高效液相色谱荧光检测法测定尿雌三醇

报告用高效液用色谱（ＨＰＬＣ）测定孕妇尿内总雌三醇（Ｅ＿３）的方法。尿标本在酸水解后用乙醚提取Ｅ＿２，蒸干乙醚，残留物用流动相（甲醇／乙腈／水＝４０／１７／４３）重组。标本成分Ｃ＿８柱分离，以２８５ｎｍ波长激发，在６１０ｎｍ测定Ｅ＿３的自然荧光。本法批内ＣＶ为１２％～１．５％（ｘ＝３２．７～１２８．２ｕｍｏｌ／Ｌ），批间ＣＶ别为２．３％和４０％（分别是３８．４和９８．９ｕｍｏｌ／Ｌ）。本法在４．３３～１３８．７ｕｍｏｌ／Ｌ（１２５～４０．００ｍｇ／Ｌ）间呈线性，最低检出１．９ｕｍｏｌ／Ｌ（０．５２ｍｇ／Ｌ，信号／噪声比为３）。     

反相高效液相色谱法测定雌三醇栓中雌三醇含量

本文报道用反相高效液相色谱法测定雌三醇栓中雌三醇的含量。采用ＹＷＧ－Ｃ１８不锈钢分析柱（１０μｍ，２５０×４．６ｍｍ），以甲醇∶水（６０∶４０）为流动相，样品用甲醇溶解后取０．５ｍｌ置５０℃水浴中通空气流挥干，残渣溶于１００μｌ流动相，进样２０μｌ。在２８１ｎｍ处检测药物峰高，按外标法定量。本法具有操作简便、灵敏准确等特点，适合于任何含量的雌三醇制剂中雌三醇含量测定。     

高效液相色谱快速测定尿假尿苷

介绍一种不用苯硼酸亲和柱的高效液相色谱法快速测定尿假尿甙。本法只需简单的标本预处理，使用ＰＨ３．３磷酸盐缓冲液动相和２６８ｎｍ检测，每个标本测定只需１２分钟，批内和批间变异分别为３．２７％和４．８６％，线性范围超过１７００μｍｏｌ／Ｌ，常见的１０种抗肿瘤药物不干扰测定。     

高效液相色谱串联质谱法测定血清非结合雌三醇的前处理研究

目的优化高效液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定血清游离雌三醇(uE3)的前处理方法。方法以活性炭吸附血清为研究基质,通过加入已知量的雌三醇(E3)标准品及E3-2-3-4-13 C3内标,在LC-20AD XR高效液相色谱系统和API 5500串联四级杆质谱仪上对E3检测的色谱条件、质谱条件及萃取条件等进行优化。结果色谱条件:选用菲罗门Knietex色谱柱(100.0mm×2.1mm,2.6μm);有机相为甲醇,水相为0.1mmol/L氟化铵水溶液,8min梯度洗脱。质谱条件:选用电喷雾(ESI)负离子模式和多反应监测(MRM)模式分析,选择质荷比(m/z)287→m/z 145作为E3的定量离子对,m/z 287→m/z 171作为定性监测离子对;选择m/z 290→m/z 148作为内标的定量离子对,m/z 290→m/z 174作为定性监测的离子对。萃取条件:萃取剂为正己烷/乙酸乙酯(50/50,v/v),样品与萃取剂的比例为1∶2,萃取率可达85.71%。结论 E3检测的色谱条件、质谱条件、萃取条件已得到全面优化,为后续建立LC-MS/MS测定人血中uE3的参考方法打下良好基础。     

尿多胺的高效液相色谱测定法

本文介绍一种改进的尿多胺的高效液相色谱法。受检尿样经酸水解,过Dowex-50离子交换树脂纯化,然后经邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生,多胺衍生物色谱分离,荧光检测定量。本法多胺标准曲线考察,线性关系佳;回收试验显示回收率高且稳定。重现性试验表明日内、日间重现性均佳。本实验条件下,尿多胺的最低检测量分别为精胺12.5 pmol;精(?)4 pmol;腐胺3pmol。本法比目前的丹酰氯柱前衍生法更特异而灵敏。因为我们应用YWG-C_(18)替代以往分析尿多胺采用的进口C_(18)分析柱,宜于临床扮推广。本法已用于胃癌病人的临床研究。     

高效液相色谱荧光检测法测定血浆同型半胱氨酸

[目的]建立使用高效液相色谱、等度洗脱、荧光检测法测定血浆同型半胱氨酸的方法。[方法]血浆同型半胱氨酸经Tris(2-Carboxyethyl)phosphate(17CEP)还原后，与7-Fluoro-benzo-2-oxa-1．3-diazole-4-sulohonate(SBD-F)衍生化，以胱氨为内标，C18反相色谱柱分离、等度洗脱，荧光检测器测定，以峰面积比进行定量。[结果]线性范围可达100μmol／L，最低检测限0．3μmol／L，批内不精密度1．2％-2．4％，批间不精密度1．4％-2．5％，平均回收率96．3-103％。[结论]本方法洗脱条件简单，准确性、特异性好，适用于临床实验室测定血浆同型半胱氨酸的含量。     

高效液相色谱——紫外、荧光双检测器同时测定人尿中犬尿氨酸和犬尿喹啉酸

目的建立高效液相色谱（HPLC）同时测定人尿中犬尿氨酸（KYN）和犬尿喹啉酸（KYNA）方法。用KYNA／KYN比值评价人体犬尿氨酸氨基转移酶（KAT）活性。方法采用HPLC测定KYN、KYNA,分析柱为安捷伦HCC18反相色谱柱;流动相为10mmol／L乙酸钠-乙酸缓冲液：7％乙腈=93：7;流速1mL／min;检测器波长：紫外365nm,荧光344nm（激发）／398nm（发射）。结果KYN和KYNA保留时间分别为6．9和11．5min。水溶液标准与标准加入工作曲线斜率差异无统计学意义（KYN：P=0．4068;KYNA：P=0．6462）。KYN和KYNA的平均回收率分别为98．74％±7．53％、95．17％±8．17％;稳定性试验的变异系数（CV）分别为3．35％和0．88％;精密度CV分别为2．73％和2．79％;最低检测限分别为0．4和0．2μmol／L。30份健康成年人尿样的KYNA／KYN比值为2．45±1．54。尿中KYNA与KYN含量呈正相关关系（r2=0．3758,P〈0．001）。结论测定方法灵敏、准确、稳定。KYNA／KYN比值评测KAT活性具有简便、实用等特点,可用于相关疾病的临床辅助诊断和基础研究。     

高效液相色谱-荧光检测法快速测定脊髓和脑内氨基酸

目的 建立快速测定脊髓和脑内氨基酸浓度的方法.方法 通过邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生、反相高效液相色谱结合荧光（激发波长280 nm,发射波长340 nm）检测氨基酸浓度.用0.1 mol/L磷酸盐缓冲液（pH值6.00～6.25）和甲醇（46%）混合液（加入四氢呋喃2%）作流动相,流速为1 ml/min.结果 在0.1～40.0 μmol/L范围内,氨基酸浓度与相对峰面积之间的相关系数（r）均值为0.999 2,日内和日间变异系数（CV）分别为2.41%～5.23%、3.51%～6.48%,平均回收率为90.13%～98.47%.结论 本法灵敏度高、快速、简便易行,可用于脊髓和脑内氨基酸测定.     

高效液相色谱-荧光检测法快速测定脊髓和脑内氨基酸

目的建立快速测定脊髓和脑内氨基酸浓度的方法。方法通过邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生、反相高效液相色谱结合荧光(激发波长280nm,发射波长340nm)检测氨基酸浓度。用0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH值6.00~6.25)和甲醇(46%)混合液(加入四氢呋喃2%)作流动相,流速为1ml/min。结果在0.1~40.0μmol/L范围内,氨基酸浓度与相对峰面积之间的相关系数(r)均值为0.9992,日内和日间变异系数(CV)分别为2.41%~5.23%、3.51%~6.48%,平均回收率为90.13%~98.47%。结论本法灵敏度高、快速、简便易行,可用于脊髓和脑内氨基酸测定。     

荧光光度法测定孕妇尿中雌三醇

荧光光度法测定孕妇尿中雌三醇王丽娟，李琳（成都市妇产科医院检验科，成都６１００１５）关键词雌三醇，尿液，荧光光度法孕妇尿中雌三醇（Ｅ３）含量的测定，是临床上诊断妊娠中毒症和胎盘功能不良等疾病的重要指标。目前实验室测定采用放射免疫法，分光光度法，高效液...     

用高效液相色谱法测定尿和血清多胺的改进及应用

本文建立了人尿及血清多肢的固相草取和高效液相色谱测定法。回收率：尿99．35～101．3％，血清：92．11～94．36％，日内和田间变异系数：1．5～4．2％，检测限：0．1μmol／L。探讨了常用抗癌药物对测定的干扰和此法在临床癌症病人多胶测定及疗效评价中的应用。本法简便、准确、重复性好、效率高，适宜临床检测。     

反相液相色谱法快速测定尿羟脯氨酸

报道了以慢硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,采用反相液相色谱快速测定尿羟脯氨酸的方法。该法的线性范围为３１．２５－５００μｍｏｌ／Ｌ,相关系数０．９９６,批内,批间的变异系数为２．３％和３．３％,回收率为９５．１％,同时测定了６８例６０－８５ｙ老年人尿羟脯氨酸含量,老年女性的结果显著高于老年男性,Ｐ〈０．０１。     

高效液相色谱-荧光法测定血清犬尿喹啉酸和色氨酸方法的建立

目的建立同时检测血清犬尿喹啉酸（kynurenic acid，KYNA）和色氨酸（tryptophan，Trp）的高效液相色谱-荧光法。方法采用高效液相色谱在线衍生技术，通过对最佳检测波长、流速、流动相中醋酸锌浓度和乙腈比例等因素的探讨，得出测定Trp和KYNA的最优实验方案，并对其进行方法学评价；测定50名正常人血清KYNA和Trp含量。结果KYNA保留时间约为8．1min，线性范围为1．05～2093nmoL／L，最低检出浓度为0．05nmoL／L，平均回收率为101．19％；Trp保留时间约为11．3min，线性范围为0．49～196μmoL／L，最低检出浓度为0．001μmoL／L，平均回收率为104．43％，二者日内、日间测定的变异系数均小于5％，苯丙氨酸、酪氨酸、5-羟色胺和犬尿氨酸等物质对该法均无干扰。健康成人血清KYNA和Trp含量分别为（24．25±9．11）nmol／L和（49．05±11．67）μmol／L。结论建立的方法简便、快速、稳定、可行，适用于临床和科研工作。     

高效液相色谱-荧光检测法测定盐酸格拉司琼在小鼠体内的血药浓度

目的 建立高效液相色谱-荧光检测法测定小鼠全血中格拉司琼浓度的方法,考察方法的专属性、线性关系、准确度、精密度、稳定性、提取回收率等效能指标.方法 采用腈基柱;流动相：磷酸三乙胺缓冲盐溶液-乙腈（85∶15 v/v）;检测波长：λex=302 nm,λem=360 nm;柱温26℃;流速1.0 ml/min;进样量20μl.生物样品预处理采用氢氧化钠碱化,二氯甲烷：乙醚（2：3）萃取.结果 小鼠全血中格拉司琼在0.5～ 50.0 ng/ml浓度范围内线性关系良好,回归方程为Y=5.35＆#215;102X＋ 6.40＆#215;102,r=0.9968.本方法在低、中、高3个浓度质控样品的日内精密度分别为7.32％,4.74％,6.86％,日间精密度分别为11.2％,13.03％,7.68％;提取回收率均在76％以上.结论 高效液相色谱-荧光检测法测定血中格拉司琼浓度简便、快速、准确、专属性强.     

四种钙离子拮抗剂的高效液相色谱测定

介绍采用Ｂｏｎｄ ＥｌｕｔＣ１８小柱提取以反相高效液相色谱法同时测定尼地平、尼卡地平、尼群地平和尼莫地平４种钙离子拮抗剂的方法。应用Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪，Ｃ１８分析柱及尼腈／ＫＨ２ＰＯ４＝４６／５４流动相，在１．５ｍｌ／ｍｉｎ流速下分离上述４种药物，回收率分别为１０１％～１０９％，９５％～１０１％，９９％～１０４％和１０３％～１０８％，批内变异系数（ＣＶ）＜７．４％，批间ＣＶ＜８．７％。本方     

高效液相色谱-荧光检测法测定人血浆中洛美沙星的浓度

盐酸洛美沙星为喹诺酮类衍生物,系广谱抗菌药物,国内外已上市多年。高效液相色谱法测定人血浆中洛美沙星浓度的方法多有报道,但均使用紫外检测方法,样品处理过程复杂[1,2]。本文通过探索,发现盐酸洛美沙星在200~400nm之间有荧光吸收,灵敏度可比紫外检测法提高数十倍,检测限能够