载脂蛋白B基因位点多态性与冠心病关系的研究

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增技术对载脂蛋白（ａｐｏ）Ｂ基因点３＇端可变数目串联重复位点（ＶＮＴＲ）作快速而准确分型。研究了该位点多态性与冠心病之间关系，与相关疾病及正常对照组作了比较。在２５３例中，各组的ａｐｏＢ基因位点呈现了不同的基因带型。扩增片段大小为５５２～１１２８ｂｐ。冠心病组发现有１５个ａｐｏＢ等位基因，正常人群组有１２个等位基因。ａｐｏＢ３＇端ＶＮＴＲ的基因频率分布为０．００１～０．４３，杂合度为４１．９％～８０．０％。急性心肌梗塞组中８０８ｂｐ等位基因的检出率明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。同时研究了冠心病组ａｐｏＢ基因与血清脂类、脂蛋白及载脂蛋白Ａ１、Ｂ水平之间的关系。     

载脂蛋白B基因MspI多态性分析及其临床应用

为研究载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）基因多态性与冠心病的关系，应用ＰＣＲ检测９０例冠心病患者和１２０例健康人ａｐｏＢＭｓｐＩ酶切位点的限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）。结果产生三种基因型：Ｍ＋Ｍ＋、Ｍ＋Ｍ－、Ｍ－Ｍ－，冠心病组等位基因Ｍ＋、Ｍ－频率分别为０．９２、０．０８；对照组Ｍ＋、Ｍ－频率分别为０．９８、０．０２，少见等位基因Ｍ－的频率在冠心病组显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），但两组各基因型之间的血脂、脂蛋白、载脂蛋白水平均无显著性差异。提示ａｐｏＢ基因该位点的多态性可能与冠心病的发病有关，但与血浆脂质及载脂蛋白的关系不明显     

应用CPR检测载脂蛋白E表型

为探讨壮族人群载脂蛋白（ａｐｏＥ）基因与冠心病之间的内在联系，应用ＰＣＲ方法检测１５８例壮族健康人群和５３例临床确诊的壮族冠心病患者ａｐｏＥ表型和等位基因频率分布，结果健康人群等位基因频率分布是ε０．１０８，ε０．８１３，ε０．０７９，冠心病组为ε０．０７６、ε０．７９２、ε０．１３２。冠心病患者中Ｅ４／３频率明显高于健康人群（Ｐ〈０．０１），提示ε４可能是冠心病的遗传易患因子。     

应用聚合酶链反应研究载脂蛋白B基因多态性及其临床意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１００例正常人及１０３例冠心病人载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）基因ＸｂａＩ和ＥｃｏＲＩ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ＿Ｓ）研究表明：（１）此两个位点上少见等位基因（Ｘ￣＋和Ｅ￣－）相对频率在冠心病组中均明显高于正常对照组，提示这些基因多态性与冠心病发病有一定关联。（２）ＸｂａＩ位点上具Ｘ￣＋Ｘ￣－基因型含血浆ＨＤＬ—Ｃ水平明显低于相应的Ｘ￣－Ｘ￣－基因型者，可能为Ｘ￣＋等位基因与冠心病关联的机理之一。（３）ＸｂａＩ和ＥｃｏＲＩ两位点的多态性间无连锁不平衡，推测这些位点的多态性以各自独立的方式影响动脉粥样硬化的形成。（４）ＰＣＲ方法用于ａｐｏＢ基因多态性的研究具有简便、敏感、重复性好、可判性强等优点，值得推广应用。     

血脂正常的冠心病患者血清载脂蛋白AⅠ、B_（100）检测的临床意义

目的探讨血脂正常的冠心病患者血清载脂蛋白水平及其检测的临床意义。方法检测３９例血清总胆固醇（ＴＣ）及甘油三酯（ＴＧ）均正常的冠心病患者血脂、脂蛋白及载脂蛋白（ａｐｏ）ＡＩ、Ｂ１００水平，并与４１例健康人作了比较。组内差别用ｔ检验，相关性比较用直线回归分析。结果ＨＤＬ－Ｃ、ａｐｏＡｌ含量及ａｐｏＡＩ／ａｐｏＢ１００比值显著低于健康人，差异显著至极显著（Ｐ＜０．０５～ｐ＜０．００１），ａｐｏＢ１００显著高于健康人，差异显著（Ｐ＜０．０５）。冠心病患者ＴＣ、ＴＧ及ＬＤＬ－Ｃ与ａｐｏＢ１００存在密切正相关。结论血清３ｐｏＢ１００含量升高、ａｐｏＡＩ含量及ａｐｏＡＩ／ａｐｏＢ１００比值降低是预测冠心病危险的最敏感、最准确的指标之一，特别是对血脂正常、无动脉硬化体征的冠心病患者。     

载脂蛋白E外显子4基因多态性与Alzheimer‘s病

探讨了载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）外显子４基因多态性与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ‘ｓ病的关系。应用聚合酶链反应扩增ａｐｏＥ外显子４基因片段，对扩增片段用ＨｈａⅠ酶切消化后进行基因分型，并用ＤＮＡ测序技术对分型结果予以证实，Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ病组与年龄匹配对照组在ａｐｏＥ外显子４ε３／４基因型频率和ε４等位基因频率分布上的差异有显著性（ｘ＾２＝８．９１，Ｐ〈０．０５，Ｘ＾２＝９．４９，Ｐ〈０．０１），Ａｌｚｈ     

应用聚合酶链反应研究载脂蛋白B基因多态性及其临床意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１００例正常人及１０３例冠心病人载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）基因ＸｂａＩ和ＥｃｏＲＩ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰｓ）研究表明：①此两个位点上少见等位基因（Ｘ＾＋和Ｅ＾－）相对频率在冠心病组中均明显高于正常对照组，提示这些基因多态性与冠心病发病有一定关联。②ＸｂａＩ位点上具Ｘ＾＋Ｘ＾－基因型者血浆ＨＤＬ－Ｃ水平明显低于相应的Ｘ＾－Ｘ＾－基因型者，可能为Ｘ＾＋等位基因与冠心病关     

成都地区汉族群体ApoB3’位点扩增片段长度多态性研究

用扩增片段长度多态性分析技术对成都地区汉族群体２００名无关个体ＡｐｏＢ３’位点扩增片段长度多态性进行了分析，查出１６个等位基因，片段大小在５４２～９９２ｂｐ之间，基因频率０００２５～０３７５０，杂合性为０７９，ＤＰ值０９５。在１３８种可能的基因型中，发现了４３种基因型，基因型的观察值与期望值符合Ｈａｒｔｄ Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡定律（χ２＝２１３，ｄｆ＝１０，Ｐ＞００１），家系调查证明ＡｐｏＢ３’位点是按孟德尔定律遗传的。采用ＨＳ ＰＣＲ法提高了方法的灵敏度和特异性。     

血脂正常的冠心病患者血清载脂蛋白AI,B100检测的临床意义

目的探讨血脂的冠心病患者血清载脂蛋白水平及其检测的临床意义，方法检测３９例血清产胆固醇（ＴＣ）及甘油三酯（ＴＧ）均正常的冠心病患者血清，脂蛋白及载脂蛋白（ａｐｏ）ＡＩ，Ｂ１００水平，并与４１例健康人作了比较，组内差别用ｔ检验，相关性比较用直线回归分析，结果ＨＤＬ－Ｃ，ａｐｏＡＩ含量及ａｐｏＡＩ／ａｐｏＢ１００比值显著性于健康人，差异显著至极显著（Ｐ〈０．０５～Ｐ〈０．００１），ａｐｏＢ１００显著性     

多位点VNTR用于异基基因骨髓移植植入存活检定研究

探讨多位点可变数串联重复序列（ＶＮＴＲ）－Ｄ１７Ｓ３０、ＰＡＨ、ＶＳ１７、ＭＬＯＷ１在异基因骨髓移植存活检定中的应用。方法：以聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增４个位点ＶＮＴＲ、ＰＣＲ产物以聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染法检测,对２名异基因骨髓移植患者作移植物成活检定研究。     

载脂蛋白E多态性研究的方法学进展

人载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）具有明显的遗传多态性，三种常见的等位基因（ε２，ε３，ε４）分别编码三种主要异构体（Ｅ２，Ｅ３，Ｅ４）。ａｐｏＥ多态性不仅是心血管疾病的一种重要易患因素，而且与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病及老化密切相关，目前国内外检测ａｐｏＥ多态性的方法主要有两类：一类以极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）或血清为样品检测ａｐｏＥ蛋白表型，另一类以ＤＮＡ为样品检测ａｐｏＥ基因型，本文仅对ａｐｏＥ基因结构与多     

载脂蛋白E多态性与动脉硬化脑梗塞关系的研究

载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）由２９９个氨基酸残基组成，分子量３４２０ＫＤ，是一种多功能糖蛋白，在脂类运输及调节脂蛋白和脂类代谢过程中起作用。ａｐｏＥ基因位于１９号染色体长臂（１９ｑ１３）上〔１〕，基因位点存在多态性，有３种常见的等位基因ε２、ε３、ε４，...     

九龙丹与日本心丹治疗无痛性心肌缺血的疗效对比研究

目的：比较九龙丹和日本心丹治疗无痛性心肌缺血（ＳＭＩ）的疗效。方法：将３５例ＳＭＩ患者分为①九龙丹组（Ａ组，１８例）：口服九龙丹１粒，每日３次，连服２７日；②日本心丹组（Ｂ组，１７例）：口服日本心丹１粒，每日３次，连服２７日。治疗前后检测：①心率、血压乘积（ＲＰＰ）；②心电图ＳＴ段压低总导联数（ＮＳＴ）、心电图ＳＴ段压低总和（ΣＳＴ）；③每搏输出量（ＳＶ）、每分输出量（ＣＯ）、射血分数（ＥＦ）；④血浆载脂蛋白（ａｐｏＡ１、ａｐｏＢ）；⑤全血粘度（ηｂ）、血浆粘度（ηｐ）、纤维蛋白原（Ｆｉ）。结果：２组患者治疗后ＮＳＴ、ΣＳＴ、ＲＰＰ均降低（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），ＳＶ、ＣＯ、ＥＦ均升高（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），其中Ａ组ΣＳＴ、ＲＰＰ降低和ＳＶ、ＥＦ升高均较Ｂ组明显（Ｐ均＜０．０５）；２组患者ａｐｏＡ１、ａｐｏＡ１／ａｐｏＢ升高（Ｐ均＜０．０５），ａｐｏＢ、ηｂ、ηｐ和Ｆｉ均显著降低（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），其中Ａ组ηｐ较Ｂ组明显降低（Ｐ＜０．０５）。结论：口服九龙丹治疗ＳＭＩ在改善心肌血供，缓解心肌缺血和降低心肌耗氧方面具有较好的疗效。     

高脂血症患儿载脂蛋白AI—CⅢ基因区限制性片段长度多态性研究

利用２．２ｋｂ人载脂蛋白ＡＩ基因探针，检测５７例高脂血症患儿及３８例正常血脂儿童的载脂蛋白（ａｐｏ）ＡＩ－ＣⅢ基因区限制片段长度多态性。发现中国上海汉族儿童人群ａｐｏＡＩ－ＣⅢ基因区存在Ｓｓ ｔＩ多态位点，其等位基因频率Ｓ１为０．９８，Ｓ２为０．１２，明显不同于其他种族。并发现多态位点与高胆固醇血症、高甘油三酯血症、高胆固醇合并高甘油三酯血症，均无密切关系，不能作为该地区高脂血症患儿的遗传标记。     

应用单克隆抗体的脂蛋白(a)免疫比浊测定

目的建立血清脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］单克隆抗体免疫比浊测定法。方法应用四株载脂蛋白（ａ）［ａｐｏ（ａ）］单克隆抗体，配制成全液体、双试剂，于自动分析仪二点反应法检测Ｌｐ（ａ）。结果检测试剂与纤维蛋白溶酶原和ａｐｏＢ无交叉反应，甘油三酯（１５ｍｍｏｌ／Ｌ）、胆红素（１５０μｍｏｌ／Ｌ）、血红蛋白（５００ｍｇ／Ｌ）对测定无干扰，检测范围０～１０００ｍｇ／Ｌ。该法与ＥＬＩＳＡ对照，结果无显著差异，ｒ＝０．９９。批内ＣＶ分别为２．５％［脂蛋白（ａ）７８５ｍｇ／Ｌ］和３．５％［脂蛋白（ａ）３００ｍｇ／Ｌ］，批间ＣＶ分别为３．９％和５．５％。结论ａｐｏ（ａ）单克隆抗体免疫比浊测定血清Ｌｐ（ａ）具有特异、灵敏、简便、快速和适用于自动分析等优点。     

聚合酶链反应限制性片段长度多态性检测载脂蛋白E基因型

目的建立一种简便、准确、实用的人载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因型的检测方法。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）特异性扩增ａｐｏＥ基因含编码１１２位和１５８位氨基酸的基因序列，扩增产物用限制性内切酶ＨｈａⅠ酶切，聚丙烯酰胺凝胶电泳后，观察酶切位点的限制性片段长度多态性（ＲＦＩＰ）图谱。结果运用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测了１１３名健康人ａｐｏＥ基因型，频率分别为ε３／３６９．０％，ε３／２１６．８％，ε４／３１１．５％，ε４／２１．８％，ε４／４０．９％；ε２、ε３和ε４等位基因频率分别是９．３％、８３．２％和７．５％。结论该方法简单、快速、准确，对人体无害，适合于一般实验室开展及大规模人群调查     

PCR-SSCP法检测冠心病患者载脂蛋白E基因多态性

目的：建立聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测冠心病患者载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）-基因多态性,研究我国汉族冠心病（ＣＨＤ）患者载脂蛋白Ｅ基因多态性 及其对血脂水平的影响。方法：建立ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术,测定９０例ＣＨＤ患者及１００例相应年龄的健康者ａｐｏＥ基因多态性,同时测定研究对象６项血脂指标。结果：ＣＨＤ患者ａｐｏＥ４等位基因频率显著高于对照组（０．１１１比０．０６,Ｐ〈０．０５）     

免疫印迹法测定血清载脂蛋白E的表型

介绍一种免疫印迹法测定载脂蛋白Ｅ表型。通过唾液酸酶处理血清、脱脂、等电聚焦电泳和免疫印迹得到ａｐｏＥ表型图谱。本法主要特点是：（１）用唾液酸酶消化处理，减轻唾液酸型ａｐｏＥ的干扰；（２）使用宽ｐＨ范围（ｐＨ４～８）的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳，适用于分离包括Ｅ＿５、Ｅ＿７的所有ａｐｏＥ表型；（３）利用ａｐｏＥ多克隆抗血清与Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ￣ＲＡＢＣ试剂盒，使免疫显色更为敏感，从而使血清标本的用量减少到０．１～０．２μｌ就可清晰分辨ａｐｏＥ表型。本法适用于人群调查。     

高脂血症患儿载脂蛋白AI－CIII基因区限制性片段长度多态性研究

利用２．２ｋｂ人载脂蛋白ＡＩ基因探针，检测５７例高脂血症患儿及３８例正常血脂儿童的载脂蛋白（ａｐｏ）ＡＩ－ＣＩＩＩ基因区限制性片段长度多态性。发现中国上海汉族儿童人群ａｐｏＡＩ－ＣＩＩＩ基因区存在Ｓｓ　ｔＩ多态位点，其等位基因频率Ｓ＿１为０．９８，Ｓ＿２为０．１２，明显不同于其他种族。并发现该多态位点与高胆固醇血症、高甘油三酯血症、高胆固醇合并高甘油三酯血症，均无密切关系，不能作为该地区高脂血症患儿的遗传标记。     

广西人群 ｍｉＲ ３６５ 基因 ｒｓ１２１２２４Ｃ ／ Ｇ 和 ｒｓ１７８５５３Ａ／ Ｇ 位点多态性分布

摘要：目的 探讨 ｍｉＲ ３６５ 基因单核苷酸多态性（ＳＮＰ）位点 ｒｓ１２１２２４Ｃ／ Ｇ 和 ｒｓ１７８５５３Ａ／ Ｇ 在广西地区健康人群中的分布，并 与其他不同种族人群进行比较。方法 采用 ＳＮＰｓｃａｎ 高通量技术检测 ２９４ 例广西地区健康人 ｒｓ１２１２２４Ｃ／ Ｇ 和 ｒｓ１７８５５３Ａ／ Ｇ 位点分型，统计分析其基因型和等位基因频率，并与人类基因组单体型图（ＨａｐＭａｐ）公布的 ＨａｐＭａｐ ＣＥＵ （欧洲人）、 ＨａｐＭａｐ ＣＨＢ（北京汉族人）、ＨａｐＭａｐ ＪＰＴ（日本人）、和 ＨａｐＭａｐ ＹＲＩ（非洲人）进行数据比较，统计分析其差异。结果 广西人 群 ｍｉＲ ３６５ 基因 ｒｓ１２１２２４Ｃ／ Ｇ 位点存在 ＣＣ（２７．９％）、ＧＣ（４９．０％ ）和 ＧＧ（２３．１％）３ 种基因型及 Ｃ（５２．４％）和 Ｇ（４７．６％）２ 种等 位基因，其基因型和等位基因频率与 ＣＥＵ、ＹＲＩ 比较，差异均有统计学意义（Ｐ 值分别为 ０．０１５ 和 ０．００４；Ｐ 值均＜０．００１），但与 ＣＨＢ、ＪＰＴ 比较，差异均无统计学意义（Ｐ 值分别为 ０． ５０４ 和 ０． ４４１；Ｐ 值分别为 ０． １４９ 和 ０． ０６７）。ｒｓ１７８５５３Ａ／ Ｇ 存在 ＡＡ（２２．４％）、ＡＧ（４９．０％）和 ＧＧ（２８．６％）３ 种基因型及 Ａ（４６．９％）和 Ｇ（５３．１％）２ 种等位基因，其基因型和等位基因频率与 ＣＥＵ、ＪＰＴ 和 ＹＲＩ 比较，差异均有统计学意义（Ｐ 值均＜０．００１；Ｐ 值分别为 ０．０４６ 和 ０．０１８；Ｐ 值均＜０．００１），但同 ＣＨＢ 比较，差异 无统计学意义（Ｐ 值分别为 ０．５０８ 和 ０．９２１）。此外，在不同性别组间对比发现两位点的基因型和等位基因频率差异无统计学 意义（Ｐ 值分别为 ０．１８５ 和０．４６６；Ｐ 值分别为 ０．１３０ 和 ０．５３２）。结论 ｍｉＲ ３６５ 基因 ｒｓ１２１２２４Ｃ／ Ｇ 和 ｒｓ１７８５５３Ａ／ Ｇ 位点多态性 在不同人群间存在不同程度的差异。