实验性感染斯氏狸殖吸虫大鼠血清抗体三种检测方法的比较

目的 比较三种血清学方法 对斯氏狸殖吸虫实验感染大鼠抗体检测的效果. 方法 采用斑点ELISA法(Dot-ELISA)、免疫酶染色试验(IEST)和后尾蚴膜试验检测斯氏肺吸虫病大鼠血清IgG抗体. 结果 三种方法 的阳性率分别为97.7%, 、97.5%和95.2%,差异无统计学意义(P＞0.05).用此三种血清学方法 检测正常大鼠、旋毛虫病大鼠、血吸虫病兔和蛔虫病人血清IgG抗体,除1例蛔虫病人血清IEST出现阳性反应外均为阴性反应. 结论 三种方法 对斯氏狸殖吸虫特异性IgG抗体的检测均有较好的敏感性和特异性.     

免疫酶染色试验与环幼沉淀试验诊断旋毛虫病的研究

目的比较免疫酶染色试验(IEST)和玻片环幼沉淀试验(CPT)检测感染旋毛虫大鼠血清抗体的敏感性和特异性。方法采用IEST和CPT二种免疫学诊断技术检测实验感染旋毛虫大鼠血清特异性抗体。结果二种方法阳性率分别为97.6%和95.1%,差异无统计学意义(P0.05)。同时用此二种血清学方法检测正常大鼠、斯氏肺吸虫感染大鼠、日本血吸虫感染兔及蛔虫病人血清,除1例蛔虫病人CPT阳性,其他均为阴性。从第2周开始旋毛虫感染大鼠IEST和CPT均能测出抗体,第5周达高峰。结论 IEST和CPT对旋毛虫特异性IgG抗体的检测均有较好的敏感性和特异性。     

肺吸虫病金标渗滤试剂盒检测人、鼠斯氏狸殖吸虫抗体的研究

目的探讨斯氏狸殖吸虫病敏感性和特异性较好的免疫学诊断技术。方法采用金标渗滤法(DIGFA-kit)检测秦巴山区十堰市居民、实验大鼠和对照组感染旋毛虫大鼠、感染血吸虫兔、粪检确诊蛔虫病人和正常健康大鼠血清Ig G抗体。结果 DIGFA-kit检测十堰市居民和实验大鼠血清斯氏狸殖吸虫Ig G抗体的检出率分别为4.9%和97.6%。从第2周开始,实验大鼠即能测出抗体,第4-9周达高峰。对照组除1份血吸虫兔血清阳性外均为阴性。结论金标渗滤试法对斯氏狸殖吸虫病血清Ig G抗体的检测有较好的敏感性和特异性。     

金标免疫渗滤法检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM的评价

目的为寻求简便、可靠的方法,用于斯氏狸殖吸虫病早期诊断及疗效考核。方法建立检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM抗体的金标免疫渗滤法(DIGFA),并对53例患者在治疗前和治疗后血清中特异抗体水平的动态变化进行研究。结果斯氏狸殖吸虫病患者经有效药物治疗后3个月、6个月、1年、1．5年连续采血,经DIGFA检测连续观察的结果表明,IgM抗体出现较早,阴转较为明显和迅速,治疗后3个月的阴转率就达47．2％(25／53),1年的阴转率可达86．8％(46／53);而IgG抗体则出现较晚,阴转缓慢,治疗后1．5年的阴转率仅为15．1％(8／53)。结论DIGFA检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM抗体可作为早期诊断及疗效考核的有效方法。     

肺吸虫病金标渗滤试剂盒（DIGFA-Kit）的现场初步应用

滴金免疫（金标）渗滤法（DIGFA）是一种新发展起来的免疫标记技术，目前已成功地应用于日本血吸虫病、华支睾吸虫病、旋毛虫病、弓形虫病、囊虫病等寄生虫病的诊断。肺吸虫病金标渗滤法近年来有较为深入的研究，并研制成试剂型”。该试剂盒已证明具有敏感性高、特异性强、操作简便、快速、不需要特殊仪器设备等特点，适合临床检验和现场应用。2005年我们应用肺吸虫病金标渗滤试剂盒，对浙江宁波和泰国Nakom-nayok省肺吸虫病流行区进行人群血清流行病学调查，并应用EUSA平行对照检测；同时对不同虫种引起的肺吸虫病人血清进行检测，初步考核该试剂盒的现场应用价值。     

斑点免疫金渗滤技术检测抗心磷脂抗体

目的建立斑点免疫金渗滤技术检测抗心磷脂抗体(Ac Ab)的新方法。方法采用牛心磷脂抗原,以胶体金颗粒结合的羊抗人Ig G为标记抗体,根据斑点免疫金渗滤技术原理,建立斑点免疫金渗滤技术法检测人血清抗心磷脂抗体。分别检测78份抗心磷脂抗体阳性血清和80份正常体检女性血清,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)的结果对比分析。结果与酶联免疫吸附试验的结果对比,其符合率为91.77%,特异性为95.00%,敏感性为88.46%,交叉试验与重复试验结果显示,斑点免疫金渗滤技术测定抗心磷脂抗体具有较好的稳定性和特异性。结论斑点免疫金渗滤技术可以快速准确地测定血清抗心磷脂抗体,便于推广普及。     

斑点金免疫渗滤试验同步检测抗斯氏狸殖吸虫IgM和IgG抗体的研究

目的:寻求简便、快速、可靠的方法,用于斯氏狸殖吸虫病早期诊断及疗效考核.方法:建立检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的斑点金免疫渗滤试验(DIGFA),并对48例患者在治疗前和治疗后血清中特异抗体水平的动态变化进行研究.结果:斯氏狸殖吸虫病患者经有效药物治疗后3月、6月、1年、1.5年连续采血,经DIGFA检测连续观察的结果表明,IgM抗体出现较早,阴转较为明显和迅速,治疗后3月的阴转率就达47.9%(23/48),1年的阴转率可达89.6%(43/48);而IgG抗体则出现较晚,阴转缓慢,治疗后1.5年的阴转率仅为18.8%(9/48).结论:DIGFA为检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的有效方法,检测IgM抗体可用于早期诊断及疗效考核,IgG抗体的检测主要用于回忆性诊断,却不能用来判断治愈或诊断再感染.     

快速检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的金标免疫渗滤法的建立和应用

目的 :建立一种检测斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体的快速、敏感和特异的新方法。方法 :以斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原为上样抗原 ,胶体金标记羊抗人IgG为显色剂 ,建立检测斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体的斑点金免疫渗滤法 (DIGFA) ;并以ELISA作平行对照。结果 :DIGFA和ELISA分别检测 83例斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体 ,其阳性率分别为 95 .2 % (79/ 83)和 91 .6 % (76 / 83) ,两法差异无显著性 (P >0 .0 5 )。DIGFA分别检测正常人血清32例、华支睾吸虫病患者血清 2 3例和日本血吸虫病患者血清 36例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 4 .3% (1 / 2 3)和 8.3% (3/ 36 ) ;DIGFA和ELISA两法的总符合率达 92 .3% (36 / 39)。结论 :DIGFA的特异性和敏感性与ELISA相近 ,但方法快速、试剂稳定 ,且不需特殊设备 ,适用于各级医疗单位和血清流行病学调查     

检测抗HSV-1IgG的斑点金免疫渗滤方法的建立

目的：建立检测人血清中抗单纯疱疹病毒Ⅰ型IgG（抗HSV-1 IgG）的斑点金免疫渗滤法（DIGFA）。方法：增殖纯化HSV-1抗原并包被于硝酸纤维素膜，自制胶体金并用于标记羊抗人IgG，自制斑点金免疫渗滤检测装置，用于检测血清中抗HSV-1 IgG。结果：当血清样本中抗HSV-1 IgG为阳性时，滴加的金标羊抗人IgG可使检测装置膜上出现红色斑点。以DIGFA与酶联免疫吸附试验（ELISA）用于检测血清样本41份，两法差异无显著性（X^2=0.01，P〉0.05）。结论：建立了检测抗HSV-1 IgG的斑点金免疫渗滤方法，该法较其他方法检测时间短，操作简便快捷。     

鄂西北地区斯氏狸殖吸虫病血清流行病学调查研究

目的:了解斯氏狸殖吸虫病在十堰地区居民的感染现状。方法:抽取十堰地区5个县(市)5个调查点,对待检人群取静脉血2 m L,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和金标渗滤法快速检测试剂盒(DIGFA-kit)检测斯氏狸殖吸虫特异性Ig G抗体。结果:ELISA和DIGFA共检测血清2 961份,检出阳性血清127份,阳性检出率为4.29%;丹江口市血清阳性率最高,为8.28%(56/676),房县检出率最低,为2.89%(16/554),两地检出率差异具有统计学意义(P<0.01)。调查人群以10岁以下儿童阳性率最高,为5.92%(17/287),其次是10~19岁阳性检出率为5.69%(32/562),50~59岁年龄组最低,为2.61%(11/421),年龄组之间阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。男性和女性抗体阳性检出率分别为4.37%(69/1 578)和4.19%(58/1 283),二者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:斯氏狸殖吸虫感染在十堰地区仍然存在,应采取有效的综合防治措施,控制感染。     

猪囊虫头节、囊壁抗原Dot-ELISA和IEST试验在脑囊虫病诊断中的初步比较研究

比较了猪囊虫头节抗原(CSAg)、囊壁抗原(CWAg)斑点(ELISA)和免疫酶染色试验(IEST)在脑囊虫病诊断中的敏感性、特异性和交叉反应.CSAg、CWAg Dot-ELISA 的检出阳性率分别是94.6%(53/56)和96.4%(54/56),IEST 的阳性率为98.2%.两种方法与正常人、并殖吸虫病和华支睾吸虫病患者血清均无假阳性反应、但与细粒棘球蚴病患者血清均有交叉反应.     

免疫印渍试验在斯氏肺吸虫病血清学诊断中的意义

应用免疫印渍试验（Immunoblottingtest）分析斯氏肺吸虫成虫、幼虫和囊蚴期的虫体可溶性抗原．结果显示感染斯氏肺吸虫的人和动物血清可识别22、24和26KD抗原蛋白带．依据病人血清对上述抗原组仿的识别，用免疫印渍试验诊断24例斯氏肺吸虫病人，皆为阳性，而对照组显阴性．与Dot－ELISA比较试验的敏感性和特异性，两试验的阳性检出事无显著性差异（P＞0．05）．Dot-ELISA的交叉反应率为18．75％（6／32），而免疫印渍试验无交叉反应．表明斯氏肺吸虫的22、24和26KD蛋白带为特异性诊断抗原，免疫印渍试验为斯氏肺吸虫病的高度敏感和特异的血清学诊断方法．     

猪囊虫头节、囊壁抗原Dot-ELISA和IEST试验在脑囊虫病诊断中的初步比较研究

比较了猪囊虫头节抗原(CSAg)、囊壁抗原(CWAg)斑点(ELISA)和免疫酶染色试验(IEST)在脑囊虫病诊断中的敏感性、特异性和交叉反应.CSAg、CWAgDot-ELISA的检出阳性率分别是94.6%(53/56)和96.4%(54/56),IEST的阳性率为98.2%.两种方法与正常人、并殖吸虫病和华支睾吸虫病患者血清均无假阳性反应、但与细粒棘球蚴病患者血清均有交叉反应.     

斯氏狸殖吸虫宿主转换的实验研究

用斯氏狸殖吸虫囊蚴经口感染小鼠，大鼠，分期剖检，在体腔，肌肉，肝，肺等脏器均获得童虫，大部分童虫形态结构与脱囊后尾蚴无异。将所获童虫在小鼠与小鼠，大鼠与大鼠，小鼠与大鼠之间进行宿主转换，虫体仍处于童虫状态。囊蚴感染后所获的童虫转入适宜宿主犬体后，在肺部检获发育成熟的成虫。实验证明，斯氏狸殖吸虫经宿主转换可介导转续传播。     

四种抗体配合检测在类风湿性关节炎诊断中的价值

目的 探讨抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体、抗突变型瓜氨酸波形蛋白（MCV）抗体、抗RA33抗体和类风湿因子（RF）在类风湿性关节炎（RA）中的临床应用价值.方法 对103例RA患者、41例其他自身免疫病患者和104例健康人进行抗CCP抗体、抗MCV抗体、RF和抗RA33抗体测定,RF用速率散射免疫比浊法检测,其余三种抗体均使用相对应的试剂盒用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定.结果 RA患者中抗CCP抗体、抗MCV抗体、类风湿因子的阳性率分别为74.8%、80.6%、91.3%明显高于非RA组（P〈0.01）.抗CCP抗体、抗MCV抗体和抗RA33抗体的特异性高达97.2%、97.9%和95.9%.三组（抗CCP抗体、抗MCV抗体、RF联合检测组和抗MCV抗体、抗RA33抗体、RF联合检测组和四种抗体共同检测组）联合检测均出现高特异性99.3%,但敏感度较低.结论 RA相关抗体抗CCP抗体或抗MCV抗体与RF的联合检测具有较好敏感性和特异性,此结果可用于RA的早期诊断预防不可逆性骨损伤.抗RA33抗体对早期症状不明显的RA患者可作为一个较好辅助指标.     

斯氏狸殖吸虫动物模型的研究

斯氏狸殖吸虫囊蚴经口感染家兔、小鼠、豚鼠和大鼠,25～120d分期解剖。重点观察肺部虫囊有无成虫及虫卵,以寻求适宜的宿主作为斯氏狸殖吸虫的实验动物。检查结果家兔、小鼠和豚鼠在接种后死亡甚多。均未查到成虫,仅见童虫。接种38只大鼠,感染60d即在肺部出现虫囊;感染90d及110d的肺部虫囊检出童虫及少部分成虫;感染120d时,87.5％虫体成熟,且成虫及卵的形态与感染犬体的斯氏狸殖吸虫的形态相似。提示大鼠是建立斯氏狸殖吸虫动物模型的理想动物。     

肺吸虫成虫石蜡切片免疫酶染色法诊断肺吸虫病

用肺吸虫成虫石蜡切片免疫酶染色法诊断62例肺吸虫患者血清,阳性率为98.39％,与血吸虫及肝吸虫患者血清无明显的交叉反应。本法敏感性高,特异性强,操作简便、迅速、经济,可用于临床诊断及流行病学调查。