抗钙调素自身抗体测定方法的建立及应用

自人脑提取钙调素（ＣａＭ），制备兔抗人ＣａＭ抗体，建立了检测抗ＣａＭ自身抗体的间接酶联免疫吸附试验方法，批内、批间误差变异系数均＜９．０％，抗ＣａＭ阳性血清用ＣａＭ吸收后吸光度值下降９０％。抗ＣａＭ抗体活性用Ｕ／ｍｌ表示，正常对照（ｎ＝１００）为７．５６±２．６８Ｕ／ｍｌ，以ｘ＋２ｓ为正常上限，＞１２．９２Ｕ／ｍｌ为阳性。各种自身免疫病患者抗ＣａＭ的水平与阳性率依次为系统性红斑狼疮（ｎ＝３２）：２６１５±１１．７Ｕ／ｍｌ，５１．１％；类风湿性关节炎（ｎ＝２８）：１３．６１±９．７Ｕ／ｍｌ，２１．４％；桥本甲状腺炎（ｎ＝２５）：５９．０７±９８．４Ｕ／ｍｌ，６０．０％；甲状腺机能亢进（ｎ＝３４）：３７．７６±８４．７Ｕ／ｍｌ，４７．１％；肝炎（ｎ＝４３）：２３．１７±６．７Ｕ／ｍｌ，４４．２％。均显著高于正常对照（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。抗ＣａＭ抗体与抗核抗体常同时存在，但与抗甲状腺球蛋白、抗甲状腺微粒体自身抗体无显著相关关系（Ｐ＞０．０５）。     

简便,灵敏的天冬氨酸转氨酶同工酶电泳法

以醋纤薄膜为载体，半胱氨酸亚磺酸为氨基供体，ｍ－ＰＭＳ和ＭＴＴ为显色剂，电泳分离天冬氨酸转氨酶同工酶ｍ－ＡＳＴ和Ｃ－ＡＳＴ。灵敏度达２．２Ｕ／Ｌ，批内重复性７．５Ｕ／Ｌ（ｎ＝１０）ＣＶ＝９．５％；２１．４Ｕ／Ｕ（ｎ＝１０）ＣＶ＝８．４％。用１４０Ｕ／Ｌｍ－ＡＳＴ作倍化稀释考核其线性，结果为Ｙ＝０．０８５２９＋０．９９６２Ｘ（理论值），ｒ＝０．９９９７。与Ｔｅｒａｎｉｓｈｉ法比较，Ｙ＝１．７５５８＋０．８３１１Ｘ（本法），ｒ＝０．８９４０。     

联合检测AFU与AFP对PHC的诊断价值

目的探讨血清α－Ｌ－岩藻糖苷酶（ＡＦＵ）对原发性肝癌（ＰＨＣ）的诊断价值。方法用国产ＡＦＵ试剂盒化学比色法和ＡＦＰ放免法检测了正常人３１例、ＰＨＣ和其他疾病病人１１４例的血清ＡＦＵ、ＡＦＰ。结果ＰＨＣ的ＡＦＵ活力为２５９±１２４ｎＫａｔ／Ｌ、阳性率为７１％，正常人ＡＦＵ活力为９９±３６ｎＫａｔ／Ｌ、阳性率为０，两者比较差异非常显著（Ｐ＜０．０１）；以ＡＦＵ＞２００ｎＫａｔ／Ｌ为阳性，ＡＦＵ对ＰＨＣ的诊断敏感性７１％、特异性７２％，与ＡＦＰ＞２０ｎｇ／ｍｌ为阳性诊断ＰＨＣ的敏感性８５％、特异性７７％相近（Ｐ＞０．０５）；ＡＦＵ与ＡＦＰ联合检测，对ＰＨＣ诊断敏感性为９４％、特异性为８７％；若以ＡＦＵ＞２００ｎＫａｔ／Ｌ且ＡＦＰ≥４００ｎｇ／ｍｌ为阳性，则特异性高达９７％。结论ＡＦＵ与ＡＦＰ联合检测是提高ＰＨＣ诊断敏感性和特异性的新途径。     

抗精浆免疫抑制物抗体的补体结合功能测定及临床意义

目的探讨抗精浆免疫抑制物抗体（ＳＰＩＭ－Ａｂ）的作用机理。方法用补体结合试验（ＣＦＡ）测定了不明原因不育症患者ＳＰＩＭ－Ａｂ的补体结合功能，并与血清Ｃ３、Ｃ４、ＣＨ５０之间的关系进行了比较。结果２９例血清ＳＰＩＭ－Ａｂ阳性患者ＣＦＡ值为６．４２±１．５５Ｕ／ｍｌ，明显低于７１例血清ＳＰＩＭ－Ａｂ阴性患者的８．１１±１．６２Ｕ／ｍｌ（Ｐ＜０．０１）和３０例对照组的８．６０±１．８０Ｕ／ｍｌ（Ｐ＜０．０１）。且血清ＳＰＩＭ－Ａｂ水平与血清Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５０呈显著的负相关（Ｐ＜０．０５～０．０１）。结论ＳＰＩＭ－Ａｂ能够与ＳＰＩＭ形成免疫复合物，激活补体，并可能对精子和受精卵产生免疫损伤，干扰生育。     

考马民斯亮蓝显以法测定精浆蛋白水解酶

用酪蛋白作底物，考马斯亮蓝显色，建立了精浆蛋白水解酶的测定方法。本法以０．０５ｍｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．６Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ作缓冲液，底物浓度为１ｍｇ／ｍｌ，线性范围在５３５￣４２８０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ为２．６％，批间ＣＶ３．３％。健康人精浆蛋白水解酶活力为１４２０￣２８７０Ｕ／Ｌ，不育患者（精液液化正常，ｎ＝４０）精浆蛋白水解酶活力为１３２６￣２６２８Ｕ／Ｌ，液化异常或粘稠度增高的不育患者精浆蛋白水解酶     

抗HCV阳性患者血清sIL-2R的检测及其意义

目的探讨ｓＩＬ ２Ｒ与丙型肝炎发展演变及病情严重程度的关系。方法利用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法对７５例抗ＨＣＶ阳性患者及３０例正常对照者的血清ｓＩＬ ２Ｒ进行测定。结果抗ＨＣＶ阳性患者血清ｓＩＬ ２Ｒ水平明显高于对照组（Ｐ＜００１～０００１），其中慢性活动性肝炎与慢性迁延性肝炎组ｓＩＬ ２Ｒ水平分别为８９００±２０８３Ｕ·ｍｌ－１、４２５５±１５５７Ｕ·ｍｌ－１，两者之间有显著性差异（Ｐ＜００１）。肝硬化活动期与非活动期的ｓＩＬ ２Ｒ水平分别为１０００７±２７０４Ｕ·ｍｌ－１、６０２５±１８５５Ｕ·ｍｌ－１，两者比较亦有明显差异（Ｐ＜００１），此外还发现血清ｓＩＬ ２Ｒ与ＡＬＴ水平之间存在明显的正相关（ｒ＝０５２，Ｐ＜００１）。结论抗ＨＣＶ阳性患者血清ｓＩＬ ２Ｒ水平升高可能与丙型肝炎的发展演变有关，可能可作为病情判断、疗效评价及预后判定的一项重要指标     

羰基二咪唑固化抗体及其在免疫放射分析的应用

目的建立一种简便、实用和适合于免疫放射分析的抗体固化技术。方法制备羰基二咪唑（ＣＤＩ）活化的聚苯乙烯珠，提纯兔抗人促甲状腺素（ｈＴＳＨ）抗血清ＩｇＧ，选择ＩｇＧ最佳稀释度，使其与ＣＤＩ活化珠共价交联，制成固相抗体。测定固相抗体与ｈＴＳＨ－１２５Ⅰ－抗ｈＴＳＨ单克隆抗体的结合率及其重复性和稳定性，将其应用于促甲状腺素免疫放射分析，并与对照试剂盒作比较。结果ＩｇＧ（１ｍｇ／ｍｌ）的最佳稀释度为１６４（１５μｇ／ｍｌ），与ＣＤＩ活化珠结合牢固，经８次洗涤未见脱落。固相抗体与ｈＴＳＨ－１２５Ⅰ－抗ｈＴＳＨ单克隆抗体的结合率与ｈＴＳＨ浓度成正相关。批内和批间变异系数分别为２．５％～３．１％（ｎ＝１０）和２．９％～４．１％（ｎ＝１８）。非特异结合率为０．１２％±０．０４％（ｎ＝５０）。固相抗体应用于促甲状腺素免疫放射分析的各项质控指标与对照试剂盒一致，血清标本的ｈＴＳＨ测定值和对照试剂盒所测值的相关系数（ｒ）＝０．９８６，Ｐ＜０．０１（ｎ＝８６）。结论羰基二咪唑固化抗体是一种简便实用、重复性和稳定性好、适合于免疫放射分析的抗体固化技术     

改良凝胶吸附法制备的凝血酶原复合物

采用ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ凝胶从人血浆中吸附制备经Ｓ／Ｄ病毒灭活处理后的ＰＣＣ制品，ＤＥＡＥ洗脱液经Ｓ／Ｄ处理（０．３％磷酸三丁脂和１％Ｔｗｅｎ８０，６～８ｈ，２４℃）后，使所加入具有感染剂量（＞１０６）的标志病毒ＶＳＶ、Ｓｉｎｄｂｉｓ、ＨＩＶ均被有效灭活；ＰＣＣ制品中Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子的比活性（Ｕ／ｍｇ）分别为０．７９９±０．３４９、０．３４３±０．２５２、０．７４７±０．３４８、０．５８０±０．１９９（ｎ＝７），均比传统ＰＣＣ提高１．５～２．５倍（其中ＦⅨ∶Ｃ的比活性提高有显著性，ｔ＝３．１０５，Ｐ＜０．０１），同时也优于国内同类制品（ｔ＝２．３６０，Ｐ＜０．０５），对其杂蛋白（ＡＴ－Ⅲ、Ｆｎ、ＰＫＡ、Ｐｌｇ、ⅧＲ∶Ａｇ抗Ａ、抗Ｂ凝集素）的分析也反映出ＰＣＣ纯度有所提高。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＩＥ、ＣＩＥ电泳图谱及ＨＰＬＣ层析图谱证实上述结果，ＰＣＣ中ＴＮＢＰ残留量≤１０μｇ／ｍｌ，Ｔｗｅｅｎ８０残留量≤１００μｇ／ｍｌ，均在安全范围内。     

人凝血因子Ⅸ∶Ag酶联免疫测定法的建立

采用抗人凝血因子Ⅸ单克隆和多克隆两种抗体，建立了人凝血因子Ⅸ抗原（ＦⅨ∶Ａｇ）酶联免疫测定法（ＥＬＩＳＡ）。标准曲线相关系数为０．９９３（Ｐ＝０．００１，ｎ＝５），测定范围（６．２５～１００）Ｕ／Ｌ，最低检测量１．５Ｕ／Ｌ；批内及批间变异系数分别为７．２５％和４．７３％，回收率９９．７％；与人血浆中其它蛋白质未见交叉反应。测得２０人份正常人血浆中ＦⅨ∶Ａｇ为（１０２７±１７２）Ｕ／Ｌ，与ＦⅨ促凝活性（ＦⅨ∶Ｃ）测得值比较，差异无显著性（Ｐ＞０．５）。重症乙型血友病人血浆ＦⅨ∶Ａｇ测得值与临床诊断相符。     

干扰素－a对慢性粒细胞白血病细胞作用的体外研究

作者通过体外骨髓半固体和长期液体培养（ＬＴＢＭＣ），研究了干扰素－ａ（ＩＦＮ－ａ）对慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）细胞的作用。在半固体琼脂培养体系中，ＩＦＮ－ａ能抑制正常对照和ＣＭＬ患者７天和１０天ＣＦＵ－ＧＭ，而不抑制１４天及其后的ＣＦＵ－ＧＭ。在ＬＴＢＭＣ中，于培养开始只加一次ＩＦＮ－ａ（１０￣２Ｕ／ｍｌ，１０￣３Ｕ／ｍｌ，１０￣４Ｕ／ｍｌ），对非贴壁层细胞数和基质细胞层的形成均无明显影响，但大剂量ＩＦＮ－ａ（１０￣３Ｕ／ｍｌ和１０￣４Ｕ／ｍｌ组）对非贴壁层的ＣＦＵ－ＧＭ抑制明显；每周连续加用ＩＦＮ－ａ（１０Ｕ／ｍｌ，１０￣２Ｕ／ｍｌ，１０￣３Ｕ／ｍｌ），对非贴壁层细胞数和ＣＦＵ－ＧＭ均有抑制作用，而且ＩＦＮ－ａ浓度愈高，贴壁层的形成愈少。上述结果表明：ＩＦＮ－ａ优先抑制晚期ＣＦＵ－ＧＭ，对基质细胞也有一定抑制作用。     

甘氮酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定及其应用

本文介绍速率法测定血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的方法，并应用于自动生化分析仪，测定的最适ｐＨ为８．６，酶活力在１３０Ｕ／Ｌ以下成线性，三份高、中、低值酶活力标本批内ＣＶ０．７％～１．４％，批间ＣＶ１．２％～４．４％。１３２例正常人ＧＰＤＡ为１８５．２±２８．６（ｘ±ｓ）Ｕ／Ｌ，６５例原发性肝癌组为４０８．０±２１６．１Ｕ／Ｌ（ｘ±ｓ），明显高于正常组（ｐ＜０．００１），且与ＡＦＰ水平无相关意义（ｒ     

血清α－L－岩藻糖苷酶自动分析法

本文报道了血清α－Ｌ－岩藻糖苷酶的自动分析法。酶促反应的最适ｐＨ５．０～５．１，Ｋｍ＝０．１８０ｍｍｏｌ／Ｌ，用柠檬酸－磷酸盐缓冲液可发挥酶的最大催化活性。线性范围为０～５０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ１．５３％～１．７１％，批间ＣＶ３．０％～３．２％。１３７例健康成人血清中酶活力为６．０６±１．３１Ｕ／Ｌ（ｘ±ｓ），男女性别间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。本法具有简单、快速、灵敏等特点。     

脑梗塞抗心磷脂抗体变化及与血液流变、血脂的关系

目的　探讨抗心磷脂抗体（ ＡＣＡ） 在脑梗塞中的意义及其与多项中风危险因素的关系。方法　５８ 例急性脑梗塞患者于发病１ ～２ 天内以ＥＬＩＳＡ 方法检测血清ＡＣＡ、以ＢＭＥ １ 生物医学处理仪等分别检测血液流变学、血脂指标水平；其中２７ 例于恢复期复查血清ＡＣＡ 水平。结果　急性期ＡＣＡ１９ ．３０ ±１３ ．２７ Ｕ／ ｍｌ，恢复期ＡＣＡ１６ ．２３ ±９ ．５８ Ｕ／ ｍｌ ，两者比较无显著差异（ Ｐ＞ ０ ．０５） ，但均比对照组１０ ．４８ ±４ ．１４ Ｕ／ ｍｌ 明显增高（ Ｐ＜ ０ ．０１） ；患者血液流变学、血脂指标与对照组比较，显示有显著或非常显著差异，且患者ＡＣＡ 水平变化与血液流变学、血脂指标改变呈显著的相关关系（ ｒ ＝ ０ ．０３ ～０ ．６１ ，Ｐ＜ ０ ．０５ ～０ ．０１） 。结论　ＡＣＡ 在脑梗塞的发生中具有重要作用，且在脑梗塞的发病机制中或与多项中风危险因素共同形成了病理效应或促进了这些危险因素在脑梗塞发生中的作用，并提出了对脑梗塞患者恢复期后适当应用抗血小板药物的意义。     

检测Ⅱ型糖尿病患者总抗氧化能力的临床意义

目的探讨检测Ⅱ型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者总抗氧化能力的临床意义。方法用ＣＯＢＡＳ全自动生化分析仪测定ＮＩＤＤＭ患者９０例（观察组），正常对照４０例的总抗氧化能力。结果观察组总抗氧化能力为９．７１±１．２Ｕ／ｍｌ，对照组总抗氧化能力为１３．０±２．０Ｕ／ｍｌ，观察组总抗氧化能力明显低于对照组（Ｐ＜０．０５）。总抗氧化能力与年龄无相关性（Ｐ＞０．０５），与血糖含量的高低成负相关。结论总抗氧化能力的测定，一方面可观察ＮＩＤＤＭ患者对机体产生的自由基的清除能力；另一方面调节ＮＩＤＤＭ患者机体的总抗氧化能力，可有效预防和控制并发症的发生。     

血清腺苷脱氨酶同工酶琼脂糖凝胶电泳测定法

介绍了一种用琼脂糖凝胶电泳法分离血清腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）同工酶。利用琼脂糖凝胶缓冲液与电泳液的不连续性，成功地分离出人血清中的两条同工酶带ＡＤＡ＿（１＋ｃｐ）、ＡＤＡ＿２。并对底物液中各成分的浓度进行了选择。酶促反应的最适ｐＨ为７．４，底物液中含腺苷为５．３４ｍｇ／ｍｌ、ＸＯＤ为０．２Ｕ／ｍｌ、ＰＮＰ为０．４Ｕ／ｍｌ时呈色最佳。方法的最小检出限ＡＤＡ（１＋ｃｐ）为２．３～４．６Ｕ／Ｌ，ＡＤＡ＿２为２．７～５．４Ｕ／Ｌ；批内ＣＶ３．２％、批间ＣＶ４．３％。２３份健康人血清ＡＤＡ同工酶谱带的百分率为ＡＤＡ＿（１＋ｃｐ）３０．９±３．１２％、ＡＤＡ＿２为６９．１±３．１２％。初步临床应用结果显示ＡＤＡ同工酶谱带百分率的变化对肝炎和急性淋巴细胞白血病有辅助诊断价值，对癌性和结核性胸腹水有鉴别诊断的价值。     

CD3AK细胞治疗晚期恶性肿瘤疗效观察

为探索肿瘤免疫治疗的新方法，我们应用ＰＨＡ（１０μｇ／ｍｌ），ｒＩＬ－２（５００Ｕ／ｍｌ）和ＣＤ３Ａｂ（抗ＣＤ３单克隆抗体，２００ｎｇ／ｍｌ）共同激活，ｒＩＬ－２（５００Ｕ／ｍｌ）维持培养的自体人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）－ＣＤ３ＡＫ细胞治疗晚期恶性肿瘤，结果显示：（１）治疗有效率（ＰＲ＋ＭＲ）为３６．３６％，（２）治疗后Ｔ细胞亚群中ＣＤ８＋下降（Ｐ〈０．０５），ＣＤ３＋，ＣＤ４＋以及ＣＤ４＋／Ｃ     

脐血CD34^＋／CD19^—细胞与体外培养集落的相关性分析

用两种单克隆抗体（单抗）标记脐血造血祖细胞表面抗原（ＨＰＣＡ，ＣＤ３４）用流式细胞仪分析，并比较两种单抗标记的ＣＤ３４＾＋细胞与体外培养的粒单细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ），红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）和混合集落形成单位的相关性，结果表明脐血有核细胞中，抗ＨＰＣＡ－２ＦＩＴＣ阳性的细胞占１．０５±０．７２％，Ｔｕｋ３（纯抗体）阳性细胞占２．０６±１．２５％，差别显（Ｐ＜０．０５），每μｌ     

双抗夹心法检测血浆氧化修饰型低密度脂蛋白

利用淋巴细胞杂交瘤技术制备了鼠抗人氧化修饰型低密度脂蛋白（ＯｘｉｄａｔｉｖｅｌｙＭｏｄｉｆｉｅｄＬｏｗＤｅｎｓｉｔｙＬｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ｏｘＬＤＬ）单克隆抗体，并制备了兔抗人ｏｘＬＤＬ多克隆抗体。以ＭｃＡｂ为包被抗体建立了酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）双抗夹心法，该方法的检测范围为０．１０—１．５０ｍｇ／Ｌ，在浓度为０．３和０．８ｍｇ／Ｌ时，其批内ＣＶ分别为４．７％和６．４％，批间ＣＶ为６．５％。此外，对９１例冠心病患者和两组对照进行检测，结果冠心病患者血浆ｏｘＬＤＬ（０．８３４±０．３７９ｍｇ／Ｎ）明显高于其它心脏病对照（０．４４２±０．１９３．Ｐ＜０．００１）和正常对照（０．４４６±０．２１５，Ｐ＜０．００１）。     

老年人血清过氧化氢酶活性测定探讨

本文采用分光光度比色法，检测了１０８例健康老年人的血清ＣＡＴ活性（男５８名，女５０名）．男性组的血清ＣＡＴ活性水平是５８．５±１９．７ＫＵ／Ｌ（２５．８～１１９．８），女性组为５６．８±１１７；４ＫＵ／Ｌ（１８．５～１０２．２），二者平均值是５７；８±１７．５ＫＵ／Ｌ（１８．５～１１９．８）。对２７３例不同疾病组的老年患者的血清ＣＡＴ活性检测表明，与正常对照组比较，有６６例血清ＣＡＴ结果增高明显，占２４．２％（Ｐ＜０．０１）；其中胰腺炎组的阳性符合率为７５．０％，肝癌组为５５．６％，心衰组为５０．０％，肝炎组为４０．０％。     

血清免疫反应性脯氨酰羟化酶ELISA法的建立及初步应用

抗脯氨酰羟化酶单克隆抗体（ＭｃＡｂ）２Ｈ７用生物素标记，ＭｃＡｂ２Ｄ５，１Ａ５，２Ｃ１的混合物用于包被固相，建立了测定血清免疫反应性脯氨酰羟化酶的双位点ＥＬＩＳＡ法，该法最低检测值为１５ｍｇ／ｍｌ，批间ＣＶ为１５．２％，批内ＣＶ为１０．０％。临床测定结果，慢性活动型肝炎，肝硬化患者的ＳＩＲＰＨ显著高于正常人及其它疾病患者。