烧伤后血清类触珠蛋白物质性质的确定

为进一步明确类触珠蛋白物质的性质,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,结果表明,过去发现的烧伤血清异常蛋白带是触珠蛋白的不同亚单位,即β、α~2和α~1链,提示类触珠蛋白物质可能即是血清触珠蛋白。进一步采用 SDS—PAGE、等电聚焦、免疫化学及生化等方法,对从正常血清及烧伤血清提取的触珠蛋白进行比较,发现烧伤血清触珠蛋白的分子量、等电点、结合血红蛋白的性质与能力以及免疫化学性质均与正常血清触珠蛋白相同。因此,认为过去发现的类触珠蛋白可能是血清触珠蛋白,烧伤后血清触珠蛋白的性质未发生改变。     

烧伤后血清类触珠蛋白物质性质的确定

为进一步明确类触珠蛋白物质的性质，采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析，结果表明，过去发现的烧伤血清异常蛋白带是触珠蛋白的不同亚单位，即β、α２和α１链，提示类触珠蛋白物质可能即是血清触珠蛋白。进一步采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、等电聚焦、免疫化学及生化等方法，对从正常血清及烧伤血清提取的触珠蛋白进行比较，发现烧伤血清触珠蛋白的分子量、等电点、结合血红蛋白的性质与能力以及免疫化学性质均与正常血清触珠蛋白相同。因此，认为过去发现的类触珠蛋白可能是血清触珠蛋白，烧伤后血清触珠蛋白的性质未发生改变。     

成人型多囊肾病的基因诊断

应用人１６号染色体上α－珠蛋白基因３’ＨＶＲ（Ｄ１６ｓ８５）为探针，对三个成人型多囊肾病（ＡＰＫＤ）家系进行限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）连锁分析，结果三个家系均对α－珠蛋白基因３’ＨＶＲ提供信息，并对家系３中一成员成功地进行了症状前诊断，确定该成员（１０岁）携带致病基因的风险为５％。说明α－珠蛋白基因３’ＨＶＲ探针可用于中国人群中ＡＰＫＤ的症状前诊断和产前诊断，同时证明此法是目前成人型多囊肾病症状前诊断和产前诊断最有效的手段。     

烧伤后血清类触珠蛋白物质性质的确定

为进一步明确类触珠蛋白物质的性质，采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析，结果表明，过去发现的烧伤血清异常蛋白带是触珠蛋白的不同亚单位，即βα＾２和α＾１链，提示类触珠蛋物质可能即是血清触珠蛋白，进一步采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，等电聚焦，免疫化学及生化等方法，对从正常血清及烧伤血清提取的触珠蛋白进行比较，发现烧伤血清触珠蛋白的分子量，等电点，结合血红蛋白的性质与能力以及免疫化学     

过表达COLIA1 cDNA腺病毒感染TT型成骨细胞株后 对其生物学性能影响的研究

目的本实验前期研究发现I型胶原α1链基因-1997G→T纯合突变可降低成骨细胞生物学性能。现利用基因重组技术提高TT型成骨细胞COLIA1基因mRNA的表达水平,观察能否逆转COLIA1基因-1997G→T突变对TT型成骨细胞生物学性能的影响。方法构建过表达COLIA1基因的腺病毒载体,并感染TT型成骨细胞。比较感染后TT型成骨细胞I型胶原α1链mRNA的表达水平、I型胶原的含量、细胞基质钙含量以及钙结节数量的差异。结果过表达COLIA1基因的腺病毒载体感染后,TT型成骨细胞I型胶原α1链mRNA的表达水平、I型胶原的含量、细胞基质钙含量以及钙结节数量较未感染组及空病毒组有显著提高,差异有统计学意义。结论利用腺病毒载体提高TT型成骨细胞的I型胶原α1链mRNA的表达水平,可增加I型胶原的含量、细胞基质钙含量以及钙结节数量。TT型成骨细胞I型胶原合成的减少导致细胞外基质减少,导致钙质沉着部位不足可能是-1997G/T患者BMD降低的原因。     

Ⅰ型胶原α1基因多态性与原发性骨质疏松症

既往研究表明原发性骨质疏松症 (ＯＰ)的发生与遗传因素有关[1 ] 。基因突变和基因多态性都可影响骨骼的生长发育和代谢 ,从而改变骨量、骨质量和骨转换等。近年的研究表明 ,除维生素Ｄ受体和雌激素受体基因多态性与骨密度(ＢＭＤ)的改变及原发性骨质疏松症的发生密切相关以外 ,Ⅰ型胶原α1(ＣＯＬⅠＡ1)基因多态性也与之密切相关。Ⅰ型胶原是骨有机质的主要成分 ,占 90 % ,由两条α1链和一条α2链交联而成。Ⅰ型胶原的代谢障碍必然影响骨钙的沉积 ,如基因突变导致胶原合成异常 ,可发生伴有不同程度骨质疏松的先天性成骨不全[2 ] 。本文综述…     

小鼠小肠移植术后排斥反应标志物研究

目的寻找小肠移植排斥反应的标志物,研究排斥反应的分子生物学机制.方法利用显微外科技术建立小鼠节段性小肠移植模型,采用逆转录定量聚合酶链式反应技术检测受体淋巴细胞中白细胞介素2受体(IL-2R)α链编码基因功能区的表达水平,并对反应产物进行DNA序列测定.结果小肠移植术后72h,异系移植组(津白Ⅱ号→BALB/c)受体鼠淋巴细胞IL-2Rα链功能区的转录水平(0.85±0.17)显著高于同系移植组(0.60±0.06)和假手术组(0.57±0.21).DNA序列测定证实PCR反应产物与IL-2Rα链功能区编码基因5'端序列相同.结论小肠移植早期IL-2Rα链编码基因mRNA的高表达是小肠移植排斥反应的主要启动因素和早期标志物,对所获得DNA片段进行的序列测定验证了反应产物的特异性.     

小儿血液病与脾外科(附119例分析)

先天性慢性进行性溶血性贫血,又称地中海贫血(下称地贫)。在我国华南地区是小儿地贫的高发区,广东籍者为最多。对我院收治的均已做脾切除术的119例各种小儿血液病患者进行了部分随访,获随访者43例,随访率为36.6%。被随访者男性24例,女性19例,除5例为血小板减少症外,均为地贫患者,随访年限为术后半年至22年不等。现就小儿血液病与脾切除术的有关问题总结如下。     

061氯胺酮抑制内毒素诱导的细胞核因子κB表达

细胞核因子κB(NF-κB)是转录多种基因时所必需的诱导型转录因子,包括促炎细胞因子、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及白细胞介素6和8(IL-6,IL-8)的编码。大多数细胞质(包括脑细胞)含有潜伏性NF-κB蛋白并作为一种无活性的P50蛋白和P65蛋白异源体与抑制蛋白IκB相结合而共存。细胞与TNF-α或脂多糖(LPS,内毒素)接触引起包含体(IB)降解,则许可游离B蛋白易位进入细胞核并激活DNA链成为特殊基因编码,例如TNF-α基因。接着细胞内TNF-α基因增多,引起TNF-α mRNA转录.结果导致一系列细胞过程并释放TNF-α。     

小儿异基因骨髓移植六例报告

对４例重症β地中海贫血患儿及２例重症再生障碍性贫血患儿进行异基因骨髓移植，患者年龄１１个月至１０岁。供受者ＨＬＡ全相合１例，亲子之间半相合或１个位点不相合５例。３例术后查得植活证据，持久性植活，１例长期无病生存。对影响植入的因素，如ＨＬＡ匹配程度、预处理方案、移植物抗宿主病及感染的防治措施及小儿骨髓移植中的一些问题进行了讨论。     

退变椎间盘聚集蛋白聚糖中硫酸软骨素链变化的实验研究

目的：研究内破裂及突出椎间盘细胞合成的聚集蛋白聚糖中硫酸软骨素链（CS）在长度及数量分布上的变化.方法：将正常椎间盘、内破裂（IDD）及突出椎间盘（LIDP）髓核或纤维环的组织20mg培养于24孔板中,用放射性同位素35S-硫酸盐和3H-丝氨酸标记新合成的蛋白聚糖分子.将聚集蛋白聚糖单体从培养的组织片中提取,用四氢硼酸钠或木瓜蛋白酶消化后,凝胶包谱分析硫酸软骨链的变化特征.结果：IDD椎间盘组织内细胞合成的聚集蛋白聚糖内CS链的数量明显减少,但长度保持相对正常;突出椎间盘组织中CS的数量和长度有明显下降和缩短,CS链数量的减少较IDD组织中更为严重.结论：IDD组织合成CS的减少主要是由于生成的CS链数量减少所致,而数量的进一步减少以及CS链长度的缩短是LIDP组织中CS合成量下降的主要原因.     

脾切除治疗地中海贫血综合征的远期疗效、感染与免疫研究

地中海贫血综合征为分子遗传性疾病,其溶血机理颇为复杂,且无特效疗法。某些地中海贫血综合征,脾切除治疗可以减轻血管外溶血,临床上贫血得到改善,患者能够恢复一般工作或劳动,在我国易于推广应用。我院以脾切除治疗30例HbH病和11例HbE—β地中海贫血,39例于术后追踪观察4个月至5年,其中29例HbH和10例HbE—β地贫的Hb分别平均增加     

HIV感染患者外周血T淋巴细胞CD127表达的研究进展

白细胞介素7受体（IL-7R）是由α链及γ链构成的,γ链受体广泛表达于淋巴细胞,是IL-2、IL-4、IL-9、IL-15和IL-21的通用受体,可以与这些细胞因子结合并相互作用.CD127是IL-7Rα链,在T淋巴细胞发育过程中,胸腺细胞的分化依赖于IL-7的表达.IL-7可以通过CD127刺激外周非同种异基因反应性T淋巴细胞的增殖,并通过抗凋亡作用促进T淋巴细胞的存活与重构,维持T淋巴细胞内环境稳态[1].     

非小细胞肺癌血清蛋白质标志物的检测及鉴定

目的 运用蛋白组学技术检测非小细胞肺癌(NSCLC)特异性的血清蛋白标志物,并验证联合应用标志物对非小细胞肺癌的检出效能.方法 运用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)等蛋白组学技术对112例非小细胞肺癌患者和123例对照者血清的蛋白质谱进行分析检测,并对差异性峰值进行鉴定,随后运用蛋白质抗体芯片对检测出的特异性蛋白质标志物进行验证,并衡量标志物的联合检出效能.结果 质荷比峰值为6628、9191、11 412的3个蛋白质构建了具有高区别能力的非小细胞肺癌判别模型.质荷比为6628的蛋白鉴定为载脂蛋白C-I,在非小细胞肺癌血清中下调;质荷比为9191和11 412的蛋白分别鉴定为触珠蛋白α-1链和S100A4蛋白,在非小细胞肺癌血清中上调.三者的联合应用在盲法检测组中的敏感性和特异性分别为96.56％和94.79％.结论 载脂蛋白C-I、触珠蛋白α-I链和S100A4蛋白作为非小细胞肺癌特异性的血清蛋白质标志物,可以用于非小细胞肺癌的早期诊断.     

Ⅳ型胶原与肾脏疾病

细胞外基质在肾小球硬化中的作用已成为热门话题，作为ＥＣＭ的主要成分－Ⅳ型胶原也受到广泛重视，目前发现Ⅳ型胶原在肾小球硬化时合成及分泌明显增加；在Ａｌｐｏｒｔ综合征及Ｇｏｏｄｐａｓｔｕｒｅ综合征存在Ⅳ型胶原α链基因突变或结构异常，本文就Ⅳ型胶原分子结构，编码基因，在肾组织中的分布以及Ⅳ型胶原在肾脏疾病中的改变加以综述。     

汉族人和法国人Ⅰ型胶原α链Spl结合序列MscⅠ酶切位点基因多态性的比较

目的　了解中国汉族人和法国人Ⅰ型胶原α链Spl结合序列MscⅠ酶切位点基因多 态性分布的异同。方法　对96例中国汉族人和78例法国人用DXA骨密度仪进行BMD测量,同时 采集全血并抗凝保存。用聚合酶链式反应、限制性酶切技术对Ⅰ型胶原α链Spl结合序列基 因型进行分析。结果　96例汉族人的基因型均为SS,78例法国人的基因型为53例SS、22例S s和3例ss,经Fisher χ2检验,显示差异有非常显著性(P＜0.01) 。结论　汉族人和法国人的Ⅰ型胶原α链Spl结合序列MscⅠ酶切位点基因多 态性显著不同。汉族人Ⅰ型胶原α链Spl结合序列MscⅠ酶切位点稀少。     

汉族人和法国人I型胶原α链Spl结合序列MscI酶切位点基因多态性的比较

目的：了解中国汉族人和法国人I型胶原α链Spl结合序列Msc I酶切位点基因多态性分布的异同。方法：对96例中国汉族人和78例法国人用DXA骨密度仪进行BMD测量,同时采集全血并抗凝保存。用聚合敏链式反应、限制性酶切技术对I型胶原α链Spl结合序列基因型进行分析。结果：96例汉族人的基因型均为SS,78例法国人的基因型为53例SS、22例Ss和3例ss,经Fisherχ^2检验,显示差异有非常显著性（P＜0.01)。结论：汉族人和法国人的I型胶原α链Spl结合序列MscI酶切位点基因多态性显著不同。汉族人I型胶原α链Spl结合序列Msc I酶切位点稀少。     

α地中海贫血孕妇妊娠期血红蛋白、平均红细胞体积及平均红细胞血红蛋白量变化相关临床分析

目的了解不同类型α地中海贫血(Thalassemia)孕妇妊娠早中晚期血红蛋白(hemoglobin;haemoglobin,Hb)、平均红细胞体积(erythrocyte mean corpuscular volume,MCV)、平均红细胞血红蛋白量(mean corpuscular hemoglobin,MCH),并探讨上述指标的变化。方法选取2013年7月至2014年10月在我院产检的α地贫孕妇263例,分为中间型组、轻型组、静止型组,对照组随机选取周期健康孕妇100例。记录孕早中晚期Hb、MCV、MCH值。结果在同一孕期,中间型组、轻型组、静止型组及对照组的Hb值和MCV值依次显著上升(P0.05);中间型组MCV值显著高于轻型组,两者均低于静止型组及对照组(P0.05),而轻型组、静止型组和对照组的MCH值依次显著上升(P0.05)。结论中间型及轻型α地中海贫血孕妇Hb下降较明显,应注意监测;α地中海贫血孕妇MCV及MCH值出现变化,均低于正常值,将Hb、MCV、MCH联合进行地中海贫血筛查可提高准确性。     

骨质疏松与Ⅰ型胶原的代谢

1．1 Ⅰ型胶原的合成 Ⅰ型胶原基因在成骨细胞内转录、剪接成前α链mRNA,转译出前α肽链,三条前α肽链组成前胶原。前胶原N端、C端的多余肽链被切下,为PINP(Ⅰ型胶原前胶原氨端肽原)和PICP,进入血液,余下部分成为原胶原。原胶原被分泌到细胞外,相互聚集形成排列规律紧密的胶原纤维。各分子间逐渐形成共价键连接,成为成熟的胶原纤维。     

儿童Dent病临床特点及CLCN5基因突变分析

目的 Dent病是一种罕见的X连锁隐性遗传性肾小管疾病,通过探讨儿童Dent病的临床特点和基因特征,旨在提高对儿童Dent病的认识。方法通过分析3例Dent病患儿的临床资料和CLCN5基因检测结果,复习相关文献,以了解Dent病的表型和基因型,并总结经验。结果 3例患儿的发病年龄1~5岁,确诊年龄1~7岁,首发症状为大量蛋白尿,且证实为低分子蛋白尿,伴有不同程度的高钙尿症,均有镜下血尿。3例患儿的乳酸脱氢酶均正常,均无高血压,无肾功能不全,无贫血,无肾结石或肾钙质沉着症,无肾小管酸中毒,无佝偻病,无矮小症,无智力低下,眼科检查正常,无氨基酸尿及糖尿,无肾脏疾病或尿石症家族史,血清尿素氮、肌酐、白蛋白、钾、钠、氯、钙、镁、磷均正常。基因检测发现3种突变,2例错义突变,1例移码突变,3例患儿均为新生突变;其中c.779GA突变位点为既往文献报道过的位点,另外发现两个新的突变位点c.1711CT(E12),c.458(E7)_c.459(E7)insA,既往文献无报道,为新的突变。结论儿童Dent病临床表现多样,并且临床表现和病程长短有关,通过基因检测可以确诊Dent病。早期发现、早期诊断,可以避免过度免疫抑制及治疗。