去甲肾上腺素性心肌损伤和保护

本文利用培养的人胚心肌细胞和组织,以及器官培养的小鼠胎心,探讨一次大剂量NA(20ng/ml)性心肌损伤及保获因素,为阐明NA性心损的机理及有效的防治提供一些实验根据。     

基于coif5小波的多普勒胎心音信号提取算法的研究

胎心率监护是围产期胎儿监护的关键技术指标，超声多普勒测量胎心率是最常用的无创方法。由于胎心多普勒信号具有信噪比低、非平稳的随机性特点，提出基于coif5小波，结合双重阈值方法的胎心音信号提取算法。实验表明，该算法有效地解决了由于胎心率加倍、减半所引起的胎心率曲线翻转问题，提高了多普勒胎心音信号提取的准确性。     

一种胎心率基线修正算法

对于胎心率分析和胎儿状况评估而言,胎心率基线估计十分重要。为了使现有胎心率基线更为准确、更符合胎心率曲线,本文提出了一种胎心率基线修正算法。首先,本算法找出并修正现有胎心率基线中的偏差部分,再对整条基线进行多次平滑,最后得到修正后的基线。为了评估基线修正算法的性能表现,本文将一种胎心率基线估计算法和基线修正算法结合在一起,并与两种现有的基线估计算法进行了比较。结果表明,包含基线修正算法在内的基线评估算法在分析准确性、运算效率方面均有不错表现,这也证实基线修正算法的有效性。     

AchR或ConA诱导正常人淋巴细胞培养上清治疗EAMG的研究

观察乙酰胆碱受体 (AchR )或刀豆蛋白 (ConA )诱导的正常人淋巴细胞培养上清对小鼠实验性重症肌无力模型 (EAMG )的疗效。分别用AchR或ConA诱导体外培养的正常人淋巴细胞 ,收集培养上清治疗EAMG小鼠。治疗前后用ELISA和微量细胞毒试验检测小鼠血中AchRAb的含量和T细胞亚群的变化 ,并检测小鼠的肌电图。结果显示 ,经两种培养上清治疗后 ,EAMG小鼠血中AchRAb水平明显下降 ,CD8+ 细胞数量显著增多 ,CD4+ /CD8+ 比值明显降低 ,且小鼠肌电图也明显改善。本文提示AchR或ConA诱导的正常人淋巴细胞培养上清对EAMG小鼠有一定疗效 ,并探讨了其可能的作用机制和潜在的应用价值。     

胎心率计算机分析方法的进展

胎心率监护是围产期胎儿监护的一项重要内容。以往对胎心率的诊断只是通过肉眼识别、手工测量与计算来得出大致的胎心率监护指标,以此来预测胎儿的健康状况和储备情况。随着计算机技术的迅速发展,基于计算机的各种新的分析方法也逐步用于对胎心率的分析和研究中,使得胎心率能够更准确地反映胎儿状况,提高胎心率监护的临床价值。本文综述了目前用于胎心率分析的各种方法     

雌激素对小鼠骨髓间充质干细胞凋亡的抑制作用及其机制研究

目的:检测雌激素浓度与小鼠骨髓间充质干细胞(mBMMSCs)凋亡的相关性,初步探讨雌激素调节mBMMSCs凋亡的分子机制。方法:构建雌性C57BL小鼠去势模型,模拟绝经期妇女低雌激素体质。分别取去势和假手术组小鼠以及正常小鼠mBMMSCs进行原代分离、培养和鉴定。利用流式细胞术(FCM)比较去势和假手术两组细胞的凋亡差异,以及不同雌激素浓度培养条件对正常C57BL小鼠mBMMSCs凋亡的影响。参考文献中芯片结果,利用实时定量PCR方法检测miR-21在去势组及假手术组mBMMSCs中的表达差异,以及不同雌激素浓度培养条件下正常小鼠mBMMSCs中miR-21的表达差异。结果:成功构建了去势小鼠模型。利用FCM证实去势小鼠骨髓间充质干细胞在体外培养的过程中较假手术组更易凋亡。正常小鼠mBMMSCs体外培养过程中,随着雌激素浓度的升高,其凋亡减少。去势鼠来源mBMMSCs中miR-21表达量低于假手术组来源mBMMSCs。高浓度雌激素培养液培养的mBMMSCs中miR-21表达高于低浓度雌激素培养液培养的mBMMSCs。结论:雌激素对mBMMSCs的凋亡具有抑制作用,miR-21可能参与这一过程。     

胎心率远程监护系统的中心站设计

本文介绍了一种基于电话网的胎心率远程监护系统,它主要由前端胎心率检测仪、医院中心站组成。中心站通过Ｍｏｄｅｍ和公共电话网接收前端胎心率检测仪的数据,并对数据进行计算机辅助分析,在医生的参与下完成诊断过程。     

小鼠肾小管上皮细胞的原代培养及鉴定

目的 建立小鼠肾小管上皮细胞(mRTECs)原代培养、传代及鉴定的方法.方法 采用肾小管节段贴块培养法与3种消化培养法(胰蛋白酶、胰蛋白酶 EDTA、胶原酶Ⅰ)进行小鼠肾小管上皮细胞原代培养,锥虫蓝染色后镜下观察消化后细胞成活率、细胞形态和数量.胰蛋白酶消化传代,以免疫细胞化学方法鉴定细胞种类.结果 贴块法和胶原酶Ⅰ消化培养法均能成功培养小鼠肾小管上皮细胞,两者相比,胶原酶Ⅰ消化培养法培养的细胞生长更快.结论 胶原酶Ⅰ消化培养法是小鼠肾小管上皮细胞原代培养的理想方法.     

小鼠睾丸间质细胞体外原代培养方法的建立

背景：组织块培养睾丸生殖细胞对污染不容易控制,胰蛋白酶消化接种培养睾丸生殖细胞可能损伤细胞。 目的：建立一种切实可行的小鼠睾丸间质细胞体外原代培养方法。 方法：小鼠睾丸间质细胞的分离采用胶原酶消化法,纯化采用Percoll等密度梯度离心法,活率鉴定采用锥虫蓝拒染法,纯度鉴定采用3β-羟基固醇脱氢酶染色方法。 结果与结论：小鼠睾丸间质细胞纯度达可达90%以上;体外培养的细胞形态完整、增殖速度快、贴壁生长状态良好。说明实验成功建立了小鼠睾丸间质细胞的体外原代培养模型。     

胎心监护对诊断胎儿窘迫的应用

目的 探讨电子胎心监护与胎儿窘迫及剖宫产率之间的关系.方法 回顾分析5633例住院分娩孕妇的胎心电子监护图形.结果 发现胎心监护图形异常者485例,其中283例考虑胎儿窘迫行剖宫产术,术中发现异常因素者211例,未发现异常因素者72例.胎心基线变异明显减弱或消失、重度变异减速、延长减速及晚期减速者发生羊水粪染、脐带缠绕及新生儿窒息比例明显高于其它胎心监护图形异常者.结论 电子胎心监护能早期发现胎儿窘迫,但是,单凭胎心监护图形异常作为胎儿窘迫诊断会出现假阳性判断,当出现异常图型时,应严密监护,根据胎心率异常的程度及胎儿能够娩出的时间选择恰当的分娩方式,可减少围产儿病死率.     

小鼠睾丸间质细胞分离培养方法的研究进展

小鼠睾丸间质细胞是目前医学研究的常用细胞.高纯度的分离、纯化及体外培养小鼠睾丸间质细胞对于相关研究的开展至关重要.本文对目前常用的几种小鼠睾丸间质细胞分离、纯化和体外培养方法以及各类方法的原理进行了综述.     

小鼠饲养层细胞制备与小鼠胚胎干细胞SF1-G的培养

背景:小鼠胚胎干细胞系SF1-G是由雌性C57BL/6小鼠与雄性M.spretus小鼠交配后,取桑葚胚期胚胎在STO饲养层细胞上分离培养获得,STO细胞较昂贵,而由小鼠胚胎成纤维细胞制备的饲养层细胞不仅取材容易,而且形成胚胎干胞的克隆率、维持胚胎干细胞正常核型的能力均比STO细胞要好一些,因此,建立一种适宜SF1-G细胞扩增的培养体系,保持其未分化状态生长是充分利用胚胎干细胞资源的前提。目的:建立有效的小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养及胚胎干细胞饲养层细胞制备体系;以建立有效的小鼠胚胎干细胞(SF1-G细胞)扩增培养体系。方法:从孕12.5～14.5d的ICR小鼠分离培养原代小鼠胚胎成纤维细胞;取3～5代的小鼠胚胎成纤维细胞,以丝裂霉素C抑制其增殖能力制备饲养层细胞;在饲养层细胞上增殖培养SF1-G细胞;染色体G显带分析法检测SF1-G细胞核型,SF1-G细胞碱性磷酸酶染色和RT-PCR检测Oct4、Nanog基因表达。结果与结论:从孕鼠胚胎有效分离到小鼠胚胎成纤维细胞,以3～5代细胞制备的饲养层细胞能够支持胚胎干细胞SF1-G呈边界清晰的克隆样生长。染色体核型检测SF1-G保持正常核型,碱性磷酸酶、表面标志物检测均呈阳性。实验建立了有效的小鼠胚胎成纤维细胞分离培养体系,并制备供胚胎干细胞进行增殖培养饲养层细胞体系,能够在实验室对SF1-G细胞保持正常未分化状态培养。     

基于MyDAQ和LabVIEW的胎心音实验系统

目的：指出胎儿监护的重要性和通过检测胎心音实现胎儿监护的重要价值，设计一个胎心音实验平台，实现胎心音采集和性质分析。方法：首先依据WHO的调查，世界每年有数百万胎儿死亡，若孕妇在怀孕期间按周期做胎儿健康监护，则可以明显降低婴儿的死亡率，简述了胎儿健康监护的重要意义；然后比较多种胎儿监护方法，指出胎心音图法具有更重要的价值。最后论文分析了胎心音的产生和基本特点，基于MyDAQ和LabVIEW建立了一个胎心音实验系统。结果：该实验系统实现了胎心音的采集、WAV格式存储和读取。时变滤波器和小波除噪的预处理，以及基于TSA的胎心音性质分析，得出胎心音的性质与文献研究一致。结论：该系统廉价、快速原型化、灵活的优势，以及能够开放的特点，不仅能用于胎心音的相关研究，还适用于语音等信号的采集和分析。     

胎心率信号分析的进展

胎心率监护是围产期胎儿监护的一项重要内容，过去对胎心率基线的评估仅限于通过手工测量与计算和肉眼识别的方法来判定胎心率监护指标，随着计算机技术，人工智能及网络技术在我国的发展，基于计算机的各种新的计算方法，测量手段也逐步用于胎心率的分析和研究中，使得胎心率能够更准确地反映胎儿状况，提高胎心率监护的监床价值，胎心率的远程监护适用了现代医学信息管理的发展趋势。     

不同代昆明小鼠胚胎成纤维细胞的生长特性研究

目的分离培养昆明小鼠成纤维细胞,研究其体外生长特性并用于胚胎干细胞培养。方法消化法分离培养获得昆明小鼠胚胎成纤维细胞,利用MTT法绘制各代细胞生长曲线,免疫荧光对各代细胞进行细胞骨架分析;用不同浓度丝裂霉素C(10μg/m L、20μg/m L和30μg/m L)分别处理MEFs 1、2、3 h,MTT法筛选饲养层制备的最佳条件,制备饲养层用于小鼠胚胎干细胞的培养。结果分离的小鼠胚胎成纤维细胞3～5代细胞增殖能力较好; 1～3代细胞微管微丝排列整齐,5代以后的细胞微管微丝排列紊乱; 10μg/m L丝裂霉素C处理2 h有利于小鼠胚胎干细胞的培养。结论体外分离培养的3～5代小鼠胚胎成纤维细胞可用于小鼠胚胎干细胞的培养。     

生殖细胞核因子在精原干细胞体外培养分化中的表达

目的 将分离纯化的小鼠精原干细胞(SSCs)体外培养并诱导分化,检测生殖细胞核因子(GCNF)在小鼠SSCs诱导分化前后的表达.方法 用干细胞因子(SCF)诱导小鼠SSCs向精母细胞分化,通过间接免疫荧光染色和RT-PCR,检测GCNF在小鼠SSCs诱导分化前后的表达.结果 小鼠SSCs向精母细胞诱导分化前后,在倒置相差显微镜下进行形态学观察,细胞形态未发生明显变化,仍然呈圆形或椭圆形,核较大;间接免疫荧光及RT-PCR结果均显示,原代培养的小鼠SSCs呈现GCNF阴性,但是向精母细胞诱导分化2d后,GCNF开始表达.结论 GCNF在体外培养小鼠SSCs向精母细胞分化的早期有表达,提示GCNF可能参与了SSCs的早期分化.     

小鼠睾丸支持细胞的体外分离和纯化

目的寻求简便经济的方法分离纯化小鼠睾丸支持细胞,提高其获取量。方法用0.1%的胶原酶和0.25%的胰蛋白酶次第消化准备7-8天小鼠生殖细胞悬液,置于37℃,5%CO2孵箱内培养,4小时后换液,24小时后向培养板内加入20 mmol Tris-HCl低渗处理3分钟,去除精原细胞,即得到高纯度的支持细胞。结果在小鼠睾丸支持细胞的分离培养中,支持细胞占培养细胞90%以上。结论应用本实验方法分离小鼠睾丸支持细胞获得成功并简化了国内现行的分离方法。     

以正交设计分析小鼠淋巴细胞培养的影响因素

<正> 小鼠混合淋巴细胞培养(MLC)试验及淋巴细胞转化试验,已为许多实验室采用。本文用正交设计,以PHA淋转系统分析比较了影响小鼠淋巴细胞体外培养的多种因素,选择了较佳试验条件。以此条件进行     

饲养层细胞体系及白血病抑制因子对维持小鼠胚胎干细胞未分化状态的作用

目的建立并筛选最适合的小鼠胚胎干(ES)细胞饲养层培养体系。方法建立7种经过不同处理的鼠胚成纤维细胞作为饲养层培养体系,分别进行小鼠胚胎干细胞的培养,观察7种饲养层培养体系对小鼠ES细胞增殖能力及未分化状态的维持情况。结果小鼠胚胎细胞在3代内均可用于ES细胞的培养。与其他各组比较,第3代培养鼠胚成纤维细胞经丝裂霉素C处理2h后加外源白血病抑制因子(IF,10μg/ml)用作饲养层的克隆形成率和碱性磷酸酶(AKP)染色阳性度最高。结论外源性白血病抑制因子是抑制小鼠ES细胞分化的主要因素。     

反复产前胎心监护异常153例的相关因素分析

目的探讨反复产前胎心监护异常的相关因素。方法 2008年1月～2009年7月对山西省汾阳医院153例反复产前胎心监护异常的相关因素进行回顾性分析。结果反复产前胎心监护异常为综合因素所致,胎儿高危因素为89.54%,母体高危因素为63.4%,新生儿窒息为14.4%,其中单纯胎心监护异常组占窒息率为18.18%,联合组为81.82%。结论反复产前胎心监护异常主要与胎儿因素、母体因素有关,提高产前检查质量,联合应用胎心监护和脐血流S/D比值能准确筛查胎儿宫内窘迫,指导产科临床治疗,降低围生儿病死率。