细胞周期蛋白D1在听神经瘤中的表达及临床意义

目的评估听神经瘤中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达及其与组织学特点、临床听力学特征的相关性。方法回顾性分析病理学上确诊听神经瘤的17例患者组织切片,进行组织病理学分型(Antoni分型)和免疫组织化学染色分析Cyclin D1的表达,结合临床一般资料与听力学检测数据并分析其相关性。结果 17例患者组织切片中有9例(53%)Cyclin D1阳性表达,与Cyclin D1表达阴性的患者相比,语频平均听阈(PTA)的平均值较低(P<0.05),Cyclin D1表达阳性的患者在2 000 Hz频率平均听阈较低(P<0.05)。没有发现Cyc-lin D1的表达与性别、侧别和病理分型相关(P>0.05)。结论 Cyclin D1可能在听神经瘤的细胞增殖与分化调节过程中发挥重要的作用,进一步观察Cyclin D1在听神经瘤细胞增殖与分化调节过程中的作用,对探讨听神经瘤的发生发展有着重要的意义。     

脑胶质瘤组织中的细胞周期分析与意义

目的：探讨脑胶质瘤组织中细胞周期蛋白（Cyclin D1、Cyclin A、Cyclin B1）和核分裂特异性抗体（PHH3）的表达规律,方法：采用免疫组化S-P法检测Cyclin D1、Cyclin A、Cyclin B1、PHH3在59例脑胶质瘤组织（Ⅰ级10例、Ⅱ级15例、Ⅲ级15例、Ⅳ级19例）和37例正常脑组织中的表达情况。结果：Cyclin D1、Cyclin A、Cyclin B1、PHH3在正常脑组织中不表达。胶质瘤组织中Cyclin D1、Cyclin A、Cyclin B1、PHH3的表达阳性率分别为69.5%、69.5%、62.7%、84.7%。随着胶质瘤级别升高,Cyclin D1、Cyclin A、Cyclin B1、PHH3的平均标记指数升高,4级脑胶质瘤中Cyclin D1、Cyclin A、Cyclin B1、PHH3的阳性标记指数比较差异有统计学意义(P< 0.01)。结论：可通过免疫组织化学法分析细胞周期的数据,这有利于肿瘤分级,并与预后相关。     

细胞周期蛋白在三阴型和激素依赖型乳腺癌中的差异表达及临床意义

目的：观察细胞周期蛋白（ Cyclin）家族成员在三阴型乳腺癌（ triple-negative breast cancer,TNBC）和激素依赖型乳腺癌中的表达情况,筛选差异表达 Cyclin,探讨其与 TNBC 临床病理参数的关系及对预后判断的指导意义。方法收集2008年1月—2014年5月沈阳军区总医院乳腺癌手术切除组织,选出65例 TNBC 组织和45例激素依赖型乳腺癌组织,应用实时荧光定量 PCR 检测 Cyclin 的基因表达,分析 Cyclin 在两种类型乳腺癌中的差异表达,筛选出特异性表达的 Cyclin 成员,并在乳腺癌组织样本中进行免疫组织化学染色检测及结果验证。应用统计学方法分析 Cyclin 表达与 TNBC 患者临床和病理资料及其与总体生存期之间的关系。结果 Cyclin G1和 Cyclin D1的 mRNA以及蛋白在 TNBC 组织中的表达高于激素依赖型乳腺癌组织（P ﹤0.05,P ﹤0.01）。临床分析显示 Cyclin G1和 Cyclin D1蛋白表达均与 TNBC 患者的绝经情况、淋巴结转移、P53表达和复发转移有相关性（ P ﹤0.05）。Cyclin G1和 Cyclin D1蛋白高表达的 TNBC 患者其总体生存期均小于低表达的 TNBC 患者（ P ﹤0.05）。结论 Cyclin G1和 Cyclin D1基因可能参与 TNBC 的发生和发展;Cyclin G1和 Cyclin D1蛋白的表达可能成为 TNBC 预后预测的指标。     

塞来昔布上调Cyclin D1基因甲基化水平对食管癌细胞增殖和凋亡的抑制作用

目的探究塞来昔布通过上调Cyclin D1基因甲基化水平对食管癌细胞增殖和凋亡的作用及机制。方法将细胞分为对照、转染和塞来昔布组,分别转染阴性对照载体、Cyclin D1过表达载体和Cyclin D1转染后给予60μmol/L塞来昔布。采用MTT法、流式细胞术分别检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡率的变化,Western blotting法检测细胞周期和细胞凋亡相关蛋白表达水平;甲基化特异性PCR(MS-PCR)、qRT-PCR法用于检测Cyclin D1甲基化特异性扩增片段和Cyclin D1 mRNA表达水平。结果塞来昔布能够抑制Cyclin D1诱导的细胞体外增殖,阻滞细胞周期向S期转化,并促进食管癌细胞凋亡;MS-PCR结果显示塞来昔布能够上调Cyclin D1基因甲基化水平,在转录水平抑制细胞内Cyclin D1 mRNA的表达。结论塞来昔布能够通过上调Cyclin D1基因甲基化水平发挥抑制食管癌细胞增殖、促进其体外凋亡的作用。     

Cyclin D1和CIC-3在鼻咽癌细胞周期调控中的相互关系

目的研究氯通道ClC-3和Cyclin D1在鼻咽癌细胞周期调控中的相互关系，探讨ClC-3参与细胞周期调控的可能机制。方法MTT法检测ClC-3反义寡核苷酸对鼻咽癌细胞增殖能力的影响，流式细胞仪测定细胞周期分布。用反义技术分别抑制细胞内ClC-3和Cyclin D1的表达，用RT-PCR检测目的基因的表达情况。结果40μg／ml ClC-3反义寡核苷酸能明显抑制鼻咽癌细胞的增殖．胞内ClC-3的表达下调对Cyclin D1表达没有影响，而Cyclin D1的表达下调则抑制鼻咽癌细胞ClC-3的表达。结论氯通道ClC-3参与了鼻咽癌细胞的周期调控，Cyclin D1可能位于该调控通路的上游。     

Cyclin D1和ClC-3在鼻咽癌细胞周期调控中的相互关系

目的 研究氯通道CIC-3和Cyclin D1在鼻咽癌细胞周期调控中的相互关系,探讨CIC-3参与细胞周期调控的可能机制.方法 MTT法检测CIC-3反义寡核苷酸对鼻咽癌细胞增殖能力的影响,流式细胞仪测定细胞周期分布.用反义技术分别抑制细胞内CIC-3和Cyclin D1的表达,用RT-PCR检测目的 基因的表达情况.结果 40μg/ml CIC-3反义寡核苷酸能明显抑制鼻咽癌细胞的增殖,胞内CIC-3的表达下调对Cyelin D1表达没有影响,而Cyclin D1的表达下调则抑制鼻咽癌细胞CIC-3的表达.结论 氯通道CIC-3参与了鼻咽癌细胞的周期调控,Cyclin D1可能位于该调控通路的上游.     

Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响

目的观察Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及细胞周期的影响。方法组织贴块法培养大鼠VSMC细胞,采用TNF-α诱导其增殖,加入不同浓度的Roscovitine预处理15 h,将细胞分为:对照组、TNF-α组、Roscovitine 5、10、15、30μmol·L~(-1)组。MTT比色法检测细胞增殖活性;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA);流式细胞仪检测细胞周期;荧光定量RT-PCR及Western blot检测细胞周期蛋白(Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4、CDK5)、细胞周期抑制蛋白(p53、p21、p27)的表达。结果 Roscovitine能抑制VSMC增殖;抑制细胞周期从G_0/G_1期向S期转化。与TNF-α组比较,Roscovitine 5、10、15、30μmol·L~(-1)组能降低细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E蛋白表达,降低细胞周期蛋白依赖激酶CDK4、CDK5蛋白表达,升高细胞周期抑制蛋白p53、p21、p27蛋白表达(P<0.05)。结论 Roscovitine可抑制大鼠VSMC细胞周期进程及增殖活性。     

Cyclin D1在胰腺癌中的表达及意义

目的检测Cyclin D1在胰腺癌中的表达,探讨其在胰腺癌中的作用。方法收集50例原发性胰腺癌组织标本和36例癌旁组织,采用免疫组织化学法、逆转录荧光定量PCR法、蛋白免疫印迹检测胰腺癌及癌旁胰腺组织中Cyclin D1的表达;并分析Cyclin D1表达与胰腺癌生物学行为的关系。结果 Cyclin D1在胰腺癌组织中出现较高表达;Cyclin D1的表达与胰腺癌的病理组织分级、增殖活性、肿瘤转移和临床分期关系密切,与年龄、性别、发病部位、生存时间无关。结论 Cyclin D1高表达与胰腺癌的发生发展有关。     

苦参碱对人前列腺癌PC-3M细胞周期与凋亡的影响

目的研究苦参碱(MR)对人前列腺癌PC-3M细胞周期与凋亡的影响。方法稳定培养PC-3M细胞株系,经0(空白组)、30、60、120μM浓度MR给药72 h后,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MR对PC-3M抑制率,碘化丙啶(PI)染色检测细胞形态学的变化,免疫组织化学法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达,Western blot法检测细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化蛋白水平。结果与空白组比较,MR给药后有效抑制PC-3M的细胞增殖(P<0.01),并促进癌细胞凋亡。同时,MR能显著减少Cyclin D1的表达以及下调内源性p-ERK1/2水平(P<0.01)。结论苦参碱可发挥有效的抗癌作用,推测其机制为抑制癌症细胞增殖并介导细胞凋亡,以及抑制内源性ERK1/2/Cyclin D1通路。     

肝细胞肝癌组织中Cyclin D1与HSP70的表达及意义

目的:探讨细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)与热休克蛋白70(hot shock protein70,HSP70)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及意义。方法:以石蜡包埋组织芯片为材料,分别检测145例HCC、78例肝硬化和16例来自尸检的正常肝组织标本的Cyclin D1和HSP70的表达。结果:Cyclin D1和HSP70在HCC中的平均表达指数分别为3.43±2.11和3.18±2.13,显著高于肝硬化组及正常对照组1.51±2.19和1.04±1.85及0和0.75±1.39,差异有统计学意义(q分别为6.29、4.13、6.62及7.39,均P<0.01)。Cyclin D1表达与HSP70表达呈正相关(r=0.219,P<0.01)。结论:Cyclin D1与HSP70过度表达,在HCC癌变中起重要作用。     

FLNA和细胞周期素D1在乳腺浸润性导管癌组织中表达

目的 探讨细丝蛋白A(FLNA)和细胞周期素D1在乳腺浸润性导管癌组织中表达.方法 免疫组织化学方法检测68例乳腺浸润性导管癌组织标本和30例非癌乳腺组织标本中FLNA和细胞周期素D1的表达,分析两者表达相关性及其与临床病理特征的关系.结果 68例乳腺浸润性导管癌组织中,FLNA和细胞周期素D1的阳性表达率分别为50.0％和48.5％.FLNA和细胞周期素D1在非癌乳腺组织中呈阴性或弱表达.FLNA和细胞周期素D1表达均与肿瘤淋巴结转移和TNM分期密切相关(P＜0.01和P＜0.05).FLNA和细胞周期素D1蛋白表达呈正相关(r=0.324,P＜0.01).结论 FLNA可能通过上调细胞周期素D1表达而影响乳腺浸润性导管癌的发生和发展.     

食管鳞癌中周期素D1和生存素的表达及预后价值

目的 探讨细胞周期素D1(cyclin D1)和生存素(survivin)的表达与食管鳞癌临床病理因素和预后的相关性.方法 应用免疫组织化学方法 检测80例食管鳞癌中周期素D1和生存素的表达.结果 细胞周期素D1和生存素阳性率分别为61.25%和65.00%.细胞周期素D1和生存素的表达均与淋巴结转移、TNM分期呈正相关(P<0.05).生存素还与癌组织学分级有关(P<0.05),且与细胞周期素D1表达亦呈正相关(P<0.01).多因素(Cox比例风险模型)生存分析显示食管鳞癌细胞周期素D1和生存素均是独立的预后因素(P<0.05).结论 细胞周期素D1和生存素均存食管鳞癌中高表达.均是影响预后的主要因素.     

索拉非尼联合塞来昔布在体外对肝癌HepG2细胞的影响

目的研究索拉非尼联合塞来昔布在体外对肝癌Hep G2细胞增殖的影响。方法以不同浓度索拉非尼和塞来昔布分别组成单药组和联合用药组作用于Hep G2细胞,MTT法检测增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期。Western blot检测Cyclin D1、Cyclin D3、CDK4蛋白的表达。结果索拉非尼、塞来昔布单药与联用均能抑制Hep G2细胞增殖,呈时间-剂量依赖效应,两药联用有协同效应(P<0.05)。药物组与空白组相比,G0/G1期细胞比例增高,联合用药组最高。联合用药组与单药及空白对照组相比,Hep G2细胞中Cyclin D1、Cyclin D3蛋白的表达显著降低。结论索拉非尼联合塞来昔布可能通过下调Cyclin D1、Cyclin D3表达,增强G0/G1期阻滞,发挥协同抑制Hep G2细胞增殖的作用。     

黄芩苷抑制胃癌细胞SGC-7901增殖及机制研究

目的研究黄芩苷对人胃癌细胞SGC-7901增殖抑制作用及分子机制研究。方法将细胞随机分为对照组,3个浓度(50,100,200μmol·L^-1)黄芩苷组,噻唑蓝法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞周期;分光光度法检测细胞中天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase 3）活性;免疫印迹法分析细胞周期蛋白（Cyclin A1）、Cyclin D1、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白含量表达及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）通路的激活状况。结果与对照组比较,3个浓度黄芩苷可显著抑制SGC-7901细胞活力（P<0.05）,上调Bax表达,而下调Bcl-2、Cyclin D1表达及AKT磷酸化水平（P<0.05）,使SGC-7901细胞周期阻滞在G1期（P<0.05）,并提高Caspase 3活性（P<0.05）。100,200μmol·L^-1黄芩苷可显著抑制Cyclin A1及PI3K表达量。结论黄芩苷可通过阻断PI3K/AKT信号通路的激活及下游相关分子的表达,进而抑制胃癌SGC-7901细胞增殖。     

Cyclin D1表达异常与肿瘤的发生及预后

<正>Cyclin D1基因位于染色体11q13,长度为120kb。Cyclin D1作为原癌基因,在调节细胞从G1期进入S期中发挥重要作用[1]。在G1→S期的转换中,Rb蛋白与转录因子E2F结合,像闸门一样抑制G1→S期转换,但是Rb蛋白的细胞周期抑制功能可以通过磷酸化作用被解除。     

涎腺黏液表皮样癌中P53、Bcl-2蛋白和Cyclin D1的表达及临床意义

目的探讨P53蛋白、肿瘤抗凋亡蛋白Bcl-2和Cyclin D1在涎腺黏液表皮样癌（MEC）中表达的临床意义。方法采用免疫组织化学方法,分别检测P53、Bcl-2及Cyclin D1在26例MEC和15例多形性腺瘤（PAS）中的表达情况。结果P53和Cyclin D1在PAS组中无表达,在MEC组中阳性表达率分别为62%及73%,与对照组（PAS）比较差异有统计学意义（P〈0.01）。Bcl-2在PAS组中表达率为47%,MEC组中表达率为60%,比较差异无统计学意义（P〉0.05）。MEC组中P53和Cyclin D1表达与临床分期、组织分级和有无淋巴结转移组间比较差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）;Bcl-2表达在临床分期组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,在组织分级和有无淋巴结转移组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论联合检测P53、Bcl-2和Cyclin D1有助于评价肿瘤患者的预后。     

小檗胺对人肝癌SMMC-7721细胞增殖作用及其机制的初步研究

目的：研究小檗胺对人肝癌SMMC-7721细胞增殖作用的影响及可能的机制。方法：经不同浓度小檗胺处理体外培养的肝癌SMMC-7721细胞,采用MTT法检测细胞增殖的变化;采用PI染色法检测肿瘤细胞周期分布的变化;采用RT-PCR和Western blot法检测肿瘤细胞中Cyclin B1、Cyclin D1、p21和p27的表达水平。结果：与溶剂对照组比较,不同浓度的小檗胺均可明显抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖。PI染色结果显示,小檗胺可明显地诱导肝癌细胞周期阻滞于G₀/G₁期（P<0.05）。RT-PCR和Western blot结果均显示,应用小檗胺处理肿瘤细胞后,p21和p27的表达明显升高,而Cyclin B1和Cyclin D1的表达水平明显下降（P<0.05）。结论：小檗胺能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,并使其细胞周期阻滞于G₀/G₁期,其机制可能与其上调p21和p27的表达和下调Cyclin B1和Cyclin D1的表达有关。     

结肠癌中KLF5表达与Cyclin D1和PCNA及P53的关系及意义

目的通过检测转录因子KLF5蛋白和细胞周期素D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、P53蛋白在结肠癌组织中的表达,对KLF5在结肠癌细胞增殖过程中的意义进行探讨。方法对48例结肠癌和30例癌旁组织石蜡标本进行免疫组化染色,检测KLF5与Cyclin D1、PCNA、P53在两种组织中的表达情况,并分析其关系。结果结肠癌组织中KLF5、Cyclin D1、PCNA表达均强于癌旁组织(均P<0.05),P53在两种组织中表达无明显差异(P>0.05)。相关分析显示,结肠癌组织中KLF5与Cyclin D1之间、KLF5与P53之间表达存在正相关关系(P均<0.05);Cyclin D1与PCNA表达也存在正相关关系(P<0.05),Cyclin D1与P53、PCNA与P53之间表达均无明显相关关系(P>0.05)。结论结肠癌组织中KLF5表达上调,这与KLF5可能通过调节CyclinD1、P53表达而参与结肠癌细胞增殖有关。     

细胞周期蛋白D1在卵巢子宫内膜异位症中的表达及意义

子宫内膜异位症多发生于生育期女性,目前发病机制仍然不十分清楚.细胞周期蛋白D1(cyclinD1)是重要的细胞周期调控因子,与肿瘤的形成密切相关.本研究采用免疫组织化学的方法检测子宫内膜异位症中cyclinD1蛋白表达,分析其在卵巢子宫内膜异位症发病过程中的作用及与临床分期的关系.