上皮钙黏着蛋白mRNA表达与肺癌的相关性研究

目的 探讨E-cadherin(上皮钙黏着蛋白,E-cad)mRNA与肺癌及其病理类型之间的相关性.方法 用巢式RT-PCR检测50例肺癌患者的癌、癌旁和远癌肺组织及5例肺良性对照标本中的E-cad mRNA的相对表达量.结果 癌组织1.33±0.53、癌旁组织1.65±0.60、远癌组织2.01±0.46、非肺癌对照肺组织2.09±0.09,经方差分析癌、癌旁和远癌组织差异有统计学意义(F=18.810,P<0.01),但远癌组织与非肺癌对照肺组织之间的差异无统计学意义(P>0.05).肺鳞癌、腺癌及腺鳞癌的癌组织、癌旁组织和远癌组织中E-cad mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 E-cad mRNA表达减少或缺失与肺癌的发生和发展有相关性,与肺癌的组织类型无关.     

蛋白质免疫印迹技术检测肺癌组织上皮钙粘蛋白的表达

目的探讨上皮钙粘蛋白（E—cad）与肺癌及其病理类型之间的相关性。方法应用蛋白质免疫印迹技术（Westernblot）检测30例肺癌患者的癌、癌旁和远癌肺组织及5例肺良性对照标本中E—cad的表达,并对部分表达阴性的标本用免疫组化方法进行验证。结果癌组织、癌旁组织、远癌组织E-cad的阳性率分别为36．7％、70．0％、96．7％。癌组织E—cad阳性率明显低于癌旁组织（P〈0．017）,也明显低于远癌组织（P〈0．017）;癌旁组织E—cad阳性率明显低于远癌组织（P〈0．017）。在30例肺癌患者鳞癌、腺癌及腺鳞癌的癌组织中E—cad阳性率分别为33．3％、40．0％、33．3％;鳞癌、腺癌及腺鳞癌的癌旁组织中的阳性率分别66．7％、73．3％、66．7％;鳞癌、腺癌及腺鳞癌的远癌组织中的阳性率分别为91．7％、100．0％、100．0％。癌、癌旁和远癌组织中E—cad的表达与肺癌组织学类型无关（P〉0．05）。结论E—cad蛋白表达减少或缺失与肺癌有相关性,与肺癌的组织类型无相关性。     

Ⅰ型钙黏蛋白基因异常甲基化及其功能蛋白表达与肺癌的相关性

目的 探讨Ⅰ型钙黏蛋白(cadherin 1,CDH1)基因甲基化及其功能蛋白表达与肺癌的相关性.方法 分别提取基因组DNA、总RNA和总蛋白,用半定量荧光甲基化特异PCR(MSP)、巢式逆转录PCR(nRT-PCR)和免疫印迹法(WB)检测30例肺癌患者的癌、癌旁和远癌肺组织及5例肺良性疾病对照肺组织中CDH1甲基化、mRNA相对表达和上皮钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)表达情况,并对部分表达阴性标本用免疫组化法进行验证.结果 半定量荧光MSP检测CDH1启动子甲基化相对比值,癌组织为0.13%～450.67%、中位数33.61%,癌旁组织为0.00%～177.02%、中位数18.04%,远癌组织为0.00%～51.68%、中位数13.69%.经配对秩和检验分析癌与癌旁组织和远癌组织中CDH1甲基化程度差异有统计学意义(Z分别为-2.355和-3.527,P分别为＜0.05和＜0.01).nRT-PCR检测CDH1 mRNA表达的相对比值,癌组织为1.33±0.48,癌旁组织为1.61±0.55,远癌组织为1.93±0.45、肺良性疾病对照肺组织为2.09±0.09,经方差分析,癌与癌旁和远癌组织的差异有统计学意义(F=9.081,P＜0.01).WB结果显示,癌组织E-cad阳性率为36.7%(11/30)、癌旁组织为70.0%(21/30)、远癌组织为96.7%(29/30),经确切概率法分析癌与癌旁和远癌组织的差异有统计学意义(X2分别为6.70、24.30和7.68,P均＜0.01).而肺良性疾病对照肺组织阳性率为100%(5/5).结论 肺癌患者癌组织CDH1启动子发生甲基化后,可抑制该基因的转录,进而影响E-cad蛋白的表达,CDH1异常甲基化与肺癌的发生有相关性.     

甲状腺转录因子-1在肺癌中的表达及意义

目的探讨甲状腺转录因子(TTF-1)在支气管肺癌中的表达和意义。方法经手术切除或纤维支气管镜活检且病理确诊肺癌65例,采用免疫组化方法检测TTF-1在原发性肺癌中的表达,并检测癌旁组织24例和肺继发性腺癌25例TTF-1的表达。结果TTF-1在肿瘤细胞胞核呈棕黄色或褐色颗粒阳性表达。TTF-1在肺鳞癌和腺癌的阳性率分别为8.33%和79.17%,差异有统计学意义(P<0.05);TTF-1在肺小细胞癌阳性率为64.71%,稍低于原发性肺腺癌的表达,差异无统计学意义(P<0.05);而在癌旁组织及肺继发性腺癌中TTF-1完全不表达,与原发性肺腺癌相比差异有统计学意义。结论TTF-1在肺腺癌中表达良好,具有较高的敏感性和特异性,可作为肺腺癌的一个比较敏感和特异的免疫组化标记;TTF-1在转移性肺腺癌中不表达,对原发性支气管肺腺癌和转移性肺腺癌有鉴别诊断价值。     

肺腺癌中的TTF-1、NAPSINA病理诊断价值

目的探讨甲状腺转录因子-1(TTF-1)与天冬氨酸蛋白酶A(NapsinA)在肺腺癌病理诊断中的价值。方法选取80例肺腺癌组织标本为实验组,以其它类型肺癌组织标本(包括鳞癌、腺鳞癌、小细胞癌、大细胞癌等)共80例作为对照组。采用免疫组织化学PV-6000两步法分别对肺癌组织标本中的TTF-1与NapsinA两项指标进行检测,分析二者的表达水平和阳性率,并评估联合采用TTF-1与NapsinA两项指标对肺腺癌的诊断价值。结果实验组患者的TTF-1和NapsinA阳性率分别为86.25%和77.5%,显著高于对照组(P0.05);TTF-1和NapsinA阳性率与患者的年龄及性别无相关性(P0.05),与肿瘤大小、分化程度、TNM分期等指标具有相关性(P0.05);TTF-1和NapsinA联合检测的灵敏度和特异度分别为92.74%和98.21%,显著高于两项指标单项检测。结论 TTF-1、NapsinA在肺腺癌中表达的阳性率显著高于其它类型非小细胞癌,且联合应用这两种免疫组化标志物检测的敏感度和特异度优于任意一种标志物单独检测,对肺腺癌准确、及时的诊断具有重要意义,同时为肺腺癌进行靶向治疗提供依据。     

食管鳞癌组织中Fas FasL蛋白的表达及意义

目的 观察食管鳞状细胞癌癌灶、癌旁组织、癌转移及非转移淋巴结中Fas、FasL蛋白的表达情况,探讨它们在食管鳞癌发生发展中的作用及其临床意义.方法收集食管鳞癌患者的癌及癌旁组织,转移及非转移淋巴结,应用免疫组化S-P染色技术测定以上组织Fas、FasL的表达情况.结果 Fas蛋白表达在癌组织中55.6%低于癌旁组织85.19%(P<0.05),高分化癌组织84.2%高于中分化44.4%和低分化25.0%(P<0.05),伴淋巴结转移癌组织38.1%低于无淋巴结转移者66.7%(P<0.05),转移组淋巴结33.3%低于非转移组66.7%(P<0.05);FasL蛋白表达在癌组织中81.5%高于癌旁组织48.2%(P<0.05),高分化57.9%低于中分化92.6%和低分化100%(P<0.05),T2期66.7%低于T3期96.0%和T4期100%(P<0.05),伴淋巴结转移癌组织100%高于无淋巴结转移者69.7%(P<0.05),转移组淋巴结71.4%高于非转移组的42.4%(P<0.05);比较临床TNM分期,Fas及FasL蛋白阳性表达率则未见差异(均P>0.05).结论 食管鳞癌组织中存在Fas表达下调,FasL表达上调,并在食管鳞癌的发生转移中发挥作用.     

非小细胞肺癌组织中Napsin-A表达与EGFR基因的相关性研究

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Napsin-A表达与表皮生长因子受体(EGFR)基因的关系。方法采用免疫组织化学法检测89例肺腺鳞癌组织中Napsin-A的表达情况,并用ARMS试剂盒检测上述组织中EGFR基因的表达情况,分析Napsin-A的表达与EGFR基因的关系。结果在NSCLC组织中,腺癌和鳞癌的Napsin-A阳性率分别为96.2%和5.6%,两者比较差异有统计学意义。肺腺癌组织中,EGFR基因突变率为54.7%,而Napsin-A表达阳性者的突变率高达100.0%;肺鳞癌组织中,EGFR基因突变率为5.6%,而Napsin-A表达阳性者的突变率为50.0%,两者比较,差异有统计学意义。结论Napsin-A在肺腺癌组织中高表达,且在腺鳞癌中表达阳性者EGFR基因突变率较高,Napsin-A表达阳性者可建议行EGFR基因检测。     

细胞增殖抑制基因、p21WAF1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义

目的 探讨细胞增殖抑制基因(HSG/Mfn2)、p21WAF1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及相关性.方法 采用免疫组化SP法检测92例非小细胞肺癌中HSG/Mfn2、p21WAF1蛋白的表达.结果 HSG/Mfn2在肺鳞癌、腺癌、非癌肺组织中吸光度值分别为15.06±2.73、12、21±2.96、10.36±3.60,差异有统计学意义(P<0.05),并与肺癌分化程度有关.p21WAF1蛋白在肺鳞癌、腺癌、非癌肺组织中吸光度值分别为3.16±0.98、3.44±0.22、0.06±0.32,肺鳞癌和腺癌组织与非癌组织比较差异均有统计学意义(均P<0.05),与分化程度、淋巴结转移有关.结论 HSG/Mfn2,p21WAF1蛋白与肺癌发生、发展密切相关.二者在肺癌组织中的表达呈正相关.     

酶免疫组化技术检测MAGE-A3抗原在肺癌组织中的表达

目的检测黑色素瘤抗原A3(MAGE-A3)在原发性肺癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法应用间接酶免疫组化技术检测MAGE-A3抗原在48例肺癌组织中的表达情况,并分析其与肺癌分型和淋巴结转移的关系。结果 48例肺癌患者中有29例(60.4%)为MAGE-A3抗原表达阳性,19例(39.6%)为MAGE-A3抗原表达阴性;肺腺癌、肺鳞癌、肺腺鳞癌和小细胞肺癌的阳性率分别为80.0%、31.3%、75.0%和33.3%;肺腺癌组的阳性率显著高于肺鳞癌组(χ2=9.744,P<0.05),淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性率差异无统计学意义(χ2=0.001,P>0.05)。结论 MAGE-A3抗原在肺癌组织中有较高的表达率,肺腺癌组MAGE-A3的表达阳性率显著高于肺鳞癌组,肺癌淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性率差异无统计学意义。     

肺癌胸腔积液肺耐药相关蛋白（LRP）基因检测及临床意义

目的 探讨胸腔积液肺耐药蛋白基因检测临床意义.方法 用荧光定量RT-PCR法检测114例肺癌患者胸腔积液标本(腺癌80例,鳞癌17例,差分化癌10例,小细胞癌7例)肺耐药蛋白基因表达,并进行胸腔积液细胞学检测.结果 腺癌、鳞癌、差分化癌及小细胞肺癌胸腔积液LRP mRNA阳性率及中位拷贝数分别为72.94%(62/85),45.45%(5/11),40.00%(4/10),28.57%(2/7);23.58,19.22,20.15,8.36 copies/ml.非小细胞肺癌各种病理类型标本中LRP mRNA阳性率均显著高于小细胞肺癌(P均<0.05),在非小细胞肺癌的各种病理类型中,以腺癌LRP mRNA阳性率最高;非小细胞肺癌各种病理类型胸腔积液标本LRP mRNA中位拷贝数无显著性差异(P均>0.05).结论 胸腔积液LRP mRNA检出,不仅明确了肺癌的诊断,也表明该肺癌细胞具有耐药性.     

肝细胞肝癌组织c-Met、Fascin及CD44表达与临床病理特征及预后的相关性

目的 探讨肝细胞肝癌（hepatocelluar carcinoma, HCC）中c-Met、Fascin及CD44的表达与临床病理特征及预后之间的关系。方法 从癌症基因组图谱（the cancer genome atlas,TCGA）数据库下载HCC中c-Met、Fascin及CD44的RNA SEqV2资料,比较50例HCC组织和对应癌旁肝组织中三者的表达。采用蛋白质印迹法分别检测6例新鲜HCC及对应癌旁肝组织中c-Met、Fascin及CD44的蛋白表达。通过免疫组织化学法（immunohistochemistry,IHC）检测186例HCC患者中HCC组织及癌旁组织c-Met、Fascin及CD44蛋白的表达,分析三者与临床病理特征及预后的关系。结果TCGA显示,HCC组织中c-Met、Fascin及CD44的mRNA表达较癌旁肝组织升高（P<0.01）。蛋白质印迹显示,新鲜HCC组织中c-Met、Fascin及CD44蛋白表达水平均高于癌旁肝组织（P<0.05）。IHC显示,186例HCC患者癌组织及癌旁组织中,c-Met蛋白表达阳性率分别为60.2%(112/1...     

WWOX蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的通过WWOX蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）癌灶与癌旁正常组织中表达的比较,探讨WWOX蛋白在NSCLC发生、发展中的作用。方法用免疫组化elivision法检N51例NSCLC组织标本中WWOX蛋白的表达,与20例癌旁正常组织标本作对照,并分析WWOX蛋白与NSCLC患者年龄、性别、组织分化程度、病理类型、吸烟及淋巴结转移等关系。结果WWOX蛋白在NSCLC组织中表达的阳性率25．49％（13／51）,癌旁正常组织中表达的阳性率85．0％（17／20）,二者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。WWOX蛋白阳性率与NSCLC组织分化程度、病理类型、吸烟、有无淋巴结转移有相关关系,而与患者的年龄、性别及肿瘤TNM分期无相关性。结论WWOX蛋自在NSCLC组织中表达明显低于癌旁正常组织,WWOX蛋白的表达与NSCLC的多种重要临床病理预后因素相关,有望成为判断NSCLC临床发展的分子标记。     

叉头框蛋白J2在非小细胞肺癌组织 和癌旁组织中的表达及临床意义

目的 探讨叉头框蛋白J2(forkhead box J2,Foxj2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者癌组织中的表达及其临床意义。方法 收集50例NSCLC患者手术切除肺癌组织标本,用免疫印迹法(western blot)和免疫组化法检测Foxj2在癌组织和癌旁组织中的表达。结果 western blot显示Foxj2在癌旁组织中的表达高于癌组织,两组间差异具有统计学意义(P<0.05); 免疫组化结果表明Foxj2在癌旁组织中的阳性细胞数明显高于癌组织,且无淋巴结转移组Foxj2的表达强度高于有淋巴结转移组,两组间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Foxj2参与NSCLC的发生发展过程,并且可能与NSCLC淋巴结转移有关。     

细胞周期蛋白G2在结直肠癌中表达水平与临床意义

目的探讨细胞周期蛋白G2(cyclin G2,CCNG2)在结直肠癌中的表达意义。方法采用免疫组织化学方法、蛋白印迹法(Western blot)检测57例结直肠癌组织及距其癌组织边缘2cm以上的镜下未见癌浸润的正常组织中蛋白的表达情况。结果免疫组织化学结果表明,CCNG2蛋白在结直肠癌组织中的表达较正常结直肠组织明显降低,分别为38.6%(22/57)、91.3%(31/33)(P0.05)。Western blot结果表明,CCNG2的蛋白在结直肠癌组织的表达相对量较正常结直肠组织的表达相对量明显降低(P0.05)。CCNG2蛋白表达与结直肠癌T分期、淋巴结转移、肿瘤临床分期及肿瘤分化有关(P0.05)。结论结直肠癌组织中CCNG2蛋白表达明显减低,且与结直肠癌T分期、淋巴结转移、临床分期及肿瘤分化有关。     

E-cadherin和CD44V6蛋白在大肠癌患者中表达的临床意义

大肠癌是严重威胁人类健康和生命的常见恶性肿瘤之一。近年来,其发病率明显增加,发病年龄提前。大肠癌的转移是一个十分复杂的过程,涉及到多种因子的异常改变。我们应用免疫组织化学方法,检测黏附分子E-cadherin和CD44V6蛋白在大肠癌患者中的表达,并对其与大肠癌患者临床、病理     

核干细胞因子基因在人肝癌组织及细胞中转录特征及临床意义

目的 研究核干细胞因子(nucleostemin,NS)基因在肝癌组织和细胞中的表达特性,探讨其在肝癌发生中的意义.方法 用PCR方法从人肝癌cDNA中分别进行NS片段和全长基因的扩增,并将扩增产物连接到pMD18-T载体进行测序验证;在40例肝癌和癌旁组织,以及3种肝癌细胞系cDNA中进行NS片段的PCR扩增及分析.结果 分别从肝癌cDNA克隆到了NS基因的部分片段(450 bp)及全长(1 650 bp);发现在肝癌组织中NS的表达高于癌旁组织,临床病例分析表明3期和4期病例NS基因上调表达显著高于下调表达;肝癌细胞株分析结果提示,NS基因随肝癌细胞转移能力的增加表达量增加.结论 NS基因参与肝癌细胞的增殖过程,对肝癌的发生起促进作用.     

膜联蛋白A1在不同骨转移潜能的肺癌细胞中的表达差异研究

目的探究膜联蛋白A1(AnnexinA1)在肺癌骨转移中的表达及意义。方法应用RT-PCR和Western blot分别从mRNA水平和蛋白水平检测不同骨转移潜能肺癌细胞系SBC-5与SBC-3中AnnexinA1的表达差异;通过免疫化学方法分别从细胞和组织中检测AnnexinA1的表达差异。结果 AnnexinA1在产生骨转移的肺癌细胞SBC-5中的表达强度明显高于非骨转移肺癌细胞SBC-3。伴有肺癌骨转移者AnnexinA1表达阳性率为97.1%(33/34),无骨转移者AnnexinA1表达阳性率为43.3%(13/30),其差异有显著性(P<0.05)。结论 AnnexinA1表达与肺癌骨转移可能相关。     

上皮-间质转化与胰腺癌生物学行为的关系

目的探讨上皮-间质转化（EMT）在胰腺癌浸润转移中的作用。方法采用免疫组织化学PV 6000法检测47例胰腺癌组织上皮-钙黏蛋白（E-cad）和波形蛋白（Vim）的表达。把E-cad阴性-Vim阳性表达作为癌细胞发生EMT的免疫表型。结果 47例胰腺癌组织中E-cad和Vim阳性率分别为46.8%、23.4%,其中E-cad阴性-Vim阳性表达7例,EMT发生率为19.1%。EMT发生率与胰腺癌的分化程度和转移有关（χ^2=6.73、4.06,P〈0.05）,与临床分期和1年生存率无关（χ^2=3.56、2.72,P〉0.05）。结论 EMT在胰腺癌的分化、浸润和转移过程中起重要作用。