龙胆中龙胆苦苷的分离纯化

目的建立龙胆中高纯度龙胆苦苷的快速分离纯化方法。方法坚龙胆药材的乙醇提取液经AB-8大孔吸附树脂柱进行粗分,乙醇-水系统进行梯度洗脱,30%乙醇溶液洗脱下来的流份粗龙胆苦苷部分冷冻干燥后经MCI树脂柱进一步纯化,洗脱剂为乙醇-水,所得的龙胆苦苷的纯度经高效液相色谱进行检测。结果在此条件下,可以分离得到纯度大于97%的龙胆苦苷。结论该法简便、快速、低毒、所得产物纯度高,适用于分离较高纯度的龙胆苦苷及龙胆苦苷标准品的制备。     

甲基龙胆苦苷元的制备

将龙胆苦苷置甲醇中用盐酸水解，成功得到甲基龙胆苦苷元。     

大孔吸附树脂对龙胆中龙胆苦苷吸附分离研究

龙胆是一种常用中药，有清湿热、利肝胆的功能，所含龙胆苦苷等水溶性成分是主要活性成分。分离龙胆苦苷的方法多为硅胶或聚酰胺柱色谱，往往需多次上柱，提纯效果不理想。大孔树脂具有理化性质稳定、吸附选择性独特，吸附效率高、不受无机盐类存在的影响、易再生等优点。本实验选择7种     

龙胆药材中龙胆苦苷含量测定样品制备方法比较

目的　龙胆药材中龙胆苦苷的含量测定时样品的最佳制备方法。方法　采用高效液相色谱法 ,比较甲醇超声提取 (本法 )、甲醇冷浸提取 (2 0 0 0版药典龙胆项下方法 )、甲醇回流提取 (2 0 0 0版药典秦艽项下方法 )及甲醇索氏提取 4种样品制备方法对龙胆苦苷含量测定结果的影响。结果　甲醇超声提取法优于其它三种方法。结论　本方法操作简便易行 ,重现性好 ,准确度高 ,可作为龙胆药材含量测定的供试品溶液制备方法     

薄膜超声法制备龙胆苦苷脂质体

目的制备均匀稳定的龙胆苦苷脂质体。方法采用薄膜超声法制备龙胆苦苷脂质体;采用HPLC法测定含量,色谱条件:流动相为甲醇:水=30:70,流速为1 mL/min,检测波长为270 nm;采用微柱离心法分离脂质体测量包封率。结果胆固醇:磷脂比1:2,PBS缓冲液的pH值为5.7,十八胺磷脂比1:10,药脂比为1:12。最优制备工艺采用薄膜超声法制备龙胆苦苷脂质体最佳包封率为75.14%。结论采用薄膜超声法制备龙胆苦苷脂质体包封率较好。     

HPLC法同时测定三味龙胆花片中龙胆苦苷及獐牙菜苦苷

目的建立HPLC法同时测定三味龙胆花片(白花龙胆、甘草、蜂蜜)中龙胆苦苷及獐牙菜苦苷的含有量。方法药物甲醇提取液的分析采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温30℃;流动相为甲醇-水(25∶75);体积流量1.0 m L/min;进样量10μL;检测波长240 nm。结果龙胆苦苷和獐牙菜苦苷分别在20.1~201.0 ng(r=0.999 9)和19.76~197.6 ng(r=0.999 9)范围内有良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.93%和100.8%,RSD值分别为1.65%和2.06%。结论该方法简便、准确、可靠,可用于三味龙胆花片的质量控制。     

酒制前后龙胆中龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的含量变化研究

目的:比较龙胆炮制前后龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的含量变化.方法:采用HPLC法测定10批生龙胆、酒制龙胆中龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的含量,色谱柱为Agilent C18柱;流动相为甲醇-乙腈-0.025 mol/L磷酸水(30:10:300);检测波长为240 nm;流速为1.0 mL/min c,结果:酒制龙胆中龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的含量均高于生品.结论:炮制可促进龙胆药材中环烯醚萜苷类成分的溶出.     

大孔吸附树脂分离纯化龙胆药材中龙胆苦苷和马钱子苷酸的研究

目的：建立利用大孔吸附树脂对龙胆药材中龙胆苦苷和马钱子苷酸进行富集和分离纯化的方法。方法：采用加速溶剂萃取法对龙胆药材中两种有效成分进行高效提取，比较了D301，AB-8，D101，XDA-l四种大孔树脂对龙胆苦苷和马钱子苷酸的吸附性能，最终确定采用D301型大孔对脂对二者进行富集吸附，对其工艺参数进行优化，全程采用高效液相色谱进行目标化合物浓度检测。结果：化优后的工艺参数为：上样浓度：0．2g／mL，最大上样量：0，25g龙胆药材／g树脂，最佳静态吸附时间：8h，采用8％和55％的乙醇溶液对龙胆苦苷和马钱子苷酸分别进行洗脱；龙胆苦苷和马钱子苷酸分别富集在8％和55％的乙醇洗脱液中，洗脱液浓缩后冷冻干燥，可得到纯度分别为74．3％和80．9％的粗产物，龙胆苦苷和马钱子苷酸的回收率分别为70．11％和67．82％。结论：此法效率较高，操作简便，即可用于实验室制备少量的难以购置的标准品，也可进行放大研究，用于工业生产。     

HPLC法测定蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷含量

目的：测定蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷的含量。方法：供试品用甲醇超声提取30min,滤过,取续滤液作为供试品溶液,经高效液相色谱仪测定峰面积。色谱柱：Inertsil ODS-sp（5um,4.6mm×150mm）;流动相：甲醇：水（36：73）;检测波长：270nm;流速：1.0ml/min;柱温：25℃。结果：蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷与其他组分分离良好。保留时间为17.1min。龙胆苦苷对照品线性范围1.68-8.40μg,r=0.9993。结论：本法灵敏度高、操作简便、结果准确,可用于珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定。     

龙胆苦苷抗炎药理作用研究

目的 研究秦艽所含龙胆苦苷的抗炎作用。方法 分别用二甲苯致小鼠耳肿胀，冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加及小鼠扭体反应，酵母多糖A、角叉菜胶、制霉菌素致大鼠或小鼠足跖肿胀模型，ig给药，观察龙胆苦苷的抗炎作用。结果 龙胆苦苷能减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀、冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶、酵母多糖A所致大鼠足跖肿胀，但对制霉菌素所致的炎症模型无明显作用。结论 秦艽所含龙胆苦苷具有一定的抗炎作用，其机制涉及对多种炎症介质的抑制。抗炎作用能部分代表秦艽生药的传统功效。     

高速逆流色谱法分离纯化浙贝母中贝母素甲，贝母素乙

目的：采用高速逆流色谱技术分离提纯浙贝母中的活性成分贝母素甲，贝母素乙。方法：采用氯仿-无水乙醇-0．2mol&;#183;L^-1盐酸（4：3：2）系统，上相为固定相，下相为流动相。主机转速为800r&;#183;min^-1，流动相流速为1．2mL&;#183;min^-1。结果：一次进样分离得到贝母素甲、贝母素乙，经高效液相（HPLC）分析纯度，经MS，^1HNMR鉴定结构。结论：利用本实验条件可从浙贝母中分离制备贝母素甲，贝母素乙，两者纯度分别达到：97．5％，94．5％。     

高速逆流色谱法分离纯化浙贝母中贝母素甲, 贝母素乙

目的:采用高速逆流色谱技术分离提纯浙贝母中的活性成分贝母素甲,贝母素乙.方法:采用氯仿-无水乙醇-0.2mo1.L-1盐酸(4:3:2)系统,上相为固定相,下相为流动相.主机转速为800r.min-1,流动相流速为1.2mL·min-1.结果:一次进样分离得到贝母素甲、贝母素乙,经高效液相(HPLC)分析纯度,经MS,1HNMR鉴定结构.结论:利用本实验条件可从浙贝母中分离制备贝母素甲,贝母素乙,两者纯度分别达到:97.5%,94.5%.     

人参中的人参皂苷高速逆流色谱法分离

目的应用高速逆流色谱(HSCCC)分离人参中的人参皂苷,并鉴定分离所得到的化合物。方法以溶剂配比为醋酸乙酯-正丁醇-水-醋酸(4∶1∶3∶0.02,V∶V∶V∶V)作为制备型逆流色谱分离的溶剂系统,以上相为固定相,下相为流动相,流速为1.5 ml.min-1,仪器转速为950 r.min-1,检测波长254 nm,并利用高效液相色谱对分离所得到的组分与标准品进行对照,确定单体皂苷。结果应用高速逆流色谱技术一次性分离得到Re、Rg1、Rg33个人参皂苷单体化合物,经高效液相色谱(HPLC)检测其纯度均达到95%以上。结论高速逆流色谱分离单体化合物具有迅速、简单、重复性好的特点。     

麻花秦艽中落干酸对照品的高效液相制备

目的 建立从麻花秦艽中快速分离高纯度落干酸的方法,用于制备麻花秦艽质量控制用对照品.方法 采用水煎提取,活性炭富集,制备高效液相分离纯化.制备液相采用GRACE Adsorbosphere C18色谱柱(22 mm×250 mm,10 μm),以甲醇-0.1％冰醋酸水溶液(8:92)为流动相,流速12 ml/min.制备柱柱后分流,分流比为1:5;UV检测,波长254 nm.部分收集器分部收集,按照色谱图回收高纯部分.结果 制备所得产品经UV,IR,1H- NMR,13C - NMR等光谱手段确证为落干酸.分析型高效液相分析,纯度大于99.0％.结论 该方法简单、高效、回收率较高,是从麻花秦艽中快速分离制备高纯度落干酸对照品的较好方法.     

高速逆流色谱法对补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的分离纯化研究

补骨脂素和异补骨脂素是中药补骨脂的特征成分,含量较高且具有多种生物活性,目前已成为补骨脂及其产品的质量控制成分。本文以补骨脂干燥成熟果实为原料,经乙醇回流制备补骨脂粗提物,率先采用高速逆流色谱技术进行分离,所得样品由高效液相色谱检测纯度,并由对照品确定成分。实验结果表明：采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（7：3：5：5）作为两相溶剂体系,经一步逆流分离可以从补骨脂粗提物中分离得到补骨脂素和异补骨脂素,二者纯度分别达到99．4％、99．1％。该法具有制备量大、分离效率高等优点。     

高速逆流色谱法对补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的分离纯化研究

补骨脂素和异补骨脂素是中药补骨脂的特征成分,含量较高且具有多种生物活性,目前已成为补骨脂及其产品的质量控制成分.本文以补骨脂干燥成熟果实为原料,经乙醇回流制备补骨脂粗提物,率先采用高速逆流色谱技术进行分离,所得样品由高效液相色谱检测纯度,并由对照品确定成分.实验结果表明:采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(7:3:5:5)作为两相溶剂体系,经一步逆流分离可以从补骨脂粗提物中分离得到补骨脂素和异补骨脂素,二者纯度分别达到99.4%、99.1%.该法具有制备量大、分离效率高等优点.     

高速逆流色谱应用于黄酮类成分分离与纯化研究进展

高速逆流色谱（HSCCC）是一项无固体载体即一种连续高效的新型液-液分配色谱技术,主要利用化合物在溶剂系统中分配系数的差异达到分离目的,在化合物分离以及单体制备等方面有广泛运用。综述了近年来高速逆流色谱技术在分离纯化黄酮苷元和黄酮苷类化合物中的应用,包括高速逆流色谱技术分离纯化已知和未知天然产物黄酮类成分、筛选黄酮活性成分,为今后高速逆流色谱在分离黄酮类化合物中的应用提供借鉴。     

高速逆流色谱法分离制备波棱瓜子中波棱芴酮

目的:建立了常规柱色谱结合高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化波棱瓜子中波棱芴酮的方法。方法:首先采用聚酰胺和硅胶柱色谱富集波棱芴酮,再用HSCCC进行分离制备,HSCCC最佳溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(4∶9∶6∶8,V/V),上相为固定相,下相为流动相,从200mg富集物中一次分离得到80mg纯度为98.3%的波棱芴酮,所得产物经ESI-MS和NMR鉴定结构。结论:本方法所得产物纯度高,重现性好,适合于波棱芴酮的制备型分离。     

高速逆流色谱法分离纯化松塔中的化学成分研究

目的为了寻找抗H IV活性单体化合物,研究华山松Pinus armandiiFranch.松塔的化学成分。方法应用高速逆流色谱仪,以正己烷-正丁醇-甲醇-水-乙酸(1:7:1:7:0.15,V/V)上相为固定相,下相为流动相,组成溶剂系统对华山松松塔的提取物行分离纯化。结果分离到两个化合物,根据理化性质和波谱数据,鉴定了它们的化学结构:4-(1,′2′-二羟基异丙基)环己烯甲酸(Ⅰ);4-羟基苯甲酸甲酯(Ⅱ)。结论首次采用制备型高速逆流色谱仪TBE2300A对华山松松塔的成分进行分离纯化,并首次从该属植物中分离化合物Ⅰ和Ⅱ。     

Preparative Separation of Four Alkaloids from Gelsemium elegans by High-speed Counter-current Chromatography

Objective To develop an efficient preparative method for the separation of Gelsemium alkaloids from Gelsemium elegans. Methods High-speed counter-current chromatography (HSCCC) with several two-phase solvent systems was investigated for the separation of Gelsemium alkaloids. The purity and structure identification of the purified compounds were performed with HPLC and NMR spectra, respectively. Results In a single operation, 206.6 mg of crude alkaloid sample was separated to yield 28.7 mg of koumine, 24.9 mg of gelsemine, 26.9 mg of humantenine, and 7.2 mg of gelsevirine, with the purities of 97.8%, 95.4%, 97.4%, and 93.5%, respectively. Conclusion A preparative HSCCC method is successfully established for the separation of four Gelsemium alkaloids from G. elegans with a modified two-phase solvent system composed of n-hexane-ethyl acetate-ethanol-0.5% triethylamine-H₂O (3:5:3:4).