垂盆草苷对幼龄肝内胆汁淤积大鼠的作用机制

研究垂盆草苷(sarmentosin,SA)对幼龄肝内胆汁淤积大鼠的干预和调节作用。将48只SD幼龄大鼠随机分为正常组(Control)、α-萘异硫氰酸酯(ANIT)组(Model)、熊去氧胆酸(UDCA)阳性对照组、垂盆草苷低、中、高剂量组,每组8只,除正常组外,各组大鼠连续1周分别灌胃给予相应药物,每日1次。在第5 d灌胃给予80 mg/kg ANIT造模。在造模后48 h测定大鼠的胆汁流量;测定大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)的活性和总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆汁酸(TBA)的含量;检测肝脏组织病理变化和组织匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量;测定血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ-干扰素(INF-γ)、白细胞介素1β(IL-1β)的表达;Western blot法分析胆汁酸转运蛋白与合成蛋白。与正常组相比,模型组胆汁流量受到明显的抑制;大鼠肝组织出现明显的病理损伤;血清中ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL、TBA水平显著升高;组织匀浆中MDA含量显著升高,SOD和GSH-Px含量显著降低;炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β的表达升高(P<0.05,P<0.01);FXR、SHP-1、SHP-2、MREP2、BSEP、NTCP蛋白表达下降,CYP7A1、CYP27A1蛋白表达升高。与模型组相比,垂盆草苷各剂量组大鼠的胆汁流量呈现不同程度的增加;大鼠肝脏组织的病理损伤有所改善;血清中ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL、TBA水平降低;肝脏组织匀浆中MDA的含量降低,SOD、GSH-Px的含量升高(P<0.05,P<0.01);TNF-α、IFN-γ、IL-1β的表达降低(P<0.05,P<0.01);结果表明垂盆草苷对于胆汁淤积有一定的治疗效果,其中垂盆草苷高剂量的作用效果与UDCA组相当,同时垂盆草苷可上调FXR、SHP-1、SHP-2、MREP2、BSEP、NTCP蛋白表达,下调CYP7A1、CYP27A1蛋白表达,说明垂盆草苷通过调控相关蛋白发挥作用。垂盆草苷对ANIT所致的SD幼龄大鼠肝内胆汁淤积有明显的干预和调节作用。可能是通过参与胆汁酸的转运与合成发挥其治疗作用。     

茵栀黄注射液对胆汁淤积性肝炎大鼠氧化应激反应及FXR基因表达的影响

【目的】探讨茵栀黄注射液对胆汁淤积性肝炎的改善作用及可能的机制。【方法】采用α-异硫氰酸萘酯(ANIT)灌胃法复制胆汁淤积性肝炎大鼠模型。将28只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、茵栀黄注射液组(YI组)、熊去氧胆酸组(UDCA组),每组7只。造模结束后,采用全自动生化仪检测各组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)、总胆红素(TB)水平,采用比色法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活性变化,采用苏木素—伊红(HE)染色法观察肝组织病理改变,采用反转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)法检测肝组织法尼酯X受体(FXR)m RNA的表达。【结果】与正常对照组比较,模型组大鼠出现明显的肝脏病理损害,血清ALT、AST、ALP、TB水平,肝组织MDA活性、FXR m RNA表达水平均显著升高,肝组织SOD活性下降(P0.05)。与模型组比较,YI组大鼠肝脏病理损害明显减轻,血清ALT、AST、ALP、TB水平及肝组织MDA活性均显著下降,FXR m RNA表达水平及肝组织SOD活性上升(P0.05)。【结论】茵栀黄注射液能显著改善肝内胆汁淤积性肝炎大鼠肝损伤,其机制可能与抑制氧化应激反应、促进FXR基因表达有关。     

硝石矾石散对肝内胆汁瘀积型大鼠血清学及Na-K-ATP酶活性的影响

目的:探讨硝石矾石散对α-荼基异硫氰酸盐(α-naphthylisothiocyanate,ANIT)诱导的肝内胆汁瘀积大鼠模型的影响。方法:采用ANIT诱导制备肝内胆汁瘀积大鼠模型40只,雌雄各半,随机分为模型组、西药阳性对照组及中药治疗组,其中模型组20只,其余组各10只,另选未造模大鼠10只作为正常对照组。各组均日一次灌胃给药,西药组给予思美泰,中药组给予硝石矾石散,模型组和正常对照组给予等容积0.9%氯化钠注射液。给药时间从造模当天开始,于造模48h后处死模型组10只大鼠,留取血清及肝组织备用。用药7天后处死全部大鼠,观察各组大鼠肝功能指标及Na-K-ATP酶活性。结果:与模型组相比,中药组血清中总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)、谷丙转氨酶(ALT)、血清总胆汁酸(TBA)、碱性磷酸酶(ALP)水平均明显下降(P<0.05),Na-K-ATP酶活性有明显差异(P<0.05)。结论:硝石矾石散对肝内胆汁瘀积模型有很好的治疗作用。     

FXR和BSEP在阻塞性黄疸大鼠肝细胞中的表达及其意义

目的：研究胆盐输出泵（BSEP）在阻塞性黄疸肝细胞表达过程中的变化及其与阻塞性黄疸高胆汁酸血症的关系,探讨法尼酯衍生物X受体（FXR）的活性及内毒素（ET）对BSEP表达的影响。方法：36只健康SD大鼠随机分为假手术组（Sham）、胆总管结扎组（CBDL）和胆总管结扎再通组（BR）,建立大鼠阻塞性黄疸模型,检测各时相点血清总胆红素（TBIL）、总胆汁酸（TBA）和ET水平;用免疫组织化学法观察各组大鼠肝组织FXP和BSEP蛋白的表达,用平均积分光密度(IOD)法检测FXR和BSEP蛋白的表达水平;线性相关分析FXR、TBA、ET和BSEP之间的定量关系。结果：Sham组大鼠术后各时间点血清TBIL、TBA及ET水平无明显变化（P>0.05）;CBDL组大鼠胆总管结扎术后,TBIL、TBA及ET水平显著增高（P<0.01）;BR组大鼠胆道再通术后TBIL、TBA及ET水平逐步下降,术后7 d组TBIL、TBA接近Sham组水平（P>0.05）,ET仍高于Sham组水平（P<0.05）。肝组织中FXR蛋白表达水平在Sham、CBDL和BR组中呈逐渐缓慢增高趋势,但各组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。肝组织中BSEP蛋白表达水平在Sham和CBDL组中呈下降趋势,BR组先下降后上升,但与Sham组比较差异无统计学意义（P>0.05）。FXR蛋白表达与血清TBA水平呈正相关关系（r=0.303,P<0.05）,FXR与BSEP蛋白表达呈负相关关系（r=－0.359,P<0.05）,BSEP蛋白表达与血清ET水平呈高度负相关关系（r=－0.412,P<0.01）。结论：阻塞性黄疸时FXR在BSEP表达调控中并非起主要作用,而是ET致炎症介质的释放下调了BSEP表达。     

大黄素对胆汁淤积大鼠肝细胞转运体基因表达的影响

目的：探讨大黄素对α-萘异硫氰酸酯（ANIT）致急性肝内胆汁淤积的保护作用及其机制.方法：采用ANIT灌胃制备大鼠急性肝内胆汁淤积病理模型.将32只大鼠随机分为正常对照组、正常＋大黄素组、模型组、模型＋大黄素组,观察各组大鼠肝功能各项生化指标和肝组织病理学改变,并采用实时荧光定量RT-PCR检测肝细胞膜上转运体基因胆盐输出泵（BSEP）、多药耐药相关蛋白2（MRP2）、钠-牛磺胆酸共转运蛋白（NTCP）、多药耐药蛋白2（MDR2）、多药耐药相关蛋白3（MRP3）和核受体法尼酯衍生物X受体（FXR）mRNA水平的变化.结果：模型组与正常对照组相比较,TB,DB,ALT,AST,ALP和TBA浓度明显增高（P〈0.01）,光镜下可见肝细胞变性和坏死、中性粒细胞浸润,在mRNA水平NTCP,FXR表达降低（P〈0.01）,MDR2,MRP3表达增高（P〈0.01或P〈0.05）,而BSEP,MRP2表达差异无显著性.经大黄素治疗后TB,DB,ALT,AST,ALP和TBA均降低（P〈0.01或P〈0.05）,组织病理学改变轻微,NTCP,MDR2,MRP3表达高于模型组（P〈0.05）,但BSEP,MRP2,FXR的表达与模型组相比较差异无显著性.正常＋大黄素组与正常对照组相比较上述各项指标差异均无显著性.结论：大黄素对胆汁淤积型肝炎有保护作用,调节肝脏中与胆汁酸代谢相关的NTCP,MDR2,MRP3的表达以减少胆汁酸在肝脏中的蓄积可能是其退黄、恢复肝脏功能的作用机制之一.     

柴胡疏肝散合参苓白术散对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织LXRαmRNA及蛋白表达的影响

目的:探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织LXRαmRNA及蛋白表达水平的影响。方法:选用SD大鼠55只,随机分为正常组10只、模型组15只、疏肝组10只、健脾组10只、综合组10只。正常组以基础饲料喂养,其余各组除基础饲料外,每天上午8∶00灌饲高脂肪乳剂10 mL.kg-1。所有动物自由进食饲料和饮清水,连续8周。各药物干预组大鼠在施以造模因素的同时,按体质量10 mL.kg-1给予相应药物,给药剂量按人和动物体表面积折算,其中疏肝组灌服柴胡疏肝散(含生药量0.32 kg.L-1),健脾组灌服参苓白术散(含生药量1.00 kg.L-1),综合组灌服柴胡疏肝散和参苓白术散的合方(含生药量1.19 kg.L-1),正常组和模型组灌服同样剂量的蒸馏水,每天下午1次。给药8周后处死动物,腹主动脉采血,用全自动生化分析仪检测血脂及肝功能;常规HE染色观察肝组织病理变化;RT-PCR方法检测肝组织LXRαmRNA的表达;免疫组织化学方法检测肝组织LXRα蛋白的表达水平。结果:与正常组相比,模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,血脂及肝功均有不同程度的升高(P<0.05,P<0.01),大鼠肝组织LXRαmRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01);各给药组血脂、肝功能和肝组织LXRαmRNA及蛋白的表达水平均较模型组显著降低(P<0.05或P<0.01),其中以健脾组下降最为明显。结论:疏肝健脾方药对高脂饮食诱导的大鼠NAFLD有较好的治疗作用,其机制可能与其下调肝脏LXRα的表达水平有关。     

FXR、CYP7A1在妊娠期肝内胆汁淤积症孕鼠胆汁酸代谢中的作用

目的分析法尼醇受体（FXR）及其靶基因胆固醇7α羟化酶（CYP7A1）在妊娠期肝内胆汁淤积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy，ICP）孕鼠肝脏的表达情况，探讨FXR与CYP7A1在ICP发病机制中的作用。方法用随机数字表法将30只孕15d的SD大鼠分成2组：生理盐水（NS）组和苯甲酸雌二醇（estradiol benzoate，EB）组，每组15只。用药前和刚药后第5天分别测定血清中ALT、AST、ALP、TBA水平，同时观察肝脏形态学变化，并应用RT—PCR和Western blot分别检测肝脏FXR、CYP7A1两者mRNA和蛋白的表达。结果EB组用药后各血清生化指标比用药前显著升高（P〈0．01），NS组用药前后无明显变化（P〉0．05）；EB组孕鼠肝脏出现肝内胆汁淤积表现，NS组肝脏形态结构正常；EB组FXR和CYP7A1两者的mRNA和蛋白表达均显著高于NS组（P〈0．01）。结论EB诱导的ICP孕鼠肝脏FXR及CYP7A1表达均增加，说明存在胆汁酸合成自身反馈调节障碍，导致胆汁酸合成增加，这可能是ICP发病机制之一。     

阻塞性黄疸大鼠肝脏中法尼酯衍生物X受体的表达及CDCA对其影响

目的探讨应用鹅脱氧胆酸(CDCA)治疗胆汁淤积性疾病的可行性。方法取4周龄健康雄性SD大鼠72只,随机将其中48只大鼠的胆总管在十二指肠上方双重结扎后剪断然后缝合关腹,建立胆道阻塞大鼠动物模型。另外24只大鼠仅游离胆总管但并不结扎,然后缝合关腹作为对照组。观察大鼠胆管阻塞1d、3d、7d和14d四个时段的肝脏组织形态学改变,并检测这四个不同时段的大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TB)和总胆汁酸(TBA)等血液生化指标;通过免疫组化方法观察大鼠胆管阻塞不同时段的法尼酯衍生物X受体(FXR)表达变化,同时利用上述方法研究CDCA在大鼠胆管阻塞进程中的作用。结果大鼠胆管阻塞后,肝内胆管扩张,纤维组织增生,但14d后症状有所缓解;随大鼠胆管阻塞时间延长,血清中ALT、TB和TBA明显升高。第7天达到峰值,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),第14天时均明显下降;CDCA可不同程度的降低大鼠血清中ALT、TB和TBA的水平。另外,随大鼠胆管阻塞时间的延长,FXR表达上调,第7天最为明显。CDCA治疗可明显减轻大鼠胆管阻塞后所致的肝脏损伤,CDCA可抑制FXR的表达上调。结论胆管阻塞可导致肝损伤和肝纤维化,其程度和血清中的ALT水平呈密切相关。胆道阻塞时,胆汁酸浓度的上升刺激FXR表达上调,并随阻塞时间延长,FXR蛋白表达增高相对缓慢。FXR的激动剂——CDCA可减轻胆道阻塞后大鼠肝脏损害。     

核转录因子kB在非酒精性脂肪肝大鼠肝组织中的表达

目的观察高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝大鼠肝组织核转录因子kB(NF-kB)的表达、脂质过氧化损伤及血清细胞因子的变化情况,探讨非酒精性脂肪肝的发病机制。方法 20只大鼠随机分为正常组10只、模型组10只,模型组予高脂饲料喂养,正常组予普通标准饲料喂养,连续12周,观察肝组织的病理改变,免疫组化法检测大鼠肝组织NF-kBp65的表达,TBA法检测肝匀浆MDA含量,黄嘌呤氧化酶法检测肝匀浆SOD活力,放免法测定血清中TNF-α、不IL-6的含量,硝酸还原酶法检测血清NO含量。结果模型组大鼠肝组织可见重度脂肪变、炎症细胞浸润、肝细胞坏死、汇管区渗出。NF-kBp65在模型组大鼠肝组织中表达较在正常组中明显增高(P<0.01),模型组大鼠肝匀浆MDA含量和血清TNF-α、IL-6、NO含量均较正常组明显升高,肝匀浆SOD活力则较正常组明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论高脂饮食可引起大鼠肝脏发生非酒精性脂肪变性,NF-kB参与了高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝损伤过程,在其发生发展中可能起重要作用。     

基于FXR通路探讨鸡血藤对ANIT诱导的肝内胆汁淤积模型大鼠的作用及机制

目的 观察鸡血藤对α-萘异硫氰酸盐(ANIT)诱导的肝内胆汁淤积SD大鼠的治疗作用,并从调控法尼醇X受体(FXR)相关通路方面进行机制研究.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为空白对照组(对照组)、ANIT造模组(模型组)、熊去氧胆酸60mg/kg组、鸡血藤150mg/kg组(鸡血藤低剂量组)、鸡血藤300mg/kg组(...     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …