枯否细胞在非酒精性脂肪肝炎中的发病机制

非酒精性脂肪肝炎(NASH)是一种代谢综合性肝病,是在肝脏细胞脂肪变性基础上进一步诱发炎性反应及纤维化.枯否细胞(KCs)是一种肝巨噬细胞,NASH进展过程中,KCs能够在脂质、内毒素、氧化应激等刺激作用下分泌炎性因子,引发肝细胞炎性反应,损伤肝脏.该文就KCs激活分泌的炎症因子在NASH发病机制中的作用进行详细论述.     

肝脏非实质细胞在非酒精性脂肪性肝炎中的作用研究进展

非酒精性脂肪性肝病是全球最流行的肝脏疾病,其疾病谱包含非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎、与非酒精性脂肪性肝炎相关的纤维化、肝硬化和肝细胞癌。非酒精性脂肪性肝炎是非酒精性脂肪性肝病进展性的肝脏病理表征,临床上需要药物治疗或其他治疗方式干预,但目前全球尚无针对非酒精性脂肪性肝炎的药物获批上市。非酒精性脂肪性肝炎发病机制复杂,涉及多种细胞内、细胞间的交互作用以及复杂的分子信号通路。非酒精性脂肪性肝炎治疗是一个尚未被满足的巨大临床需求。综述了肝脏中几种主要的非实质细胞在非酒精性脂肪性肝炎发病中的重要作用,同时探讨了非酒精性脂肪性肝炎药物开发靶点与不同细胞之间的相关性。     

大鼠肝贮脂细胞、枯否细胞的同时分离和培养

贮脂细胞（Ｉｔｏ细胞）又叫肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｔｅｃｅｌｌｓ，ＨＳＣ）,位于肝Ｄｉｓｓｅ间隙内,有合成细胞外基质(ＥＣＭ)的功能［１］。目前研究表明,枯否细胞介导的贮脂细胞激活是肝纤维化形成的主要机制,枯否细胞所产生的介质可能是肝纤维化形成的启动因素［２～４］。因此,建立同时分离贮脂细胞和枯否细胞的方法,为贮脂细胞和枯否细胞的共同培养,以及研究肝纤维化的机制和药物作用奠定基础。１材料１．１动物ＳＤ大鼠,雌雄兼用,体重３５０～４５０ｇ,安徽医科大学提供,皖实动准字第０１号。１．２试剂Ｎｙｃ…     

天然免疫与非酒精性脂肪肝病

肝脏中大量的巨噬细胞、自然杀伤细胞(natural killer,NK)、自然杀伤T细胞(natural killer T cell,NKT)等构成了天然免疫系统.这一系统细胞功能紊乱,发生Th-1极化,使促炎症因子产生增多,促进了非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)的形成;肝脏持续的暴露于这些炎症因子,可以促进多种促纤维化因子产生,但Th-2细胞因子分泌的不足, 使NASH进一步发展为肝硬化的现象却相对比较少见.本文就肝脏天然免疫系统在非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)中的调节机制作一综述.     

大鼠原代肝细胞与枯否细胞同步分离的优化研究

目的优化分离培养高纯度的大鼠肝细胞与枯否细胞,为肝细胞与枯否细胞的共同培养提供实验细胞。方法 1原位胶原酶灌注法分离细胞;2 Percoll液不连续密度梯度离心法分离枯否细胞;3选择性贴壁纯化枯否细胞;4台盼蓝拒染法判定细胞活力,PAS染色法鉴定肝细胞,墨汁吞噬及CD68免疫染色法鉴定枯否细胞。结果通过改良的原位胶原酶灌注法,不连续密度梯度离心法以及选择性贴壁法等手段,成功实现了肝细胞与枯否细胞的同时分离,且所分离出的2种细胞的得率与纯度均达到后续实验所需细胞的要求。结论通过该创新方法同时分离肝细胞与枯否细胞是有效可行的。     

黄芪总提物对体外脂多糖刺激的枯否细胞基质金属蛋白酶-9活性的影响

目的 :研究黄芪总提物 (totalextractionofAs tragalus,TEA)对体外脂多糖 (LPS)刺激的枯否细胞(KC)基质金属蛋白酶 9(MMP 9)活性的影响。方法 :采用IV型胶原酶灌流分离大鼠肝枯否细胞进行原代培养 ,用LPS刺激枯否细胞并收集上清液 ,酶谱法观察TEA对肝枯否细胞产生MMP 9的影响。结果 :TEA (5～ 40mg·L- 1 )对LPS(1 μg·ml- 1 )刺激的大鼠肝KC细胞MMP 9活性有明显的抑制作用。结论 :TEA对体外激活的肝枯否细胞产生MMP 9有明显的抑制作用 ,该作用可能是TEA抗肝纤维化的机理之一     

酒精性肝纤维化中肝星状细胞活化的机制研究进展

肝星状细胞(HSC)活化是各种病因所致肝纤维化过程中的关键环节。在酒精性肝病的发展过程中,乙醇和代谢产物乙醛可改变机体氧化还原状态,活化枯否细胞,释放大量细胞因子,诱导HSC活化、增殖和胶原合成,形成肝纤维化。本文将对酒精性肝纤维化中HSC活化的机制和相关靶点加以综述,为开发抗肝纤维化药物和临床治疗提供新的思路。     

梗阻性黄疸患者肝脏免疫功能变化的临床研究

目的 :间接观察梗阻性黄疸患者肝脏枯否细胞功能的变化。方法 :采用测定梗阻性黄疸患者不同时期的肝功能、血浆内毒素值、肿瘤坏死因子 α(TNFα)及丙二醛 (MDA)的含量。结果 :梗阻性黄疸患者血中内毒素值明显高于对照组 ,TNFα及 MDA明显高于对照组 ,手术后内毒素水平较正常高 ,但无显著性意义 ,TNF及 MDA在一段时间维持一个高水平 ,而且 TNF及 MDA值越高 ,肝功能异常越明显 ,两者有相关性。结论 :血中 TNFα及 MDA含量可作为梗阻性黄疸患者肝脏枯否细胞功能变化的参数指标 ,为判定肝脏免疫功能及肝功能变化提供依据。     

五灵胶囊有效成分对脂多糖诱导大鼠枯否细胞核因子的影响

目的观察五灵胶囊中有效成分对脂多糖（LPS）诱导大鼠枯否细胞核因子（NF-κB）的调节作用。方法分离大鼠肝细胞和枯否细胞,60μg·L~（-1）LPS诱导枯否细胞分泌促炎因子及NO。采用^125Ⅰ放射免疫测定法测定TNFα、IL-6、IL-8水平,比色法测定NO生成量,Western blot法检测ERK、p-ERK、NF-κB P50、NF-κB P65、p-NF-κB P65、IκB、p-IκB、IKK、P38、p-P38、CD14、Stat3蛋白的变化。结果五灵胶囊中的有效成分可显著抑制LPS诱导枯否细胞分泌TNF-α、IL-6、IL-8、NO的生成量。结论五灵胶囊有效成分能抑制枯否细胞释放促炎因子,是其治疗慢性肝炎的作用机制之一。     

非酒精性脂肪性肝病发病机制的研究进展

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是指与过量饮酒无关的临床综合征,主要病理改变包括肝细胞弥漫性脂肪变性和脂肪堆积。NAFLD动物模型表现出显著的肝脏微循环障碍,关于其形成机制,被广为接受的为＂二次打击＂学说。该学说认为肥胖、胰岛素抵抗等因素作为＂第一次打击＂,导致肝脏中脂质堆积,形成单纯性脂肪肝,增加了＂第二次打击＂造成的肝脏损伤的易感性,这些因素包括炎症、枯否细胞功能障碍、氧化应激、线粒体障碍、脂肪因子调节紊乱等,导致非酒精性脂肪性肝炎甚至纤维化等更严重疾病的发生。     

梗阻性黄疸时枯否细胞Fc受体表达及其吞噬功能的实验研究

为探讨梗阻性黄疽时肝脏枯否细胞(KC)吞噬功能受抑制的机制，通过制作大鼠梗阻性黄疽模型，利用KC分离、培养和流式细胞技术，观察KC表面Fc受体(FcR)表达及其与KC吞噬功能的关系。结果显示；①在梗阻性黄疽早期(胆管结扎后3天)即有KC FcR表达减少(P<0.01),且随着梗阻的时间延长而呈进行性减少。②KC吞噬功能与KC FcR表达呈同步变化．两呈显正相关。结果提示，梗阻性黄疽时KC吞噬功能受抑可能与KC表面FcR表达减少有关。     

中性粒细胞来源的miR-223延缓非酒精性脂肪性肝炎的研究进展

全球有20%～25%的人患有非酒精性脂肪性肝病,其中非酒精性脂肪性肝炎约占25%。目前关于非酒精性脂肪性肝炎的发病机制尚未完全明确,尚无特效药延缓其进展。近年来有学者提出,来源于中性粒细胞的miR-223可能通过抑制NLRP3的表达从而影响巨噬细胞表型的转换,此过程可能延缓非酒精性脂肪性肝炎的进展。本文就近年来中性粒细胞来源的miR-223延缓非酒精性脂肪性肝炎的研究进展进行综述,旨在为临床治疗非酒精性脂肪性肝炎提供参考。     

黄芪总提物对大鼠肝星状细胞增殖及产生胶原的影响

目的　研究黄芪总提物　（　TEA　）　对体外肝星状细胞增殖和产生胶原的影响　。方法　采用IV型胶原酶灌流分离大鼠肝星状细胞进行原代培养,　用CCl4急性损伤的大鼠肝枯否细胞条件培养基　（　KCCM　）　刺激肝星状细胞,　用3H-TdR和3H-Proline的掺入法分别检测肝星状细胞的增殖和胶原的产生　。结果　TEA(5～40　mg     

不饱和脂肪酸对枯否氏细胞膜磷脂的影响

本文研究了不饱和脂肪酸（鱼油）对脓毒症大鼠枯否氏细胞（KC）膜磷脂的影响,结果表明,脓毒症组大鼠KC膜磷脂酰肌醇（PI）、磷脂酰丝氨酸（PS）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰胆碱（PC）以及膜上花生四烯酸（AA）含量明显减少,KC培养液中AA代谢产物6-k-PGF_(1a)、TXB_2浓度明显升高。经鱼油治疗后,KC膜结构损伤程度减轻,AA代谢产物减少,提示不饱和脂肪酸有调节KC膜磷脂结构与功能,减少炎性介质产生的作用。     

基于网络药理学分析苍术-桂枝治疗非酒精性脂肪性肝炎的作用机制

目的 网络药理学筛选苍术-桂枝治疗非酒精性脂肪性肝炎的有效成分和靶点。方法 应用TCMSP和Swiss查找苍术、桂枝的活性成分的靶点,通过OMIM和GeneCards数据检索非酒精性脂肪性肝炎的靶点,获取交集靶点,利用Cytoscape 3.6.0构建苍术-桂枝与非酒精性脂肪性肝炎的“药物-成分-疾病-靶点”的网络图,筛选出关键靶点,进行GO和KEGG富集分析,最后利用分子对接验证关键靶点。结果 得到苍术-桂枝有效活性成分16个,交集靶点77个,蛋白互作分析(PPI)得到ACE、APOB、CAT、TP53、EGFR、PPARG等16个核心靶点。KEGG和GO结果显示：主要影响脂质颗粒、细胞外间隙、内质网等10种细胞成分,脂肪酸结合、肝素结合、脂质转运体活性等10种分子功能,作用于炎症反应、胆固醇稳态、胆固醇代谢过程等10种生物过程,主要通过脂质与动脉粥样硬化、胰岛素抵抗、非酒精性脂肪肝等13种通路对非酒精性脂肪性肝炎起作用,分子对接结果证明,16中有效成分与靶点具有较强的结合能。结论 苍术-桂枝改善非酒精性脂肪性肝炎的作用机制可能通过胰岛素抵抗、非酒精性脂肪肝等通路实现的,具有多个靶点...     

非酒精性脂肪肝病发病机理及诊治进展

非酒精性脂肪肝疾病(non alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种无过量饮酒史,多种原因引起的肝实质细胞脂肪变性和脂肪蓄积为特征的临床病理综合征,其临床表现主要有单纯性脂肪肝(nonalcoholic simple fatty liver,NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic stestohepatitis,NASH)、肝硬变甚至肝细胞癌。其发病机理正成为医学界研究的热点之一。     

n－3多烯脂肪酸在创伤感染中的作用

为探讨ｎ－３多烯脂肪酸在创伤感染中所起的作用，采用盲肠结扎穿孔诱发大鼠脓毒血症，食道插管灌入液体鱼油治疗。研究结果，术前接受４ｗｋ鱼油治疗组与脓毒症组比较，前者动物枯否细胞释放的细胞因子，炎性介质及氧自由基产物明显减少，膜磷脂成分及花生四烯酸含量明显增加；同时观察到肝细胞膜脂流动性明显升高，相变温度明显降低，内皮素含量明显减少。提示，ｎ－３多烯脂肪酸有调节创伤感染动物巨噬细胞的生物学功能，减轻肝细胞和血管内皮细胞损伤的作用。     

非酒精性脂肪性肝炎诊断研究进展

非酒精性脂肪性肝病是一种慢性非传染性疾病。近年来其患病率和发病率不断增高,发病年龄也出现低年龄化趋势,该疾病已取代慢性乙型肝炎成为第一大慢性肝脏疾病。重点综述非酒精性脂肪性肝病中的非酒精性脂肪性肝炎的诊断研究进展,介绍非酒精性脂肪性肝炎的临床病史、病理学诊断、非侵入方法诊断,为临床诊断提供参考。     

n－3多烯脂肪酸在创伤感染中的作用

为探讨ｎ－３多烯脂肪酸在创伤感染中所起的作用，采用盲肠结扎穿孔诱发大鼠脓毒血症，食道插管灌入液体鱼油治疗。研究结果，术前接受４ｗｋ鱼油治疗组与脓毒症组比较，前者动物枯否细胞释放的细胞因子，炎性介质及氧自由基产物明显减少，膜磷脂成分及花生四烯酸含量明显增加；同时观察到肝细胞膜脂流动性明显升高，相变温度明显降低，内皮素含量明显减少。提示，ｎ－３多烯脂肪酸有调节创伤感染动物巨噬细胞的生物学功能，减轻肝细胞和血管内皮细胞损伤的作用。     

非酒精性脂肪肝离体细胞模型的建立

<正>随着人们生活水平提高,非酒精性脂肪肝(NAFL)及非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的发病率呈逐年上升趋势[1,2],严重威胁人类健康。目前,对NAFL的研究最常采用的是动物模型,但动物模型存在个体差异大,研究周期长,实验条件不易控制等不利因素。而细胞模型能较好地克服上述因素,有针对性地研究NAFL发病的细胞机制,且能进一步缩短药物干预的进程[3,4]。因此,建立NAFL体外细胞模型对研究其发病机制,为进一步防治NAFL具有重要的理论意义与广泛的