果：LPS组COX-2蛋白表达明显高于对照组,并且LPS浓度越高,COX-2表达越强。结论：LPS能够诱导人牙周膜成纤维细胞COX-2表达上调,随着LPS刺激浓度增高,COX-2表达逐渐增强,这一机制很可能在牙周炎发生发展过程中扮演重要角色。     

人正常或炎症牙髓组织中炎症信号细胞间黏附分子-1表达的研究

目的：研究人正常、慢性牙髓炎、急性牙髓炎牙髓组织中细胞间黏附分子-1免疫定位，探讨其在牙髓炎症机制中的作用和意义。方法：采用免疫组化（ABC）法对成人正常牙髓、慢性牙髓炎、急性牙髓炎牙髓中的细胞间黏附分子-1进行免疫定位。结果：细胞间黏附分子-1在3组牙髓组织中均有表达。其分布为：正常牙髓组织中少许血管内皮细胞呈较弱的阳性反应；慢性牙髓炎牙髓组织中较多的血管内皮有较强的阳性染色；急性牙髓炎牙髓组织中很多血管内皮染色呈强阳性。其中急性牙髓炎组染色强度与慢性牙髓炎组、正常组之间细胞间黏附分子-1的表达有显著差异；慢性牙髓炎组与正常组之间细胞间黏附分子-1的表达也有显著差异。结论：①人牙髓组织中血管内皮细胞膜表达细胞间黏附分子-1。②炎症组与正常组之间细胞间黏附分子-1的表达有显著性差异。③细胞间黏附分子-1可能参与介导牙髓炎症过程，在炎症机制中发挥重要作用。     

人牙髓细胞受内毒素脂多糖、肿瘤坏死因子、复合树脂浸出液刺激后的MTT值研究

目的：观察人牙髓细胞（human detal pulp cells,HDP）热休克模型及正常HDP受到LPS、TNF－α及复合树脂浸出液的细胞毒刺激后的MTT值。方法：用LPS、TNF－α各三种浓度及750ml/L Durafill复合树脂浸出液分别处理HDP及其热休克模型，72h后计算各组相对增殖率（RGR）。结果：热处理板与非热处理板相比RGR有显著差异；同一处理因素随浓度增加RGR有下降趋势，且在低浓度与高浓度之间有显著差异。结论：在受到LPS、TNF－α及复合树脂浸出液的细胞毒作用后，经过热休克处理的HDP的MTT值显著高于未经热处理的HDP，提示热处理可能提高HDP的抗细胞毒能力。     

头颈部弥漫性大B细胞淋巴瘤临床病理研究

目的：探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤在头颈部的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法：分析25例弥漫性大B细胞淋巴瘤的临床特点、观察HE表现,通过免疫组化方法检测肿瘤细胞CD20、CD79a、CD3、CD68、Bcl—2、CD10、Bcl-6、MUM-1、CD138、ALK、Ki67的表达特点。结果：男性14人,女性11人,平均年龄58．8岁。临床表现为突起肿物,可发生溃疡。镜下肿瘤细胞较大,空泡状,核仁明显。瘤细胞均广泛表达B细胞标记。结论：弥漫性大B细胞淋巴瘤的诊断主要依靠细胞形态学和免疫表型;应与大细胞恶性肿瘤相鉴别。     

体外培养人牙周牙髓相关细胞中釉原蛋白的表达

目的:观察釉原蛋白(amelogenin,Am)基因在体外培养的人牙龈上皮细胞及口腔外胚间充质来源细胞(人牙龈成纤维细胞、人牙周膜成纤维细胞和人牙髓细胞)中的表达.方法:采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,检测培养细胞中釉原蛋白mRNA的表达.采用蛋白质免疫印迹技术检测培养细胞中釉原蛋白的表达.结果:培养的人牙周膜成纤维细胞、牙髓细胞、牙龈成纤维细胞和牙龈上皮细胞中均未检测到釉原蛋白及其mRNA的表达.结论:体外培养的人牙周膜成纤维细胞、牙髓细胞、牙龈成纤维细胞和牙龈上皮细胞不表达釉原蛋白基因.     

原发牙龈B细胞性淋巴瘤1例

本文报告1例原发牙龈B细胞性淋巴瘤。患者男,28岁,临床表现为:左上颌牙龈无痛性逐渐增生1月。专科检查发现患者23,24,25,26颊侧见一大小约2cm*1.5cm*1cm肿物。影像学检查24,25牙周膜增宽,颊侧骨质呈低密度影像,边界不清。病理镜下可见异形淋巴细胞弥漫排列,免疫组化示:CD20(-),CD2(-),CD10(-),CD138(+),CD79a(+),LCA(+),Ki-67:80%左右(+)。诊断为原发牙龈B细胞性淋巴瘤。     

核因子κB/B细胞淋巴瘤2信号通路与糖原合成激酶3β在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 初步探讨核因子κB（NF-κB）/B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）信号通路与糖原合成激酶3β（GSK-3β）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中的表达情况,为OSCC的早期诊断及治疗提供参考。方法 收集OSCC标本55例及癌旁组织10例,采用免疫组织化学SP法检测OSCC组织及癌旁组织中GSK-3β、NF-κB及Bcl-2的表达情况,并分析三者相互之间的表达关系及三者与患者临床病理参数之间的关系。结果 GSK-3β、NF-κB及Bcl-2在OSCC中的表达高于癌旁组织中的表达（P<0.01）,且三者与患者年龄、性别以及临床分期无明显关系（P>0.05）。Bcl-2在不同组织学分化程度的OSCC组织中的表达有统计学差异（P<0.05）,而GSK-3β及NF-κB在不同组织学分化程度的OSCC中的表达无统计学差异（P>0.05）。GSK-3β、NF-κB及Bcl-2在OSCC中的表达均两两相关（P<0.05）。结论 GSK-3β、NF-κB及Bcl-2在OSCC组织中的表达显著高于癌旁组织中的表达,检测GSK-3β、NF-κB及Bcl-2的表达水平对于OSCC的早期诊断和预后估计有一定的临床意义。     

正常及炎症状态人牙髓中八聚体结合转录因子4B的表达

目的 研究人正常及炎症牙髓组织中八聚体结合转录因子4B(Oct-4B)的表达特点,检测大肠杆菌脂多糖刺激后人牙髓细胞( HDPCs)中Oct-4B的表达水平,以探讨Oct-4B在牙髓炎症中的可能作用.方法 采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应( RT-PCR)方法检测正常及炎症牙髓组织中Oct-4B的表达情况.RT-PCR检测1 mg/L脂多糖刺激HDPC 24、48、72 h后Oct-4B和热休克蛋白70(HSP70)表达水平的变化.结果 正常牙髓组织中未检测到Oct-4B的表达,炎症牙髓组织病灶处牙髓成纤维细胞和炎症细胞胞质中Oct-4B表达强阳性.炎症牙髓组织中Oct-4B mRNA水平显著高于正常牙髓组织(P<0.05).脂多糖刺激48.72 h后,HDPC中Oct-4B和HSP70 mRNA水平同步上调(P<0.05).结论 Oct-4B在炎症牙髓组织中高表达,且脂多糖刺激可上调牙髓细胞内Oct-4B表达,Oct-4B可能参与牙髓炎症修复过程.     

牙本质黏结剂诱导人牙髓细胞凋亡的体外研究

目的:比较不同固化时间牙本质黏结剂对牙髓细胞凋亡的诱导作用。方法:体外培养人牙髓细胞,与黏结剂模型共同孵育24h,经PI染色,采用流式细胞记数仪检测凋亡细胞数目。结果:经t检验,与对照组比较,光照0s、10s和20s对牙髓细胞凋亡都有不同程度的影响(P<0.05),光照时间延长可减少对牙髓细胞凋亡的诱导。结论:牙本质黏结剂可诱导牙髓细胞凋亡,适当延长固化时间可以减轻黏结剂对牙髓的刺激。     

细胞表达HSP70的细胞模型研究

目的 :通过热休克预处理提高人牙髓细胞HSP70的表达水平 ,建立供体外实验研究的热休克细胞模型。方法 :将体外培养的人牙髓细胞爬片后进行热处理 ,置 42℃水浴 2 5min ,37℃复温。于复温后 1、2、3、4、6、8、10h、1d固定 ,进行HSP70的免疫组化染色 ;96孔板细胞同样方法热处理 ,连续培养 3d后 ,进行MTT检测。结果 :正常对照牙髓细胞呈阴性表达。热休克处理牙髓细胞 1、2h组中度阳性着色 ,3、4h组强阳性着色 ,6、8、10h组达到高峰 ,1d组恢复到弱阳性水平。MTT检测显示热处理组与对照组无统计学差异。结论 :热预处理方法可成功诱导人牙髓细胞表达HSP70 ;该方法不会导致连续培养 3d后细胞存活数量的明显变化     

Irreversible but not reversible pulpitis is associated with up-regulation of tumour necrosis factor-alpha gene expression in human pulp

AIM: To analyse the gene expression of tumour necrosis factor-alpha (TNF-alpha) in human dental pulps, under normal and inflammatory conditions and to examine the association between any observed alterations in the expression of this cytokine with the severity of the clinical symptoms. METHODOLOGY: Eighteen pulpal samples were obtained from single-rooted human teeth. Six of the teeth were normal (group A), six had been diagnosed with reversible pulpitis (group B), and the remaining six were from teeth diagnosed with irreversible pulpitis (group C). TNF-alpha gene expression was semi-quantitatively analysed in each sample with RT-PCR, and the results from each group of teeth were compared with the Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests. RESULTS: Tumour necrosis factor-alpha was detected in all three groups of dental pulp. Statistical analysis provided evidence of a significant increase of TNF-alpha gene expression associated with irreversible inflammation compared with healthy controls (P = 0.002). No such difference was detected in reversibly inflamed pulp in comparison to healthy teeth (P = 0.699). CONCLUSION: Tumour necrosis factor-alpha gene expression in inflamed human dental pulp tissue is positively associated with the severity of clinical symptoms.     

Localization of substance P-induced upregulated interleukin-8 expression in human dental pulp explants

AIM: To localize ex vivo expression of interleukin-8 (IL-8) induced by substance P (SP) in human dental pulps. METHODOLOGY: Intact caries-free, freshly extracted third molars (n = 20) were collected from patients (15-25 years old). The teeth were split and pulpal tissue was obtained and stored in Dulbecco's modified Eagle medium. Human dental pulp tissue explants were stimulated with SP. Expression of IL-8 in pulp explants was detected and localized by immunohistochemistry. RESULTS: Moderated IL-8 immunoreactivities were detected mainly in the cell-rich zone in pulp tissues 12 h after tumour necrosis factor alpha (TNF-alpha) stimulation (positive controls), whereas only weak IL-8 expression was observed in tissues stimulated with SP at the same time interval. These data did not differ from those in negative controls. Increased IL-8 expression in pulp explants after 24 h of SP stimulation was noted compared with negative controls and located in fibroblast-like cells, blood vessel-associated cells and extracellular matrix in the central zone and cell-rich zone of pulp explants. Tissues stimulated with TNF-alpha for 24 h (positive controls) revealed weak IL-8 immunoreactivities with altered cell morphology. CONCLUSIONS: Substance P induces IL-8 expression and was located in fibroblast-like pulp cells, blood vessel-associated cells and extracellular matrix of human dental explants. These data support the hypothesis that neuropeptide (SP) coordinates the modulation of pulpal inflammation via up-regulating chemokine IL-8.