c-fos原癌基因在小鼠内耳发育中作用的研究

目的探讨原癌基因c-fos在昆明种小白鼠内耳发育中的作用.方法运用免疫组化(LSAB法)对原癌基因c-fos蛋白产物在昆明种小白鼠内耳发育中的表达进行研究.结果本研究发现在胚胎发育的第15天至第17天,c-fos蛋白产物在耳蜗的感觉上皮、支持细胞、血管纹、前庭膜、螺旋神经节神经元及前庭感觉器官椭圆囊斑及球囊斑的上皮有阳性表达,而于此期间内耳上皮正处于分化发 育阶段,螺旋神经节也处于分化发育阶段.结论c-fos参与了小鼠内耳的发育过程,在此期间其对内耳上皮的发育主要起促进分化作用.c-fos在内耳毛细胞再生中的作用有待于进一步深入研究.     

转化生长因子-β1在小鼠内耳发育中作用的研究

探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在昆明种小白鼠内耳发育中的作用.方法运用免疫组化(LSAB法)对TGF-β1蛋白产物在昆明种小白鼠内耳发育中的表达进行研究.结果本研究发现在胚胎发育的第15天～19天,TGF-β1在耳蜗的感觉上皮、支持细胞、血管纹、前庭膜、螺旋神经节神经元及前庭感觉器官椭圆囊斑及球囊斑的上皮有阳性表达,而于此期间内耳上皮正处于分化发育阶段,螺旋神经节也处于分化发育阶段.结论TGF-β1参与了小鼠内耳的发育过程,在此期间其对内耳上皮的发育主要起促进分化作用.TGF-β1在内耳毛细胞再生中的作用有待于进一步深入研究.     

c—fos原癌基因在小鼠内耳发育中作用的研究

目的：探讨原癌基因c-fos在昆明种小白鼠内耳发育中的作用。方法：运用免疫组化（LSAB法）对原癌基因c-fos蛋白产物在昆明种小白鼠内耳发育中的表达进行研究。结果：本研究发现在胚胎发育的第15天至第17天，c-fos蛋白产物在耳蜗的感染上皮、支持细胞、血管纹、前庭膜、螺旋神经节神经元及前庭感觉器官椭圆囊斑及球囊斑的上皮有阳性表达，而于此期间内耳上皮正处于分化发育阶段，螺旋神经节也处于分化发育阶段。结论：c-fos参与了小鼠内耳的发育过程，在此期间其对内耳上皮的发育主要起促进分化作用。c-fos在内耳毛细胞再生中的作用有待于进一步深入研究。     

全反式维甲酸与胃癌预后相关性及其机制研究

目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)治疗对胃癌术后患者生存期是否产生影响,分析ATRA是否通过调控上皮间质转化(EMT)对胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡产生影响。方法 选取胃癌术后患者共198例,分为对照组和ATRA组,比较两组间患者生存期的差异。体外培养MGC-803胃癌细胞,分为对照组和ATRA组。CCK-8实验检测其增殖能力,细胞划痕实验检测其迁移能力,Transwel实验检测其侵袭能力,流式细胞术检测凋亡情况。Western blot、RT-qPCR和免疫荧光检测EMT相关基因(E-cadherin、 N-cadherin和Vimentin)的表达情况。结果 ATRA可以延长胃癌术后患者的生存时间。经ATRA处理后,胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力下降,同时会促进胃癌细胞的凋亡。Western blot、RT-qPCR和免疫荧光结果显示ATRA会下调胃癌细胞N-cadherin和Vimentin的表达水平,上调E-cadherin表达水平。结论 ATRA可以延长胃癌术后患者的生存时间,促进胃癌细胞凋亡,通过调控EMT抑制胃癌细胞增殖,迁移,侵袭。     

ATRA在卵巢癌细胞HO8910增殖中的作用

目的:探讨全反式维甲酸在人卵巢癌细胞生长和增殖中的作用机制.方法:选用人卵巢癌细胞株HO8910在体外进行培养,培养时添加不同浓度的全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA),作用24 h、48 h、72 h后,采用MTT比色法测定细胞生长抑制率;采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)进行细胞周期分析;采用RT-PCR法检测维甲酸α受体(retinoic acid receptorα,RARα)mRNA的表达.结果:不同浓度的全反式维甲酸对HO8910细胞生长均起到抑制作用(P＜0.05),并呈浓度和时间依赖关系;能够增加G1期细胞比例,同时降低S、G2/M期细胞比例(P＜0.05),细胞增殖指数PI(P＜0.05)降低;能够上调维甲酸α受体mRNA的表达(P＜0.05),从而抑制卵巢癌细胞增殖.结论:说明全反式维甲酸对卵巢癌细胞HO8910的增殖具有显著的抑制作用,其机制可能是通过上调维甲酸α受体mRNA的表达来实现的.     

Ezh2在全反式维甲酸诱导的P19神经细胞分化过程中的作用

目的 探讨组蛋白甲基转移酶Ezh2在P19神经细胞分化中的作用.方法 通过Western印迹检测全反式维甲酸 (RA)诱导TuJ1蛋白的表达;通过染色质免疫沉淀技术检测Ngn1基因启动子区Ezh2的结合与H3K27三甲基化的变化;通过实时定量RT-PCR检测RA诱导P19细胞分化后 Ezh 2 mRNA表达.结果 在RA诱导P19细胞中,Ezh2与H3K27me3在Ngn1启动子区的结合逐渐升高,并在诱导后第2天达到高峰,然后迅速降低,随后出现神经分化特异标志.结论 Ezh2在RA诱导的P19细胞早期产生一种抑制性的组蛋白修饰标志H3K27me3,通过避免Ngn1的过早表达,确保P19细胞的正常分化.     

维甲酸(RA)在临床上的应用

维甲酸类(retinoids)药物,是维生素A天然的以及人工合成的具有生物活性的衍生物.维生素A(视黄醇)进入人体后转变成视黄醛,再经氧化变成维甲酸(retinoic acids,RAs).维甲酸的自然形式是全反式维甲酸(All—trans—Retinoic acid,ATRA),在脊椎动物发育、细胞分化和维持体内平衡中发挥广泛的效应.     

全反式维甲酸对大鼠肾间质纤维化的延缓作用及其可能分子机制

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对大鼠肾间质纤维化(RIF)的延缓作用及其可能分子机制。方法将36只大鼠随机分为ATRA组、RIF模型组和假手术组,每组12只。ATRA组、RIF模型组大鼠采用左侧输尿管梗阻方法建立RIF模型,假手术组只开腹探及肾包膜。术前1 d,ATRA组给予ATRA灌胃,其余2组灌胃等量生理盐水。于造模后的第2周末和第4周末,每组随机抽取6只大鼠。留取大鼠左侧肾组织,行Masson染色并计算RIF指数,免疫组织化学法检测肾组织维甲酸受体α(RARα)、阻抑素、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)、纤维连接蛋白(FN)的表达水平,实时荧光定量PCR检测肾脏组织RARα、阻抑素的mRNA表达水平。结果造模后的第2周末和第4周末,假手术组、ATRA组、RIF模型组RIF指数、ColⅣ和FN的蛋白表达水平依次升高,RARα和阻抑素的蛋白、mRNA表达水平依次降低(均P<0.05);在ATRA组、RIF模型组,与第2周末比较,第4周末RIF指数、ColⅣ和FN的蛋白表达水平更高,而RARα和阻抑素的蛋白、mRNA表达水平更低(均P<0.05)。在RIF模型组中,第2、4周末时...     

全反式维甲酸在帕金森病大鼠模型中脑神经干细胞移植治疗中的作用

目的 观察全反式维甲酸(atRA)处理的大鼠中脑神经干细胞(NSCs)移植对帕金森病(PD)模型大鼠的治疗作用.方法 制备PD大鼠模型并将成功模型分为对照组、常规培养中脑NSCs组和atRA处理中脑NSCs组(atRA+NSCs组).动态观察模型大鼠NSCs移植前后的行为学变化,定量分析纹状体多巴胺能神经元表达的变化.结果 atRA+NSCs组与对照组、NSCs组比较,实验动物的行为功能指标均得到有效改善(P＜0.05或0.01).atRA+NSCs组与NSCs组大鼠纹状体移植区BrdU标记的酪氨酸羟化酶染色阳性细胞(TH+细胞)分别为(261.2±31.7)、(204.3±25.1)个,差异有统计学意义(P＜0.05),而对照组纹状体区没有BrdU标记TH+细胞.结论 atRA在PD大鼠模型中脑NSCs移植治疗中有明显的促进作用,具有潜在的临床应用价值.     

血栓调节蛋白在全反式维甲酸诱导的急性早幼粒细胞白血病中的作用

急性早幼粒细胞性自血病（acutepromyelocyticleukemi—a;APL）是急性髓细胞性白血病中一种不常见的亚型,它有着高死亡率,绝大多数死亡是由于颅内出血所致。全反式维甲酸介入的诱导性化疗革命性地改变了APL患者的治疗方法,接近90％新诊断的APL患者得到了完全缓解,     

Notch1在全反式维甲酸诱导的神经干细胞分化中的作用

目的 探究Notch1在全反式维甲酸诱导的神经干细胞分化中的作用,揭示其对神经管发育的影响。 方法 免疫荧光检测神经干细胞标记物——巢蛋白(Nestin)、神经元标记物——神经丝蛋白(NF)、星型胶质细胞标记物——神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及少突胶质细胞标记物——半乳糖脑苷脂(GALC)及Notch1在上述细胞中的分布。Western blotting检测神经干细胞中Notch1、NF、GFAP、GALC分别在普通分化培养基和全反式维甲酸培养基(ATRA)中1、3、5、7 d的含量。神经干细胞分为4组:将普通分化培养基设为A组,普通分化培养基+DMSO组设为B组,普通分化培养基+DMSO+25 μmol/L γ-内分泌酶抑制剂(γSI)组设为C组,普通分化培养基+DMSO+50 μmol/L γSI设为D组,Western blotting检测各组细胞中Notch1含量。 结果 免疫荧光鉴定Nestin、NF、GFAP、GALC呈阳性,且在上述细胞胞膜上及胞质中有Notch1存在。普通分化培养基中Notch1在第5天较第1天明显增加,NF在第5天较第3天明显降低,GFAP与GALC含量在第5天较第1天明显下降。加入ATRA的普通分化培养基中,Notch1在第7天较第1天明显减少,而NF、GFAP、GALC在第7天较第1天明显增加。加入γSI后,Notch1胞内段NICD含量明显降低。 结论 Notch1信号通路抑制神经干细胞分化,ATRA通过抑制Notch1促进神经干细胞的分化。     

维甲酸相关孤儿核受体-γ蛋白在肝细胞癌组织中的表达及其与上皮-间质转化的关系研究

目的 探讨维甲酸相关孤儿核受体-γ(retinoid-related orphan receptor-γ, ROR-γ)与肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）临床病理特征及人肝癌细胞系HepG2上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的关系,并探讨其作用机制。方法 选取2016年6月至2020年5月赤峰学院附属医院90例肝癌组织及56例癌旁正常组织石蜡标本、20例肝癌组织及癌旁正常组织新鲜术后标本,采用免疫组织化学法和蛋白质印迹法（Western blotting）检测ROR-γ在肝癌及癌旁正常组织中的表达。将ROR-γ小干扰RNA转染至HepG2细胞,采用Western blotting检测ROR-γ、Smad2以及EMT标志物（E-cadherin、vimentin）蛋白表达水平。结果 免疫组织化学染色和Western blotting结果显示,与癌旁正常组织比较,肝癌组织中ROR-γ蛋白阳性表达率显著升高（71.1%比42.9%）,差异有统计学意义（P<0.05）,且ROR-γ蛋白阳性表达...     

lncRNA Meg3在全反式维甲酸和转化生长因子β3影响小鼠腭突间充质细胞增殖过程中的作用

目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)Meg3在全反式维甲酸(atRA)和转化生长因子β3(TGF-β3)影响胎鼠腭突间充质细胞增殖过程中的作用。方法:分离、培养妊娠13 d胎鼠腭突间充质细胞。EdU法检测对照组(未处理)、atRA组(5μmol/L atRA)和TGF-β3组(10μg/L TGF-β3)处理48 h腭突间充质细胞增殖能力的变化。荧光原位杂交和实时荧光定量PCR法检测上述3组Meg3的定位和相对表达量。利用EdU实验检测Meg3 siRNA转染前后atRA和TGF-β3对腭突间充质细胞增殖的影响。结果:与对照组相比,atRA处理48 h可抑制腭突间充质细胞的增殖,TGF-β3处理48 h可促进腭突间充质细胞增殖(P<0.05)。与对照组相比,atRA可促进腭突间充质细胞中Meg3的表达,TGF-β3可抑制Meg3的表达(P<0.05)。Meg3基因沉默后,与对照组相比,Meg3 siRNA组、atRA和TGF-β3处理组胎鼠腭突间充质细胞增殖能力均增强(P<0.05)。结论:atRA对胎鼠腭突间充质细胞的增殖抑制作用可能主要通过Meg3介导,而T...