类风湿关节炎患者体液中可溶性CD147的表达和意义

目的:研究类风湿关节炎(RA)患者外周血、关节液中可溶性CD147(sCD147)的表达水平,探讨在RA致病中的作用,并以C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)作为病情活动指标,观察RA患者血清中可溶性CD147(sCD147)表达水平与病情活动的关系。方法:应用双抗体夹心ELISA检测37例RA患者外周血、12例RA患者关节液及16例健康人外周血、18例血清阴性脊柱关节病(SpA)患者外周血、8例SpA患者关节液中sCD147的表达水平;全自动乳胶免疫分析系统(日本三菱公司)检测患者的CRP;全自动血沉分析仪(DRAGONMED公司)测患者ESR。结果:RA患者血清中sCD147的含量高于健康对照组和SpA组;RA患者关节液中sCD147的含量明显高于SpA组。RA患者关节液中sCD147的含量明显高于其血清中的含量。RA患者血清中sCD147与CRP、ESR正相关。结论:RA患者血清、关节液中sCD147均可检出,且明显高于对照;RA患者关节液中sCD147明显高于其血清水平,提示sCD147可能参与RA关节损伤与发病。RA患者血清中sCD147表达水平与病情活动相关。     

类风湿关节炎患者血清巨噬细胞集落刺激因子与心脏受累的关系

目的 观察类风湿关节炎(RA)患者血清巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)水平,探讨其与RA心脏受累的关系.方法 选取64例RA患者及20例健康体检者(健康对照组).根据RA患者的临床症状体征、心电图诊断结果、心脏彩超检查及X线等辅助检查结果将患者分为RA心脏受累组(40例)和RA非心脏受累组(24例).应用ELISA法检测RA组及健康对照组受检者血清M-CSF 水平,应用酶标仪测量各样本的吸光度值(OD值),并将其在标准曲线下换算成浓度.分别比较健康对照组与RA组,RA心脏受累组与RA非心脏受累组受检者血清M-CSF 、IgA、IgM、IgG、C反应蛋白(CRP)水平及血小板计数(PLT),了解M-CSF水平与RA患者心血管事件之间的相关性,探讨RA心脏受累的相关因素.结果 (1)RA组患者血清IgA、IgG、M-CSF 水平显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(P均＜0.01).(2)RA心脏受累组患者血清CRP、PLT、M-CSF水平显著高于RA非心脏受累组,差异均有统计学意义(P均＜0.05).(3)Logistic回归分析显示,IgA、IgG、M-CSF与RA无相关性(P均＞0.05);而血清M-CSF水平与RA心脏受累相关(P＝0.011).结论 RA心脏受累患者血清M-CSF水平显著高于RA非心脏受累患者,血清高水平M-CSF提示可能会出现心脏受累.     

GM-CSF表达质粒对pcDNA3/MDC-VP1 DNA疫苗的增强作用

目的:观察粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对pcDNA3/MDC-VP1DNA疫苗免疫作用的影响,为柯萨奇病毒B组3型(CVB3)疫苗的研制提供理论和实验依据。方法:4～6周龄雄性BALB/c小鼠随机分成pcDNA3组、pcDNA3/MDC-VP1组、pcDNA3/mGM-CSF组、pcDNA3/MDC-VP1与pcDNA3/mGM-CSF混合注射组,每组10只。每3周接种1次,共3次。每次接种的第20天眼眶采血,用微量中和试验(固定病毒-稀释血清法)检测血清中和抗体效价。第3次免疫后3周,每组取3只小鼠脾脏制备淋巴细胞悬液,检测淋巴细胞增殖活性与特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性。结果:pcDNA3/MDC-VP1+pcDNA3/mGM-CSF组的血清中和抗体滴度明显提高,小鼠脾脏淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性均有增强。结论:GM-CSF可以增强pcDNA3/MDC-VP1DNA疫苗的特异性免疫应答。     

类风湿关节炎中性粒细胞中CD147分子的表达及意义

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种以滑膜增殖和骨质破坏为主要特征的慢性炎性疾病。在RA关节腔滑液中含量最丰富的细胞是中性粒细胞,它的代谢产物水平可以作为反映病情活动度的指标之一。而成纤维样滑膜细胞（fibroblast—like synovial cell,FLS）在空间占位的同时,也可以通过分泌大量的基质金属蛋白酶（matrix metalloproleinases,MMPs）达到破坏软骨的目的。     

肝细胞性肝癌中MIF、CD147和MMP-9蛋白的表达及意义

目的:研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和CD147在肝细胞性肝癌(HCC)组织中的表达水平及相互关系,探讨三者表达在HCC浸润、转移中的意义。方法:采用链霉亲和素-过氧化酶连接(SP)免疫组化法检测73例肝细胞性肝癌和43例肝硬化组织中MIF、CD147和MMP-9蛋白的表达。结果:①上述蛋白在HCC组织中均过表达,43例伴肝硬化的HCC病例中三者在癌组织中的表达均较肝硬化组织为高(P<0.05);②3种蛋白表达分别与肿瘤分化程度及淋巴结转移状态相关,此外MIF蛋白在有门静脉癌栓组的表达高于无门静脉癌栓组,CD147和MMP-9蛋白阳性表达率与瘤体大小相关(P<0.05);③HCC组织中MIF和CD147蛋白的表达分别与MMP-9蛋白存在显著正相关(P<0.01),MIF与CD147蛋白的表达无相关性。结论:MIF和CD147均可上调HCC组织中MMP-9的表达,三者协同表达在HCC浸润转移中起重要作用。     

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶治疗烧伤后残余创面55处

目的:探讨局部应用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶治疗烧伤后残余创面的疗效。方法:选取烧伤患者80例,共110处烧伤后残余创面,将110处残余创面随机分为观察组和对照组各55处,观察组应用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶治疗,对照组以空白基质做安慰剂,疗程为3周,观察用药后两组创面愈合情况及不良反应发生情况。结果:用药后两组创面直径比较差异无显著性,观察组创面愈合时间明显比对照组短,观察组总有效率为96.36%,明显高于对照组的83.64%。不良反应主要为局部刺激,个别有局部疼痛、红肿等,症状轻微可自行消退。结论:烧伤后残余创面局部应用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶进行治疗,可有效促进创面愈合,且应用安全,值得推广。     

类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞表面PD-1的表达及意义

目的观测类风湿关节炎（RA）患者外周血CD4+T细胞表面程序性死亡因子1（PD-1,CD279）表达的变化、探讨PD-1在RA发生、发展中的作用。方法应用流式细胞术检测40例RA患者和20例健康体检者外周血CD4+T细胞表面PD-1的阳性率,对比分析RA患者病情活动组与稳定组间PD-1表达的差异,分析PD-1阳性率与C反应蛋白（CRP）,红细胞沉降率（ESR）,类风湿因子（RF）等临床指标的相关关系。结果病情活动期RA患者外周血CD4+T细胞PD-1阳性率为（32.90±12.15）%,明显高于健康体检者（22.32±6.04）%,差异有统计学意义（P＜0.01）;稳定期RA患者的PD-1阳性率为（27.49±6.79）%,与健康体检者的差异无统计学意义（P＞0.05）。RA患者中,CD4+T细胞表面PD-1阳性率与RF呈正相关（r=0.525,P＜0.01）,与ESR呈正相关（r=0.328,P＜0.05）,与CRP无明显相关性（r=0.232,P＞0.05）。结论病情活动期RA患者外周血CD4+T细胞表面PD-1表达增加,可能对疾病的发生、发展具有重要意义。     

CD147与类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞MMPs合成的关系

目的观察类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)患者成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes, FLS)与高表达CD147的单核细胞株(THP-1)共培养后,基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)合成的变化.方法从手术切除的RA患者滑膜组织中,分离FLS,经流式细胞术测定CD14,CD68及免疫组化测定波形纤维蛋白(vimentin)证实后,传代培养.将FLS与高表达 CD147的THP-1共培养,观察THP-1细胞对FLS MMPs合成的影响.用明胶酶谱法测FLS MMP-2,MMP-9含量.同时观察CD147拮抗肽(AP9)对MMPs表达的影响.结果高表达CD147,低表达MMP-2、 MMP-9的THP-1细胞与CD147表达水平低的RA FLS混合培养后,FLS合成MMP-2、 MMP-9水平显著升高,随着THP-1细胞数的增加,MMP-2、 MMP-9的合成量也增加.THP-1对FLS合成MMP-2、 MMP-9的刺激作用可被CD147拮抗肽AP-9所抑制.结论高表达CD147的THP-1细胞对共培养的RA FLS合成MMP-2、MMP-9有刺激作用,这种刺激作用可被CD147拮抗肽AP-9所抑制,提示THP-1表面的CD147对FLS合成MMPs有促进作用.     

CD147基因沉默对亲环素A趋化作用及MMP-9表达的影响

目的探讨CD147在亲环素A（cyelophilinA,CyPA）诱导单核／巨噬细胞趋化过程及MMP-9表达中的作用。方法根据兔源CD147mRNA的序列构建能高效抑制兔外周血单核／巨噬细胞CD147表达的shRNA慢病毒载体,将分离出的兔外周单核／巨噬细胞分为空白对照组、NC对照组、CD147慢病毒组。对NC对照组及CD147慢病毒组分别给予空白慢病毒、CD147．shRNA慢病毒转染,以荧光显微镜观察转染效果。采用流式细胞仪检测膜CD147水平,并检测CD147mRNA及蛋白水平,采用微孔小室趋化实验检测CyPA对单核／巨噬细胞的趋化作用。对三组单核／巨噬细胞分别加人CyPA,孵育12h后ELISA检测上清液中MMP-9含量。结果CD147慢病毒组单核／巨噬细胞CD147表达水平较其他两组明显降低（P〈0．01）,基因沉默CD147降低了CyPA对单核／巨噬细胞的趋化作用（P〈0．05）及CyPA诱导的MMP-9（P〈0．05）产生。结论CyPA对单核／巨噬细胞趋化作用依赖或部分依赖于膜CD147水平,阻断CyPA-CD147相互作用可显著降低单核／巨噬细胞MMP-9表达水平。     

粒细胞集落刺激因子对大鼠脑出血后脑水肿及MMP-9的影响

目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠脑出血(ICH)后脑水肿的影响及可能机制。方法健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组,断尾取自体血法制备大鼠ICH模型,治疗组于造模1小时后腹腔注射重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)60μg/kg。3组大鼠于术后6、12、24、48、72h和7d处死,干湿重法测定脑组织含水量,免疫组化染色观察MMP-9的动态表达。结果模型组脑组织含水量明显高于假手术组(P<0.05),在造模后48、72h最明显,且与6、12、24h和7d相比差异显著(P<0.05);治疗组脑组织含水量明显低于模型组(P<0.05)。模型组脑组织MMP-9的表达明显高于假手术组(P<0.05);治疗组各时间点MMP-9的表达低于模型组(P<0.05)。结论 G-CSF可减轻ICH后脑水肿程度,其机制可能与G-CSF抑制MMP-9表达密切相关。     

CD147、MMP-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2在不同级别的脑胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨CD147、MMP-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2在胶质瘤中的表达及其相关性,方法采用免疫组织化学法对78例石蜡包埋的胶质瘤组织和12例正常脑组织进行标记和分析。结果CD147、MMP-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的阳性率分别为62%、66%、64%、75%、59%、59%,采用Spearm an进行相关性分析,他们与胶质瘤的恶性程度均呈正相关（rs=0.2671-0.5631,P〈0.05）,CD147与MMP-1、MMP-2和MMP-9呈正相关（rs=0.3481-0.4951,P〈0.05）。结论CD147、MMPS、TIMPs可以作为临床判断胶质瘤预后的分子生物学标志。     

白细胞免疫球蛋白样受体A3在类风湿关节炎患者外周血CD14+单核细胞中的表达

目的: 分析白细胞免疫球蛋白样受体A3（LILRA3）在类风湿关节炎（RA）患者外周血CD14⁺单核细胞中的表达。方法: 收集2017年2至8月在浙江大学医学院附属第二医院风湿科住院治疗的RA患者53例和21名该院健康体检者的资料。流式细胞术检测CD14⁺单核细胞亚群LILRA3表达,并分析其与RA患者的临床特征、实验室指标、自身抗体和疾病活动度的关系。结果: RA患者外周血CD14⁺单核细胞中LILRA3表达水平较健康对照组升高（P < 0.01）。LILRA3表达与RA患者压痛关节数、肿胀关节数、红细胞沉降率呈正相关（r=0.280、0.371、0.341,P < 0.05或P < 0.01）,但与年龄、病程、Sharp评分、C反应蛋白、血常规及免疫球蛋白等指标均无相关性（均P>0.05）。类风湿因子和抗环瓜氨酸肽抗体阳性患者LILRA3的表达率高于阴性患者（均P < 0.05）。以28处关节疾病活动指数（DAS28）5.1分作为疾病活动度分组的依据,高疾病活动度组LILRA3表达率较中低疾病活动度组升高,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论: RA患者外周血CD14⁺单核细胞中LILRA3表达升高,且与疾病活动度相关。     

抗P68抗体检测在类风湿关节炎患者血清中的意义

目的建立抗P68抗体的检测方法,研究其在类风湿关节炎（RA）中的表达及临床意义。方法以Hela细胞为抗原基质,采用间接免疫荧光法检测71例RA患者,42例其它风湿病患者和30例正常对照组血清中抗P68抗体表达。结果抗P68抗体诊断RA的敏感性和特异性分别为70.42%、76.20%,其在RA组的阳性率明显高于阴性组,差异有统计学意义（P〈0.05）,抗P68抗体阳性RA组患者血小板计数高、病程长、晨僵持续时间长、握拳差、骨质侵蚀严重。结论抗P68抗体在RA组中有较高的特异性和敏感性,可作为诊断RA的一项特异性血清学指标,该抗体可在RA早期出现,能预测骨质侵蚀、反映疾病的活动性和判断预后。     

CD147通过Beclin-1抑制前列腺癌PC-3细胞自噬

目的: 通过建立饥饿诱导的自噬模型,探讨CD147对前列腺癌PC-3细胞自噬作用的影响,并阐明其作用机制。 方法: 通过饥饿诱导方式建立自噬细胞模型。实验分为阴性对照组和RNAi干扰CD147组(PC-3/shCD147组)。GFP-LC3质粒转染观察细胞自噬斑点形成情况,免疫印迹技术检测自噬蛋白LC3和Beclin-1表达,台盼蓝排斥实验检测细胞死亡率。 结果: 与阴性对照组比较,PC-3/shCD147组GFP-LC3斑点细胞数增加(P<0.01),自噬相关蛋白LC3-Ⅱ(P<0.01)和Beclin-1(P<0.05)表达水平升高;与阴性对照组(22.3%±3.5%)比较,PC-3/shCD147组细胞死亡率(38.4%±3.1%)明显升高(P<0.05)。 结论: 在前列腺癌PC-3细胞中,CD147通过Beclin-1抑制饥饿诱导的自噬过程,减少细胞自噬的发生。     

类风湿关节炎患者血清自身抗体对其诊断价值分析

目的：分析抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）、抗角质蛋白抗体（AKA）及各型类风湿因子（RF）联合检测对类风湿关节炎（RA）诊断与病情活动等方面的作用。方法：选取80例RA患者和75例非RA患者,进行相关实验室指标测定,并对结果进行统计学分析。结果：RF-IgG、RF-IgA、RF-lgM、AKA及抗CCP抗体对RA的敏感性为：RF-IgM〉抗CCP抗体〉RF-IgG〉RF-IgA〉AKA;特异性为：AKA〉抗CCP抗体〉RF-IgG〉RF-IgA〉RF-IgM;联合检测2种、3种、5种抗体对RA的敏感性和特异性分别是：RF-IgA＋RF-lgM为51.3%/81.3%,RF-IgG＋RF-IgA＋RF-lgM为43.8%/89.3%,RF-IgA＋RF-lgM＋抗CCP抗体为45%/98.7%,RF-IgA＋RF-lgM＋AKA为22.5%/98.7%,RF-IgG＋RF-IgA＋RF-lgM＋抗CCP抗体＋AKA为18.8%/100%;抗CCP抗体阳性和阴性患者在RF滴度值、ESR和晨僵方面差异存在统计学意义（P〈0.05）。结论：抗CCP抗体在诊断RA中的价值优于AKA和RF;抗CCP抗体在一定程度上可能有助于早期诊断和活动性的监测;RF与抗CCP抗体、AKA联合检测可进一步提高对RA诊断的特异性。     

哮喘患者诱导痰上清液MIP-1α、MIF、MCP-1水平测定

目的:通过测定哮喘患者诱导痰上清液肺泡巨噬细胞炎性蛋白-1α(M IP-1α)、肺泡巨噬细胞移动抑制因子(M IF)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平,探讨三者在哮喘发病中的作用。方法:轻、中度哮喘患者14例,正常人12例,用高渗盐水进行痰诱导,痰液经解粘、离心后,对沉淀细胞分类计数,使用ELISA测定诱导痰上清液中M IP-lα、M IF、MCP-1浓度。结果:哮喘组诱导痰嗜酸粒细胞、淋巴细胞相对计数均高于正常组(分别为7.7%±1.4%、0.7%±0.8%,P<0.01;4.2%±1.0%、2.1±0.8%,P<0.01),而哮喘组诱导痰肺泡巨噬细胞相对计数构成比(57.8%±3.7%)明显低于正常组(65.9%±3.6%,P<0.01)。哮喘患者诱导痰上清液M IP-1α质量浓度[(36.6±4.8)pg.m l-1]明显高于正常人[(32.6±1.7)pg.m l-1,P<0.05],两组诱导痰上清液M IF、MCP-1浓度无显著差异。哮喘患者诱导痰上清液M IF与嗜酸粒细胞相对计数呈正相关(r=0.53,P<0.05),与肺泡巨噬细胞、淋巴细胞相对计数无相关关系;哮喘患者诱导痰上清液中M IP-1α、MCP-1与肺泡巨噬细胞、嗜酸粒细胞和淋巴细胞相对计数均无相关关系。结论:M IP-1α可能参与哮喘的发病,嗜酸粒细胞可能通过释放M IF参与哮喘     

早期类风湿关节炎血清抗CCP抗体、AKA与IgM-RF检测情况分析

目的探讨抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体、抗角蛋白抗体（AKA）及IgM型类风湿因子（IgM-RF）对早期类风湿关节炎（RA）的诊断价值。方法分析103例早期RA及259例有关节受累的非RA风湿患者的血清抗CCP抗体、AKA及IgM-RF的检测情况。分别采用ELISA方法、间接免疫荧光法及乳胶凝集法检测抗CCP抗体、AKA和IgM-RF。结果抗CCP抗体（72.8%）和IgM-RF（78.6%）对早期RA的敏感性均较AKA（36.9%）高（P均=0.0000）。抗CCP抗体、AKA和IgM-RF对早期RA的特异性分别为94.2%、90.7%及81.1%,IgM-RF较前两者低（P分别为0.0000和0.0019）。在非RA的其他弥漫性结缔组织病（DCTD）中,IgM-RF阳性率（39.1%）较AKA（17.2%）及抗CCP抗体（10.5%）高（P均〈0.05）。抗CCP抗体滴定量在阳性RA患者中平均值为（85.77±58.20）RU/ml,在阳性的非RA风湿病患者中中位数为20.06RU/ml（5.2～100.6）,前者显著高于后者（P〈0.05）。3种抗体联合分析,抗CCP抗体＋RF对RA的敏感性为61.2%,特异性为97．7％;其他组合或者敏感性较低（〈33．0％）,或者特异性较低（〈86％）。结论3种抗体中．抗CCP抗体对早期RA的诊断价值较高。IgM—RF因特异性较低、AKA因敏感性差,对早期RA的诊断作用受到影响。3种抗体联合检测时,对基结果认真分析,可减少误诊或者漏诊。     

曲格列酮对大鼠垂体腺瘤GH3细胞CD147、TGF-β1和MMP-9表达的影响

目的   探讨过氧化物酶体增殖激活物受体γ(PPAR-γ)的配体曲格列酮(TGZ)对大鼠垂体腺瘤GH3细胞系白细胞分化抗原147(CD147)、转化生长因子β1(TGF-β1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法   GH3细胞分为空白对照组和实验组(TGZ浓度分别为1×10-3、1×10-4和1×10-5 mol／L)。TGZ作用GH3细胞48h后,分别采用Western blot和荧光定量PCR检测各组细胞中CD147、TGF-β1、MMP-9蛋白和mRNA的表达。结果   各组细胞CD147、TGF-β1、MMP-9蛋白和mRNA的表达与空白对照组相比,均有统计学差异(P均<0.05),而且TGZ浓度越高,CD147、TGF-β1、MMP-9蛋白和mRNA的表达量越低。结论   PPAR-γ配体TGZ能降低CD147、TGF-β1、MMP-9的表达,并可能通过该作用减弱GH3细胞的侵袭力。